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一種檢測抗生物素蛋白的比率型熒光探針及其合成方法和應(yīng)用與流程

文檔序號:12695061閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種檢測抗生物素蛋白的比率型熒光探針,其特征在于:該熒光探針以1,8-萘酰亞胺為熒光基團(tuán),2-(N,N-二乙基氨基)乙?;?氨基為響應(yīng)基團(tuán),生物素為靶向基團(tuán);其結(jié)構(gòu)如下:

2.一種如權(quán)利要求1所述檢測抗生物素蛋白的比率型熒光探針的合成方法,其特征在于:包含步驟如下:

(1)中間體N-Boc-乙二胺的合成:

將二碳酸二叔丁酯溶于二氯甲烷中,并在冰浴下滴加入乙二胺,室溫下攪拌過夜,飽和食鹽水洗滌,無水硫酸鈉干燥,旋干得N-Boc-乙二胺;

(2)中間體N-Boc-N-生物素乙二胺的合成:

將EDC.HCl,HOBt.H2O,三乙胺,以及生物素溶于DMF中,并向其中加入N-Boc-乙二胺,室溫攪拌18-20h,減壓除去溶劑,硅膠柱分離得N-Boc-N-生物素乙二胺;

(3)探針的合成:

將N-Boc-N-生物素乙二胺溶于二氯甲烷中,加入三氟乙酸,室溫下攪拌0.5-2h,減壓除去溶劑,殘留物溶于乙醇中,并加入4-(2-(N,N-二乙基氨基)乙?;?氨基-1,8-萘酐,加熱至80-90℃,3-6h,旋干,硅膠柱分離。

3.如權(quán)利要求2所述的合成方法,其特征在于:步驟(2)中所述EDC.HCl、HOBt.H2O、三乙胺、生物素、DMF、N-Boc-乙二胺,其質(zhì)量比為1:1:1.5:1:80:1-1:2:2:100:2,硅膠柱分離,200-300目硅膠,洗脫劑為二氯甲烷:甲醇=100:1~50:1,分離后需經(jīng)減壓除去溶劑得N-Boc-N-生物素乙二胺。

4.如權(quán)利要求2所述的合成方法,其特征在于:步驟(3)中所述N-Boc-N-生物素乙二胺、二氯甲烷、三氟乙酸、乙醇、4-(2-(N,N-二乙基氨基)乙酰基)氨基-1,8-萘酐,其質(zhì)量比為1:150:30:200:1-1:200:100:600:1,硅膠柱分離,200-300目硅膠,洗脫劑為二氯甲烷:甲醇=50:1~20:1,分離后需經(jīng)減壓除去溶劑得淡黃色固體。

5.一種如權(quán)利1所述的檢測抗生物素蛋白的比率型熒光探針在比率識別抗生物素蛋白、蛋白檢測或在生物熒光成像中的應(yīng)用。

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