化合物的制作方法
【專利說明】
[0001] 相關(guān)申請
[0002] 本申請要求2013年1月25日在中華人民共和國國家知識產(chǎn)權(quán)局提交的PCT國際 申請PCT/CN2013/070970的優(yōu)先權(quán)，其全部內(nèi)容在此引入作為參考。
技術(shù)領(lǐng)域
[0003] 本發(fā)明涉及新的3, 4-二氫-1H-嘧啶并[1，6-a]嘧啶-6(2H)-酮化合物，其制備 方法，用于其制備的中間體，包含它們的藥物組合物，以及它們治療Lp-PLA 2介導(dǎo)的疾病或 病癥的用途。
【背景技術(shù)】
[0004] 以前被稱為血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH)的脂蛋白相關(guān)磷脂酶 A2(Lp-PLA 2)為參與脂蛋白脂質(zhì)或磷脂的水解的磷脂酶A2酶。14)-?1^2隨低密度脂蛋白 (LDL)游走，并迅速裂解從LDL氧化得到的氧化的磷脂酰膽堿分子（參見，例如Zalewski A 等人，Arterioscler. Thromb. Vase. Biol.，25, 5,923-31 (2005))。Lp_PLA2水解氧化的磷脂 酰膽堿的sn-2酯得到脂質(zhì)介體溶血磷脂酰膽堿（lysoPC)和氧化的非酯化脂肪酸（NEFA)。 據(jù)觀察，lysoPC和NEFA引起炎性反應(yīng)（參見，例如Zalewski A等人（2005))。
[0005] 先前已經(jīng)描述了許多的Lp-PLAJP制劑和/或其用途。（參見例如，公開的專 利申請 W096/13484, W096/19451，W097/02242, W097/12963, W097/21675, W097/21676, TO 97/41098, W097/41099, W099/24420, W000/10980, W000/66566, W000/66567, W000/68208, W001/60805, W002/30904, W002/30911， W003/015786, W003/016287, W003/041712， W003/042179, W003/042206, W003/042218, W003/086400, W003/87088, W008/048867, US 2008/0103156, US 2008/0090851，US 2008/0090852 和 W008/048866)。公開的用途包括治 療涉及內(nèi)皮功能異常或與其相關(guān)的疾病、涉及與Lp-PLA2活性關(guān)聯(lián)的（例如與溶血磷脂酰 膽堿和氧化的游離脂肪酸的形成相關(guān)的）脂質(zhì)氧化的疾病及涉及活化的單核細(xì)胞、巨噬細(xì) 胞或淋巴細(xì)胞的或者與單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞或淋巴細(xì)胞的參與增加相關(guān)的疾病。具體疾病 的例子包括動脈粥樣硬化（例如，外周血管動脈粥樣硬化和腦血管動脈粥樣硬化）、糖尿 病、高血壓、心絞痛、缺血和再灌注后、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、中風(fēng)、腦的炎性病癥如阿爾茨海默 病、各種神經(jīng)精神病癥如精神分裂癥、心肌梗塞、缺血、再灌注損傷、敗血癥、急性和慢性炎 癥和牛皮癬。
[0006] Lp-PLAdm制劑和/或其用途也在例如PCT公開W005/003118 (及其加拿大同族申 請 CA 2530816A1)、W006/063811、W006/063813 和 TO 2008/141176、JP 200188847 及美國 公開專利申請 US 2008/0279846Al、US 2010/0239565A1 和 US 2008/0280829A1 中報道。
[0007] 其他研究者已經(jīng)研究了與Lp-PLAj其抑制劑相關(guān)的效應(yīng)。例如，研究數(shù)據(jù)還表 明，LysoPC促進(jìn)動脈粥樣硬化斑塊的發(fā)展，這最終導(dǎo)致形成壞死核（參見，例如Wilensky等 人，Current Opinion in Lipidology，20,415_420(2009))。此外，Lp_PLA2抑制劑對于動 脈粥樣硬化斑塊成分的效應(yīng)在加速冠狀動脈粥樣硬化的糖尿病和高膽固醇血癥豬模型中 得到證明（參見，例如 Wilensky 等人，Nature Medicine，10,1015-1016 (2008))。這些研究 結(jié)果進(jìn)一步證明Lp-PLAJ^制劑可以用于治療動脈粥樣硬化。
[0008] 其他研究指示，高的Lp_PLA2活性與癡呆癥（包括阿爾茨海默?。ˋD))高的風(fēng)險相 關(guān)（參見，例如 Van Oijen 等人，Annals of Neurology，59，139(2006))。也在 AD 患者中觀 察到較高的氧化LDL的水平（參見，例如Kassner等人，Current Alzheimer Research，5， 358-366(2008) ;Dildar 等人，Alzheimer Dis Assoc Disord，24, April-June (2010) ;Sinem 等人，Current Alzheimer Research，7,463-469 (2010))。此外，研究表明，神經(jīng)炎癥存在于 AD患者中，且多種細(xì)胞毒性的炎性細(xì)胞因子在AD患者中上調(diào)（參見，例如Colangelo等人， Journal of Neuroscience Research，70,462-473(2002) ；ffyss-Coray, Nature Medicine, 12, Sept. (2006))。研究表明：LysoPC作為誘導(dǎo)多種細(xì)胞毒性炎性細(xì)胞因子釋放的促炎癥 因子起作用（參見Shi等人Atherosclerosis，191，54-62 (2007))。因此，這些研究提供了 Lp-PLA^抑制劑可以用于通過抑制Lp-PLA2活性和減少lysoPC的產(chǎn)生而治療AD的進(jìn)一 步的證據(jù)。
[0009] 此外，使用Lp_PLA2抑制劑用于糖尿病和高膽固醇血癥豬模型證明：減少了血腦屏 障滲漏和大腦淀粉樣0蛋白（AP)負(fù)載（阿爾茨海默病的病理標(biāo)志）（參見美國專利申請 公開2008/0279846)。這一公開描述了 Lp-PLA2抑制劑用于治療與血腦屏障滲漏相關(guān)的疾 ?。òǎ绨柎暮Ｄ『脱苄园V呆）的幾種用途。
[0010] 此外，神經(jīng)炎癥（包括多種細(xì)胞毒性細(xì)胞因子的釋放）為所有神經(jīng)變性疾?。ò?括多發(fā)性硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、帕金森病、阿爾茨海默病等）的共同特征（參見，例 如 Perry，Acta Neuropathol，120,277-286(2010))。如上所述，Lp-PLAd[]]制劑可以減 少炎癥，例如通過抑制lysoPC產(chǎn)生來減少多種細(xì)胞因子的釋放（參見例如，Shi等人， Atherosclerosis 191,54-62(2007))。因此，抑制14)-?1^2是神經(jīng)變性疾?。òǘ喟l(fā)性 硬化、肌萎縮性側(cè)索硬化、帕金森病等）的潛在治療方法。
[0011] 除了炎性效應(yīng)，LysoPC也參與白細(xì)胞活化、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和介導(dǎo)內(nèi)皮功能障礙 (參見，例如 Wilensky 等人，Current Opinion in Lipidology，20,415 - 420,（2009))。因 此，據(jù)認(rèn)為Lp-PLA2抑制劑可以用于通過減少lys〇PC(其可以導(dǎo)致血管炎癥的連續(xù)循環(huán)和 活性氧（R0S)產(chǎn)生的增加）的產(chǎn)生而治療與糖尿病相關(guān)的組織損傷。鑒于Lp-PLA 2的炎性 作用以及局部炎性過程和糖尿病性視網(wǎng)膜病變之間的關(guān)聯(lián)，據(jù)推測Lp-PLA2可以用于治療 糖尿病性眼病。
[0012] 青光眼和年齡相關(guān)性黃斑變性（AMD)為視網(wǎng)膜神經(jīng)變性疾病。研究表明：炎癥（包 括TNF-a信號傳導(dǎo)）可以在青光眼和AMD的發(fā)病機(jī)制中起重要作用（參見，例如Buschini 等人，Progress in Neurobiology, 95,14-25 (2011) ;Tezel，Progress in Brain Research, vol. 173, ISSN0079-6123,第28章）。因此，考慮到Lp-PIjyi]]制劑阻斷炎性細(xì)胞因子釋放 的功能（參見，例如 Shi 等人，Atherosclerosis，191,54-62(2007))，認(rèn)為 Lp-PIjyi]]制劑 可以提供對于青光眼和AMD的潛在治療應(yīng)用。
[0013] 鑒于1^41^2介導(dǎo)的病理反應(yīng)的數(shù)目，已嘗試制備抑制其活性的化合物。雖然許 多這類化合物已在現(xiàn)有技術(shù)中公開，仍然存在對于可用于治療各種病癥的Lp-PLA 2抑制劑 的需要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014] 在第一方面，本發(fā)明涉及式（I)化合物及其藥物上可接受的鹽，式（I)化合物為：
[0015]
[0016] 其中：
[0017] R1 選自環(huán)丙基、-CH2-Ar 和-CH2-(C = O)-N(Ra) (Rb)，其中
[0018] Ar為苯基，其任選被一個或多個獨立選自以下的取代基取代：鹵素、0〇13和〇1 3，且
[0019] Ra和Rb各自獨立地為H或C! 3烷基，
[0020] 或Ra、Rb與它們連接的氮原子一起結(jié)合形成選自以下的含氮雜環(huán)：啦咯烷基，嗎 啉基、哌嗪基和哌啶基，其中所述含氮雜環(huán)任選被一個或多個獨立選自以下的取代基取代： G 3烷基和鹵素；
[0021] R2為 F 或 H，
[0022] R3為F或-0-Ar'，其中Ar'為被一個或多個獨立選自以下的取代基取代的苯基： 鹵素和0? 3，且
[0023] R4選自 H、F 和 CN。
[0024] 本發(fā)明還提供包含本發(fā)明的化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物 組合物。
[0025] 本發(fā)明還提供治療或預(yù)防與Lp_PLA2的活性相關(guān)的疾病的方法，包括向有需要的 受試者給藥治療有效量的本文所述的本發(fā)明的化合物。該疾病可以與以下相關(guān)：單核細(xì)胞、 巨噬細(xì)胞或淋巴細(xì)胞的參與增加；溶血磷脂酰膽堿和氧化的游離脂肪酸的形成；與Lp_PLA2 活性關(guān)聯(lián)的脂質(zhì)的氧化；或內(nèi)皮功能障礙。
[0026] 本發(fā)明還提供通過抑制Lp_PLA2活性治療或預(yù)防疾病的方法。示例性的疾病包括 但不限于：神經(jīng)變性疾?。ɡ绨柎暮Ｄ?、血管性癡呆）、動脈粥樣硬化、中風(fēng)、代謝性 骨病（例如骨髓異常）、血脂異常、佩吉特?。≒aget' s disease)、II型糖尿病、代謝綜合 征、胰島素抵抗和甲狀旁腺功能亢進(jìn)、糖尿病性眼部疾?。ɡ琰S斑水腫、糖尿病性視網(wǎng)膜 病變和后葡萄膜炎）、黃斑水腫、傷口愈合、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、慢性阻塞性肺?。–0PD)、牛皮 癬和多發(fā)性硬化。
[0027] 該方法包括向有需要的受試者給藥治療有效量的本發(fā)明的化合物。本發(fā)明并不意 圖限制于疾病的任何特定階段（如早期或晚期）。
[0028] 本發(fā)明還提供治療或預(yù)防阿爾茨海默病的方法。該方法包括向有需要的受試者給 藥治療有效量的本發(fā)明的化合物。
[0029] 本發(fā)明還提供治療或預(yù)防動脈粥樣硬化的方法。該方法包括向有需要的受試者給 藥治療有效量的本發(fā)明的化合物。
[0030] 本發(fā)明還提供了減少0淀粉樣蛋白（也被稱為"AP "）在受試者腦中積聚的方 法。該方法包括向有需要的受試者給藥治療有效量的本發(fā)明化合物。在一些實施方式中， 所述0淀粉樣蛋白為AP-42。
[0031] 本發(fā)明還提供了通過給藥本發(fā)明的化合物治療或預(yù)防眼部疾病的方法。在一些實 施方式中，本發(fā)明提供了治療黃斑水腫的方法，其包括向受試者給藥治療有效量的本發(fā)明 的化合物。在一些實施方式中，該黃斑水腫與糖尿病性眼病（例如糖尿病性黃斑水腫或糖 尿病性視網(wǎng)膜?。┯嘘P(guān)。在一個實施方式中，該黃斑水腫與后葡萄膜炎有關(guān)。
[0032] 本發(fā)明還提供了本發(fā)明的化合物在制備用于治療或預(yù)防本文所述的疾病的藥物 中的用途。
[0033] 本發(fā)明還提供了本發(fā)明化合物，其用于本文所述的治療或預(yù)防。
[0034] 發(fā)明詳沐
[0035]如本發(fā)明的實施方式的說明和附屬權(quán)利要求中所用的，除非上下文另有清楚地說 明，單數(shù)形式"一（a) "、"一個（an)"和"該"也包括復(fù)數(shù)形式。另外，本文使用的"和/或" 是指包括一個或多個關(guān)聯(lián)的列舉項目的任何和所有可能的組合?？梢赃M(jìn)一步理解，本說明 書中使用的術(shù)語"包含"和/或"包括"指明所指的特征、整體、步驟、操作、元素和/或組分 的存在，但不排除一個或多個其他特征、整體、步驟、操作、元素、組分和/或其組合的存在 或加入。
[0036]-般而言，本文使用的命名和本文所描述的有機(jī)化學(xué)、藥物化學(xué)、生物學(xué)的實驗操 作是本領(lǐng)域公知的，而且在本領(lǐng)域中普遍采用。除非另有定義，本文使用的所有技術(shù)和科學(xué) 術(shù)語一般具有本公開所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員通常理解的相同含義。在本文使用的術(shù)語存 在多個定義的情況下，除非另有說明，以本部分的定義為準(zhǔn)。
[0037] 本文提及的所有專利、專利申請和公開整體引入作為參考。在存在術(shù)語沖突的情 況下，以本說明書為準(zhǔn)。
[0038] A.宙義
[0039]如本文使用的，術(shù)語"疾病"是指機(jī)體或一些器官的狀態(tài)的任何改變，其中斷或 干擾功能的執(zhí)行和/或引起患病的人或與其接觸的人的癥狀（如不適、功能障礙、不良 應(yīng)激乃至死亡）。疾病還可以包括痕熱（distempber)、患?。╝iling)、疾?。╝iment)、 疾?。╩alady)、障礙（disorder)、疾?。╯ickness)、疾?。╥llness)、主訴（complain)、 interdisposition 和 / 或病變（affectation) 〇
[0040] 本文使用的術(shù)語"神經(jīng)變性疾病"是指特征為神經(jīng)組織和/或神經(jīng)組織功能的逐 步的、進(jìn)行性損失的不同種類的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。神經(jīng)變性疾病為一類神經(jīng)系統(tǒng)疾病，其 中神經(jīng)系統(tǒng)疾病的特征為神經(jīng)組織的逐步的、進(jìn)行性損失和/或改變的神經(jīng)功能，通常為 由于逐步的、進(jìn)行性的神經(jīng)組織損失而導(dǎo)致神經(jīng)功能的降低。在一些實施方式中，本文所述 神經(jīng)變性疾病包括其中存在有缺陷的血腦屏障（例如滲透性血腦屏障）的神經(jīng)變性疾病。 其中存在缺陷性血腦屏障的神經(jīng)變性疾病的例子包括但不限于，阿爾茨海默病、亨廷頓病、 帕金森病和血管性癡呆等。
[0041]術(shù)語"血管性癡呆"也被稱為"多發(fā)性梗塞性癡呆"，其是指一組由不同的機(jī)制（其 都導(dǎo)致腦中的血管損害）引起的綜合征。例如，血管性癡呆的主要亞型為血管性輕度認(rèn)知 功能障礙、多發(fā)性梗塞性癡呆、由于重大的單梗塞（影響丘腦、大腦前動脈、頂葉或扣帶回） 導(dǎo)致的血管性癡呆、由于出血性損害導(dǎo)致的血管性癡呆、小血管疾?。ò?，例如由于腔隙 性損害和賓斯旺格病（Binswanger disease)導(dǎo)致的血管性癡呆）及混合型癡呆。
[0042] 術(shù)語"血腦屏障"或"BBB"在本文可互換使用，用于指存在于穿過腦組織的血管中 的可滲透屏障，其嚴(yán)格地限制和密切地調(diào)節(jié)物質(zhì)在血液和腦組織之間的交換。血腦屏障組 分包括形成所有血管的最內(nèi)層襯里的內(nèi)皮細(xì)胞、作為BBB的結(jié)構(gòu)性關(guān)聯(lián)物的相鄰內(nèi)皮細(xì)胞 之間的緊密連接物、內(nèi)皮細(xì)胞的基底膜和覆蓋幾乎所有暴露的血管外表面的附近星形膠質(zhì) 細(xì)胞的擴(kuò)大的足突。
[0043] 本文使用的術(shù)語"代謝性骨病"是指特征為骨組織的逐步和進(jìn)行性損失的不同種 類的骨疾病。本文所述的代謝性骨病為其中存在擴(kuò)散性骨密度下降和/或骨強(qiáng)度降低的狀 況的骨代謝疾病。這類疾病通過組織學(xué)外觀來表征。示例性的代謝性骨病包括但不限于， 特征為礦物質(zhì)和骨基質(zhì)減少的骨質(zhì)疏松癥和特征為礦物質(zhì)減少但具有完整的骨基質(zhì)的骨 軟化癥。
[0044] 術(shù)語"骨質(zhì)減少疾病"或"骨質(zhì)減少"可以在本文中互換使用，涉及具有下降的鈣 化和/或骨密度的狀況，為用來表示在其中觀察到鈣化和/或骨密度下降的所有骨骼系統(tǒng) 的描述性術(shù)語。骨質(zhì)減少也是指由于類骨質(zhì)（osteiod)合成不足導(dǎo)致的骨質(zhì)減少。
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