一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法，該方法為采用高效液相色譜法，色譜柱為ＨｙｐｅｒｓｉｌＯＤＳ２-Ｃ１８柱，流動(dòng)相為甲醇－水溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)為２７５ｎｍ，流速為１.０ｍｌ／ｍｉｎ,本發(fā)明根據(jù)巖白菜素的性質(zhì)，在甲醇中溶解，在乙醇或水中微溶，再結(jié)合制劑為水提取的水溶液，可用水、含水乙醇或含水甲醇作溶劑，考慮樣品過(guò)濾等處理的操作容易進(jìn)行，故采用５０％甲醇作為提取溶劑，經(jīng)過(guò)超聲及直接稀釋溶解兩種方法的對(duì)比，兩種方法效果基本一樣，故采用直接稀釋至刻度即,本方法穩(wěn)定性、精密度、重復(fù)性均符合定量分析要求，操作簡(jiǎn)便，色譜分離良好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可有效進(jìn)行該制劑的質(zhì)量檢測(cè)。
【專利說(shuō)明】一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法，屬于生物醫(yī)藥檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002]開(kāi)喉劍噴霧劑由八爪金龍、山豆根、蟬蛻、薄荷腦等四味藥材組成，具有明顯的抑制病毒作用，能顯著抑制革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌的生長(zhǎng)，具有清熱解毒、消腫止痛的功效，八爪金龍是方中君藥，巖白菜素是八爪金龍的主要成分之一，巖白菜素又稱虎耳草素和矮地茶素，一般是從虎耳草科植物和紫金?？浦参镏刑崛〉挠行С煞?，屬于異香豆精類化合物，具有良好的止咳祛痰作用，此外，還具有良好的抗炎、抗心律失常、抗病毒和護(hù)肝作用，八爪金龍中化學(xué)成分的含量測(cè)定，文獻(xiàn)報(bào)道較多的是巖白菜素的含量測(cè)定，測(cè)定的方法有薄層掃描法、高效液相色譜法(11& 11061 1 (? II 1 ￠1 0111-0111 & &]0等，目前已有多篇文獻(xiàn)報(bào)道只？匕匚測(cè)定巖白菜素在片劑、丸劑、顆粒劑、膠囊劑、糖漿劑等中的含量。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是:提供一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法，方法操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可用于開(kāi)喉劍噴霧劑的質(zhì)量控制，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。
[0004]本發(fā)明的技術(shù)方案
一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法，該方法為采用采用高效液相色譜法，色譜柱為只7 ？ 6 1- 3 1 1 0 0 5 2 - 0: 8柱，流動(dòng)相為甲醇一水溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)為2 7 5 11 111,1.0 111 1 / 111 1 11。
[0005]前述的一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法中，所述II 7 ？ 6 1- 3 1 1
00 5 2 - (11 丨 8 柱的標(biāo)準(zhǔn)為 5 406111111。
[0006]前述的一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法中，所述的甲醇一水溶液中體積比為1 7:83。
[0007]由于采用上述技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明根據(jù)巖白菜素的性質(zhì)，在甲醇中溶解，在乙醇或水中微溶，再結(jié)合制劑為水提取的水溶液，可用水、含水乙醇或含水甲醇作溶劑，考慮樣品過(guò)濾等處理的操作容易進(jìn)行，故采用5 0 %甲醇作為提取溶劑，經(jīng)過(guò)超聲及直接稀釋溶解兩種方法的對(duì)比，兩種方法效果基本一樣，故采用直接稀釋至刻度即可。根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)資料選擇2 7 5 11 0作為該實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)波長(zhǎng)，巖白菜素的II？ 含量測(cè)定的流動(dòng)相一般有甲醇一水系統(tǒng)、甲醇一冰醋酸系統(tǒng)、乙腈一磷酸系統(tǒng)等幾種不同的系統(tǒng)，本實(shí)驗(yàn)試用了多種組成及比例的流動(dòng)相，峰形及分離情況無(wú)差別，出于簡(jiǎn)捷考慮，采用了甲醇一水(17:8 3)的組成，本方法穩(wěn)定性、精密度、重復(fù)性均符合定量分析要求，操作簡(jiǎn)便，色譜分離良好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可有效進(jìn)行該制劑的質(zhì)量檢測(cè)。

【專利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0008]附圖1為開(kāi)喉劍噴霧劑的II ？ 1.0色譜結(jié)果圖；
附圖2為開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的回收率示意圖；
附圖3為2 0批樣品中巖白菜素測(cè)定結(jié)果示意圖。

【具體實(shí)施方式】
[0009]下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不作為對(duì)本發(fā)明的任何限制。
[0010]本發(fā)明的實(shí)施例:
1材料與方法
1.1 試劑和藥品
甲醇為色譜純、分析純，水為純凈水，其余試劑均為分析純；巖白菜素對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，供含量測(cè)定用，批號(hào)1 5 3 2 - 2 0 0 2 0 2 ^樣品和陰性樣品由貴州三力制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn)企業(yè)提供，方法研宄所用樣品為成人型。
[0011]1.2 儀器
島津1 (3 - 2 0人高效液相色譜儀，包括3 ？ 0 - 2 0人紫外檢測(cè)器、3 11-20入自動(dòng)進(jìn)樣裝置、1 ?: - 3 0 1 II〖丨0 11色譜工作站、1.0 - 2 0人丁輸液泵和7 09-25 0超聲波清洗器(北京醫(yī)療設(shè)備二廠X
[0012]1.3 色譜條件
色譜柱為大連依利特只 71361*3 丨 10032-(^8^(54 111,200 111111 X
4.6檢測(cè)波長(zhǎng) 2 7 5 11111，流速為 1.0^1/
爪1 11，進(jìn)樣量1 0^1，本實(shí)驗(yàn)條件下巖白菜素與其他組分分離完全(分離度? 1，5),理論板數(shù)以巖白菜素峰計(jì)算為3 0 0 0，陰性對(duì)照品溶液無(wú)干擾，見(jiàn)附圖1。
[0013]1.4 溶液的制備
1.4.1 對(duì)照品溶液的制備
精密稱取巖白菜素對(duì)照品10.1108，置5001量瓶中，加5 0 %甲醇溶解并稀釋至刻度，得對(duì)照品貯備液，精密量取5 111 1貯備液置2 0 0 1量瓶中，加5 0 %甲醇稀釋至刻度，制成每1爪1含巖白菜素0.0 5 0 5 5 02的對(duì)照品溶液。
[0014]1.4.2 供試品溶液的制備
取本品5瓶，傾出藥液、攪勻，精密量取5 0 1，置5 0 111 1量瓶中，加5 0 %甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液5 0 1，置2 5 0 1量瓶中，加5 0 %甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0015]1.4.3 陰性樣品溶液的制備
參照“ 1.4.2 ”項(xiàng)方法制得缺八爪金龍藥材陰性樣品溶液。
[0016]2 結(jié)果
2.1線性關(guān)系考察
精密吸取對(duì)照品貯備液5 0 1置2 0 111 1量瓶中，加5 0 %甲醇稀釋至刻度，精密吸取該對(duì)照品溶液1、3、9、15、21、27^ 1，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以峰面積人對(duì)質(zhì)量數(shù)5)進(jìn)行線性回歸計(jì)算，得線性回歸方程為:人= 1 3 0 2 2 2 5.8
0- 3 4 9 5.7,1- = 0.9 9 9 9，巖白菜素在 0.05055^1.365“ 5 線性關(guān)系良好。
[0017]2.2 精密度試驗(yàn)
取巖白菜素對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，結(jié)果為巖白菜素的平均峰面積為663824，只30 為 0.24%。
[0018]2.3 重復(fù)性試驗(yàn)
取本品(成人型，批號(hào)2 0 1 0 0 9 0 5 ),按“ 1.4.2 ”項(xiàng)供試品溶液的制備方法，平行制備6份供試溶液，分別進(jìn)樣1 0 V 1，測(cè)定峰面積，計(jì)算結(jié)果為巖白菜素的平均含量為 2.32561115/5,1130 為 1.1%。
[0019]2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)
取重復(fù)性試驗(yàn)中的第一份供試液，分別于0、1、2、4、6、8 進(jìn)樣測(cè)定巖白菜素峰面積，結(jié)果為巖白菜素平均峰面積為606706，1130為0.7 7 %，說(shuō)明供試液在8內(nèi)穩(wěn)定性良好。
[0020]2.5 加樣回收率試驗(yàn)
分別精密稱取6份已測(cè)定含量的樣品(批號(hào)2 0 1 0 0 9 0 5，巖白菜素含量
2.3 1 2 7 2丨1.) 2.501，置于5 001量瓶中，精密加入巖白菜素溶液(0.5 7 2 3 5/1)
對(duì)照品混合溶液1 0 0 1，加5 0 %甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液5 0 1，置2 5爪1量瓶中，加5 0 %甲醇至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，制得供試品溶液，精密吸取1 0^ 1，測(cè)定峰面積，計(jì)算結(jié)果見(jiàn)附圖2，巖白菜素的平均回收率為9 9.5%，1130為2.1
[0021]2.6 樣品的含量測(cè)定
按照“1.4.1”、“1丨4.2”項(xiàng)方法分別制備對(duì)照品和供試品溶液，進(jìn)樣各1 0 V1，測(cè)定峰面積，計(jì)算樣品中巖白菜素的含量，2 0批樣品結(jié)果見(jiàn)附圖3。
[0022]3 討論
根據(jù)巖白菜素的性質(zhì)，在甲醇中溶解，在乙醇或水中微溶，再結(jié)合制劑為水提取的水溶液，可用水、含水乙醇或含水甲醇作溶劑，考慮樣品過(guò)濾等處理的操作容易進(jìn)行，故采用
50 %甲醇作為提取溶劑，經(jīng)過(guò)超聲及直接稀釋溶解兩種方法的對(duì)比，兩種方法效果基本一樣，故采用直接稀釋至刻度即可，根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)資料選擇2 7 5 110作為該實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)波長(zhǎng)，巖白菜素的只？ 1 0含量測(cè)定的流動(dòng)相一般有甲醇一水系統(tǒng)、甲醇一冰醋酸系統(tǒng)、乙腈一磷酸系統(tǒng)等幾種不同的系統(tǒng)。本實(shí)驗(yàn)試用了多種組成及比例的流動(dòng)相，峰形及分離情況無(wú)差別，出于簡(jiǎn)捷考慮，采用了甲醇一水(1 7: 8 3)的組成，本方法穩(wěn)定性、精密度、重復(fù)性均符合定量分析要求，操作簡(jiǎn)便，色譜分離良好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可有效進(jìn)行該制劑的質(zhì)量檢測(cè)。
【權(quán)利要求】
1.一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法，其特征在于:該方法為采用采用高效液相色譜法，色譜柱為H y p e r s i 10DS2 - C i 8柱，流動(dòng)相為甲醇一水溶液，檢測(cè)波長(zhǎng)為2 7 5 n m，流速為1.0 m 1 / m i η。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種開(kāi)喉劍噴霧劑中巖白菜素的含量測(cè)定方法，其特征在于:所述 Hypers i 10032-(1；18柱的標(biāo)準(zhǔn)為 5 μ m，2 Ο 0 mm X 4.6mm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種歸芍膠囊中白芍的鑒別和芍藥苷含量，其特征在于:所述的甲醇一水溶液中體積比為1 7:83。
【文檔編號(hào)】G01N30/02GK104483404SQ201410739797
【公開(kāi)日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年12月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月8日
【發(fā)明者】敖云霞 申請(qǐng)人:敖云霞