一種氫溴酸右美沙芬的藥物組合物及其醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種氫溴酸右美沙芬的藥物組合物及其醫(yī)藥用途，本發(fā)明提供的氫溴酸右美沙芬的藥物組合物中含有氫溴酸右美沙芬和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物化合物(Ⅰ)，氫溴酸右美沙芬、化合物(Ⅰ)單獨(dú)作用時(shí)，可以調(diào)節(jié)血脂治療動(dòng)脈粥樣硬化；氫溴酸右美沙芬和化合物(Ⅰ)聯(lián)合作用時(shí)，作用效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物，與現(xiàn)有技術(shù)相比具有突出的實(shí)質(zhì)性特點(diǎn)和顯著的進(jìn)步。
【專利說明】
一種氫溴酸右美沙芬的藥物組合物及其醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及氫溴酸右美沙芬的新用途，具體涉及氫溴酸右美 沙芬的藥物組合物及其醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 氫溴酸右美沙芬為鎮(zhèn)咳類非處方藥藥品，可抑制延腦咳嗽中樞而產(chǎn)生鎮(zhèn)咳作用。 其鎮(zhèn)咳作用與可待因相等或稍強(qiáng)。一般治療劑量不抑制呼吸，長(zhǎng)期服用無成癮性和耐受性。
[0003] 迄今為止，尚未見氫溴酸右美沙芬及其藥物組合物與動(dòng)脈粥樣硬化的相關(guān)性報(bào) 道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種氫溴酸右美沙芬的藥物組合物，該藥物組合物中含氫 溴酸右美沙芬和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，氫溴酸右美沙芬和該天然產(chǎn)物可協(xié)同治療動(dòng)脈 粥樣硬化。
[0005] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)的：
[0006] 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
[0008] -種氫溴酸右美沙芬的藥物組合物，包括氫溴酸右美沙芬、如權(quán)利要求1所述的化 合物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。
[0009] 進(jìn)一步地，藥學(xué)上可以接受的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、 崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體或潤(rùn)滑劑。
[0010] 進(jìn)一步地，所述劑型包括片劑、膠囊劑、口服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、 膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。
[0011] 上述化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將紅豆蔻粉碎，用75~85%乙 醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃 取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中正丁醇取物用 大孔樹脂除雜，先用25 %乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70 %乙醇洗脫12個(gè)柱體積，收集70 %洗 脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分 離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個(gè)組分；（d)步 驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇 梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積 百分濃度為72%的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得 到化合物(I)。
[0012] 進(jìn)一步地，化合物（I)的制備方法中，所述大孔樹脂為D101型大孔吸附樹脂。
[0013] 上述化合物(I)在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。
[0014] 上述氫溴酸右美沙芬的藥物組合物在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn):本發(fā)明提供的氫溴酸右美沙芬的藥物組合物中含有氫溴酸右美沙 芬和一種結(jié)構(gòu)新穎的天然產(chǎn)物，氫溴酸右美沙芬、化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，可以調(diào)節(jié)血脂治 療動(dòng)脈粥樣硬化;氫溴酸右美沙芬和化合物（I)聯(lián)合作用時(shí)，作用效果進(jìn)一步提高，可以開 發(fā)成治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物。
【具體實(shí)施方式】
[0016] 下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì) 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和范圍。
[0017] 實(shí)施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0018]分離方法：（a)將紅豆蔻(2kg)粉碎，用80 %乙醇熱回流提?。?5L X 3次），合并提取 液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3L X 3次）、乙酸乙酯（3L X 3次）和水飽和的正丁醇 (3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟(a)中 乙酸乙酯萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫 12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1 (10個(gè)柱體積）、45:1 (8個(gè)柱體積）、25:1 (10 個(gè)柱體積)和15:1 (8個(gè)柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得至1」4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分 4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1 (10個(gè)柱體積）、15:1 (8個(gè)柱體積)和1:1 (6個(gè) 柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗 脫液，洗脫液減壓濃縮得到化合物（I) (HPLC歸一化純度大于98% )。
[0019] 結(jié)構(gòu)確證:冊(cè)431-]\^顯示[]\?1]+為111/2 433.2087，結(jié)合核磁特征可得分子式為 C26H28N2〇4，不飽和度為 14。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(卯m，CDC13，500MHz): H-3 (3 · 98，t，J = 3.2Hz)，H-5(3.48，d，J = 7.3Hz)，H-6a(3.32，dd，J=16.3,7.3Hz)，H-6b(2.61，br d，J = 16.3Hz)，H-9(7.49，d，J = 8.2Hz)，H-10(7.11，td，J = 8.2，1.3Hz)，H-ll(7.22，td，J = 8.2， 1.3Hz)，H-12(7.30，d，J = 8.2Hz)，H-14a(2.74，d，J = 13.0Hz)，H-14b(1.88，d，J=13.0Hz)， H-17a(4.33，d，J=12.1Hz)，H-17b(4.16，d，J=12.1Hz)，H-18(1.57，s)，H-20(2.89，dd，J = 12.3,8.4Hz)，H-21(1.88，m)，H-21(2.41，m)，H-23(6.24，d，J=10.3Hz)，H-24(6.03，dd，J = 10.3,3.4Hz)，H-25(5.50，m)，H-26(9.38，d，J = 4.5Hz)，Ni-Me(3.64，s)，N4-Me(2.34，s);核 磁共振碳譜數(shù)據(jù) Sc(ppm，CDCl3，125MHz):132.4(C，2-C)，53.5(CH，3-C)，61.4(CH，5-C)，23.7 (CH2,6-C)，107.3(C，7-C)，126.8(C，8-C)，118.4(CH，9-C)，119.2(CH，10-C)，121.2(CH，n-C)，109.5(CH，12-C)，136.7(C，13-C)，33.3(CH2，14-C)，126.2(C，15-C)，130.0(C，16-C)， 59.6(CH2，17-C)，24.3(CH3，18-C)，116.2(C，19-C)，40.1(CH，20-C)，32.2(CH2,21-C)，101.2 (C，22-C)，139.1(CH，23-C)，134.6(CH，24-C)，94.7(CH，25-C)，200.1(CH，26-C)，30.2(CH 3， 沁-Me)，41.3(CH3，N4_Me)。紅外波譜中在1670CHT1吸收峰是由該化合物中的醛基產(chǎn)生;且UV 譜圖表明在232nm與285nm有紫外吸收，顯示該化合物含有吲哚發(fā)色基團(tuán)。13C-匪R、DEPT和 邯0(：譜中顯示有26個(gè)碳信號(hào)，包括三個(gè)甲基5。24.3,30.2,41.3 ;四個(gè)亞甲基5。23.7,33.3， 59.6,32.2H^一個(gè)次甲基(兩個(gè)連氧次甲基，一個(gè)醛基）SC53.5,61.4,118.4,119.2,121.2， 109.5,40.1，139.1，134.6,94.7,200.1;以及八個(gè)季碳(兩個(gè)二連氧季碳）3。132.4，107.3， 126.8，136.7，126.2，130.0，116.2，101.2;以上功能結(jié)構(gòu)再結(jié)合不飽和數(shù)表明該化合物為 七環(huán)結(jié)構(gòu)。 1H-匪R譜顯示一組無取代吲哚片段的質(zhì)子信號(hào)δΗ-97.49(lH，d，J = 8.2Hz)JH- io7.11(lH，td，J = 8.2，1.3Hz)、SH-117.22(1!1，七(1，了 = 8.2，1.3?。┡c3[1-127.30(1!1，(1，了 = 8.2泡）；一個(gè)醛基質(zhì)子信號(hào)6(1-269.38(1!1，(1，1 = 4.5抱）；一個(gè)甲基質(zhì)子信號(hào)611-181.57(3!1，8， Me);兩個(gè)N-CH3質(zhì)子信號(hào)δΗ3.64 (3H，s，Ni-Me)與2.34 (3H，s，NfMe); -組移向低場(chǎng)的連氧亞 甲基質(zhì)子信號(hào)知-1734.33(1!1，(1，1=12.1抱）與611- 1幾4.16(1!1，(1，1=12.1泡）；三組亞甲基 質(zhì)子信號(hào)δΗ- 6a 3.32(1!1，(1(1，了=16.3,7.3泡）與311，2.61(1!1，(1，了 = 16.3泡），311-1432.74 (1!1，(1，了=13.0!^)與3[ 1-1仙1.88(1!1，(1，了=13.0!^)以及3[1-211.88(1!1，111)與2.41(1!1，111) ;一 組烯烴質(zhì)子信號(hào) δΗ-236.24(1!1，(1(1，了=10.3抱）與5[1- 246.03(1!1，(1，了=10.3,3.4抱）。13(：-匪1? 譜、DEPT譜顯示該化合物中存在吲哚結(jié)構(gòu)片段δ。- 2132.4(C)、δ[-7107· 3(C)、δ[-8126· 8(C)、 Sc-9118·4(α0、δ。-10119·2((：Η)、δ。- η121·2(00、δ。-12l09.5(CH)與 δ。-13136.7(C)，一個(gè)甲基 信號(hào) Sc-i824.3(CH3)，兩個(gè) N-甲基信號(hào) 5以0.2(013，見-]^)與41.3(013，仏-]^)。0)5￥與邯〇(：波 譜數(shù)據(jù)揭示該化合物中含有-NCHCH2-結(jié)構(gòu)片段(-N4-C 5-C6-與-N4-C3-&4-)。進(jìn)一步分析HMBC 譜，H2-14與C-15和C-20，H2-17與C-15和C-19，H-20與C-14和C-19存在相關(guān)信號(hào)，結(jié)合 13C-NMR譜中相關(guān)碳信號(hào)暗示結(jié)構(gòu)中存在連氧六元環(huán)片段;H3-18與C-19的相關(guān)信號(hào)表明甲基連 接在C-19位。在COSY譜中，還存在一組復(fù)雜的相關(guān)信號(hào)，通過這組信號(hào)可以分析出該化 合物中可能存在的結(jié)構(gòu)片段-CHCH 2-和-CHCHCHCHO-，結(jié)合HMBC譜分析，可以推斷出該化合 物的結(jié)構(gòu)中E/F環(huán)為雙五元螺環(huán)結(jié)構(gòu)。另在HMBC譜中還顯示存在H-5與C-3、C-7和C-17，H 2-14與C-131-Me與C-2和C-13相關(guān)信號(hào)，可構(gòu)建該化合物的相關(guān)碳?xì)溥B接方式。N0ESY譜中， H3-18與H-17a、H-20的相關(guān)信號(hào)確定了 E/F環(huán)的連接方式為H3-18與H-20順式連接成α構(gòu)型。 綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和N0ESY譜，以及文獻(xiàn)關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物 如下所示，立體構(gòu)型進(jìn)一步通過ECD試驗(yàn)確定，理論值與實(shí)驗(yàn)值基本一致。
[0020]該化合物化學(xué)式及碳原子編號(hào)如下：
[0022] 實(shí)施例2:藥理作用
[0023]本實(shí)施例使用VD3和高脂飼料造動(dòng)脈粥樣硬化(AS)大鼠模型，檢測(cè)動(dòng)物血脂含量， 觀察藥物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的治療作用。
[0024] 1、材料與方法
[0025] 1.1動(dòng)物
[0026] SD大鼠，雄性，50~55d，體質(zhì)量(200 ± 20)g，由廣東省醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。 [0027] 1.2試劑與樣品
[0028] 氫溴酸右美沙芬購自中國(guó)藥品生物制品檢定所?；衔铮↖)自制，制備方法見實(shí)施 例1。復(fù)方丹參片：將藥片進(jìn)行研磨，加水溶解，制成混懸液。VD 3、膽酸鈉、膽固醇、丙基硫氧 嘧啶:上海藍(lán)季科技發(fā)展有限公司。
[0029] 1.3儀器
[0030] 酶標(biāo)儀（iMARK，BI〇-RAD)、顯微鏡（0LYMPUS，DSX500)、烘干箱（南京萊布科技實(shí)業(yè) 有限公司，DZF-6020)
[0031] 1.4大鼠分組及模型制備
[0032]將60只雄性SD大鼠常規(guī)飼養(yǎng)1周后，觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物狀態(tài)穩(wěn)定，將其隨機(jī)分為6組，每 組10只，分別為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組(復(fù)方丹參片溶液，25.92mg/mL)和氫 溴酸右美沙芬組(80mg · kg^1)、化合物（I)組(80mg · kg<)、氫溴酸右美沙芬與化合物（I)組 合物組【40mg · kg<氫溴酸右美沙芬+40mg · kg<化合物（I)】。各組按照體質(zhì)量進(jìn)行腹腔注 射造模，其中空白對(duì)照組注射生理鹽水，其余各組注射VD3。并于造模當(dāng)天除空白對(duì)照組外 各組均給予高脂飼料喂養(yǎng)。高脂飼料制作:將普通飼料粉碎成粉末狀，按照配方添加藥物： 配方為:3%膽固醇，0.5%膽酸鈉，0.2%丙基硫氧嘧啶，5%白糖，10%豬油。加水調(diào)勻，制作 成條形，放入烘干箱中烘干。各組按體質(zhì)量灌胃給藥，空白對(duì)照組每天給予普通飼料喂養(yǎng)， 灌胃給生理鹽水;模型對(duì)照組給生理鹽水灌胃；其余藥物組給相應(yīng)藥物灌胃，給藥時(shí)間為8 周。
[0033] 1.5試驗(yàn)材料獲取
[0034] 8周后禁食24h，進(jìn)水8h，稱量動(dòng)物體質(zhì)量，麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，心臟取血，取動(dòng)脈及心臟 組織。離心血清，5min，5000r/min，取上清，放于-20°C備用。動(dòng)脈及心臟組織置于甲醛固定 液中備用。
[0035] 1.6血脂含量檢測(cè)
[0036] ELISA法檢測(cè)血脂含量，按照說明書中步驟進(jìn)行操作，在酶標(biāo)儀上觀測(cè)結(jié)果。
[0037] 1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
[0038]應(yīng)用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，結(jié)果以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(X土s)表 不。
[0039] 2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0040] 2.1對(duì)AS模型大鼠血脂的影響
[0041 ]血清總膽固醇（TC)、高密度與低密度脂蛋白膽固醇(HDL-C與LDL-C)及三酰甘油 (TG)是動(dòng)脈粥樣硬化性疾病4項(xiàng)基本指標(biāo)。
[0042] 與空白對(duì)照組比，模型對(duì)照組大鼠 TG、TC、LDL-C水平顯著升高(P<0.01)，HDL-C水 平顯著降低(p<0.01)，說明造模成功。與模型對(duì)照組比，陽性對(duì)照組大鼠 TG、TC、LDL-C水平 顯著降低(P<〇.〇l)，HDL_C水平顯著升高(P<0.01);與模型對(duì)照組比，氫溴酸右美沙芬組、 化合物（I)組大鼠 TG、TC、LDL-C水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05);與模型對(duì)照 組相比，氫溴酸右美沙芬與化合物（I)組合物組大鼠 TG、TC、LDL-C水平顯著降低(P<0.01)， HDL-C水平顯著升高(P<0.01)。結(jié)果見表1。
[0043] 表1對(duì)AS模型大鼠血脂的影響（無±s,n = 10，mmol/L)
[0045] 上述結(jié)果表明，氫溴酸右美沙芬、化合物（I)單獨(dú)作用時(shí)，可以調(diào)節(jié)血脂治療動(dòng)脈 粥樣硬化;氫溴酸右美沙芬和化合物（I)聯(lián)合作用時(shí)，作用效果進(jìn)一步提高，可以開發(fā)成治 療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物。
[0046] 上述實(shí)施例的作用在于說明本發(fā)明的實(shí)質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護(hù) 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)和保護(hù)范圍。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，2. -種氫溴酸右美沙芬的藥物組合物，其特征在于:包括氫溴酸右美沙芬、如權(quán)利要求 1所述的化合物(I)和藥學(xué)上可以接受的載體，制備成需要的劑型。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的氫溴酸右美沙芬的藥物組合物，其特征在于:藥學(xué)上可以接受 的載體包括稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸 附載體或潤(rùn)滑劑。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的氫溴酸右美沙芬的藥物組合物，其特征在于:所述劑型包括片 劑、膠囊劑、□服液、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、粉劑、溶液劑、注 射劑、栓劑、噴霧劑、滴劑或貼劑。5. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于，包含以下操作步驟：（a)將紅 豆蔻粉碎，用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙 酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用25%乙醇洗脫8個(gè)柱體積，再用70%乙醇洗脫 12個(gè)柱體積，收集70%洗脫液，減壓濃縮得70%乙醇洗脫濃縮物；（c)步驟(b)中70%乙醇洗 脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為85:1、45:1、25:1和15:1的二氯甲烷-甲醇梯度 洗脫得到4個(gè)組分；（d)步驟(c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體積比為20:1、15:1 和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個(gè)組分；（e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的 反相硅膠分離，用體積百分濃度為72 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集10~16個(gè)柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到化合物(I)。6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為D101型 大孔吸附樹脂。7. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用。8. 權(quán)利要求2~4任一所述的氫溴酸右美沙芬的藥物組合物在制備治療動(dòng)脈粥樣硬化 的藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K31/485GK106046013SQ201610379965
【公開日】2016年10月26日
【申請(qǐng)日】2016年5月31日
【發(fā)明人】王昌榮
【申請(qǐng)人】王昌榮