75%。
[0140] NMR (500MHz, CDC13) : δ 7. 35 (d, J = 1. 6Hz, 1H) , 6. 33 (dd, J = 3. 2, 1. 6Hz, 1H), 6. 20 (d, J = 3. 2Hz, 1H), 5. 37 (s, 2H), 3. 86 (s, 2H), 3. 14 (s, 3H), 3. 08 (s, 3H) 〇
[0141] 實(shí)施例48 :化合物（I1-15)的制備
[0142] 操作同實(shí)施例1，只是將1，1 一二溴（3'，4' 一二甲氧基）苯乙烯換成1，1 一二溴一 4 一苯基丁二烯（0· 1152g，0.40mmol)，制得目標(biāo)化合物（II 一 15)，0.0695g，收率為 68%。
[0144] 蟲 NMR (500MHz，CDC13): δ 7. 43 - 7.36 (m，2H)，7.29 (t，J = 7.4Hz，2H)，7.21 (t，J =7. 4Hz, 1H), 6. 55 - 6. 48 (m, 2H), 5. 39 (s, 2H), 3. 45 (d, J = 5. 6Hz, 2H), 3. 18 (s, 3H), 3. 10 ( s, 3H) 〇
[0145] 實(shí)施例49 :化合物（11-16)的制備
[0146] 操作同實(shí)施例1，只是將1，1 一二溴（3'，4' 一二甲氧基）苯乙烯換成1，1 一二 溴一 3 -甲基一 4 一（3'，4,一亞甲二甲氧基）苯丁烯（0. 1392g，0.40mmol)，制得目標(biāo)化合 物（II 一 16)，0· 0959g，收率為 76 %。
[0148] NMR (50 0MHz, CDCl3)：56.71(d,J = 7.9Hz,lH),6.69(d,J = 1. 5Hz, 1H), 6. 62 (dd, J = 7. 9, 1. 5Hz, 1H), 5. 90 (s, 2H), 5. 68 (s, 2H), 3. 16 (s, 3H), 3. 08 (s, 3 H)，2. 68-2. 45 (m, 2H)，2. 34 (m, 3H)，0· 88 (d, J = 5. 8Hz, 3H)。
[0149] 實(shí)施例50 :化合物（11-17)的制備
[0150] 操作同實(shí)施例1，只是將1，1 一二溴（3'，4' 一二甲氧基）苯乙烯換成1，1 一二溴 (2' 一溴一3'，4' 一二甲氧基）苯乙烯（0· 1604g，0.40mmol)，制得目標(biāo)化合物（II - 17)， 0.06928，收率為47%。
[0152] 蟲 NMR (500MHz，CDC13) : δ 7. 02 (s，1H)，6. 92 (s，1H)，5. 26 (s，2H)，3. 92 (s，2H)，3. 8 6 (s，3Η)，3· 83 (s，3Η)，3· 08 (s，6Η)。
[0153] 實(shí)施例51 :化合物（I1-18)的制備
[0154] 操作同實(shí)施例1，只是將1，1 一二溴（3'，4' 一二甲氧基）苯乙稀換成1，1 一二氯一 苯乙烯（0. 0692g，0. 40mmol)，制得目標(biāo)化合物（II 一 18)，0. 0321g，收率為35%。
[0155]
[0156] 4匪1?(50冊(cè)!^，〇0(：13)5 7.38((1，了 = 7.5取，2!〇,7.34 - 7.27(111，2!〇,7.25- 7· 19 (m，1H)，5· 31 (s，2H)，3· 81 (s，2H)，3· 16 (s，3H)，3· 08 (s，3H)。
[0157] 實(shí)施例52 :化合物（I1-19)的制備
[0158] 操作同實(shí)施例1，只是將1，1 一二溴（3'，4' 一二甲氧基）苯乙烯換成1，1 一二氯 (4'一氰基）苯乙烯（0.07928,0.40臟〇1)，制得目標(biāo)化合物（11一19)，0.04378，收率為 43%〇
[0160] 蟲 NMR (500MHz，CDC13) : δ 7. 58 (d，J = 8. 2Hz，2H)，7. 46 (d，J = 8. 2Hz，2H)，5. 25 ( s，2H)，3. 84 (s，2H)，3. 12 (s，3H)，3. 07 (s，3H)。
[0161] 實(shí)施例53 :抗人肝癌細(xì)胞HepG2生物活性測(cè)試
[0162] 體外抗人肝癌細(xì)胞Η印G2活性測(cè)試方法：MTT法
[0163] A原理：細(xì)胞通過(guò)線粒體水解酶將噻唑蘭（MTT)分解為不溶于水的藍(lán)紫色結(jié)晶并 沉積在細(xì)胞中，結(jié)晶物能被二甲基亞砜溶解，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光 吸收值，間接反映細(xì)胞的增殖情況和數(shù)量變化。
[0164] B細(xì)胞：人肝癌細(xì)胞！fepG2(購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)院細(xì)胞庫(kù)）
[0165] C實(shí)驗(yàn)步驟：
[0166] 1)樣品的準(zhǔn)備：對(duì)于可溶樣品，每lmg用20 μ L DMS0溶解，取2uL用1000 μ L培 養(yǎng)液稀釋，使?jié)舛葹?00 μ g/mL，再用培養(yǎng)液連續(xù)稀釋至使用濃度。
[0167] 2)細(xì)胞的培養(yǎng)
[0168] 2. 1)培養(yǎng)基的配制：每1000mL培養(yǎng)基中含80萬(wàn)單位青霉素，l.Og鏈霉素，10%滅 活胎牛血清。
[0169] 2. 2)細(xì)胞的培養(yǎng)：將腫瘤細(xì)胞接種于培養(yǎng)基中，置37°C，5% 0)2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)， 3~5d傳代。
[0170] 3)測(cè)定樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用
[0171 ] 將細(xì)胞用EDTA-胰酶消化液消化，并用培養(yǎng)基稀釋成1 X 105/mL，加到96孔細(xì)胞培 養(yǎng)板中，每孔l〇〇uL，置37°C，5% C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種24h后，加入用培養(yǎng)基稀釋的樣 品，每孔100 μ L，每個(gè)濃度加3孔，置37°C，5% 0)2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，72h后在細(xì)胞培養(yǎng)孔中加 入5mg/mL的MTT，每孔10 μ L，置37°C孵育4h，加入DMS0,每孔150 μ L，用振蕩器振蕩，使甲 臢完全溶解，用酶標(biāo)儀在570nm波長(zhǎng)下比色。以同樣條件用不含樣品，含同樣濃度DMS0的 培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞作為對(duì)照，計(jì)算樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的半數(shù)致死濃度（IC5。)，結(jié)果如表1 所示。
[0172] 以人肝癌細(xì)胞Η印G2為模型，以順鉑為陽(yáng)性對(duì)照品，測(cè)定了實(shí)施例中制備的三嗪 化合物（II)樣品體外對(duì)乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。結(jié)果顯示，部分化合物（II)對(duì)實(shí)驗(yàn) 所用的人肝癌細(xì)胞IfepG2有一定的抑制作用（結(jié)果詳見表1)。
[0173]表 1 化合物（III)對(duì) MDA-MB-231 的 IC50( μΜ)
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種Ξ嗦類化合物，其特征在于，結(jié)構(gòu)通式如下：其中R獨(dú)立為C8~C12芳乙締基，或者C4~C8含氧或硫的芳雜環(huán)，或者C1~CIO芳 基取代的烷基，或者C6~CIO芳基或取代芳基，所述的取代基選自C1~CIO烷氧基、面素 或含氮吸電子取代基。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種Ξ嗦類化合物，其特征在于，R選自3, 4-(亞甲二甲氧 基）苯丙基，苯乙締基，巧喃基，嚷吩，苯基或取代苯基，其中取代基選自甲氧基，3, 4-亞甲 二甲氧基，硝基，氣，氯或漠。3. 權(quán)利要求1或2所述的Ξ嗦類化合物的制備方法，其特征在于，具體通過(guò)W下步驟實(shí) 現(xiàn)：將式1，1-二面乙締類化合物與二甲雙脈鹽酸鹽混合加入有機(jī)溶劑中，在金屬銅的催化 作用下，在配體和堿的存在下，在60~130°C溫度下攬拌反應(yīng)2~25小時(shí)，反應(yīng)結(jié)束后，反 應(yīng)液后處理制得Ξ嗦類化合物；反應(yīng)式如下：其中R獨(dú)立為C8~C12芳乙締基，或者C4~C8含氧或硫的芳雜環(huán)，或者C1~CIO芳 基取代的烷基，或者C6~CIO芳基或取代芳基，所述的取代基選自C1~CIO烷氧基、面素 或含氮吸電子取代基；X為面素。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述后處理采用如下方法：反應(yīng)結(jié)束 后，反應(yīng)液過(guò)濾，濾渣用甲醇洗涂，濃縮濾液，柱層析，二氯甲燒：甲醇=50:1，V:V，收集含 目標(biāo)化合物的洗脫液，減壓蒸饋，干燥得到目標(biāo)化合物（II)。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑為酸類或臘類；所述 金屬銅催化劑為一價(jià)銅或二價(jià)銅化合物；所述配體為芳香氮雜環(huán)、芳香環(huán)、含徑基化合物、 含幾基化合物或氨基酸；所述堿為無(wú)機(jī)堿；1，1-二面乙締類化合物與二甲雙脈鹽酸鹽、金 屬銅催化劑、配體、堿的質(zhì)量量比為1 :〇. 5~3. 0 :0. 05~0. 5 :0. 3~0. 1 :8. 0~4. 0。6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，R選自3, 4-(亞甲二甲氧基）苯丙 基，苯乙締基，巧喃基，嚷吩，苯基或取代苯基，其中取代基選自甲氧基，3, 4-亞甲二甲氧基， 硝基，氣，氯或漠；X選自漠或氯。7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的有機(jī)溶劑選自四氨巧喃、1，4-二氧六環(huán)或乙臘；所述有機(jī)溶劑的體積用量通常W式1，1-二面乙締類化合物的質(zhì)量計(jì)為 10~50血/邑。8. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于，所述的金屬銅催化劑選自氯化亞銅、 艦化亞銅漠化銅，氧化亞銅或醋酸酬；進(jìn)一步優(yōu)選為艦化亞銅或氧化亞銅；所述配體選自 2, 2' 一聯(lián)化晚、1，10-菲羅嘟、N，N，Ν'，Ν' -四甲基乙二胺、S-聯(lián)糞、聯(lián)糞酪、乙二醇、乙酷丙 酬、苯甲酯乙酸乙醋、乙酷乙酸乙醋、巧Ξ酬、甘氨酸、亮氨酸或脯氨酸；所述的堿選自碳酸 鐘、醋酸飽、碳酸飽、氨氧化鋼、氨氧化鐘或憐酸鐘。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述配體選自2, 2'-聯(lián)化晚、巧Ξ酬 或甘氨酸；所述的堿選自憐酸鐘。10. 權(quán)利要求1所述的Ξ嗦類化合物在制備治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用，其特征在于，在 制備抗肝癌細(xì)胞的藥物中的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明提供一種三嗪類化合物，將1,1-二鹵乙烯類化合物與二甲雙胍鹽酸鹽混合加入有機(jī)溶劑中，在金屬銅、配體和堿的存在下反應(yīng)，反應(yīng)液后處理制得三嗪類化合物。本發(fā)明提供的三嗪類化合物的制備方法原料易得，設(shè)備要求不高，操作方便，成本低，有著廣泛的工業(yè)應(yīng)用前景。本發(fā)明提供的三嗪類化合物顯示一定的抗腫瘤活性，尤其在抗人肝癌HepG2細(xì)胞方面具有較強(qiáng)活性。為新藥篩選及開發(fā)奠定了基礎(chǔ)，具有較好的實(shí)用價(jià)值。結(jié)構(gòu)通式如下：
【IPC分類】C07D251/18, A61P35/00, C07D409/06, C07D405/06
【公開號(hào)】CN105399695
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510923118
【發(fā)明人】張辰, 郭順娜, 張立宇, 李曉, 崔冬梅
【申請(qǐng)人】浙江大學(xué)
【公開日】2016年3月16日
【申請(qǐng)日】2015年12月11日