步驟一、取皂刺原材料，在室溫下陰干后粉碎，得到皂刺粉末，備用； 步驟二、將步驟一得到的皂刺粉末加入到體積百分比為50%的乙醇溶液中，室溫下浸 泡3d，浸泡結束后分離得到提取液，再重復浸泡和分離操作2次，合并提取液，備用；然后將 提取液在〇°C條件下靜置18h，靜置結束后過濾，并將濾液減壓濃縮，得到低醇浸膏，備用； 步驟三、向步驟二得到的低醇浸膏中加入其重量7倍的水，攪拌使低醇浸膏溶解完全， 得到混合溶液，備用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯進行萃取，得到剩余水相，再將剩余水相 減壓濃縮，得到上料樣品，備用；將上料樣品采用大孔樹脂柱色譜法進行分離，上樣后依次 采用體積百分比為10%、20%、30%、40%、50%和60%的乙醇溶液進行梯度洗脫，收集洗脫劑為 體積百分比為50-60%乙醇溶液的餾分，并將該餾分濃縮，得到濃縮浸膏，備用； 步驟四、將步驟三得到的濃縮浸膏采用硅膠柱色譜法進行分離純化，上樣后依次用體 積比為1:0、10:1、9:1、5:1、2:1、1:1、1 :2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及體積比為 7:3的甲醇水溶液進行洗脫，洗脫得到的餾分經(jīng)TLC檢測、合并，得到餾分段1-30，備用； 步驟五、將步驟四得到的餾分段2采用硅膠柱色譜法進行分離純化，其中拌樣硅膠粒 徑為100目，裝柱硅膠粒徑為200目，上樣后依次用體積比為30:1、20 :1、10:1、5:1和1 :1 的乙酸乙酯-甲醇溶液進行洗脫，收集洗脫劑的體積比為10:1的餾分段，濃縮得到黃色膠 狀透明物，即為化合物I; 步驟六、步驟四得到的餾分段13-15,均有固體析出，合并、過濾，得到的固體進一步采 用凝膠色譜法進行等度洗脫純化，純化的流動相為體積比為1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流 速為6-7滴/min，得到的餾分經(jīng)減壓濃縮，得到淡黃色粉末，即化合物II; 步驟七、步驟四得到的餾分段9有固體析出，過濾后采用氯仿和甲醇溶劑進行重結晶， 得到淺黃色固體，即化合物III。
[0016] 實施例2: 一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方法，包括以下步驟： 步驟一、取皂刺原材料，在室溫下陰干后粉碎，得到皂刺粉末，備用； 步驟二、將步驟一得到的皂刺粉末加入到體積百分比為65%的乙醇溶液中，室溫下浸 泡5d，浸泡結束后分離得到提取液，再重復浸泡和分離操作3次，合并提取液，備用；然后將 提取液在4°C條件下靜置26h，靜置結束后過濾，并將濾液減壓濃縮，得到低醇浸膏，備用； 步驟三、向步驟二得到的低醇浸膏中加入其重量10倍的水，攪拌使低醇浸膏溶解完 全，得到混合溶液，備用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯進行萃取，得到剩余水相，再將剩余 水相減壓濃縮，得到上料樣品，備用；將上料樣品采用大孔樹脂柱色譜法進行分離，上樣后 依次采用體積百分比為10%、20%、30%、40%、50%和60%的乙醇溶液進行梯度洗脫，收集洗脫 劑為體積百分比為50-60%乙醇溶液的餾分，并將該餾分濃縮，得到濃縮浸膏，備用； 步驟四、將步驟三得到的濃縮浸膏采用硅膠柱色譜法進行分離純化，上樣后依次用體 積比為1:0、10:1、9:1、5:1、2:1、1:1、1 :2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及體積比為 7:3的甲醇水溶液進行洗脫，洗脫得到的餾分經(jīng)TLC檢測、合并，得到餾分段1-30，備用； 步驟五、將步驟四得到的餾分段2采用硅膠柱色譜法進行分離純化，其中拌樣硅膠粒 徑為200目，裝柱硅膠粒徑為300目，上樣后依次用體積比為30:1、20:1、10 :1、5:1和1 :1 的乙酸乙酯-甲醇溶液進行洗脫，收集洗脫劑的體積比為10:1的餾分段，濃縮得到黃色膠 狀透明物，即為化合物I; 步驟六、步驟四得到的餾分段13-15,均有固體析出，合并、過濾，得到的固體進一步采 用凝膠色譜法進行等度洗脫純化，純化的流動相為體積比為1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流 速為6-7滴/min，得到的餾分經(jīng)減壓濃縮，得到淡黃色粉末，即化合物II; 步驟七、步驟四得到的餾分段9有固體析出，過濾后采用氯仿和甲醇溶劑進行重結晶， 得到淺黃色固體，即化合物III。
[0017] 實施例3: 一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方法，包括以下步驟： 步驟一、取皂刺原材料，在室溫下陰干后粉碎，得到皂刺粉末，備用； 步驟二、將步驟一得到的皂刺粉末加入到體積百分比為60%的乙醇溶液中，室溫下浸 泡4d，浸泡結束后分離得到提取液，再重復浸泡和分離操作3次，合并提取液，備用；然后 將提取液在0-4°C條件下靜置22h，靜置結束后過濾，并將濾液減壓濃縮，得到低醇浸膏，備 用； 步驟三、向步驟二得到的低醇浸膏中加入其重量9倍的水，攪拌使低醇浸膏溶解完全， 得到混合溶液，備用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯進行萃取，得到剩余水相，再將剩余水相 減壓濃縮，得到上料樣品，備用；將上料樣品采用大孔樹脂柱色譜法進行分離，上樣后依次 采用體積百分比為10%、20%、30%、40%、50%和60%的乙醇溶液進行梯度洗脫，收集洗脫劑為 體積百分比為50-60%乙醇溶液的餾分，并將該餾分濃縮，得到濃縮浸膏，備用； 步驟四、將步驟三得到的濃縮浸膏采用硅膠柱色譜法進行分離純化，上樣后依次用體 積比為1:0、10:1、9:1、5:1、2:1、1:1、1 :2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及體積比為 7:3的甲醇水溶液進行洗脫，洗脫得到的餾分經(jīng)TLC檢測、合并，得到餾分段1-30，備用； 步驟五、將步驟四得到的餾分段2采用硅膠柱色譜法進行分離純化，其中拌樣硅膠粒 徑為100目，裝柱硅膠粒徑為200目，上樣后依次用體積比為30:1、20:1、10:1、5:1和1 :1 的乙酸乙酯-甲醇溶液進行洗脫，收集洗脫劑的體積比為10:1的餾分段，濃縮得到黃色膠 狀透明物，即為化合物I; 步驟六、步驟四得到的餾分段13-15,均有固體析出，合并、過濾，得到的固體進一步采 用凝膠色譜法進行等度洗脫純化，純化的流動相為體積比為1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流 速為6-7滴/min，得到的餾分經(jīng)減壓濃縮，得到淡黃色粉末，即化合物II; 步驟七、步驟四得到的餾分段9有固體析出，過濾后采用氯仿和甲醇溶劑進行重結晶， 得到淺黃色固體，即化合物III。
【主權項】
1. 一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方法，其特征在于：包括 以下步驟： 步驟一、取皂刺原材料，在室溫下陰干后粉碎，得到皂刺粉末，備用； 步驟二、將步驟一得到的皂刺粉末加入到體積百分比為50-65%的乙醇溶液中，室溫下 浸泡3-5d，浸泡結束后分離得到提取液，再重復浸泡和分離操作2-3次，合并提取液，備用； 然后將提取液在0-4°C條件下靜置18-26h，靜置結束后過濾，并將濾液減壓濃縮，得到低醇 浸膏，備用； 步驟三、向步驟二得到的低醇浸膏中加入其重量7-10倍的水，攪拌使低醇浸膏溶解完 全，得到混合溶液，備用；然后依次用石油醚、乙酸乙酯進行萃取，得到剩余水相，再將剩余 水相減壓濃縮，得到上料樣品，備用；將上料樣品采用大孔樹脂柱色譜法進行分離，上樣后 采用不同濃度的乙醇溶液進行梯度洗脫，收集洗脫劑為體積百分比為50-60%乙醇溶液的 餾分，并將該餾分濃縮，得到濃縮浸膏，備用； 步驟四、將步驟三得到的濃縮浸膏采用硅膠柱色譜法進行分離純化，上樣、梯度洗脫， 洗脫得到的餾分經(jīng)TLC檢測、合并，得到餾分段1-30,備用； 步驟五、將步驟四得到的餾分段2采用硅膠柱色譜法進行分離純化，上樣后依次用體 積比為30:1、20:1、10:1、5:1和1 :1的乙酸乙酯-甲醇溶液進行洗脫，收集洗脫劑的體積比 為10:1的餾分段，濃縮得到黃色膠狀透明物，即為化合物I; 步驟六、步驟四得到的餾分段13-15,均有固體析出，合并、過濾，得到的固體進一步采 用凝膠色譜法進行等度洗脫純化，純化的流動相為體積比為1:1的三氯甲烷-甲醇溶液，流 速為6-7滴/min，得到的餾分經(jīng)減壓濃縮，得到淡黃色粉末，即化合物II; 步驟七、步驟四得到的餾分段9有固體析出，過濾后進行重結晶，得到淺黃色固體，即 化合物III; 所述化合I、II和III的結構式依次為：2. 如權利要求1所述的一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步驟三所述的大孔樹脂柱色譜法依次采用體積百分比為10%、20%、30%、 40%、50%和60%的乙醇溶液進行梯度洗脫。3. 如權利要求1所述的一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步驟四所述的硅膠柱色譜法上樣后依次用體積比為1 :〇、1〇:1、9:1、5:1、 2:1、1:1、1:2、1:5和0:1的乙酸乙酯-甲醇溶液以及體積比為7:3的甲醇水溶液進行洗脫。4. 如權利要求1所述的一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步驟五的硅膠柱色譜法中，拌樣硅膠粒徑為100-200目，裝柱硅膠粒徑為 200-300 目。5. 如權利要求1所述的一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步驟七過濾得到的固體采用氯仿和甲醇溶劑進行重結晶。6. 如權利要求1所述的一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方 法，其特征在于：步驟二所述的皂刺粉末加入到體積百分比為60%的乙醇溶液中。
【專利摘要】本發(fā)明屬于天然產物提取領域，具體公開一種從低醇皂刺中提取新環(huán)烯醚萜化合物和其他化合物的方法，包括以下步驟：皂刺粉末采用低醇冷浸提取濃縮，得到的低醇浸膏萃取，并將剩余水相濃縮，得上料樣品；上料樣品采用大孔樹脂柱色譜法進行分離，并將餾分濃縮，得到的濃縮浸膏采用硅膠柱色譜法分離純化得到餾分段1-30；將餾分段2采用硅膠柱色譜法分離純化，得到化合物Ⅰ；餾分段13-15析出固體得到化合物Ⅱ；餾分段9析出固體經(jīng)重結晶得到化合物Ⅲ。本發(fā)明采用低醇冷浸提取，結合色譜法以及特定比例的溶劑和參數(shù)，能夠保證皂角刺中含氧化合物如醚類、酮類和內酯類等不穩(wěn)定活性成分被有效的提取分離出來，不會造成化學鍵斷裂或結構的變化。
【IPC分類】C07D493/04, C07D311/30, C07D311/94, C07D311/40
【公開號】CN105111180
【申請?zhí)枴緾N201510428080
【發(fā)明人】尹衛(wèi)平, 李海迪, 劉軍娜, 劉華清, 閆強衛(wèi)
【申請人】河南科技大學
【公開日】2015年12月2日
【申請日】2015年7月21日