將15mL制備好的實(shí)施例一得到的共聚 物的膠束濃度為2. 5mg/mL的載藥膠束溶液放入截留分子量為3500的透析袋內(nèi)，置于150mL pH7. 4的磷酸鹽緩沖溶液中，在20°C、37°C和40°C，恒速攪拌條件下，進(jìn)行藥物釋放實(shí)驗(yàn)。每 隔lh，從透析袋外的釋放介質(zhì)中取2mL的液體，再補(bǔ)充2mL新的pH7. 4磷酸鹽緩沖溶液。將 取出的溶液樣品烘干，加入4mL的乙醇溶液溶解，測(cè)定在292nm處的紫外吸光度，通過(guò)鬼臼 毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及鬼白毒素的濃度-吸光度線(xiàn)性方程，計(jì)算出釋放介質(zhì)中的藥物含量，從而 得到累積釋放百分比和時(shí)間的關(guān)系，作出釋放曲線(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)圖4(A-20°C，A-37°C，A-4(TC)。
[0061] 實(shí)施例九
[0062] 基本同實(shí)施例七，只是共聚物是實(shí)施例二得到的：將15mL制備好的實(shí)施例二得到 的共聚物的膠束濃度為2. 5mg/mL的載藥膠束溶液放入截留分子量為3500的透析袋內(nèi)，置 于150mL pH5. 6的磷酸鹽緩沖溶液中，在20°C、37°C和40°C，恒速攪拌條件下，進(jìn)行藥物釋 放實(shí)驗(yàn)。每隔lh，從透析袋外的釋放介質(zhì)中取2mL的液體，再補(bǔ)充2mL新的pH5. 6磷酸鹽緩 沖溶液。將取出的溶液樣品烘干，加入4mL的乙醇溶液溶解，測(cè)定在292nm處的紫外吸光度， 通過(guò)鬼白毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及鬼白毒素的濃度-吸光度線(xiàn)性方程，計(jì)算出釋放介質(zhì)中的藥物含 量，從而得到累積釋放百分比和時(shí)間的關(guān)系，作出釋放曲線(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)圖3(B-20°C，Β-37Γ， B-40°C ) 〇
[0063] 實(shí)施例十
[0064] 基本同實(shí)施例九，只是釋放介質(zhì)的pH不同：將15mL制備好的實(shí)施例二得到的共聚 物的膠束濃度為2. 5mg/mL的載藥膠束溶液放入截留分子量為3500的透析袋內(nèi)，置于150mL pH7. 4的磷酸鹽緩沖溶液中，在20°C、37°C和40°C，恒速攪拌條件下，進(jìn)行藥物釋放實(shí)驗(yàn)。每 隔lh，從透析袋外的釋放介質(zhì)中取2mL的液體，再補(bǔ)充2mL新的pH7. 4磷酸鹽緩沖溶液。將 取出的溶液樣品烘干，加入4mL的乙醇溶液溶解，測(cè)定在292nm處的紫外吸光度，通過(guò)鬼臼 毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及鬼白毒素的濃度-吸光度線(xiàn)性方程，計(jì)算出釋放介質(zhì)中的藥物含量，從而 得到累積釋放百分比和時(shí)間的關(guān)系，作出釋放曲線(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)圖4(B-20°C，B-37°C，B-4(TC)。
[0065] 實(shí)施例^^一
[0066] 基本同實(shí)施例七，只是共聚物是實(shí)施例二得到的：將15mL制備好的實(shí)施例二得到 的共聚物的膠束濃度為2. 5mg/mL的載藥膠束溶液放入截留分子量為3500的透析袋內(nèi)，置 于150mL pH5. 6的磷酸鹽緩沖溶液中，在20°C、37°C和40°C，恒速攪拌條件下，進(jìn)行藥物釋 放實(shí)驗(yàn)。每隔lh，從透析袋外的釋放介質(zhì)中取2mL的液體，再補(bǔ)充2mL新的pH5. 6磷酸鹽緩 沖溶液。將取出的溶液樣品烘干，加入4mL的乙醇溶液溶解，測(cè)定在292nm處的紫外吸光度， 通過(guò)鬼白毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及鬼白毒素的濃度-吸光度線(xiàn)性方程，計(jì)算出釋放介質(zhì)中的藥物含 量，從而得到累積釋放百分比和時(shí)間的關(guān)系，作出釋放曲線(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)圖3(C-20°C，C-37°C， C-40°C ) 〇
[0067] 實(shí)施例十二
[0068] 基本同實(shí)施例^^一，只是釋放介質(zhì)的pH不同：將15mL制備好的實(shí)施例二得到的 共聚物的膠束濃度為2. 5mg/mL的載藥膠束溶液放入截留分子量為3500的透析袋內(nèi)，置于 150mL pH7. 4的磷酸鹽緩沖溶液中，在20°C、37°C和40°C，恒速攪拌條件下，進(jìn)行藥物釋放 實(shí)驗(yàn)。每隔lh，從透析袋外的釋放介質(zhì)中取2mL的液體，再補(bǔ)充2mL新的pH7. 4磷酸鹽緩沖 溶液。將取出的溶液樣品烘干，加入4mL的乙醇溶液溶解，測(cè)定在292nm處的紫外吸光度， 通過(guò)鬼白毒素標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)及鬼白毒素的濃度-吸光度線(xiàn)性方程，計(jì)算出釋放介質(zhì)中的藥物含 量，從而得到累積釋放百分比和時(shí)間的關(guān)系，作出釋放曲線(xiàn)。結(jié)果見(jiàn)圖4(C-20°C，C-37°C， C-40°C ) 〇
[0069] 結(jié)果表明：本發(fā)明研制的烯丙基丙二酸與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物膠束對(duì)鬼 臼毒素具有pH和溫度雙重響應(yīng)性控釋作用，在ρΗ5. 6的緩沖溶液中和40°C的釋放速率比在 PH7. 4的緩沖溶液中和20°C及37°C的釋放速率快。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種pH和溫度雙重響應(yīng)性共聚物，其特征在于分子結(jié)構(gòu)式為：分子量為10000~30000。2. 如權(quán)利要求1所述的pH和溫度雙重響應(yīng)性共聚物的制備方法，其特征在于按如下步 驟： (a) 制備烯丙基丙二酸二乙酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物： 將偶氮二異丁腈和N-乙烯基己內(nèi)酰胺溶于二氧六環(huán)，偶氮二異丁腈與N-乙烯基己內(nèi) 酰胺的質(zhì)量比為1:320~350,每毫升二氧六環(huán)中溶有0. 1~0. 3g的N-乙烯基己內(nèi)酰胺； 在氮?dú)鈿夥障掠?5~75°C攪拌中滴加烯丙基丙二酸二乙酯的二氧六環(huán)溶液，所加入烯丙 基丙二酸二乙酯的二氧六環(huán)溶液與偶氮二異丁腈和N-乙烯基己內(nèi)酰胺二氧六環(huán)溶液的體 積比是1:1~2,烯丙基丙二酸二乙酯和N-乙烯基己內(nèi)酰胺的質(zhì)量比為1:3~10 ;于65~ 75°C聚合反應(yīng)后，產(chǎn)物用THF溶解并于石油醚中共沉淀，收集沉淀物，待有機(jī)溶劑揮發(fā)干后 用蒸餾水溶解，將該水溶液用截留分子量為3500的透析袋透析5~8天，經(jīng)減壓蒸餾和真 空干燥得烯丙基丙二酸二乙酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物TOEAM-co-PNVCL ; (b) 制備烯丙基丙二酸與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物： 將NaOH加入TOEAM-co-PNVCL的四氫呋喃溶液中，再加入蒸餾水，每毫升四氫呋喃溶有 0· 02 ~0· 04g PDEAM-co-PNVCL，NaOH 和 PDEAM-co-PNVCL 的質(zhì)量比為 1:1 ~L 5,蒸餾水和 四氫呋喃的體積比為1:2~2. 5 ;68~72°C反應(yīng)48~52h后，冷至0~5°C，將產(chǎn)物溶液 的PH值調(diào)節(jié)至4-5,攪拌，用二氯甲烷萃取，分出的有機(jī)層經(jīng)減壓蒸餾，剩余物蒸餾水溶解 后用截留分子量為3500的透析袋透析5~8天，減壓蒸餾，真空干燥制得烯丙基丙二酸與 N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物。3. 如權(quán)利要求2所述的pH和溫度雙重響應(yīng)性共聚物的制備方法，其特征在于按如下步 驟： (a) 制備烯丙基丙二酸二乙酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物： 將偶氮二異丁腈和N-乙烯基己內(nèi)酰胺溶于二氧六環(huán)，所述偶氮二異丁腈和N-乙烯基 己內(nèi)酰胺的質(zhì)量比為1:320~350,每毫升二氧六環(huán)中溶有0. 1~0. 3g的N-乙烯基己內(nèi)酰 胺；抽真空充氮?dú)?~5次，每次30~60min，65~75°C攪拌下滴加烯丙基丙二酸二乙酯 的二氧六環(huán)溶液，所加入烯丙基丙二酸二乙酯的二氧六環(huán)溶液與偶氮二異丁腈和N-乙烯 基己內(nèi)酰胺二氧六環(huán)溶液的體積比是1:1~3,烯丙基丙二酸二乙酯和N-乙烯基己內(nèi)酰胺 的質(zhì)量比為1:3~10 ;65~75°C聚合反應(yīng)20~30h，產(chǎn)物用THF溶解后倒入石油醚中共沉 淀2~5次，收集沉淀，待有機(jī)溶劑揮發(fā)干后用蒸餾水溶解，將產(chǎn)物的水溶液倒入截留分子 量為3500的透析袋中，透析5~8天，減壓蒸餾蒸出水后，真空干燥得烯丙基丙二酸二乙酯 與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物TOEAM-co-PNVCL ; (b) 制備烯丙基丙二酸與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物： 將NaOH加入TOEAM-co-PNVCL的四氫呋喃溶液中，再加入蒸餾水，每毫升四氫呋喃溶有 0· 02 ~0· 04g PDEAM-CO-PNVCL，NaOH 和 PDEAM-CO-PNVCL 的質(zhì)量比為 1:1 ~I. 5,蒸餾水和 四氫呋喃的體積比為1:2~2. 5 ;70°C反應(yīng)48~52h后，冷至室溫。將反應(yīng)瓶置于冰水浴 中，用0. 1~0. 2mol/mL的鹽酸將產(chǎn)物溶液的pH調(diào)節(jié)至4-5,攪拌1~2h，用二氯甲燒萃取 3~4次，分出的有機(jī)層經(jīng)減壓蒸餾蒸出有機(jī)溶劑后，剩余物用蒸餾水溶解后轉(zhuǎn)移至截留分 子量為3500的透析袋中，透析5~8天，減壓蒸餾蒸出水后，真空干燥制得烯丙基丙二酸與 N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物。4.如權(quán)利要求1所述的pH和溫度雙重響應(yīng)性共聚物的用途是在水中自組裝形成納米 膠束，作為鬼白毒素藥物的控制釋放載體。
【專(zhuān)利摘要】一種pH和溫度雙重響應(yīng)性共聚物及其制備方法和用途，屬藥用高分子材料技術(shù)領(lǐng)域。共聚物的分子結(jié)構(gòu)如下式所示，其分子量為10000～30000：按如下步驟制備：(a)制備烯丙基丙二酸二乙酯與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物；(b)制備烯丙基丙二酸與N-乙烯基己內(nèi)酰胺的共聚物。用途是在水中自組裝形成納米膠束，作為鬼臼毒素藥物的控制釋放載體。原料價(jià)廉易得、合成方法簡(jiǎn)單、產(chǎn)物易分離提純、可操作性強(qiáng)。能在水溶液中自組裝形成穩(wěn)定的球形納米膠束，該膠束對(duì)鬼臼毒素具有較高的載藥量和包封率，并對(duì)鬼臼毒素具有的pH和溫度雙重響應(yīng)性控制釋放性能，可用于構(gòu)建智能型藥物控釋系統(tǒng)。
【IPC分類(lèi)】C08F220/04, C08F226/06, C08F220/10, A61K47/32
【公開(kāi)號(hào)】CN105061664
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510582778
【發(fā)明人】畢韻梅, 徐立, 劉玲琪, 唐剛, 胡敏奇
【申請(qǐng)人】云南師范大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年11月18日
【申請(qǐng)日】2015年9月15日