L－羥基脯氨酸的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種L-羥基脯氨酸的制備方法，其包括如下步驟：制備焦谷氨酸；制備焦谷氨酸酯；制備焦谷氨酸醇；制備(3R，7aS)-3-苯基四氫吡咯并[1，2]惡唑-5(3H)-酮；制備L-羥基脯氨酸。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下的有益效果：摒棄了傳統(tǒng)采用動物供體提取的方式會存在安全隱患的問題，解決了采用生物原料對藥物生產(chǎn)的限制的問題，在缺少生物原料的情況下也能合成得到目標(biāo)產(chǎn)物，豐富了L-羥基脯氨酸的合成方法，增加了L-羥基脯氨酸的附加值，能夠進一步擴展L-羥基脯氨酸的應(yīng)用范圍；制備出的L-羥基脯氨酸產(chǎn)率和純度均較高，間接提高了阿扎那韋的合成純度；可以在制備時選擇較為常見的原料，因此生產(chǎn)成本較低。
【專利說明】
L一羥基脯氨酸的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ]本發(fā)明涉及一種L-羥基脯氨酸的制備方法，屬于氨基酸合成技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] L-羥基脯氨酸作為抗病毒藥物阿扎那韋合成的重要中間體，具有很高的應(yīng)用價 值。目前，L-羥基脯氨酸的主要來源是將明膠、骨膠、干酪素、大豆皮等蛋白質(zhì)用鹽酸水解， 用亞硝化法提取亞氨酸后，經(jīng)樹脂色譜分離后進行精制、結(jié)晶而成，由于其均是通過動物提 取的方式獲得，因此存在潛在的TSE/BSE污染，即傳染性海綿腦病和牛腦海綿狀病，這樣在 后續(xù)合成制備藥物時，其藥物的安全性也有一定的風(fēng)險，甚至?xí)：θ祟惖慕】?，?yán)重的話 會致人死亡。
[0003] 有鑒于此，目前已有很多針對L-羥基脯氨酸制備的研究，如中國專利CN104894152 通過基因工程手段，利用大腸桿菌，通過將經(jīng)密碼子及mRNA二級結(jié)構(gòu)優(yōu)化后的脯氨酸-4-順 式-4-羥化酶基因連接在含有合適啟動子的載體上，在宿主細(xì)胞中過量表達該羥化酶，從而 將游離的L-脯氨酸轉(zhuǎn)化為順式-4-羥基-L-脯氨酸的方法。該方法確實避免了從動物源原料 中提出L-羥基脯氨酸的帶病毒風(fēng)險，但是，由于其要構(gòu)建新的生物菌株，以及需要對菌株進 行篩選，因此，生產(chǎn)成本較高，生產(chǎn)效率較慢。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 針對現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，本發(fā)明的目的是提供一種L-羥基脯氨酸的制備方法。
[0005] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0006] 本發(fā)明提供一種L-羥基脯氨酸的制備方法，其包括如下步驟：
[0007] S1:將谷氨酸加入反應(yīng)罐中，油浴加熱至220~290°C，攪拌脫水，在130~180°C保 溫條件下反應(yīng)40~70分鐘，放入水中冷卻，過濾得到焦谷氨酸粗品，將所述焦谷氨酸粗品加 水于40~70°C下飽和，冷卻至30~40°C使其結(jié)晶，分離出晶體用洗滌劑洗滌，烘干得到焦谷 氨酸精品；
[0008] S2:在燒瓶中加入無水乙醇，用冰鹽浴降溫至-5°C以下，加入催化劑和步驟S1中得 到的焦谷氨酸，攪拌緩慢升溫于20~45°C反應(yīng)24~48小時；用中和堿調(diào)PH至7~8，過濾收 集濾液，濾渣用洗滌劑洗滌，將洗滌液與濾液合并后濃縮得到粗產(chǎn)物，在將所述粗產(chǎn)物于 130~150°C/1~2mmHg條件下蒸餾純化，得焦谷氨酸酯；
[0009] S3:將步驟S2中得到的焦谷氨酸酯溶于溶劑中，用冰鹽浴降溫到0~10°C，攪拌下 緩慢加入還原劑，其配比為焦谷氨酸酯：溶劑:還原劑=lmol :100ml: (2~3)mol，在此溫度 下攪拌反應(yīng)6~12小時，反應(yīng)完畢后加入水，并用中和酸調(diào)PH至6~6.5,濃縮得到白色片狀 結(jié)晶，然后再加入溶劑，溶劑該結(jié)晶，過濾溶液，將濾液濃縮，得淡黃色油狀物;再加入溶劑 丙酮，溶解該油狀物，將溶液過濾，收集濾液濃縮，冷卻后析出白色結(jié)晶，濾出結(jié)晶并用冷丙 酮洗滌該結(jié)晶，最后干燥，得到焦谷氨酸醇；
[0010] 步驟S1~S3的合成路線如下：
[0011]
[0012] S4:將步驟S3中得到的焦谷氨酸醇與苯甲醛混合后，在酸性催化劑的催化下，于70 ~120°C進行縮合脫水反應(yīng)，得到化合物（3R，7aS)-3-苯基四氫吡咯并[1，2]惡唑-5(3H)_ 酮；
[0013] 35:將步驟34中得到的（31?，7&3)-3-苯基四氫吡咯并[1，2]惡唑-5(3!〇-酮經(jīng)過|3- 羰基氧化反應(yīng)、羰基還原反應(yīng)、催化加氫反應(yīng)以及羥基氧化反應(yīng)，得到L-羥基脯氨酸；
[0014] 步驟S4~S5的合成路線如下：
[0015]
[0016]
123456 其中，所述β-羰基氧化反應(yīng)的溫度為-40~-50°c， 2 作為優(yōu)選方案，步驟S2中所述的催化劑選自硫酸、二氯亞砜、鹽酸中的一種。 3 作為優(yōu)選方案，步驟S3中所述的還原劑選自硼氫化鈉、硼氫化鋰中的一種。 4 作為優(yōu)選方案，步驟S4中所述的酸性催化劑選自對甲苯磺酸、三氯化硼乙醚、磺基 水楊酸中的一種。 5 作為優(yōu)選方案，步驟S4中所述的縮合脫水反應(yīng)的溫度為100°C。 6 作為優(yōu)選方案，所述焦谷氨酸醇、苯甲醛以及酸性催化劑的質(zhì)量比為1:(0.15~ 1.3):(0.165~0.2)。
[0023] 作為優(yōu)選方案，所述焦谷氨酸醇、苯甲醛以及酸性催化劑的質(zhì)量比為1:0.8:0.18。
[0024] 作為優(yōu)選方案，步驟S5中所述的β-羰基氧化反應(yīng)所用的去氫劑選自氫化鉀、氫化 鈉、六甲基娃基氨基鋰中的一種。
[0025] 作為優(yōu)選方案，所述去氫劑為氫化鉀。
[0026] 作為優(yōu)選方案，步驟S5中所述的β-羰基氧化反應(yīng)中的氧化劑選自次氯酸鈉、雙氧 水、亞氯酸鈉、2,2,6,6_四甲基哌啶。
[0027] 作為優(yōu)選方案，步驟S5中所述的羰基還原反應(yīng)中所用的還原劑選自四氫鋁鋰或硼 氫化鈉。
[0028] 作為優(yōu)選方案，步驟S5中所述的催化加氫反應(yīng)中的壓力控制為1~1.5MPa，催化劑 為鈀炭。
[0029] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下的有益效果：
[0030] 1、摒棄了傳統(tǒng)采用動物供體提取的方式會存在安全隱患的問題，解決了采用生物 原料對藥物生產(chǎn)的限制的問題，在缺少生物原料的情況下也能合成得到目標(biāo)產(chǎn)物，豐富了 L-羥基脯氨酸的合成方法，增加了L-羥基脯氨酸的附加值，能夠進一步擴展L-羥基脯氨酸 的應(yīng)用范圍；
[0031] 2、制備出的L-羥基脯氨酸產(chǎn)率和純度均較高，間接提高了阿扎那韋的合成純度；
[0032] 3、可以在制備時選擇較為常見的原料，因此生產(chǎn)成本較低。
【附圖說明】
[0033]通過閱讀參照以下附圖對非限制性實施例所作的詳細(xì)描述，本發(fā)明的其它特征、 目的和優(yōu)點將會變得更明顯：
[0034]圖1為本發(fā)明制備的L-羥基脯氨酸的H-NMR圖譜。
【具體實施方式】
[0035]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行詳細(xì)說明。以下實施例將有助于本領(lǐng)域的技術(shù) 人員進一步理解本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。應(yīng)當(dāng)指出的是，對本領(lǐng)域的普通技術(shù) 人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進。這些都屬于本發(fā)明 的保護范圍。
[0036] 實施例1
[0037] 本實施例涉及一種L-羥基脯氨酸的制備方法，具體包括如下步驟：
[0038] 在200L的電加熱不銹鋼反應(yīng)罐中加入谷氨酸60kg，于220~290°C進行油浴脫水反 應(yīng)，于140°C下保溫反應(yīng)55min后，放入10L水中；
[0039]攪拌冷卻，離心得焦谷氨酸粗品，將該焦谷氨酸粗品在65 °C下加水至飽和，離心過 濾，冷卻至35°C進行結(jié)晶，將晶體離心分離并洗滌、烘干得到焦谷氨酸精品28kg，收率54% (以谷氨酸投料理論收率計），熔點為159~161°C，[a]2Q = -ll .6(C = 2，H20);
[0040] 按照焦谷氨酸、無水乙醇、二氯亞砜的投料比為lmol :100ml :(0.06~1.2)mol進行 配比，在干燥的三口燒瓶中加入無水乙醇10L，用冰鹽水降溫至-5°C以下，滴加二氯亞砜 300ml，加入焦谷氨酸1000g，攪拌緩慢升溫至35~40 °C下，反應(yīng)24~36h，用氫氧化鉀的乙醇 溶液調(diào)節(jié)PH至7~8,過濾并用無水乙醇洗滌，洗滌液與濾液合并，濃縮得到1357g粗焦谷氨 酸乙酯，經(jīng)155°C/2mmHg下的蒸餾純化后，得到焦谷酸乙酯精品1108g，收率為90%(以焦谷 氨酸理論值計），純度不低于99.0%(HPLC)，[a]2Q = 4(C=10，H20);
[0041] 按照焦谷氨酸乙酯、無水甲醇、硼氫化鈉的投料比為lmol :100ml :(2~3)mol進行 配比，將32g焦谷氨酸乙酯溶于300ml無水甲醇中，用冰鹽水浴降溫到0~5°C，攪拌下緩慢加 入15g硼氫化鈉，加完后在此溫度下攪拌反應(yīng)并以TLC監(jiān)測反應(yīng)進程，反應(yīng)完畢后緩慢加入 lml水，用鹽酸中和至PH為6~6.5,減壓濃縮得白色片狀結(jié)晶，加入300ml無水乙醇，攪拌溶 解過濾，將濾液減壓濃縮，得22g黃色油狀物，加入100ml丙酮，溶解存放過夜，過濾濃縮至 干，稍冷后得白色結(jié)晶，過濾并用冷丙酮洗滌得到白色結(jié)晶，于低溫真空干燥，得到產(chǎn)品焦 谷氨酸醇18g，收率78% (以焦谷氨酸乙酯投料計），純度不低于98.0% (HPLC)，[a]2Q = 29(C = 2，Et0H);
[0042] 將焦谷氨酸醇100g，對甲苯磺酸一水合物16.5g，苯甲醛130g，甲苯350g依次加入 2L反應(yīng)瓶中，加熱至70~120°C回流4~6h，減壓蒸餾濃縮蒸發(fā)掉溶劑甲苯得到油狀物，經(jīng)柱 層析純化得到40 · 5g TSSA0200-A，HPLC: 95 %，收率23 % ;
[0043] 取TSSA0200-A 30g，加入900ml四氫呋喃，加入90g MoOPH于2L反應(yīng)瓶中，氮氣保護 下降溫至-40~-50 °C，滴加 LiHMDS 240g，反應(yīng)6~10h，猝滅反應(yīng)，柱層析得到9.7g TSSA0200-B，HPLC: 94 · 2 %，收率：30 % ;
[0044] 將TSSA0200-B 5g加入100ml三口瓶中，氮氣保護下加入50ml四氫呋喃，降溫至-15 ~-20°C，加入0.8g四氫鋁鋰，升溫至室溫反應(yīng)6~8h，猝滅反應(yīng)，柱層析得到1 .5g 丁55厶0200-(：，冊1^：:97%，收率：31.7%;
[0045] 將TSSA0200-C 1.5g用30ml乙醇溶解，加入高壓釜中，加入0.015g鈀炭，通入氫氣 至1]\〇^，反應(yīng)311，過濾除去鈀炭，得到0.828了3340200-〇，收率:96.5%;
[0046] 將 TEMPO 0.082g 配制成 20wt% 的溶液，TSSA0200-D 0.82g 配制成 10wt% 的溶液， 經(jīng)栗栗入硅膠柱中反應(yīng)5~10min，得到TSSA0200-D的溶液，經(jīng)濃縮結(jié)晶得到0.6g L-羥基脯 氨酸，收率65.4%，確認(rèn)圖譜如圖1所示，其中，該硅膠柱的長度控制在30cm，直徑控制在 60cm〇
[0047] 實施例2
[0048] 本實施例涉及一種L-羥基脯氨酸的制備方法，具體包括如下步驟：
[0049] 在200L的電加熱不銹鋼反應(yīng)罐中加入谷氨酸80kg，于250~270°C進行油浴脫水反 應(yīng)，于160°C下保溫反應(yīng)50min后，放入10L水中；
[0050]攪拌冷卻，離心得焦谷氨酸粗品，將該焦谷氨酸粗品在50°C下加水至飽和，離心過 濾，冷卻至3 0 °C進行結(jié)晶，將晶體離心分離并洗滌、烘干得到焦谷氨酸精品3 7 k g，收率 53.8%(以谷氨酸投料理論收率計），熔點為158.5~161°(：，[&]2() = -11.5(0 = 2，!120);
[00511 按照焦谷氨酸、無水乙醇、濃硫酸的投料比為lmol: 100ml: (0.06~1.2)mol進行配 比，在干燥的三口燒瓶中加入無水乙醇10L，用冰鹽水降溫至-5°C以下，滴加濃硫酸250ml， 加入焦谷氨酸l000g，攪拌緩慢升溫至35~45°C下，反應(yīng)36~48h，用氫氧化鉀的乙醇溶液調(diào) 節(jié)PH至7~8,過濾并用無水乙醇洗滌，洗滌液與濾液合并，濃縮得到1258g粗焦谷氨酸乙酯， 經(jīng)150°C/2mmHg下的蒸餾純化后，得到焦谷酸乙酯精品985g，收率為88% (以焦谷氨酸理論 值計），純度不低于 99.0%(HPLC)，[a]2° = 9.8(C = 2，Et0H);
[0052]按照焦谷氨酸乙酯、異丙醇、硼氫化鈉的投料比為lmol :100ml :(2~3)mol進行配 比，將315g焦谷氨酸乙酯溶于3000ml異丙醇中，用冰鹽水浴降溫到0~5°C，攪拌下緩慢加入 160g硼氫化鈉，加完后在此溫度下攪拌反應(yīng)并以TLC監(jiān)測反應(yīng)進程，反應(yīng)完畢后緩慢加入 l〇ml水，用鹽酸中和至PH為6~6.5,減壓濃縮得白色片狀結(jié)晶，加入3000ml無水乙醇，攪拌 溶解過濾，將濾液減壓濃縮，得220g黃色油狀物，加入1000ml丙酮，溶解存放過夜，過濾濃縮 至干，稍冷后得白色結(jié)晶，過濾并用冷丙酮洗滌得到白色結(jié)晶，于低溫真空干燥，得到產(chǎn)品 焦谷氨酸醇175g，收率76% (以焦谷氨酸乙酯投料計），純度不低于98.0%(HPLC)，[a]2Q = 30 (C = 2，EtOH);
[0053] 將焦谷氨酸醇100g，對三氟化硼乙醚20g，苯甲醛15g，甲苯450g依次加入2L反應(yīng)瓶 中，加熱至120°C回流4~6h，減壓蒸餾濃縮蒸發(fā)掉溶劑甲苯得到油狀物，經(jīng)柱層析純化得到 37 · 6g TSSA0200-A，HPLC: 94 · 2 %，收率30 % ;
[0054] 取TSSA0200-A 30g，加入900ml四氫呋喃，加入120g MoOPH于2L反應(yīng)瓶中，氮氣保 護下降溫至-50°C，滴加氰化鉀300g，反應(yīng)6~10h，猝滅反應(yīng)，柱層析得到9.7g TSSA0200-B， HPLC:94.2%，收率：30% ;
[0055] 將TSSA0200-B 5g加入100ml三口瓶中，氮氣保護下加入50ml四氫呋喃，降溫至-15 。(：，加入1.2g四氫鋁鋰，升溫至室溫反應(yīng)6~8h，猝滅反應(yīng)，柱層析得到1.5g TSSA0200-C， HPLC:97%，收率：31.7% ;
[0056] 將TSSA0200-C 1.5g用30ml乙醇溶解，加入高壓釜中，加入0.075g鈀炭，通入氫氣 至1.2MPa，反應(yīng)3h，過濾除去鈀炭，得到0.82g TSSA0200-D，收率:96.5 % ;
[0057] 將TEMPO O.lg配制成20wt%的溶液，TSSA0200-D 0.82g配制成10wt%的溶液，經(jīng) 栗栗入硅膠柱中反應(yīng)l〇min，得到TSSA0200-D的溶液，經(jīng)濃縮結(jié)晶得到0.6g L-羥基脯氨酸， 收率65 · 4%，確認(rèn)圖譜如圖1所示，其中，該硅膠柱的長度控制在40cm，直徑控制在55cm〇
[0058] 實施例3
[0059] 本實施例涉及一種L-羥基脯氨酸的制備方法，具體包括如下步驟：
[0060] 在200L的電加熱不銹鋼反應(yīng)罐中加入谷氨酸60kg，于220~250°C進行油浴脫水反 應(yīng)，于140°C下保溫反應(yīng)55min后，放入10L水中；
[0061 ]攪拌冷卻，離心得焦谷氨酸粗品，將該焦谷氨酸粗品在65 °C下加水至飽和，離心過 濾，冷卻至35°C進行結(jié)晶，將晶體離心分離并洗滌、烘干得到焦谷氨酸精品28kg，收率54% (以谷氨酸投料理論收率計），熔點為158.5~161°C，[a]2() = -11.5(C = 2，H20);
[0062] 按照焦谷氨酸、無水乙醇、鹽酸的投料比為lmol :100ml :(0.06~1.2)mol進行配 比，在干燥的三口燒瓶中加入無水乙醇1L，用冰鹽水降溫至-5 °C以下，滴加鹽酸150g，加入 焦谷氨酸l〇〇〇g，攪拌緩慢升溫至35~45°C下，反應(yīng)36~48h，用氫氧化鉀的乙醇溶液調(diào)節(jié)PH 至7~8,過濾并用無水乙醇洗滌，洗滌液與濾液合并，濃縮得到1100g粗焦谷氨酸乙酯，經(jīng) 135°C/2mmHg下的蒸餾純化后，得到焦谷酸乙酯精品1108g，收率為90% (以焦谷氨酸理論值 計），純度不低于 99.0%(HPLC)，[a]2Q = 3.5(C=10，H20);
[0063] 按照焦谷氨酸甲酯、無水甲醇、硼氫化鈉的投料比為lmol :100ml: (2~3)mol進行 配比，將290g焦谷氨酸甲酯溶于3000ml四氫呋喃中，用冰鹽水浴降溫到0~5°C，攪拌下緩慢 加入165g硼氫化鈉，加完后在此溫度下攪拌反應(yīng)并以TLC監(jiān)測反應(yīng)進程，反應(yīng)完畢后緩慢加 入10ml水，用鹽酸中和至PH為6~6.5,減壓濃縮得白色片狀結(jié)晶，加入3000ml無水乙醇，攪 拌溶解過濾，將濾液減壓濃縮，得230g黃色油狀物，加入1000ml丙酮，溶解存放過夜，過濾濃 縮至干，稍冷后得白色結(jié)晶，過濾并用冷丙酮洗滌得到白色結(jié)晶，于低溫真空干燥，得到產(chǎn) 品焦谷氨酸醇180g，收率78% (以焦谷氨酸乙酯投料計），純度不低于98.0%(HPLC)，[a]2Q = 31(C = 2，EtOH);
[0064] 將焦谷氨酸醇100g，對甲苯磺酸一水合物18g，苯甲醛80g，甲苯400g依次加入2L反 應(yīng)瓶中，加熱至70°C回流4~6h，減壓蒸餾濃縮蒸發(fā)掉溶劑甲苯得到油狀物，經(jīng)柱層析純化 得到39.5g TSSA0200-A，HPLC:95%，收率22.4% ;
[0065] 取TSSA0200-A 30g，加入900ml四氫呋喃，加入90g MoOPH于2L反應(yīng)瓶中，氮氣保護 下降溫至-40°C，滴加 LiHMDS 240g，反應(yīng)6~10h，猝滅反應(yīng)，柱層析得到9.7g TSSA0200-B， HPLC:94.2%，收率：30% ;
[0066] 將TSSA0200-B 5g加入100ml三口瓶中，氮氣保護下加入50ml四氫呋喃，降溫至-15 ~-20°C，加入0.8g四氫鋁鋰，升溫至室溫反應(yīng)6~8h，猝滅反應(yīng)，柱層析得到1 .5g 丁55厶0200-(：，冊1^：:97%，收率：31.7%;
[0067] 將TSSA0200-C 1.5g用30ml乙醇溶解，加入高壓釜中，加入0.07g鈀炭，通入氫氣至 IMPa，反應(yīng)3h，過濾除去鈀炭，得到0.82g TSSA0200-D，收率:96.5% ;
[0068] 將次氯酸鈉與TEMPO的混合物0.082g配制成20wt %的溶液，TSSA0200-D0.82g配制 成10wt %的溶液，經(jīng)栗栗入硅膠柱中反應(yīng)5~10min，得到TSSA0200-D的溶液，經(jīng)濃縮結(jié)晶得 到0.63g L-羥基脯氨酸，收率68.7%，確認(rèn)圖譜如圖1所示，其中，該硅膠柱的長度控制在 50cm，直徑控制在50cm。
[0069] 實施例4
[0070] 本實施例涉及一種L-羥基脯氨酸的制備方法，具體包括如下步驟：
[0071] 在200L的電加熱不銹鋼反應(yīng)罐中加入谷氨酸80kg，于220~290°C進行油浴脫水 反應(yīng)，于160°C下保溫反應(yīng)50min后，放入10L水中；
[0072]攪拌冷卻，離心得焦谷氨酸粗品，將該焦谷氨酸粗品在50°C下加水至飽和，離心過 濾，冷卻至35°C進行結(jié)晶，將晶體離心分離并洗滌、烘干得到焦谷氨酸精品38kg，收率55 % (以谷氨酸投料理論收率計），熔點為159.5~161°C，[a]2Q = -11.6(C = 2，H20);
[0073] 按照焦谷氨酸、無水甲醇、ToSOH的投料比為lmol: 100ml: (0.06~1 · 2)mol進行配 比，在干燥的三口燒瓶中加入無水甲醇1L，用冰鹽水降溫至-5 °C以下，滴加 ToSOH 860g，加 入焦谷氨酸l〇〇〇g，攪拌緩慢升溫至35~45°C下，反應(yīng)36~48h，用碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)PH至7~ 8，過濾后濃縮，經(jīng)蒸發(fā)（135°(：/2111111取)得到9958粗焦谷氨酸乙酯，收率為87.9%(以焦谷氨 酸理論值計），純度不低于 99.0%(HPLC)，[a]2Q = 4(C = 2，Et0H);
[0074] 按照焦谷氨酸甲酯、無水乙醇、硼氫化鈉的投料比為lmol :100ml: (2~3)mol進行 配比，將290g焦谷氨酸乙酯溶于3000ml無水乙醇中，用冰鹽水浴降溫到0~5°C，攪拌下緩慢 加入165g硼氫化鈉，加完后在此溫度下攪拌反應(yīng)并以TLC監(jiān)測反應(yīng)進程，反應(yīng)完畢后緩慢加 入10ml水，用鹽酸中和至PH為6~6.5,減壓濃縮得白色片狀結(jié)晶，加入3000ml無水乙醇，攪 拌溶解過濾，將濾液減壓濃縮，得232g黃色油狀物，加入1000ml丙酮，溶解存放過夜，過濾濃 縮至干，稍冷后得白色結(jié)晶，過濾并用冷丙酮洗滌得到白色結(jié)晶，于低溫真空干燥，得到產(chǎn) 品焦谷氨酸醇179g，收率78% (以焦谷氨酸乙酯投料計），純度不低于98.0%(HPLC)，[a]2Q = 31(C = 2，Et0H);
[0075] 將焦谷氨酸醇100g，對甲苯磺酸一水合物16.5g，苯甲醛130g，甲苯350g依次加入 2L反應(yīng)瓶中，加熱至70~120°C回流4~6h，減壓蒸餾濃縮蒸發(fā)掉溶劑甲苯得到油狀物，經(jīng)柱 層析純化得到40 · 5g TSSA0200-A，HPLC: 95 %，收率23 % ;
[0076] 取TSSA0200-A 30g，加入900ml四氫呋喃，加入90g MoOPH于2L反應(yīng)瓶中，氮氣保護 下降溫至-40~-50 °C，滴加 LiHMDS 240g，反應(yīng)6~10h，猝滅反應(yīng)，柱層析得到9.7g TSSA0200-B，HPLC: 94 · 2 %，收率：30 % ;
[0077] 將TSSA0200-B 5g加入100ml三口瓶中，氮氣保護下加入50ml四氫呋喃，降溫至-15 ~-20°C，加入0.8g四氫鋁鋰，升溫至室溫反應(yīng)6~8h，猝滅反應(yīng)，柱層析得到1 .5g 丁55厶0200-(：，冊1^：:97%，收率：31.7%;
[0078] 將TSSA0200-C 1.5g用30ml乙醇溶解，加入高壓釜中，加入0.015g鈀炭，通入氫氣 至1]\〇^，反應(yīng)311，過濾除去鈀炭，得到0.828了3340200-〇，收率:96.5%;
[0079] 將 TEMPO 0.082g 配制成 20wt% 的溶液，TSSA0200-D 0.82g 配制成 10wt% 的溶液， 經(jīng)栗栗入硅膠柱中反應(yīng)5~10min，得到TSSA0200-D的溶液，經(jīng)濃縮結(jié)晶得到0.6g L-羥基脯 氨酸，收率65.4%，確認(rèn)圖譜如圖1所示，其中，該硅膠柱的長度控制在30cm，直徑控制在 60cm〇
[0080] 以上對本發(fā)明的具體實施例進行了描述。需要理解的是，本發(fā)明并不局限于上述 特定實施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以在權(quán)利要求的范圍內(nèi)做出各種變形或修改，這并不影 響本發(fā)明的實質(zhì)內(nèi)容。
【主權(quán)項】
1. 一種L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，包括如下步驟： S1:將谷氨酸加入反應(yīng)罐中，油浴加熱至220~290°C，攪拌脫水，在130~180°C保溫條 件下反應(yīng)40~70分鐘，放入水中冷卻，過濾得到焦谷氨酸粗品，將所述焦谷氨酸粗品加水于 40~70 °C下飽和，冷卻至30~40°C使其結(jié)晶，分離出晶體用洗滌劑洗滌，烘干得到焦谷氨酸 精品； S2:在燒瓶中加入無水乙醇，用冰鹽浴降溫至-5°C以下，加入催化劑和步驟S1中得到的 焦谷氨酸，攪拌緩慢升溫于20~45°C反應(yīng)24~48小時；用中和堿調(diào)PH至7~8,過濾收集濾 液，濾渣用洗滌劑洗滌，將洗滌液與濾液合并后濃縮得到粗產(chǎn)物，在將所述粗產(chǎn)物于130~ 150°C/1~2mmHg條件下蒸餾純化，得焦谷氨酸酯； S3:將步驟S2中得到的焦谷氨酸酯溶于溶劑中，用冰鹽浴降溫到0~10°C，攪拌下緩慢 加入還原劑，其配比為焦谷氨酸酯：溶劑:還原劑=lmol: 100ml: (2~3)mol，在此溫度下攪 拌反應(yīng)6~12小時，反應(yīng)完畢后加入水，并用中和酸調(diào)PH至6~6.5,濃縮得到白色片狀結(jié)晶， 然后再加入溶劑，溶劑該結(jié)晶，過濾溶液，將濾液濃縮，得淡黃色油狀物;再加入溶劑丙酮， 溶解該油狀物，將溶液過濾，收集濾液濃縮，冷卻后析出白色結(jié)晶，濾出結(jié)晶并用冷丙酮洗 滌該結(jié)晶，最后干燥，得到焦谷氨酸醇； S4:將步驟S3中得到的焦谷氨酸醇與苯甲醛混合后，在酸性催化劑的催化下，于70~ 120 °C進行縮合脫水反應(yīng)，得到化合物(3R，7aS)-3-苯基四氫吡咯并[1，2 ]惡唑-5 (3H)-酮； S5:將步驟S4中得到的（3R，7aS)-3-苯基四氫吡咯并[1，2]惡唑-5(3H)_酮經(jīng)過β-羰基 氧化反應(yīng)、羰基還原反應(yīng)、催化加氫反應(yīng)以及羥基氧化反應(yīng)，得到L-羥基脯氨酸， 其中，所述羰基氧化反應(yīng)的溫度為-40~-50Γ。2. 如權(quán)利要求1所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，步驟S2中所述的催化劑 選自硫酸、二氯亞砜、鹽酸中的一種。3. 如權(quán)利要求1所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，步驟S3中所述的還原劑 選自硼氫化鈉、硼氫化鋰中的一種。4. 如權(quán)利要求1所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，步驟S4中所述的酸性催 化劑選自對甲苯磺酸、三氯化硼乙醚、磺基水楊酸中的一種。5. 如權(quán)利要求1所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，步驟S4中所述的縮合脫 水反應(yīng)的溫度為l〇〇°C。6. 如權(quán)利要求1所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，步驟S4中，所述焦谷氨 酸醇、苯甲醛以及酸性催化劑的質(zhì)量比為1:(0.15~1.3):(0.165~0.2)。7. 如權(quán)利要求6所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，所述焦谷氨酸醇、苯甲 醛以及酸性催化劑的質(zhì)量比為1:0.8:0.18。8. 如權(quán)利要求1所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，步驟S5中所述的β-羰基 氧化反應(yīng)所用的去氫劑選自氫化鉀、氫化鈉、六甲基硅基氨基鋰中的一種。9. 如權(quán)利要求8所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，所述去氫劑為氫化鉀。10. 如權(quán)利要求1所述的L-羥基脯氨酸的制備方法，其特征在于，步驟S5中所述的羰基 還原反應(yīng)中所用的還原劑選自四氫鋁鋰或硼氫化鈉。
【文檔編號】C07D207/16GK105837486SQ201610133099
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年3月10日
【發(fā)明人】王林
【申請人】南通普悅生物醫(yī)藥有限公司