一種n-乙酰肌肽的合成方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種藥物中間體的合成技術領域，尤其是涉及一種N-乙酰肌肽的合 成方法。
【背景技術】
[0002] 老年性白內(nèi)障是隨著眼球的晶狀體氧化出現(xiàn)渾濁的現(xiàn)象，會造成視力低下甚至 失明。N-乙酰肌肽是作為天然的氧化抑制劑能起到抑制眼球的晶狀體氧化的作用，N-乙 酰-L-肌肽滴眼液可以治療老年性白內(nèi)障疾病，市場潛力巨大。另外N-乙酰-L-肌肽還具 有很好的美容功效，具有理想的抗除皺紋、防止老化和修復皮膚損傷的功效。由于肌肽已經(jīng) 工業(yè)化生產(chǎn)，所以許多合成方法都是從肌肽開始合成，如CN101077863A(化學合成N_乙酰 _L_肌肽的改進方法），日本專利JP58124750A等等。此方法有許多缺點：一是肌肽雖然已 經(jīng)工業(yè)化生產(chǎn)但比起起始原料如組氨酸，3 -丙氨酸來講還是價格比較昂貴，第二是乙?；?由于乙?；钚员容^高很難保證組氨酸側(cè)鏈上也會部分乙酰化。第三由于產(chǎn)物與原料在有 機溶劑中溶解度都不好，在水里溶解性都很好，所以很難進行萃取分離純化。另外的方法直 接用Ac- 3 -丙氨酸與組氨酸來合成，但Ac- 3 -丙氨酸方法很難能通過有機溶劑進行萃取 分離，在生產(chǎn)過程中很難進行。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的就是為了克服上述現(xiàn)有技術存在的缺陷而提供一種后處理簡單，能 有效分離提純的N-乙酰肌肽的合成方法。
[0004] 本發(fā)明的目的可以通過以下技術方案來實現(xiàn)：一種N-乙酰肌肽的合成方法，其特 征在于，該方法包括以下步驟：
[0005] (l)N-2, 4,6_三甲氧芐基-3-丙氨酸甲酯的合成：以丙氨酸甲酯為起 始原料，將2, 4, 6-三甲氧基苯甲醛與丙氨酸甲酯通過乙酸硼氫化鈉還原反應得 N-2, 4, 6-三甲氧芐基-丙氨酸甲酯；所述的2, 4, 6-三甲氧基苯甲醛、0 -丙氨酸甲酯、 乙酸硼氫化鈉的質(zhì)量比的范圍1 : (1~2) : (2~3);
[0006] (2)N_乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-3-丙氨酸甲酯的合成：將步驟（1)所得 N-2, 4, 6-三甲氧芐基-0 -丙氨酸甲酯溶于溶劑中，冰浴下滴加醋酐，滴加溫度控制在10°C 以下，加完，室溫反應12小時，所得反應液加水后用鹽酸調(diào)到pH為1-2,萃取、干燥、所得油 狀物即為N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-0 -丙氨酸甲酯；
[0007] (3)N_乙酰N-2,4,6_三甲氧芐基-3-丙氨酸的合成：將步驟（2)所得N-乙酰 N-2, 4, 6-三甲氧芐基-丙氨酸甲酯溶于甲醇，加入氫氧化鈉的水溶液，反應2小時，然后 用HC1調(diào)節(jié)pH至4后，攪拌有固體析出，所得固體清洗干燥得到N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧 芐基-0-丙氨酸；
[0008] (4)N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-丙氨酰-L-組氨酸的合成：將 L-His-OME. 2HCL溶解在二甲基甲酰胺（DMF)中，冰浴下，依次加入N，N-二異丙基乙胺 (DIEA)、N-乙酰N-2,4,6-三甲氧芐基-0-丙氨酸、2-(7_偶氮苯并三氮唑）-四甲基脲六 氟磷酸酯（HBTU)，室溫反應4-6小時，反應液加酸水調(diào)pH至2,所得油狀物溶于乙醇中，配 成（0. 03~0. 04) g/ml的溶液，加入氫氧化鈉，室溫反應2小時，然后HCL調(diào)節(jié)pH至5,得固 體N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-0 -丙氨酰-L-組氨酸；
[0009] (5)N-乙酰-丙氨酰-L-組氨酸三氟乙酸鹽的合成：將三氟乙酸與水按體積 比（9~19) : 1混合，冰水浴冷卻至0°，加入N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-@ -丙氨酰 L-組氨酸，然后室溫反應2小時，得白色固體N-乙酰-0 -丙氨酰-L-組氨酸三氟乙酸鹽；
[0010] (6)N-乙酰肌肽的合成：將N-乙酰-丙氨酰-L-組氨酸三氟乙酸鹽溶解于水 中，通過強酸性陽離子交換樹脂吸附，用去離子水洗去三氟乙酸，用氨水洗脫，收集，濃縮， 加異丙醇結晶，得產(chǎn)品。
[0011] 步驟⑴所述的2, 4,6_三甲氧基苯甲醛溶解在有機溶劑中后，再與丙氨酸甲 酯和乙酸硼氫化鈉進行反應，反應溫度為室溫，反應時間為24h。
[0012] 步驟（1)所述的有機溶劑為二氯甲烷與三乙胺按體積比300 : 11的比例進行混 合的混合物。
[0013] 步驟⑵所述的溶劑為體積比為100 : 14的二氯甲烷和三乙胺的混合物；所述的 N-2, 4, 6-三甲氧芐基-0 -丙氨酸甲酯在溶劑中的質(zhì)量濃度為（0. 1~1) g/ml ;所述的醋酐 的加入量為溶劑體積（〇. 1~〇. 2) %。
[0014] 步驟（3)所述的N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-3-丙氨酸甲酯溶于甲醇的質(zhì)量 濃度為（〇. 1~〇. 2) g/ml ;所述的N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-0 -丙氨酸甲酯與氫氧化 鈉的質(zhì)量比為（2~3) : 1。
[0015] 步驟⑷所述的L-His-〇ME. 2HCL溶解在DMF中得到濃度為（0. 06~0. 07) g/ml ; 所述的DIEA與DMF的體積比為1 : 6 ;所述的L-His-〇ME. 2HCL、N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧 芐基-0-丙氨酸，HBTU的質(zhì)量比為4 : 5 : (7~8);所述的乙醇與氫氧化鈉水溶液的體 積比為4 : 3;所述的氫氧化鈉水溶液的濃度為4N。
[0016] 所述的L-His-〇ME. 2HCL的分子結構為：
[0017]
[0018] 步驟（5)所述的N-乙酰N-2,4,6_三甲氧芐基-0-丙氨酰-L-組氨酸在三氟乙 酸與水的混合液中的濃度為（0. 05~0. 1) g/ml。
[0019] 合成路線如下：
[0020]
[0021] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明以丙氨酸甲酯為起始原料，通過對氨基進行 2, 4, 6-三甲氧芐基化修飾，從而提高0 -丙氨酸原料在有機溶劑中的溶解性，降低在水中 的溶解性，進一步氨基乙?；螅獾艏柞?，再與組氨酸甲酯進行縮合，水解掉甲酯后，通 過強酸去保護，最后通過強酸陽離子樹脂吸收，氨水洗脫得到N-乙酰肌肽。工藝合理，操作 簡單，從廉價的原料出發(fā)制備N-乙酰肌肽，適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，為工業(yè)化生產(chǎn)N-乙酰 肌肽提供了有利條件。
【具體實施方式】
[0022] 下面結合具體實施例對本發(fā)明進行詳細說明。
[0023] 實施例1
[0024] (1) N-2,4,6-三甲氧芐基-P -丙氨酸甲酯的合成
[0025] 2, 4, 6-三甲氧基苯甲醛10. 4克溶解在300毫升二氯甲烷中，加三乙胺11毫升， 3 -丙氨酸甲酯鹽酸鹽11. 2克，以及乙酸硼氫化鈉22克，室溫反應24小時，加飽和碳酸 氫鈉水溶液分層.二氯甲烷萃取，水洗，無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮得N-2, 4, 6-三甲氧芐 基-丙氨酸甲酯油狀物.產(chǎn)物未經(jīng)處理直接用于下一步反應.
[0026] (2)N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-3-丙氨酸甲酯的合成
[0027] 實例1中的產(chǎn)物溶于100ML二氯甲烷中，攪拌下加入14毫升三乙胺，冰水浴下，滴 加12毫升醋酐，控制溫度10度以下，加完，室溫反應12小時，反應液直接加水，用鹽酸調(diào)到 PH為1-2,分層，二氯甲烷萃取，飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，脫色。旋干得17克油狀物。
[0028] (3)N_乙酰N-2,4,6_三甲氧芐基-0-丙氨酸的合成
[0029] 將N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-3 -丙氨酸甲酯8. 9克溶于50毫升甲醇加入20 毫升4N氫氧化鈉的水溶液，反應2小時，然后用6N HC1調(diào)節(jié)PH至4后攪拌有固體析出，得 固體，乙醚洗，干燥得固體7克。
[0030] (4) N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-丙氨酰-L-組氨酸的合成
[0031] 將4克L-His-〇ME. 2HCL加至60毫升DMF中，冰水浴下，依次加入10毫升DIEA，5 克N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-@ -丙氨酸，7. 5克HBTU后，室溫反應4-6小時，反應液加 酸水調(diào)PH至2,用二氯甲烷萃取，有機層用5%碳酸鉀水溶液洗，飽和鹽水洗，無水硫酸鈉干 燥，脫色，過濾，濾液旋干得油狀物7. 2克，溶于200毫升乙醇中150毫升4N氫氧化鈉水溶 液，室溫反應2小時,然后用6N HCL調(diào)節(jié)PH至5,用乙酸乙酯萃取.酸水洗，飽和食鹽水洗， 無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮，加石油醚結晶.得固體，4克。
[0032] (5)N-乙酰-丙氨酰-L-組氨酸三氟乙酸鹽的合成
[0033]將45毫升三氟乙酸與5毫升水加至反應瓶中，冰水浴冷卻至0°，加入4克N-乙 酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-0 -丙氨酰-L-組氨酸，然后室溫反應2小時，加無水乙醚進行沉 淀，過濾，無水乙醚洗滌，得白色固體3克。
[0034] (6) N-乙酰肌肽的合成
[0035] 3克N-乙酰-丙氨酰-L-組氨酸三氟乙酸鹽加10毫升水溶解，通過強酸性 陽離子交換樹脂吸附，用去離子水洗去三氟乙酸，用5%氨水洗脫，收集，濃縮，加異丙醇結 晶?得固體1. 5克。
[0036] 實施例2
[0037] -種N-乙酰肌肽的合成方法，該方法包括以下步驟：
[0038] (l)N-2, 4,6_三甲氧芐基-3-丙氨酸甲酯的合成：以丙氨酸甲酯為起 始原料，將2, 4, 6-三甲氧基苯甲醛與丙氨酸甲酯通過乙酸硼氫化鈉還原反應得 N-2, 4, 6-三甲氧芐基-丙氨酸甲酯；所述的2, 4, 6-三甲氧基苯甲醛、0 -丙氨酸甲酯、 乙酸硼氫化鈉的質(zhì)量比的范圍1 : 1 : 2 ;
[0039] 所述的2, 4, 6-三甲氧基苯甲醛溶解在有機溶劑中后，再與0 -丙氨酸甲酯和乙酸 硼氫化鈉進行反應，反應溫度為室溫，反應時間為24h。所述的有機溶劑為二氯甲烷與三乙 胺按體積比300 : 11的比例進行混合的混合物。
[0040] (2)N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-3-丙氨酸甲酯的合成：將步驟（1)所得 N-2, 4, 6-三甲氧芐基-0 -丙氨酸甲酯溶于溶劑中，冰浴下滴加醋酐，滴加溫度控制在10°C 以下，加完，室溫反應12小時，所得反應液加水后用鹽酸調(diào)到pH為1-2,萃取、干燥、所得油 狀物即為N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-0 -丙氨酸甲酯；
[0041] 所述的溶劑為體積比為100 : 14的二氯甲烷和三乙胺的混合物；所述的 N-2, 4, 6-三甲氧芐基-丙氨酸甲酯在溶劑中的質(zhì)量濃度為0. lg/ml ;所述的醋酐的加入 量為溶劑體積〇. 1%。
[0042] (3)N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧芐基-3-丙氨酸的合成：將步驟（2)所得N-乙酰 N-2, 4, 6-三甲氧芐基-丙氨酸甲酯溶于甲醇，加入氫氧化鈉的水溶液，反應2小時，然后 用HC1調(diào)節(jié)pH至4后，攪拌有固體析出，所得固體清洗干燥得到N-乙酰N-2, 4, 6-三甲氧 芐基-0-丙氨酸；
[0043] 所述的N-乙酰N-2, 4,