巖白菜素類衍生物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，涉及巖白菜素類衍生物及其制備方法，具體是涉及一 類巖白菜素8位羥基類衍生物及其制備方法，以及該類化合物在制備抗血小板聚集藥物中 的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 心腦血管疾病包括缺血性冠狀動脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。?、腦卒中和（或） 周圍血管病，是導(dǎo)致人類死亡的主要病因。動脈粥樣硬化血栓形成是心、腦血管疾病的病理 基礎(chǔ)。血小板激活和聚集在其形成過程中起核心作用。在體內(nèi)，血小板通過粘附、聚集在血 管損傷的部位參與初級血栓的形成，此外通過血小板的釋放產(chǎn)物，可進(jìn)一步引起血管收縮， 刺激白細(xì)胞，損傷內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)血液凝固，導(dǎo)致血栓形成?？寡“逯委熡兄跍p少心、腦 血管不良事件的發(fā)生。隨著抗血小板聚集藥物在心腦血管疾病中的良好應(yīng)用，越來越多的 學(xué)者對其進(jìn)行研究。
[0003] 巖白菜素（bergenin)，其結(jié)構(gòu)如式I表不
是虎耳草、巖 白菜、厚葉巖白菜、矮地茶等虎耳草科植物的主要活性成分，2010版《中華人民共和國藥典》 收為鎮(zhèn)咳祛痰藥，已有片劑應(yīng)用于臨床。已有學(xué)者報道了巖白菜素及其衍生物的抗血小板 聚集活性，為了發(fā)現(xiàn)更新、更有效和更廣譜的抗血小板聚集新藥，開發(fā)具有抗血小板聚集活 性的巖白菜素衍生物作為新型抗血小板聚集藥物研發(fā)具有良好的應(yīng)用前景?；谝陨媳?景，本發(fā)明合成了巖白菜素8位羥基結(jié)構(gòu)修飾的衍生物，并進(jìn)行了體外抗血小板聚集實驗 研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是通過對巖白菜素進(jìn)行衍生化反應(yīng)，增強其抗血小板聚集作用，提 供一系列巖白菜素類衍生物。
[0005] 本發(fā)明的另一個目的是提供巖白菜素類衍生物的制備方法。
[0006] 本發(fā)明的另一個目的是提供巖白菜素類衍生物的用途。
[0007] 本發(fā)明的目的是通過技術(shù)方案實現(xiàn)的：
[0008] 如式II所示的巖白菜素類衍生物：
[0009]
[0010] 其中，n= 1~10的整數(shù)；R選自氯、溴、含1個或多個N的雜環(huán)基、
NR2R3;Ri選自氫、氟、氯、溴、氰基、氨基、硝基、Ci5烷基、鹵代Ci5烷基、Ci5烷氧基，X選自S、 〇 ;R2、R3相同或不同，各自獨立的選自H、Ci6烷基。
[0011] 作為優(yōu)選方案，n= 2~5的整數(shù)；R選自氯、溴、含1個或多個N的雜環(huán)基、
_NR2R3 ;Ri選自氫、氟、氯、溴、氰基、氨基、硝基、Cl5烷基、鹵代C1 5烷基，C1 5烷 v 氧基，X選自S、0;R2、R3相同或不同，各自獨立的選自H、C13烷基。
[0012] 作為進(jìn)一步的優(yōu)選方案，n= 2~5的整數(shù)；R選自Br、含1個或多個N的雜環(huán)基、

t為0、1或2,1?4選自羥基、羧基、羥甲基、Ci4烷基、Ci3烷氧基、C1 4烷氧基取代 的C14烷基；m為0、1或2，R5選自C14烷基、C13烷氧基、C14烷氧基取代的C14烷基；y為0、 1或2, &選自甲基、甲氧基取代的C: 2烷基；z為0、1或2,R7選自C: 4烷基；k為0、1或2， Rs選自C: 4烷基、C: 3烷氧基；R9選自氣、C: 4烷基、
&。選自C: 4烷基，p為1或2,q為1、2或3,Rn、R12相同或不同，各自獨立的選自H、C: 3烷 基；Rl；3選自氣、鹵素、羥基、氣基、硝基、氛基、Ci4烷基、Ci3烷氧基；
[0013]


[0024] 本發(fā)明所述的巖白菜素類衍生物優(yōu)選自：8-0-(2-溴乙基）巖白菜素，8-0-(3_溴 丙基）巖白菜素，8-0-(4_溴丁基）巖白菜素，8-0-(5_溴戊基）巖白菜素，8-0-(2_吡咯 烷基乙基）巖白菜素，8-0-(3_吡咯烷基丙基）巖白菜素，8-0-(4_吡咯烷基丁基）巖白菜 素，8-〇-(5_P比略烷基戊基）巖白菜素，8-〇-(2_嗎啡啉基乙基）巖白菜素，8-〇-(3_嗎啡 啉基丙基）巖白菜素，8-0-(4-嗎啡啉基丁基）巖白菜素，8-0-(5-嗎啡啉基戊基）巖白菜 素，8-0-(2-(4-甲基哌嗪基）乙基）巖白菜素，8-0-(3-(4-甲基哌嗪基）丙基）巖白菜素， 8-0-(4-(4_甲基哌嗪基）丁基）巖白菜素，8-0-(5-(4_甲基哌嗪基）戊基）巖白菜素， 8-〇-(2-(4_漠-1-苯疏基）乙基））-巖白菜素，8-〇-(3-(4_漠-1-苯疏基）丙基））-巖 白菜素，8-〇-(4-(4_溴-1-苯疏基）丁基））-巖白菜素，8-〇-(5-(4_溴-1-苯疏基）戊 基））_巖白菜素，8-〇_ (2- (4-甲基-1-苯疏基）乙基））-巖白菜素，8-〇_ (3- (4-甲基-1-苯 疏基）丙基））_巖白菜素，8-〇_ (4- (4-甲基-1-苯疏基）丁基））-巖白菜素，8-〇_ (5- (4-甲 基-1-苯疏基）戊基））-巖白菜素，8-〇_ (2- (4-溴-1-苯酸基）乙基））-巖白菜素， 8-0-(3-(4_溴-1-苯酚基）丙基））-巖白菜素，8-0-(4-(4_溴-1-苯酚基）丁基））-巖 白菜素，8-0-(5-(4-溴-1-苯酚基）戊基））-巖白菜素，8-0-(2-(4-甲基-1-苯酚基）乙 基））-巖白菜素，8-0-(3-(4_甲基-1-苯酚基）丙基））-巖白菜素，8-0-(4-(4_甲基-1-苯 酚基）丁基））-巖白菜素，8-0- (5- (4-甲基-1-苯酚基）戊基））-巖白菜素。
[0025] 本發(fā)明所述的巖白菜素類衍生物的制備方法：
[0026] 當(dāng)R為C1或Br時，以巖白菜素和二氯代烷或二溴代烷為原料，在縛酸劑作用下反 應(yīng)生成巖白菜素類衍生物，即8-0-氯代烷基巖白菜素或8-0-溴代烷基巖白菜素，其反應(yīng)式 為：
[0027]
[0028] 所述的巖白菜素和二氯代烷或二溴代烷的摩爾比為1 :1. 1~1. 6。所述的二氯代 烷或二溴代烷為二氯或二溴取代的C2i。直鏈烷烴，優(yōu)選為二氯或二溴取代的C2 5直鏈代烷， 典型的為1，2-二氯乙烷，1，3-二氯丙烷，1，4-二氯丁烷，1，5-二氯戊烷，1，6-二氯己烷， 1，2-二溴乙烷，1，3-二溴丙烷，1，4-二溴丁烷，1，5-二溴戊烷，1，6-二溴正己烷。
[0029] 所述的縛酸劑為碳酸氫鈉。所述的巖白菜素和碳酸氫鈉的摩爾比為1 :1~3。所 述的反應(yīng)在無水N，N-二甲基甲酰胺中（DMF)，氮氣保護(hù)下進(jìn)行；所述的反應(yīng)溫度為60~ 80°C。反應(yīng)進(jìn)行時，碳酸氫鈉作為縛酸催化劑將反應(yīng)產(chǎn)生的HBr中和，促進(jìn)反應(yīng)向正方向進(jìn) 行。
[0030] 進(jìn)一步的，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液降至室溫，加入等體積的乙酸乙酯和水萃取，水相 用乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯相，再用蒸餾水洗滌三次，乙酸乙酯相經(jīng)無水硫酸鈉 干燥后過濾，減壓蒸干溶劑，得到的殘留物經(jīng)硅膠柱層析，洗脫劑是二氯甲烷/甲醇=30 : 1 (V/V)，得到白色固體粉末狀目標(biāo)產(chǎn)物8-0-氯代烷基巖白菜素或8-0-溴代烷基巖白菜素。
[0031] 本發(fā)明中優(yōu)選采用二溴代烷和巖白菜素為原料，以碳酸氫鈉為縛酸劑，在無水DMF 中、氮氣保護(hù)、溫度60~80°C下反應(yīng)生成巖白菜素類衍生物，即8-0-溴代烷基巖白菜素。
[0032] 當(dāng)R為含1個或多個N的雜環(huán)基.
或仲胺基_NR2R3時，合成步驟包括： (1)、以巖白菜素和二氯代烷或二溴代烷為原料，在縛酸劑作用下先反應(yīng)生成8-0-氯代烷 基巖白菜素或8-0-溴代烷基巖白菜素；（2)、8-0-氯代烷基巖白菜素或8-0-溴代烷基巖白 菜素再進(jìn)一步和含1個或多個N的雜環(huán).
或仲胺HNR2R3反應(yīng)生成式II所示的巖 白菜素類衍生物；其反應(yīng)式為：
[0033]
選自羥基、羧基、羥甲基、Ci4烷基、Ci3烷氧基、Ci4烷氧基取代的Ci4烷基；m為0、1或2，R5 選自G4烷基、Ci3烷氧基、Ci4烷氧基取代的Ci4烷基；y為0、1或2，R6選自甲基、甲氧基 取代的C12烷基；Z為0、1或2,R7選自C14烷基；k為0、1或2,Rs選自C14烷基、C13烷氧 基；馬選自氫、q4烷基
選自C14烷基，p為 1或2，q為1、2或3，Rn、R12相同或不同，各自獨立的選自H、C13烷基；R13選自氫、鹵素、羥 基、氨基、硝基、氰基、Q4烷基、Ci3烷氧基。
[0035] 優(yōu)選的，含1個或多個N的雜環(huán)選自：吡咯烷、吡咯烷-2-甲醇、吡咯烷-2-羧 酸、4-羥基吡咯烷-2-甲酸、2-甲基吡咯烷、3-甲基吡咯烷、3-乙基吡咯烷、3-丙基吡咯 烷、2-丙基吡咯烷、2-異丙基吡咯烷、3-甲氧基吡咯烷、3-乙氧基吡咯烷、3-丙氧基吡咯 烷、2-(甲氧基甲基）吡咯烷、2-(乙氧基甲基）吡咯烷、3-(甲氧基乙基）吡咯烷、哌啶、 2-甲基哌啶、3-甲基哌啶、4-甲基哌啶、2, 6-二甲基哌啶、3, 5-二甲基哌啶、2-乙基哌啶、 4_異丙基哌啶、4- 丁基哌啶、3-甲氧基哌啶、4-甲氧基哌啶、4, 4-二甲氧基哌啶、3-乙氧 基哌啶、4-n-丙氧基哌啶、4-乙氧基哌啶、4-甲氧基甲基哌啶、3-甲氧基甲基哌啶、2-甲氧 基甲基哌啶、嗎啡啉、2, 6-二甲基嗎啡啉、3-甲氧基甲基嗎啉、2-甲氧基乙基嗎啉、咪唑、 2-甲基咪唑、4-甲基咪唑、2-乙基咪唑、2-丙基咪唑、2-異丙基咪唑、2- 丁基咪唑、4, 5-二 甲基-1H-咪唑、苯并咪唑、5-甲基苯并咪唑、5, 6-二甲基苯并咪唑，5-甲氧基苯并咪唑， 5, 6-二甲氧基苯并咪唑、N-甲基哌嗪、N-乙基哌嗪、N-乙氧羰基哌嗪、N-甲氧羰基哌嗪、 1-(2_嘧啶基）哌嗪、1-(4_吡啶基）哌嗪、N-(2-羥乙基）哌嗪、1-(N，N-二甲基丙胺基）哌 嗪、N-苯基哌嗪、1-(2_氟苯基）哌嗪、1-(3_氟苯基）哌嗪、1-(4_氟苯基）哌嗪、1-(4_甲基 苯基）哌嗪、4-(1-哌嗪基）苯酚、1-(4-硝基苯基）哌嗪、4-(4-甲基哌嗪）苯胺、1-(2-苯 甲腈）哌嗪、1-(2-甲氧苯基）哌嗪。
[0036] 最優(yōu)選的，含1個或多個N的雜環(huán)選自吡咯烷、N-甲基哌嗪、嗎啡啉。
[0037] 所述的
中，&選自氫、氟、氯、溴、氰基、氨基、硝基、C15烷基、鹵代C15燒 基、C15烷氧基，X選自S、0 ;優(yōu)選的，L選自氫、氟、氯、溴、氰基、氨基、硝基、q5烷基、鹵代G5烷基，Ci5烷氧基，X選自S、0。
[0038] 最優(yōu)選的，
選自對溴苯硫酚、對甲苯硫酚、對溴苯酚、對甲苯酚。
[0039] 所述的仲胺HNR2R3中，R2、R3相同或不同，各自獨立的選自H、Ci6烷基；優(yōu)選的，R2、 R3相同或不同，各自獨立的選自H、Ci3烷基。
[0040] 反應(yīng)步驟（2)中，所述的8-0-氯代烷基巖白菜素或8-0-溴代烷基巖白菜素和含 1個或多個N的雜環(huán)
K仲胺HNR2R3的摩爾比為1 :1. 1~1. 6,優(yōu)選為1 :1. 4~ 1. 6〇
[0041] 所述的8-0-氯代烷基巖白菜素或8-0-溴代烷基巖白菜素和含1個或多個N的雜 環(huán)或仲胺HNR2R3在乙腈中、氮氣保護(hù)、反應(yīng)溫度70~80°C下進(jìn)行。進(jìn)一步的，反應(yīng)結(jié)束后， 除去溶劑，得到的粘稠狀物采用硅膠柱層析、以乙酸乙酯：甲醇=5 :1為洗脫液進(jìn)行純化， 得到式II所示的巖白菜素類衍生物純品。
[0042] 或所述的8-0-氯代烷基巖白菜素或8-0-溴代烷基巖白菜素和
％原料、 加入碳酸鉀作為催化劑，在乙腈中、氮氣保護(hù)、反應(yīng)溫度70~80°C下進(jìn)行。進(jìn)一步的，反應(yīng) 結(jié)束后，過濾除去不溶物，除去濾液中的溶劑，得到的殘留物采用硅膠柱層析、以二氯甲烷： 甲醇=25 :1為洗脫劑進(jìn)行純化，得到式II所示的巖白菜素類衍生物純品。
[0043] 經(jīng)藥理實驗表明，本發(fā)明所述的巖白菜素類衍生物具有明顯的抗血小板聚集活 性，對ADP誘導(dǎo)兔血小板聚集反應(yīng)的抑制作用均明顯高于原料巖白菜素及陽性對照藥物阿 司匹林，本發(fā)明所述的巖白菜素類衍生物的IC5。值在5~62yM之間。本發(fā)明所述的巖白 菜素類衍生物在制備抗血小板聚集藥物中的應(yīng)用。
[0044] 和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：
[0045] 本發(fā)明從易得的天然產(chǎn)物出發(fā)，以巖白菜素為起始原料，合成了一系列8位取代 的巖白菜素類衍生物，合成方法簡單，具有較好的可操作性和反應(yīng)收率，以巖白菜素為原 料，首先在巖白菜素8位酚羥基上引入一條烷基鏈，該步收率在50%以上，在此基礎(chǔ)上與不 同的含N雜環(huán)化合物或苯環(huán)衍生物反應(yīng)，合成了一系列巖白菜素類衍生物，該步收率至少 為69%以上，總收率最尚可達(dá)49%。
[0046] 制得的巖白菜素類衍生物具有明顯的抗血小板聚集活性，對ADP誘導(dǎo)兔血小板聚 集反應(yīng)的抑制作用均明顯高于原料巖白菜素及陽性對照藥物阿司匹林，為巖白菜素類化合 物在治療心腦血管疾病中提供參考。
【具體實施方式】
[0047] 通過【具體實施方式】對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步的說明。
[0048] 實施例1 8-0-(2-溴乙基）巖白菜素（化合物2)
[0049] 稱取巖白菜素（化合物 1，lOOmg, 0? 30mmol)、碳酸氫鈉（50mg, 0? 6mmol)，用 5ml 無水DMF溶解，在室溫下滴加1，2-二溴乙烷（39yL，0. 45mmol)，氮氣保護(hù)下逐漸加熱至 80°C反應(yīng)，TLC(薄層硅膠板）監(jiān)測至反應(yīng)完全。反應(yīng)完畢后冷卻至室溫，加入10ml水和 10ml乙酸乙酯萃取，分離得到有機相，有機相用蒸餾水洗滌三次后，再用無水Na2S04干燥， 減壓蒸除有機溶劑后得到的殘留物用硅膠柱層析，洗脫劑為二氯甲烷/甲醇=30 :1，得到 8-0-(2-溴乙基）巖白菜素（化合物2, 72. 8mg，產(chǎn)率是54% )。
[0050]
[0051]化合物2:白色晶體，m.p. 254-256°C?ESI-MSm/z:471. 0[M+C1] ?IR(KBr)cmh34 07, 3230, 2959, 2926, 2818, 1736, 1602, 1488, 1457, 1399, 1345, 1277, 1245, 1135.
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