一種香草醛分子印跡材料的制備方法及應(yīng)用
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種香草醛的分子印跡材料的制備方法及應(yīng)用，具體步驟如下：通過(guò)紫外可見(jiàn)分光光度法對(duì)模板分子與功能單體的比例進(jìn)行選擇；將一定量的埃洛石加至鹽酸溶液中進(jìn)行活化，在無(wú)水甲苯中充氮排氧加熱密封的條件下，加入硅烷偶聯(lián)劑γ?甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(KH?570)進(jìn)行反應(yīng)，完成改性；將上述改性埃洛石分散于乙腈溶劑中，加入預(yù)聚合的香草醛和功能單體，再加入分散劑、交聯(lián)劑及引發(fā)劑加熱條件下進(jìn)行聚合反應(yīng)，經(jīng)索氏提取除去模板，從而制備出所需的基于埃洛石的香草醛分子印跡材料，該材料對(duì)香草醛具有較強(qiáng)的特異識(shí)別能力、較高的吸附量等優(yōu)點(diǎn)，可以實(shí)現(xiàn)分離并富集食品樣品中香草醛的目的，具有一定的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
【專利說(shuō)明】
一種香草醛分子印跡材料的制備方法及應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及香草醛分子印跡材料技術(shù)領(lǐng)域，具體的說(shuō)，是一種香草醛分子印跡材 料的制備方法及應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 香草醛，學(xué)名3-甲氧基-4-羥基苯甲醛，是具有廣泛用途的芳香族有機(jī)化合物，香 草醛是食品行業(yè)中不可缺少的香料，廣泛應(yīng)用于各種需要增加奶香氣息的調(diào)香食品中，如 巧克力、煙草、調(diào)香酒類等，同時(shí)，香草醛具有殺菌能力和鎮(zhèn)靜作用，常用作醫(yī)藥原料和中間 體。近年來(lái)，隨著需求量的不斷增加，導(dǎo)致天然香草醛供不應(yīng)求、價(jià)格昂貴，因此價(jià)格低廉的 人工合成香草醛已經(jīng)被普遍使用。然而，人們食用過(guò)量合成的香草醛會(huì)導(dǎo)致頭疼、惡心和嘔 吐，影響肝和腎的功能，因此測(cè)定食品中香草醛的添加量對(duì)于食品安全非常必要。目前，食 品中香草醛含量的檢測(cè)方法，常用的有氣相色譜法、高效液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用 法等。分析前多采用固相萃取進(jìn)行前處理，現(xiàn)有萃取填料存在特異識(shí)別能力差等缺點(diǎn)，而分 子印跡技術(shù)的出現(xiàn)，為解決這一問(wèn)題提供基本保障。
[0003] 分子印跡技術(shù)(molecular imprinting technique，MIT)通常以目標(biāo)分子為模板 分子，通過(guò)化學(xué)合成法為目標(biāo)分子量身定做具有構(gòu)效預(yù)定性、特異識(shí)別性及廣泛應(yīng)用性的 新型高分子材料即分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymer，MIP)。該種聚合物 具有抗酸堿性強(qiáng)、使用時(shí)間長(zhǎng)、重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)，主要應(yīng)用于固相萃取、傳感和生物模擬等 領(lǐng)域。
[0004] 目前，制備分子印跡聚合物的方法主要有本體聚合、原位聚合、沉淀聚合及表面聚 合等。表面聚合法的原理為以帶-NH2或-CH=CH 2偶聯(lián)劑為連接橋梁，使MIP引入到載體上。相 比于其他方法，該方法使大量吸附孔穴分布在載體表面，提高M(jìn)IP結(jié)合速率。另外，該法是在 載體上進(jìn)行反應(yīng)，因而加強(qiáng)了MIP的機(jī)械穩(wěn)定性。國(guó)內(nèi)外已有人以香草醛為模板分子，制備 MIP，多采用本體聚合、懸浮聚合等方法，也有報(bào)道在硅基材料表面印跡聚合物。而以埃洛石 為載體，制備香草醛分子印跡聚合物，將其用于實(shí)際樣品中香草醛的分離與富集尚未見(jiàn)報(bào) 道。
[0005] 埃洛石納米管(halloysite nanotubes，HNTs)是一種環(huán)境友好的天然多壁納米管 狀硅鋁酸鹽材料，HNTs表面和層間含有較多活潑羥基，利于改性以及進(jìn)一步應(yīng)用。近年來(lái)將 其作為印跡載體得到廣泛關(guān)注和研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種香草醛分子印跡材料的制備方 法及應(yīng)用。用該方法制備的印跡聚合物對(duì)香草醛具有良好的選擇性和較大的吸附容量。將 其應(yīng)用于食品樣品中香草醛的分離、富集與檢測(cè)，具有良好的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。
[0007] 本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的：
[0008] -種香草醛分子印跡材料的制備方法，其具體步驟為：
[0009] (1)模板分子與功能單體比例的選擇
[0010] 模板分子香草醛和功能單體α-甲基丙烯酸的摩爾比為1:0.001~1:8,優(yōu)選為1:4;
[0011] 在制備分子印跡聚合物過(guò)程中，模板分子和功能單體比例的選擇至關(guān)重要，它直 接影響印跡聚合物的識(shí)別能力。采用固定模板分子香草醛摩爾數(shù)為1，改變功能單體ΜΑΑ的 摩爾數(shù)，分別對(duì)摩爾比(η廠肝:ηι；?銷$)為1:0.001、1:2、1:4、1:6、1:8時(shí)模板分子與功能單體 相互作用進(jìn)行了紫外光譜掃描，從模板分子與功能單體作用力的大小來(lái)選擇合適的比例。
[0012] (2)活化埃洛石的制備
[0013]將過(guò)篩粒度為180目的埃洛石按質(zhì)量體積比lg: 10mL加入到2~6mol/L的鹽酸溶液 中活化12~24h，用蒸餾水抽濾洗滌至中性，于真空干燥箱中干燥后備用；
[0014] (3)硅烷化埃洛石m-HNTs的制備
[0015] 在120mL 60~70°C無(wú)水甲苯溶液中，加入0.5~2g步驟（2)制備的活化埃洛石，10 ~30mL硅烷偶聯(lián)劑KH-570，充氮密封;在攪拌反應(yīng)24~36h，反應(yīng)結(jié)束后，分別經(jīng)甲苯、丙酮、 乙腈抽濾洗滌，并于50~60°C真空干燥，得硅烷化埃洛石m-HNTs;
[0016] (4)印跡材料的預(yù)聚合
[0017]將模板分子香草醛與功能單體α-甲基丙烯酸按摩爾比1:4在乙腈中預(yù)聚合12~ 24h，得到模板與單體的自組裝溶液；
[0018] (5)香草醛分子印跡材料的制備
[0019]將上述步驟⑶所得的rn-HNTs分散于乙腈溶液中，按照香草醛:α-甲基丙烯酸：乙 二醇二甲基丙烯酸酯摩爾比1:4:(16~20)，每毫升溶液中香草醛的濃度為10~12.5mmol/ L，依次加入分散劑聚乙烯吡咯烷酮0.2~0.4g、交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶 氮二異丁腈0.03~0.08g，在60~70°C條件下攪拌反應(yīng)18~24h;隨后用乙腈抽濾洗滌產(chǎn)物， 并在真空干燥箱中干燥至恒重；
[0020] (6)模板分子的去除
[0021] 將聚合物用甲醇/乙酸(體積比為9:1，v/v)混合液進(jìn)行索氏提取，控溫80~100 °C， 提取18~36h，以除去模板分子，產(chǎn)物經(jīng)無(wú)水甲醇、蒸餾水交叉洗滌至pH = 7,真空干燥至恒 重，得到埃洛石表面香草醛分子印跡材料(MIP);
[0022] (7)非印跡聚合物(NIP)的制備
[0023] 將上述步驟(3)所得的m-HNTs分散于乙腈溶液中，按照α-甲基丙烯酸：乙二醇二甲 基丙烯酸酯摩爾比4: (16~20)，依次加入分散劑聚乙烯吡咯烷酮0.2~0.4g、交聯(lián)劑乙二醇 二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈0.03~0.08g，在60~70°C條件下攪拌反應(yīng)18~ 24h;隨后用乙腈抽濾洗滌產(chǎn)物，并在真空干燥箱中干燥至恒重;得到非印跡材料。
[0024] MIP的應(yīng)用
[0025]稱取50mgMIP裝填于3mL帶有濾板的聚丙烯空柱中，制成分子印跡固相萃取小柱 (MISPE)。對(duì)兩種實(shí)際樣品進(jìn)行固相萃取實(shí)驗(yàn)，上樣溶液及濃縮液經(jīng)超高效液相色譜法 (UPLC)檢測(cè)。
[0026] 色譜柱為ACQUITYUPLC BEH C18(1.7ym，2.1X100mm)分析柱；紫外吸收波長(zhǎng)為 28〇11111(群）；流動(dòng)相為80%乙腈-水;流速為0.511117 /111；[11。
[0027] 所述的兩種實(shí)際樣品樣品分別為市面銷售的某品牌巧克力與某品牌嬰幼兒奶粉。
[0028] 所述的兩種實(shí)際樣品與40%甲醇-水混合溶液的質(zhì)量體積比為2g: 50mL。
[0029] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的積極效果是：
[0030] 本發(fā)明的技術(shù)優(yōu)點(diǎn):通過(guò)紫外分光光度法確定最佳模板分子與功能單體的比例為 1:4;通過(guò)硅烷偶聯(lián)劑γ -甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(KH-570)對(duì)埃洛石表面進(jìn)行修 飾，接枝雙鍵，使埃洛石表面更易接枝聚合物;通過(guò)表面印跡法，在硅烷化埃洛石表面接枝 分子印跡聚合物層。相比于傳統(tǒng)方法，表面印跡法將識(shí)別位點(diǎn)建立在載體的表面，解決了制 備中對(duì)模板分子包埋過(guò)深而洗脫困難的問(wèn)題，提高其結(jié)合速率;因?yàn)槭窃谳d體上進(jìn)行反應(yīng)， 也增強(qiáng)了聚合物的機(jī)械穩(wěn)定性。埃洛石載體來(lái)源充足、成本低。聚合物對(duì)香草醛具有較好的 特異識(shí)別性及較大的吸附量的優(yōu)點(diǎn)，可以用于準(zhǔn)確、方便、快捷的分離并富集復(fù)雜樣品中的 香草醛，具有良好的應(yīng)用前景。
[0031] 本發(fā)明采取表面印跡法，以香草醛為模板分子，埃洛石為載體，制備印跡聚合物。 將印跡聚合物作為固相萃取填料，以其對(duì)香草醛的特異識(shí)別能力，將其應(yīng)用到復(fù)雜樣品中 香草醛的分離、富集與檢測(cè)，得到很好的效果。
【附圖說(shuō)明】
[0032] 圖1為不同摩爾比的模板分子與功能單體紫外光譜掃描圖；
[0033] 圖2分別為改性前HNTs(A)、改性后m-HNTs(B)、洗脫前含有模板分子的聚合物 MIP洗|KC)及洗脫后聚合物MIP(D)的紅外譜圖；
[0034] 圖3為MIP和NIP的等溫吸附曲線圖；
[0035] 圖4為MIP和NIP競(jìng)爭(zhēng)吸附實(shí)驗(yàn)圖；
[0036] 圖5為以MIP為萃取填料，對(duì)某品牌巧克力進(jìn)行固相萃取實(shí)驗(yàn)的色譜圖。
[0037] 圖6為以MIP為萃取填料，對(duì)某品牌嬰幼兒奶粉進(jìn)行固相萃取實(shí)驗(yàn)的色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0038] 以下提供本發(fā)明一種香草醛分子印跡材料的制備方法及應(yīng)用的【具體實(shí)施方式】。 [0039] 實(shí)施例1:
[0040] (1)模板分子與功能單體比例的選擇
[0041] 以香草醛為模板分子，α-甲基丙烯酸為功能單體，逐漸增加功能單體的用量，使二 者的摩爾比分別為1:0.001，1:2,1:4,1:6和1:8,充分作用24h后，測(cè)定上述溶液的紫外光譜 吸收。由圖1可知，當(dāng)模板分子與功能單體的摩爾比從1:0.001到1:4時(shí)，吸收值發(fā)生了較大 的變化。模板分子與功能單體的比例超過(guò)1:4時(shí)，繼續(xù)增加單體用量，吸收峰的強(qiáng)度變化不 再明顯，綜合考慮，本發(fā)明選擇了香草醛與MAA的摩爾比為1:4來(lái)制備聚合物。
[0042] (2)活化埃洛石的制備
[0043]將過(guò)篩粒度為180目的埃洛石按質(zhì)量體積比lg: 10mL加入到6mol/L的鹽酸溶液中 活化18h，用蒸餾水抽濾洗滌至中性，于真空干燥箱中干燥后備用。
[0044] (3)硅烷化埃洛石(m-HNTs)的制備
[0045] 在120mL 70°C無(wú)水甲苯溶液中，加入2g步驟(2)制備的活化埃洛石，30mL硅烷偶聯(lián) 劑KH-570,充氮密封。攪拌反應(yīng)36h，反應(yīng)結(jié)束后，分別經(jīng)甲苯、丙酮、乙腈抽濾洗滌，并于60 °C真空干燥，得硅烷化埃洛石(m-HNTs)。從圖2的紅外圖可知，KH-570已經(jīng)接枝在HNTs表面。 [00 46] (4)印跡材料的預(yù)聚合
[0047]將模板分子香草醛與功能單體α-甲基丙烯酸按摩爾比1:4在適量乙腈中預(yù)聚合 24h，得到模板與單體的自組裝溶液。
[0048] (5)香草醛分子印跡材料的制備
[0049]將上述步驟(3)所得的m-HNTs分散于乙腈溶液中，按照香草醛:α_甲基丙烯酸：乙 二醇二甲基丙烯酸酯摩爾比1:4: 20,每毫升溶液中香草醛的濃度為12.5mmol/L，依次加入 分散劑聚乙烯吡咯烷酮〇.3g、交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈0.05g， 在60°C條件下攪拌反應(yīng)24h。隨后用乙腈抽濾洗滌產(chǎn)物，并在真空干燥箱中干燥至恒重。 [00 50] (6)模板分子的去除
[0051] 將聚合物用甲醇/乙酸(9:l，v/v)混合液進(jìn)行索氏提取，控溫90°C，提取24h，以除 去模板分子，產(chǎn)物經(jīng)無(wú)水甲醇、蒸餾水交叉洗滌至pH = 7，真空干燥至恒重，得到埃洛石表面 香草醛分子印跡材料(MIP)。
[0052] (7)非印跡聚合物(NIP)的制備
[0053] 將上述步驟(3)所得的m-HNTs分散于乙腈溶液中，按照α-甲基丙烯酸：乙二醇二甲 基丙烯酸酯摩爾比4:20,依次加入分散劑聚乙烯吡咯烷酮0.3g、交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯 酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈〇.〇5g，在60°C條件下攪拌反應(yīng)24h;隨后用乙腈抽濾洗滌產(chǎn)物， 并在真空干燥箱中干燥至恒重;得到非印跡材料。
[0054]圖1為不同摩爾比的模板分子與功能單體紫外光譜掃描圖，從圖中可以看出，隨著 功能單體比例的增加，吸收值和吸收波長(zhǎng)都發(fā)生一定的變化。當(dāng)模板分子與功能單體的摩 爾比從1:0.001到1:4時(shí)，吸收值和吸收波長(zhǎng)發(fā)生了較大的變化。模板分子與功能單體的比 例超過(guò)1:4時(shí)，吸收峰的變化不再明顯。在一定范圍內(nèi)增加功能單體的用量，可以使模板分 子與功能單體的作用更加充分，但并不是二者的比例越大越好，功能單體的濃度過(guò)大既可 能引起自身的締合也會(huì)使未參加自組裝印跡體系中功能殘基增多，從而降低特異性識(shí)別位 點(diǎn)數(shù)目，影響聚合物對(duì)香草醛的選擇識(shí)別能力。綜合各方面的考慮，本發(fā)明選擇了模板分子 和功能單體摩爾比為1:4來(lái)制備聚合物。
[0055]圖2分別為改性前HNTs(A)、改性后m-HNTs(B)、洗脫前含有模板分子的聚合物 MIP獅(C)及洗脫后聚合物MIP(D)的紅外譜圖，A中3697cm-1和3621cm-1的峰歸因于HNTs內(nèi)表 面A1-OH伸縮振動(dòng)，1031CHT 1處峰是由于Si-0-Si伸縮振動(dòng)造成的。圖中B與A相比，在1645cm 4處及1720CHT1處出現(xiàn)碳碳雙鍵、羰基伸縮振動(dòng)產(chǎn)生的吸收峰，且在2929CHT1處有硅烷偶聯(lián) 劑KH-570中C = C中的C-H伸縮振動(dòng)吸收峰，說(shuō)明HNTs改性成功，即在HNTs表面成功的接枝了 KH-570X與B相比，在1577和1627CHT1處出現(xiàn)模板分子苯環(huán)的特征峰，是由于含香草醛的印 跡物聚合在HNTs表面。在C與D中，2925CHT 1左右出現(xiàn)了交聯(lián)劑中飽和碳?xì)鋯捂I的特征吸收 峰，說(shuō)明印跡層包覆在載體表面。比較C與D，模板分子苯環(huán)特征峰消失，說(shuō)明香草醛成功從 印跡層中洗脫下來(lái)。制得含有與模板空穴匹配的印跡物。
[0056]圖3為MIP和NIP的等溫吸附曲線，從圖中可以看出，隨著香草醛濃度的升高，吸附 量隨之增加，MIP對(duì)香草醛的吸附量遠(yuǎn)大于NIP，對(duì)香草醛表現(xiàn)出良好的特異識(shí)別性，是由于 在MIP中存在于香草醛相匹配的三維孔穴與結(jié)合位點(diǎn)。
[0057]圖4為MIP和NIP競(jìng)爭(zhēng)吸附實(shí)驗(yàn)，從圖中可以看出MIP對(duì)香草醛的吸附量遠(yuǎn)大于其他 兩種結(jié)構(gòu)類似物，而NIP對(duì)三種物質(zhì)的吸附量沒(méi)有明顯差別，MIP對(duì)香草醛顯示出較好的選 擇識(shí)別能力。
[0058] 圖5為以MIP為萃取填料，對(duì)某品牌巧克力進(jìn)行固相萃取實(shí)驗(yàn)的色譜圖，從圖中可 以看出，分子印跡聚合物可以使巧克力樣品中的香草醛得到很好的富集、分離和凈化。
[0059] 圖6為以MIP為萃取填料，對(duì)某品牌嬰幼兒奶粉進(jìn)行固相萃取實(shí)驗(yàn)的色譜圖，從圖 中可以看出，分子印跡聚合物可以使嬰幼兒奶粉樣品中的香草醛得到很好的富集、分離和 凈化。
[0060] 2、下面結(jié)合具體實(shí)施案例，對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明：
[0061] 本發(fā)明具體實(shí)施方案，通過(guò)靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)與選擇性吸附實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)聚合物吸附性 能。
[0062] 實(shí)施例2:分別稱取10mg MIP放入10個(gè)小瓶中，向其中依次加入0.01-0.1m〇VL香 草醛溶液，置于25°C恒溫超聲波振蕩器中震蕩，然后靜置24h，取適量的上層清液，用0.45μπι 濾膜過(guò)濾，通過(guò)高效液相色譜測(cè)其峰面積，平行測(cè)定三次。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算不同測(cè)量濃度 底物下的平衡濃度，然后計(jì)算出吸附量。
[0063]用10mg的NIP作為對(duì)照，重復(fù)上述步驟。
[0064]平衡態(tài)吸附容量(Q)由吸附前后溶液中香草醛濃度的變化、溶液的體積和聚合物 的質(zhì)量計(jì)算。定義為每單位質(zhì)量(g)聚合物的吸附容量：
[0066]式中Co:初始香草醛濃度(mg/mL);
[0067] C:吸附后溶液中香草醛的濃度(mg/mL);
[0068] V:加入香草醛溶液的體積(mL);
[0069] m:稱取印跡聚合物的質(zhì)量(mg)。
[0070] 靜態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖3所示，MIP和NIP對(duì)香草醛的吸附量都是隨香草醛濃度的 增加而增加的。當(dāng)香草醛濃度增加到0.07mg/mL時(shí)，聚合物的吸附量都趨于飽和狀態(tài)，不再 變化，這是由于分子印跡聚合物中的孔穴對(duì)模板分子的吸附數(shù)目是一定的，當(dāng)孔穴與模板 分子結(jié)合達(dá)飽和后，MIP和NIP的吸附量就不再隨模板分子香草醛的濃度增加而增加。MIP對(duì) 香草醛的最大吸附容量為68.89mg/g，NIP對(duì)香草醛的最大吸附容量為24.93mg/g，是其2.76 倍。
[0071] 實(shí)施例3:稱取3份MIP和NIP各20mg，加入濃度相同的香草醛、阿魏酸、愈創(chuàng)木酚溶 液，靜置12h，進(jìn)行吸附實(shí)驗(yàn)。吸附實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4所示，MIP對(duì)模板的吸附量明顯高于對(duì)共存 在的阿魏酸和愈創(chuàng)木酚，分別是其1.92和2.24倍。這是由于MIP中不僅存在能與模板相結(jié)合 的功能基團(tuán)，還存在與模板結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的特定三維空腔。而NIP對(duì)三種物質(zhì)的吸附?jīng)]有明顯的 區(qū)別，這是由于NIP中的功能單體是隨機(jī)分布的，未能形成特定的三維空腔。
[0072] 實(shí)施例4:準(zhǔn)確稱取2g某品牌巧克力于燒杯中，加入50mL40 %甲醇-水溶液進(jìn)行超 聲溶解，30min后，用濾紙過(guò)濾，收集濾液。將上述制得的濾液加到MISTO中并控制流速， MISPE程序如下：5mL甲醇活化；3mL處理后巧克力溶液上樣；3mL 5 % (v/v)甲醇-水溶液淋 洗；10mL甲醇-乙酸(v/v = 9:l)洗脫劑，隨后將洗脫液濃縮至lmL。將上樣溶液及洗脫液經(jīng)超 高效液相色譜儀(UPLC)檢測(cè)，色譜條件為:色譜柱為ACQUITY UPLC BEH C18(1.7ym，2.1X 100mm)分析柱;紫外吸收波長(zhǎng)為280nm(UV);流動(dòng)相為80%乙腈-水;流速為0.5mL/min。 [0073]實(shí)施例5:準(zhǔn)確稱取2g某品牌嬰幼兒奶粉于燒杯中，加入50mL 40%甲醇-水溶液進(jìn) 行超聲溶解，30min后，用濾紙過(guò)濾，收集濾液。將上述制得的濾液加到MISPE中并控制流速， MISPE程序同實(shí)施案例4。
[0074]檢測(cè)結(jié)果為:巧克力樣品中的香草醛含量為425mg/kg，奶粉樣品中香草醛含量為 2.3mg/1 OOmL，均未超標(biāo)，符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。
[0075]中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》(GB2760-2011)規(guī)定，香草醛在 巧克力中的使用限量為970mg/kg。較大嬰兒和幼兒配方食品中香草醛最大使用量為5mg/ 100mL〇
[0076]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人 員，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也應(yīng)視為 本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種香草醛分子印跡材料的制備方法，其特征在于，其具體步驟為： (1) 模板分子與功能單體比例的選擇 模板分子香草醛和功能單體α-甲基丙烯酸的摩爾比為1:0.001~1:8; (2) 活化埃洛石的制備 將過(guò)篩粒度為180目的埃洛石按質(zhì)量體積比lg:10mL加入到2~6mol/L的鹽酸溶液中活 化12~24h，用蒸餾水抽濾洗滌至中性，于真空干燥箱中干燥后備用； (3) 硅烷化埃洛石m-HNTs的制備 在120mL60~70 °C無(wú)水甲苯溶液中，加入0.5~2g步驟(2)制備的活化埃洛石，10~30mL 硅烷偶聯(lián)劑KH-570，充氮密封;在攪拌反應(yīng)24~36h，反應(yīng)結(jié)束后，分別經(jīng)甲苯、丙酮、乙腈抽 濾洗滌，并于50~60°C真空干燥，得硅烷化埃洛石m-HNTs; (4) 印跡材料的預(yù)聚合 將模板分子香草醛與功能單體甲基丙烯酸按摩爾比1:4在乙腈中預(yù)聚合12~24h，得 到模板與單體的自組裝溶液； (5) 香草醛分子印跡材料的制備 將上述步驟(3)所得的m-HNTs分散于乙腈溶液中，按照香草醛:α_甲基丙烯酸：乙二醇 二甲基丙烯酸酯摩爾比1:4: (16~20)，每毫升溶液中香草醛的濃度為10~12.5mmol/L，依 次加入分散劑聚乙烯吡咯烷酮0.2~0.4g、交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二 異丁腈〇. 03~0.08g，在60~70°C條件下攪拌反應(yīng)18~24h;隨后用乙腈抽濾洗滌產(chǎn)物，并在 真空干燥箱中干燥至恒重； (6) 模板分子的去除 將聚合物用甲醇/乙酸混合液進(jìn)行索氏提取，控溫80~100°C，提取18~36h，以除去模 板分子，產(chǎn)物經(jīng)無(wú)水甲醇、蒸餾水交叉洗滌至pH=7,真空干燥至恒重，得到埃洛石表面香草 醛分子印跡材料。2. 如權(quán)利要求1所述的一種香草醛分子印跡材料的制備方法，其特征在于，模板分子香 草醛和功能單體甲基丙烯酸的摩爾比為1:4。3. -種非印跡材料的制備方法，其特征在于，其具體步驟為： (1) 活化埃洛石的制備 將過(guò)篩粒度為180目的埃洛石按質(zhì)量體積比lg:10mL加入到2~6mol/L的鹽酸溶液中活 化12~24h，用蒸餾水抽濾洗滌至中性，于真空干燥箱中干燥后備用； (2) 硅烷化埃洛石m-HNTs的制備 在120mL 60~70 °C無(wú)水甲苯溶液中，加入0.5~2g步驟（2)制備的活化埃洛石，10~ 30mL硅烷偶聯(lián)劑KH-570，充氮密封;在攪拌反應(yīng)24~36h，反應(yīng)結(jié)束后，分別經(jīng)甲苯、丙酮、乙 腈抽濾洗滌，并于50~60°C真空干燥，得硅烷化埃洛石m-HNTs; (3) 非印跡材料的制備 將上述步驟(2)所得的m-HNTs分散于乙腈溶液中，按照α-甲基丙烯酸：乙二醇二甲基丙 烯酸酯摩爾比4: (16~20)，依次加入分散劑聚乙烯吡咯烷酮0.2~0.4g、交聯(lián)劑乙二醇二甲 基丙烯酸酯和引發(fā)劑偶氮二異丁腈〇. 03~0.08g，在60~70°C條件下攪拌反應(yīng)18~24h;隨 后用乙腈抽濾洗滌產(chǎn)物，并在真空干燥箱中干燥至恒重;得到非印跡材料。4. 一種香草醛分子印跡材料的應(yīng)用方法，其特征在于，其具體步驟為： 稱取50mg MIP裝填于3mL帶有濾板的聚丙烯空柱中，制成分子印跡固相萃取小柱 (MISPE);對(duì)兩種實(shí)際樣品進(jìn)行固相萃取實(shí)驗(yàn)，上樣溶液及濃縮液經(jīng)超高效液相色譜法 (UPLC)檢測(cè)。5. 如權(quán)利要求4所述的一種香草醛分子印跡材料的應(yīng)用方法，其特征在于，色譜柱為 ACQUITY UPLC BEH (：18(1.7以111，2.1\100臟)分析柱；紫外吸收波長(zhǎng)為28〇11111(群）；流動(dòng)相為 80 %乙腈-水;流速為0.5mL/min。6. 如權(quán)利要求4所述的一種香草醛分子印跡材料的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的兩種 實(shí)際樣品樣品分別為市面銷售的某品牌巧克力與某品牌嬰幼兒奶粉。7. 如權(quán)利要求4所述的一種香草醛分子印跡材料的應(yīng)用方法，其特征在于，所述的兩種 實(shí)際樣品與40%甲醇-水混合溶液的質(zhì)量體積比為2g: 50mL。
【文檔編號(hào)】B01J20/30GK105968401SQ201610323371
【公開(kāi)日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2016年5月10日
【發(fā)明人】蘇立強(qiáng), 鄒雪瑩, 柏金鳳, 李晶, 祖廣權(quán)
【申請(qǐng)人】齊齊哈爾大學(xué)