丙稀酸（MAA)作為功能單體，室溫下攪拌24h， 使模板分子與功能單體充分作用，加入20mmol交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA)， 7mmol引發(fā)劑過(guò)硫酸鉀及50mL乙腈，用頻率為20KHz超聲振蕩5min，通氮?dú)?5min，密封，放 入60°C恒溫水浴中反應(yīng)48h。取出，冷卻至室溫，抽濾得到聚合物微球，真空干燥，用250mL 的提取液，其中V(乙酸）：V(甲醇）=1 : 4在索氏提取器中提取24h，洗去模板分子，用 甲醇將聚合物洗至中性，真空干燥，得到鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球1。
[0037]實(shí)施例2
[0038] (1)稱(chēng)取2.Og殼聚糖溶40mL2%的乙酸溶液，靜置8個(gè)小時(shí)使其消泡，用注射 器將殼聚糖溶液逐滴加入到氫氧化鈉乙醇混合液中（10%NaOH和95 %乙醇，體積比為 4 : 1)，得到形狀規(guī)整、粒度均勻的殼聚糖微球，將制得的殼聚糖小球放在混合液中陳化 20h。過(guò)濾得到殼聚糖微球（CS)，用蒸餾水洗滌7次，除去多余的氫氧化鈉乙醇溶液，將殼聚 糖微球加入到50mL戊二醛溶液（質(zhì)量百分比1 % )(相當(dāng)于0? 005mol戊二醛），磁力攪拌 3h。然后用大量蒸餾水反復(fù)洗滌，以去除殘留的戊二醛溶液，得到醛基交聯(lián)后的殼聚糖微球 載體（CS-CHO)。
[0039] (2)將I.Og上述步驟⑴得到的交聯(lián)殼聚糖微球和Immol4-氨基鄰苯二甲酸二 甲酯加入到25mL乙腈中，再加入4mmol甲基丙稀酸（MAA)作為功能單體，室溫下攪拌12h， 使模板分子與功能單體充分作用。加入IOmmol交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDM)， 5mmol引發(fā)劑過(guò)硫酸銨及50mL乙腈，用頻率為60KHz超聲振蕩lOmin，通氮?dú)?0min，密封， 放入70°C恒溫水浴中反應(yīng)36h。取出，冷卻至室溫，抽濾得到聚合物微球，真空干燥。用 250mL的提取液，其中V(乙酸）：V(甲醇）=1 : 3在索氏提取器中提取24h，洗去模板 分子，用甲醇將聚合物洗至中性，真空干燥，得到鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球2。
[0040] 實(shí)施例3
[0041] (1)稱(chēng)取1.5g殼聚糖溶于20mL2%的乙酸溶液，靜置15個(gè)小時(shí)使其消泡，用注 射器將殼聚糖溶液逐滴加入到氫氧化鈉乙醇混合液中（10%NaOH和95%乙醇，體積比為 4 : 1)，得到形狀規(guī)整、粒度均勻的殼聚糖微球，將制得的殼聚糖小球放在混合液中陳化 28h，過(guò)濾得到殼聚糖微球（CS)，用蒸餾水洗滌4次，除去多余的氫氧化鈉乙醇溶液。將殼聚 糖微球加入到50mL戊二醛溶液（質(zhì)量百分比1 % )(相當(dāng)于0? 005mol戊二醛），磁力攪拌 lh。然后用大量蒸餾水反復(fù)洗滌，以去除殘留的戊二醛溶液，得到醛基交聯(lián)后的殼聚糖微球 載體（CS-CHO)。
[0042] (2)將0?75g上述步驟（1)得到的交聯(lián)殼聚糖微球和Immol4-氨基鄰苯二甲酸二 甲酯加入到25mL乙腈中，再加入8mmol甲基丙稀酸（MAA)作為功能單體，室溫下攪拌36h， 使模板分子與功能單體充分作用。加入30mmol交聯(lián)劑乙二醇二甲基丙烯酸酯（EGDMA)， IOmmol引發(fā)劑過(guò)硫酸鉀及50mL乙腈，用頻率為40KHz超聲振蕩7min，通氮?dú)?0min，密封， 放入80°C恒溫水浴中反應(yīng)24h。取出，冷卻至室溫，抽濾得到聚合物微球，真空干燥。用 250mL的提取液，其中V(鹽酸）：V(甲醇）=1 : 5在索氏提取器中提取24h，洗去模板 分子，用甲醇將聚合物洗至中性，真空干燥，得到鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球3。
[0043] 測(cè)試?yán)?
[0044]對(duì)上述實(shí)施例1得到的交聯(lián)殼聚糖微球（CS)、殼聚糖微球載體（CS-CHO)及鄰苯二 甲酸二甲酯分子印跡微球（MIP)在IRPrestige-21型傅立葉變換紅外光譜儀上進(jìn)行測(cè)試 (KBr壓片法，掃描范圍在400-4000cm3，得到如圖1所示的紅外光譜。
[0045] 測(cè)試?yán)?
[0046]對(duì)上述實(shí)施例2得到的交聯(lián)殼聚糖微球（CS)、鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球利 用ADVANCEII/400MHZ型核磁共振儀進(jìn)行表征測(cè)定。得到如圖2所示的殼聚糖微球及如圖 3所示的鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的 13C-NMR波譜。
[0047] 測(cè)試?yán)?
[0048] 分別取上述實(shí)施例3中得到的交聯(lián)殼聚糖微球、分子印跡聚合物微球以及非印 記聚合物均勻固定在樣品臺(tái)上，在SS-550型掃描電子顯微鏡下觀(guān)測(cè)樣品形貌及表觀(guān)形態(tài) (SEM的電壓設(shè)定為5kV)，得到如圖4所示的交聯(lián)殼聚糖微球（CS-CHO)的SEM圖，如圖5所 示的鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球（MIP)的SEM圖和如圖6所示的非印記聚合物（NIP) 的SEM圖。
[0049] 測(cè)試?yán)?
[0050] 鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球吸附曲線(xiàn)的測(cè)定。分別稱(chēng)取10份等量的實(shí)施例 1~3得到的鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球（每份0. 03g)置于試管中，分別加入配制好 的2mL不同濃度DMP的溶液中，于恒溫震蕩24h，使吸附達(dá)到平衡，去上清液，用紫外分光光 度計(jì)測(cè)其吸光度，并計(jì)算平衡吸附液中DMP的濃度。根據(jù)結(jié)合前后溶液中底物濃度變化計(jì) 算出聚合物對(duì)底物的吸附量。結(jié)果得到如圖7所示的吸附曲線(xiàn)。
[0051] 吸附曲線(xiàn)說(shuō)明吸附容量在基本達(dá)到飽和后只有略小增加，體現(xiàn)了比較快的吸附動(dòng) 力學(xué)和穩(wěn)定的吸附平衡，說(shuō)明本發(fā)明制備的鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球?qū)︵彵蕉姿?二甲酯分子有很好的檢測(cè)能力。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在于，所述的制備方法為 以下步驟： (1) 稱(chēng)取殼聚糖溶于乙酸溶液中，靜置至泡末消失，然后將殼聚糖的乙酸溶液逐滴加入 到氫氧化鈉乙醇混合液中并陳化20~28h，過(guò)濾后得到殼聚糖微球，用蒸餾水洗滌若干次，將 洗滌后的殼聚糖微球加入到戊二醛溶液中，磁力攪拌1~3 h，然后再用蒸餾水洗滌若干次， 得到殼聚糖微球載體； (2) 將殼聚糖微球載體與4-氨基鄰苯二甲酸二甲酯加入到乙腈中，再加入甲基丙 烯酸，室溫下攪拌12~36h后加入交聯(lián)劑、引發(fā)劑及乙腈，超聲振蕩5~10 min，通氮?dú)?5 ~30min，密封，放入60°C以上恒溫水浴中反應(yīng)1~2天，取出，冷卻至室溫，抽濾得到聚合物微 球，干燥后用提取液提取24h~48h，再用甲醇將聚合物微球洗至中性，真空干燥，得到鄰苯二 甲酸二甲酯分子印跡微球。2. 根據(jù)權(quán)利要求1的一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在于， 殼聚糖的相對(duì)分子質(zhì)量為3X 105~7X 105Da。3. 根據(jù)權(quán)利要求1的一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在于， 步驟（1)的氫氧化鈉乙醇混合液中NaOH溶液與乙醇溶液的體積比為4 :1，其中，NaOH溶液 的質(zhì)量百分比為10%，乙醇溶液的質(zhì)量百分比為95%。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2的一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在 于，戊二醛溶液中戊二醛的物質(zhì)的量大于等于殼聚糖微球物質(zhì)的量。5. 根據(jù)權(quán)利要求1的一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在于， 步驟（2)中的4-氨基鄰苯二甲酸二甲酯與殼聚糖微球載體的物質(zhì)的量比為1 :1~2。6. 根據(jù)權(quán)利要求1的一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在于， 甲基丙烯酸與4-氨基鄰苯二甲酸二甲酯的物質(zhì)的量比為4~8 :1。7. 根據(jù)權(quán)利要求1的一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在于， 交聯(lián)劑選自乙二醇二甲基丙烯酸酯，交聯(lián)劑與4-氨基鄰苯二甲酸二甲酯的物質(zhì)的量比為 10-30 ：1〇8. 根據(jù)權(quán)利要求1的一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在于， 引發(fā)劑選自過(guò)硫酸鉀或過(guò)硫酸銨，4-氨基鄰苯二甲酸二甲酯與引發(fā)劑的物質(zhì)的量比為 5~10 ：1〇9. 根據(jù)權(quán)利要求1的一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，其特征在于， 提取液中乙酸與甲醇的體積比為1 :3~5。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及分子印跡聚合物領(lǐng)域，為解決對(duì)采用分子印跡技術(shù)檢測(cè)鄰苯二甲酸二甲酯分子時(shí)存在識(shí)別位點(diǎn)吸附性不佳的問(wèn)題，本發(fā)明提出了一種鄰苯二甲酸二甲酯分子印跡微球的制備方法，該方法制備的分子印跡微球，具有構(gòu)效預(yù)定性、特異識(shí)別性和環(huán)境穩(wěn)定性，能在鄰苯二甲酸酯（PAEs）的富集分離、檢測(cè)分析及高效減除領(lǐng)域發(fā)揮積極作用。
【IPC分類(lèi)】C08J9/26, B01J20/26, C08F220/06, B01J20/30, C08F222/14
【公開(kāi)號(hào)】CN105085765
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510354912
【發(fā)明人】郭明, 譚賢, 婁鈞翼, 孫立蘋(píng)
【申請(qǐng)人】浙江農(nóng)林大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年11月25日
【申請(qǐng)日】2015年6月24日