專利名稱：從血液中除去β－2微球蛋白的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及從血液中除去β-2微球蛋白的方法。
已經(jīng)做過(guò)除去β-2微球蛋白的嘗試，如在透析淀粉狀蛋白病的新治療途徑中公開(kāi)的《用吸附劑柱集中除去β2-2微球蛋白》，F(xiàn)umitake Geijyo，Noriyuki Homma，Shin Hasegawa，和MassaakiArakawa，于日本，Niigata，Niigata大學(xué)藥學(xué)院，內(nèi)服藥系(II)發(fā)表。在1997年7月30日遞交的美國(guó)專利申請(qǐng)系列號(hào)08/902,727中也公開(kāi)了從血液中除去β-2微球蛋白的方法。這一方法可以進(jìn)一步擴(kuò)大和改進(jìn)。
本發(fā)明的公開(kāi)因此，本發(fā)明的目的是提供一種除去β-2微球蛋白的方法，它是對(duì)現(xiàn)有方法的進(jìn)一步改進(jìn)。
與在下文中逐漸明了的這些目的和其它目的一致，簡(jiǎn)要地說(shuō)，本發(fā)明的一個(gè)特征在于除去β-2微球蛋白的方法，按照該方法將血液通過(guò)孔大小和結(jié)構(gòu)選定的吸附劑以便從血液中除去β-2微球蛋白，和將除去了β-2微球蛋白的血液再輸入患者中。
根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案，血液通過(guò)吸附劑可與常規(guī)的血液透析過(guò)程同時(shí)或先后進(jìn)行，在血液透析過(guò)程中，迫使血液通過(guò)血液透析膜柱體。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)特征，吸附劑是中孔比例增大的多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物。
根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)特征，通過(guò)過(guò)程包括通過(guò)吸附劑，該吸附劑是具有比例增大的中孔和具有修飾的小珠和大孔表面的多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物，從而防止吸附大的蛋白質(zhì)和血小板和在不影響β-2微球蛋白和中等大小的毒物分子很容易進(jìn)入小珠的內(nèi)部吸附空間的情況下使血液補(bǔ)體系統(tǒng)的活化減到最小。
被視為本發(fā)明所特有的新特征特別地在附帶的權(quán)利要求書(shū)中闡述了。但是，對(duì)于本發(fā)明的構(gòu)成和它的操作方法來(lái)說(shuō)，根據(jù)下面對(duì)具體實(shí)施方案的說(shuō)明并在閱讀時(shí)結(jié)合附圖
將最好地理解發(fā)明本身以及本發(fā)明的其它目的和優(yōu)點(diǎn)。
實(shí)施本發(fā)明的最佳方式根據(jù)本發(fā)明，推薦了一種從血液中除去β-2微球蛋白的方法。即，從患者的動(dòng)脈血液循環(huán)通路點(diǎn)吸取血液，然后使血液通過(guò)吸附劑-聚合物。
根據(jù)本發(fā)明，血液通過(guò)吸附劑可以與常規(guī)的血液透析過(guò)程同時(shí)(先后)進(jìn)行，在這個(gè)過(guò)程中，迫使血液通過(guò)血液透析膜柱體。
血液通過(guò)的吸附劑可以是中孔的比例增大的多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物。
同時(shí)，吸附劑可以是具有增大比例的中孔和具有修飾的小珠和大孔表面的多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物以便防止吸附大的蛋白質(zhì)和血小板并使血液補(bǔ)體系統(tǒng)的活化減到最小而不影響β-2微球蛋白和中等大小毒物分子很容易進(jìn)入小珠的內(nèi)部吸附空間。
修飾可通過(guò)化學(xué)修飾表面來(lái)進(jìn)行。
根據(jù)本發(fā)明，將根據(jù)本發(fā)明制備的吸附劑裝載在柱或柱體中使用。優(yōu)選地，應(yīng)該將柱設(shè)計(jì)成具有進(jìn)口和出口，允許容易地與血液流路連接，并且在進(jìn)口和吸附劑層之間，和在吸附劑層和出口之間具有兩個(gè)多孔過(guò)濾器。柱可以是由生物相容材料，玻璃，聚乙烯，聚丙烯，聚碳酸酯，聚苯乙烯制成的。在這些中間，聚丙烯和聚碳酸酯是優(yōu)選的材料，因?yàn)榭梢栽谑褂弥皩⑻畛淞嗽撐絼┑闹鶞缇?例如高壓和γ-射線滅菌)。
然后，將1％的人血清白蛋白的普通鹽水溶液填充于柱或柱體中，儲(chǔ)藏在4℃下。當(dāng)準(zhǔn)備使用時(shí)，用0.9％的已經(jīng)加入適當(dāng)?shù)目鼓齽┤绾杏行Я康母嗡谹CD-A的NaCl溶液洗滌柱。對(duì)于250毫升的柱體來(lái)說(shuō)，這是已經(jīng)加入150毫升含有6，000單位肝素的ACD-A的大約1升氯化鈉溶液。
通常，可以利用下面兩個(gè)典型的體外血液循環(huán)系統(tǒng)
(I)迫使從患者的血管取的血液通過(guò)用本發(fā)明的吸附劑填充的柱，將澄清的血液回輸入患者的血管。
(ii)首先通過(guò)離心或諸如此類，將從患者取的血液通過(guò)分離膜分離成血細(xì)胞和血漿，然后，迫使這樣分離的血漿通過(guò)用本發(fā)明的吸附劑填充的柱，從血漿中移去毒物；然后，將來(lái)自柱的澄清的血漿與上面分離的血細(xì)胞混合，將混合物回入患者的血管。
在這兩種方法中，后一種方法更實(shí)用，因?yàn)槔缤ㄟ^(guò)與血小板和紅血細(xì)胞粘連可以使白細(xì)胞的損失較小。
進(jìn)行血液灌流或血漿灌流的任何其它方法對(duì)本發(fā)明的修飾的吸附劑是適當(dāng)?shù)摹Ｌ貏e有前途的看來(lái)是上面提到的Bodden的建議(美國(guó)專利5,069,662，1991年11月)，據(jù)此，將高濃度的抗癌劑灌流通過(guò)有腫瘤的肝或其它身體器官，然后在將血液回輸入患者的血液循環(huán)系統(tǒng)之前，將流出的血液進(jìn)行體外血液灌流以除去過(guò)量的藥物。另一個(gè)有前景的系統(tǒng)是Shettigar等人(美國(guó)專利5,221,850，1993年)提出的，在這個(gè)專利中，提出了將血漿通過(guò)中空纖維膜朝著具有吸附劑的閉室對(duì)流性和擴(kuò)散性傳輸并返回到纖維通道中。閉室可以用本發(fā)明的吸附劑填充。
可以如下進(jìn)行吸附劑的制備
在實(shí)施例1中獲得的聚合物具有的表觀內(nèi)表面積是1200m2/g，具有的總孔體積是0.8ml/g。不需要對(duì)聚合物小珠的表面進(jìn)行任何化學(xué)修飾或額外的處理，它在乙醇中的體積增加了1.3倍，以每克聚合物32-34毫克的量從磷酸鹽緩沖液中吸附了細(xì)胞色素C，從接受永久透析治療的患者的血液中有效地除去了β2微球蛋白，確實(shí)成功地通過(guò)了血液相容性測(cè)試(在允許的126-144秒的限制時(shí)間內(nèi)血漿的再鈣化)。直徑0.4-0.63毫米的各個(gè)球狀小珠以450±50克的填充量被機(jī)械地破壞，這比典型的大孔小珠(約120-150克)要好得多，但沒(méi)有類似直徑和總孔體積的典型的超交聯(lián)小珠(高達(dá)600克)好。
正如實(shí)施例1中所述，取有機(jī)相，由320毫升二乙烯苯，80毫升乙基乙烯苯，600毫升甲苯，600毫升正辛烷和2.94克雙偶氮丁腈組成。獲得的產(chǎn)物的內(nèi)表面積達(dá)到1150m2/g，用乙醇膨脹的體積達(dá)到1.5倍。
根據(jù)本發(fā)明，正如本文上面所述，聚合物小珠的表面可以被修飾。
按照下面三個(gè)主要方向，可以進(jìn)行共聚物的修飾。通過(guò)2-羥乙基異丁烯酸酯，N-乙烯吡咯烷酮，N-乙烯己內(nèi)酰胺，或其它水溶性單體的徑向聚合接枝親水聚合物鏈，將乙烯基團(tuán)氧化成環(huán)氧基團(tuán)且隨后環(huán)氧基團(tuán)與水，乙二醇，胺或2-氨基乙醇分子反應(yīng)，使高分子量的血液相容性聚合物，特別是聚(三氟乙氧基)磷腈沉積到聚合物小珠的表面。
在引入本文作為參考的美國(guó)專利申請(qǐng)系列號(hào)09/019,583中對(duì)此做出詳細(xì)公開(kāi)。
下面給出改進(jìn)方法的幾個(gè)實(shí)施例。
在40℃搖動(dòng)混合物2.5小時(shí)后，發(fā)現(xiàn)80％最初的乙烯吡咯烷酮接枝到聚合物表面。
用于修飾聚合物的介質(zhì)可以是純有機(jī)的，但是，它可以是例如水-有機(jī)的，至少含有20％(體積)的有機(jī)物質(zhì)。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)在非有機(jī)的，例如純水介質(zhì)中進(jìn)行修飾過(guò)程時(shí)，聚合物被內(nèi)毒素污染，其血液通過(guò)這樣產(chǎn)生的物料純化的動(dòng)物出現(xiàn)發(fā)燒，這可以認(rèn)為是聚合物中存在內(nèi)毒素的間接癥狀。與之相反，利用以本發(fā)明的介質(zhì)修飾的物料進(jìn)行純化生物體的生理液體的許多實(shí)驗(yàn)表明了聚合物沒(méi)有被內(nèi)毒素污染。沉積磷腈
權(quán)利要求
1.從血液中除去β-2微球蛋白的方法，包括從患者中移取血液，將血液通過(guò)選定大小和結(jié)構(gòu)的吸附劑，從血液中除去β-2微球蛋白，將β-2微球蛋白被除去的血液再輸入患者中。
2.如權(quán)利要求1定義的從血液中除去β-2微球蛋白的方法，其中所述的血液通過(guò)所述的吸附劑的過(guò)程與迫使血液也通過(guò)血液透析膜柱體的常規(guī)血液透析過(guò)程同時(shí)進(jìn)行。
3.如權(quán)利要求1定義的從血液中除去β-2微球蛋白的方法，其中所述的血液通過(guò)吸附劑的過(guò)程與迫使血液也通過(guò)血液透析膜柱體的常規(guī)血液透析過(guò)程先后進(jìn)行。
4.如權(quán)利要求1定義的方法，其中所述的通過(guò)包括通過(guò)多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物的吸附劑。
5.如權(quán)利要求4定義的方法，其中所述的聚合物的中孔的比例增大。
6.如權(quán)利要求1定義的方法，其中所述的通過(guò)包括通過(guò)多孔聚二乙烯苯或聚苯乙烯-共-聚二乙烯苯聚合物的吸附劑，其中小珠或孔的表面被修飾以便防止吸附大的蛋白質(zhì)和血小板并使血液補(bǔ)體系統(tǒng)的活化減到最小而不影響β-2微球蛋白和中等大小的毒物分子容易地進(jìn)入小珠的內(nèi)部吸附空間。
7.如權(quán)利要求4定義的方法，其中所述的通過(guò)包括通過(guò)聚合物，其中表面暴露的乙烯基團(tuán)被化學(xué)修飾以便形成表面暴露的不同的功能基團(tuán)，與乙烯基團(tuán)相比其具有更大的親水性和更大的生物相容性。
全文摘要
從血液中除去β－2微球蛋白的方法的步驟有:從患者中移取血液,將血液通過(guò)選定大小和結(jié)構(gòu)的吸附劑,從血液中除去β－2微球蛋白,然后將除去了β－2微球蛋白的血液再輸入患者中。
文檔編號(hào)B01J20/32GK1344172SQ00800620
公開(kāi)日2002年4月10日 申請(qǐng)日期2000年4月17日 優(yōu)先權(quán)日1999年4月19日
發(fā)明者A·布萊福曼, V·戴萬(wàn)科夫 申請(qǐng)人:腎技術(shù)國(guó)際有限責(zé)任公司