%。
[0052]實(shí)施例6
[0053]步驟一、將紫菜干燥至恒重，之后用粉碎機(jī)粉碎，將粉碎的紫菜使用80目標(biāo)準(zhǔn)篩子進(jìn)行過(guò)篩處理，備用；
[0054]步驟二、將微晶纖維素與過(guò)篩后的紫菜按照9: I混合，作為誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物加入真菌液體培養(yǎng)基中，添加量為35g/L ；
[0055]步驟三、向液體培養(yǎng)基中加入真菌生長(zhǎng)需要的N源和無(wú)機(jī)鹽離子，玉米漿干粉1.7%, (NH4)2S04 0.5%, MgSO4 0.1%,甘油 0.25%, CaC03 0.25%,調(diào)節(jié) pH 4.5-5.5 ；
[0056]步驟四、在培養(yǎng)基中接入里氏木霉(T.reesei)的孢子懸液，于30°C的條件下，以轉(zhuǎn)速170-200轉(zhuǎn)/分速率的搖床上震蕩培養(yǎng)96-120h。
[0057]發(fā)酵120h后，采用國(guó)際理論與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)推薦的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定發(fā)酵液酶活力，與只用微晶纖維素誘導(dǎo)里氏木霉酶液相比，利用誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物誘導(dǎo)里氏木霉酶液中beta-葡萄糖苷酶酶活力提高104%。蛋白濃度提高了 24%，夕卜切酶酶活力提高17.2%，木聚糖酶活力提高479%。
[0058]實(shí)施例7
[0059]步驟一、將紫菜干燥至恒重，之后用粉碎機(jī)粉碎，將粉碎的紫菜使用80目標(biāo)準(zhǔn)篩子進(jìn)行過(guò)篩處理，備用；
[0060]步驟二、將微晶纖維素與過(guò)篩后的紫菜按照7.5: I混合，作為誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物加入真菌液體培養(yǎng)基中，添加量為30g/L ；
[0061]步驟三、向液體培養(yǎng)基中加入真菌生長(zhǎng)需要的N源和無(wú)機(jī)鹽離子，玉米漿干粉1.7%, (NH4)2S04 0.5%, MgSO4 0.1%,甘油 0.25%, CaC03 0.25%,調(diào)節(jié) pH 4.5-5.5 ；
[0062]步驟四、在培養(yǎng)基中接入里氏木霉(T.reesei)的孢子懸液，于30°C的條件下，以轉(zhuǎn)速170-200轉(zhuǎn)/分速率的搖床上震蕩培養(yǎng)96-120h。
[0063]發(fā)酵120h后，采用國(guó)際理論與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)推薦的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定發(fā)酵液酶活力，與只用微晶纖維素誘導(dǎo)里氏木霉酶液相比，利用誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物誘導(dǎo)里氏木霉酶液中beta-葡萄糖苷酶酶活力提高112%。蛋白濃度提高了 21.4%，外切酶酶活力提高54.1 %，木聚糖酶活力提高521 %。
[0064]實(shí)施例8
[0065]步驟一、將紫菜干燥至恒重，之后用粉碎機(jī)粉碎，將粉碎的紫菜使用80目標(biāo)準(zhǔn)篩子進(jìn)行過(guò)篩處理，備用；
[0066]步驟二、將微晶纖維素與過(guò)篩后的紫菜按照8.5: 1.5混合，作為誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物加入真菌液體培養(yǎng)基中，添加量為33g/L ；
[0067]步驟三、向液體培養(yǎng)基中加入真菌生長(zhǎng)需要的N源和無(wú)機(jī)鹽離子，玉米漿干粉1.7%, (NH4)2S04 0.5%, MgSO4 0.1%,甘油 0.25%, CaC03 0.25%,調(diào)節(jié) pH 4.5-5.5 ；
[0068]步驟四、在培養(yǎng)基中接入里氏木霉(T.reesei)的孢子懸液，于30°C的條件下，以轉(zhuǎn)速170-200轉(zhuǎn)/分速率的搖床上震蕩培養(yǎng)96-120h。
[0069]發(fā)酵120h后，采用國(guó)際理論與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)推薦的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定發(fā)酵液酶活力，與只用微晶纖維素誘導(dǎo)里氏木霉酶液相比，利用誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物誘導(dǎo)里氏木霉酶液中beta-葡萄糖苷酶酶活力提高108%。蛋白濃度提高了 15.7%，外切酶酶活力提高50%，木聚糖酶活力提高495%。
[0070]實(shí)施例9
[0071]步驟一、將水稻桿干燥至恒重，之后用粉碎機(jī)粉碎，將粉碎的水稻使用80目標(biāo)準(zhǔn)篩子進(jìn)行過(guò)篩處理，備用；
[0072]步驟二、將微晶纖維素與過(guò)篩后的水稻桿按照9: I混合，作為誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物加入真菌液體培養(yǎng)基中，添加量為35g/L ；
[0073]步驟三、向液體培養(yǎng)基中加入真菌生長(zhǎng)需要的N源和無(wú)機(jī)鹽離子，玉米漿干粉1.7%, (NH4)2S04 0.5%, MgSO4 0.1%,甘油 0.25%, CaC03 0.25%,調(diào)節(jié) pH 4.5-5.5 ；
[0074]步驟四、在培養(yǎng)基中接入里氏木霉(T.reesei)的孢子懸液，于30°C的條件下，以轉(zhuǎn)速170-200轉(zhuǎn)/分速率的搖床上震蕩培養(yǎng)96-120h。
[0075]發(fā)酵120h后，采用國(guó)際理論與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)推薦的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定發(fā)酵液酶活力，與只用微晶纖維素誘導(dǎo)里氏木霉酶液相比，利用誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物誘導(dǎo)里氏木霉酶液中濾紙酶活力提高59.5%。內(nèi)切酶酶活力提高了 72.5%，外切酶酶活力提聞103.5%。
[0076]實(shí)施例10
[0077]步驟一、將小麥桿干燥至恒重，之后用粉碎機(jī)粉碎，將粉碎的水稻使用80目標(biāo)準(zhǔn)篩子進(jìn)行過(guò)篩處理，備用；
[0078]步驟二、將微晶纖維素與過(guò)篩后的小麥桿按照9: I混合，作為誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物加入真菌液體培養(yǎng)基中，添加量為30g/L ；
[0079]步驟三、向液體培養(yǎng)基中加入真菌生長(zhǎng)需要的N源和無(wú)機(jī)鹽離子，玉米漿干粉1.7%, (NH4)2S04 0.5%, MgSO4 0.1%,甘油 0.25%, CaC03 0.25%,調(diào)節(jié) pH 4.5-5.5 ；
[0080]步驟四、在培養(yǎng)基中接入里氏木霉(T.reesei)的孢子懸液，于30°C的條件下，以轉(zhuǎn)速170-200轉(zhuǎn)/分速率的搖床上震蕩培養(yǎng)96-120h。
[0081]發(fā)酵120h后，采用國(guó)際理論與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)推薦的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定發(fā)酵液酶活力，與只用微晶纖維素誘導(dǎo)里氏木霉酶液相比，利用誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物誘導(dǎo)里氏木霉酶液中濾紙酶活力提高41.3%。內(nèi)切酶酶活力提高了 68.7%。
[0082]實(shí)施例11
[0083]步驟一、將芒草桿干燥至恒重，之后用粉碎機(jī)粉碎，將粉碎的水稻使用80目標(biāo)準(zhǔn)篩子進(jìn)行過(guò)篩處理，備用；
[0084]步驟二、將微晶纖維素與過(guò)篩后的芒草桿按照9: I混合，作為誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物加入真菌液體培養(yǎng)基中，添加量為33g/L ；
[0085]步驟三、向液體培養(yǎng)基中加入真菌生長(zhǎng)需要的N源和無(wú)機(jī)鹽離子，玉米漿干粉
1.7%, (NH4)2S04 0.5%, MgSO4 0.1%,甘油 0.25%, CaC03 0.25%,調(diào)節(jié) pH 4.5-5.5 ；
[0086]步驟四、在培養(yǎng)基中接入里氏木霉(T.reesei)的孢子懸液，于30°C的條件下，以轉(zhuǎn)速170-200轉(zhuǎn)/分速率的搖床上震蕩培養(yǎng)96-120h。
[0087]發(fā)酵120h后，采用國(guó)際理論與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會(huì)(IUPAC)推薦的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)定發(fā)酵液酶活力，與只用微晶纖維素誘導(dǎo)里氏木霉酶液相比，利用誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物誘導(dǎo)里氏木霉酶液中濾紙酶活力提高38.4%，外切酶酶活力提高72.1%。
[0088]盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開(kāi)如上，但其并不僅僅限于說(shuō)明書(shū)和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出的實(shí)施例。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物，其特征在于，按重量份計(jì)，包括以下組分:木質(zhì)纖維素0.5?1.5、以及微晶纖維素6?9.5。2.如權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物，其特征在于，按重量份計(jì)，包括以下組分:木質(zhì)纖維素I?1.5、以及微晶纖維素7?8。3.如權(quán)利要求2所述的誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物，其特征在于，按重量份計(jì)，包括以下組分:木質(zhì)纖維素1、以及微晶纖維素7.5。4.如權(quán)利要求3所述的誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物，其特征在于，所述木質(zhì)纖維素為紫菜、水稻、小麥或者芒草中的任一種。5.如權(quán)利要求4所述的誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物，其特征在于，所述木質(zhì)纖維素為紫菜。6.—種如權(quán)利要求1所述的誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物的使用方法，其特征在于，在真菌培養(yǎng)基中加入所述組合物，所述組合物的添加量為30?35g/L。7.如權(quán)利要求6所述的誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物的使用方法，其特征在于，所述組合物的添加量為33g/L。8.如權(quán)利要求7所述誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物的使用方法，其特征在于，所述真菌培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基還包括真菌生長(zhǎng)所需氮源和無(wú)機(jī)鹽離子為:質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.7%的玉米漿干粉，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.5%的(NH4)2SO4，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的MgSO4,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25 %的甘油，質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.25 %的CaCO3,并調(diào)節(jié)pH為4.5-5.5。9.如權(quán)利要求8所述的誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物的使用方法，其特征在于，還包括以下步驟: 在所述液體培養(yǎng)基中接入真菌的孢子懸液，于28-30°C的條件下，以轉(zhuǎn)速170-200轉(zhuǎn)/分速率的搖床上震蕩培養(yǎng)96-120h。10.如權(quán)利要求9所述誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物的使用方法，其特征在于，所述真菌為檜狀青霉或者里氏木霉中的一種。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及纖維素酶發(fā)酵領(lǐng)域，特別涉及一種誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物及其使用方法。本發(fā)明公開(kāi)了一種誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物，按重量份計(jì)，包括以下組分：木質(zhì)纖維素0.5～1.5、以及微晶纖維素6～9.5。該誘導(dǎo)真菌高產(chǎn)纖維素酶的組合物的使用方法為：在真菌培養(yǎng)基中加入所述組合物，所述組合物的添加量為30～35g/L。本發(fā)明所述誘導(dǎo)真菌產(chǎn)纖維素酶的組合物配比簡(jiǎn)單，原料易于獲得，且成本低，是新型廉價(jià)的纖維素酶合成的誘導(dǎo)物；該組合物的使用方法具有工藝簡(jiǎn)單，條件溫和以及環(huán)境友好的優(yōu)點(diǎn)，為纖維素酶高效低成本生產(chǎn)提供新的途徑。
【IPC分類(lèi)】C12R1/885, C12N9/42, C12R1/80
【公開(kāi)號(hào)】CN105505901
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410500338
【發(fā)明人】高樂(lè), 賈文娣, 張東遠(yuǎn), 陳樹(shù)林
【申請(qǐng)人】中國(guó)科學(xué)院天津工業(yè)生物技術(shù)研究所
【公開(kāi)日】2016年4月20日
【申請(qǐng)日】2014年9月26日