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【主權(quán)項】
1. 從體細(xì)胞產(chǎn)生神經(jīng)嵴細(xì)胞的方法，包括： a) 在補(bǔ)充有丙戊酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)體細(xì)胞， b) 在補(bǔ)充有N- {(3R，4R) -4- [4- (2-氟-6-羥基-3-甲氧基-苯甲酰基）-苯甲酰氨 基]-吖庚烷-3-基}-4-羥基-3, 5-二甲基-苯甲酰胺的無血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)步驟（a)中 獲得的細(xì)胞。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中方法不包括通過引入基因遺傳修飾體細(xì)胞或步驟 (a)中獲得的細(xì)胞。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中步驟b)包括以懸浮培養(yǎng)法培養(yǎng)細(xì)胞。4. 根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的方法，其中步驟b)的無血清培養(yǎng)基補(bǔ)充有骨形 態(tài)發(fā)生蛋白（BMP)的抑制物。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中BMP的抑制物是頭蛋白。6. 根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的方法，其中步驟b)的無血清培養(yǎng)基補(bǔ)充有轉(zhuǎn)化 生長因子β(TGFi3)的小分子抑制物。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中TGFβ的小分子抑制物是SB431542。8. 根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項所述的方法，其中步驟b)的無血清培養(yǎng)基補(bǔ)充有糖原 合酶激酶3 (GSK3β)的小分子抑制物。9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中GSK3β的抑制物是3- (3-氨基-苯基）-4- (1-甲 基-1Η-吲哚-3-基）-吡咯-2, 5-二酮。10. 根據(jù)權(quán)利要求1至9中任一項所述的方法，其中步驟a)包括將細(xì)胞培養(yǎng)2天。11. 根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項所述的方法，其中步驟b)包括將細(xì)胞培養(yǎng)7天。12. 根據(jù)權(quán)利要求1至11中任一項所述的方法，其中體細(xì)胞是成纖維細(xì)胞。13. 根據(jù)權(quán)利要求1至12中任一項所述的方法，其中體細(xì)胞是人細(xì)胞。14. 根據(jù)權(quán)利要求1至13中任一項所述的方法，其中體細(xì)胞是從患有神經(jīng)疾病的受試 者獲得的。15. 神經(jīng)嵴細(xì)胞，其是通過前述權(quán)利要求中任一項所述的方法獲得的。16. 根據(jù)權(quán)利要求1至14中任一項所述的方法，還包括 c) 在適于神經(jīng)嵴細(xì)胞分化成分化細(xì)胞的條件下溫育步驟b)的產(chǎn)物，所述的分化細(xì)胞 選自施旺細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞或脂肪細(xì)胞。17. 施旺細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞或脂肪細(xì)胞，其是通過權(quán)利要求16所述的方法獲 得的。18. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的神經(jīng)嵴細(xì)胞或根據(jù)權(quán)利要求17所述的分化的施旺細(xì)胞、軟 骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞或脂肪細(xì)胞的生物樣本庫。19. 根據(jù)權(quán)利要求15或17所述的細(xì)胞的用途或根據(jù)權(quán)利要求18所述的生物樣本庫的 用途，用作神經(jīng)疾病的體外模型。20. 治療性組合物，其包含根據(jù)權(quán)利要求15或17所述的細(xì)胞或根據(jù)權(quán)利要求18所述 的生物樣本庫。 21. N- {(3R，4R) -4- [4- (2-氟-6-羥基-3-甲氧基-苯甲?；?苯甲酰氨基]-吖庚 烷-3-基} -4-羥基-3, 5-二甲基-苯甲酰胺的用途，用在從體細(xì)胞產(chǎn)生神經(jīng)嵴細(xì)胞的方法 中。 22. 3-(3-氨基-苯基）-4-(1-甲基-1H-吲哚-3-基）-吡咯-2, 5-二酮的用途，用在 從體細(xì)胞產(chǎn)生神經(jīng)嵴細(xì)胞的方法中。23. 基本上如本文所述的方法和用途。
【專利摘要】本申請涉及一種基于化學(xué)確定成分的培養(yǎng)基誘導(dǎo)的關(guān)聯(lián)步驟，將體細(xì)胞分化成多能神經(jīng)嵴細(xì)胞的方法。神經(jīng)嵴細(xì)胞能夠分化成眾多細(xì)胞類型，如施旺細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞或脂肪細(xì)胞。
【IPC分類】C12N5/0797
【公開號】CN105392881
【申請?zhí)枴緾N201480041377
【發(fā)明人】M·格拉夫, R·亞科內(nèi), E·C·托馬
【申請人】豪夫邁·羅氏有限公司
【公開日】2016年3月9日
【申請日】2014年7月18日
【公告號】CA2914520A1, EP3024928A1, WO2015011031A1