11. 98g的原料2-肟基-2-氰基乙酸叔丁酯（I)加入到88mL去離子水中，加入 預(yù)先配制的SOmL飽和碳酸氫鈉水溶液，攪拌下反應(yīng)進(jìn)行約40min。將反應(yīng)瓶置于40°C油浴 鍋中，逐份加入保險(xiǎn)粉共33g。反應(yīng)約9h。加入15g氯化鈉，充分溶解冷卻至室溫?；旌弦?用二氯甲烷（每次用50mL)反復(fù)萃取，將有機(jī)相萃取液用無水硫酸鎂進(jìn)行干燥，旋蒸除去溶 劑得棕色油狀物（11)2. 10g，產(chǎn)率19%。
[0049] (2) 2.2-(N-叔丁氧羰基氨基）-2_氰基乙酸叔丁酯（III)的合成
[0050] 將8. 94mmol的2-氨基-2-氰基乙酸叔丁酯（II)加入到12mL甲苯中，待充分溶 解后加入體積為I. 477mL的N，N-二異丙基乙胺（DIPEA)，隨后一次性加入二碳酸二叔丁酯 (Boc2O) 3. 44g，將反應(yīng)容器放置在115°C油浴鍋中加熱回流過夜。加入5mL水萃滅反應(yīng)，用 50mLX3次乙酸乙酯萃取。采用柱層析法，得純凈淡黃色油狀物（III)I. 483g(5. 8mmol)，產(chǎn) 率為65%。
[0051] 1HNMR(400MHz，CDCl3)S: 1. 57 (s，18H，tBu)，5. 35 (m，1H，H-C)。
[0052] (3)中間體化合物（IV-n)的合成
[0053] 將50mLSchlenk瓶在真空線下除水除氧，在氬氣保護(hù)下加入含量為60% 的氫鈉74.lmg(2. 75mmol)。將2-(N-叔丁氧羰基氨基）-2-氰基乙酸叔丁酯 (III) 281. 9mg(I.lmmol)用重蒸四氫呋喃20mL溶解后加入反應(yīng)瓶中，在油浴60°C條件下回 流反應(yīng)半小時(shí)。
[0054] (3-1)n為2時(shí)，中間體化合物（IV-2)的合成
[0055] 加入溴丙酸乙酯298mg(1.5eq.)，反應(yīng)在70°C條件下加熱回流過夜。旋干溶劑， 加水后用50mLX3次乙酸乙酯萃取，用飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥后旋掉溶劑得到棕黃 色油狀粗產(chǎn)物，通過柱層析純化，產(chǎn)物為黃色油狀物（IV-2) 169mg(0. 5mmol)，反應(yīng)產(chǎn)率為 45%〇
[0056] 1HNMR(400MHz，CDCl3)S:1. 27 (s，3H，CH3), 1.44 ~1.54 (2s，18H，tBu)，1.98 ~ 2. 04 (m，2H，CH2)，2. 35 ~2. 40 (m，2H，CH2)，4. 13 (m，2H，CH2-O)。
[0057] (3-2)n為3時(shí)，中間體化合物（IV-3)的合成
[0058] 加入溴丁酸乙酯321.8mg(1.5eq.)，反應(yīng)在70°C條件下加熱回流過夜。旋 干溶劑，加水后用50mLX3次乙酸乙酯萃取，用飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥后旋掉 溶劑得到棕黃色油狀粗產(chǎn)物378. 9mg。對粗產(chǎn)物進(jìn)行柱層析純化，產(chǎn)物為黃色油狀物 (IV-3) 202. 9mg(0? 55mmol)，反應(yīng)產(chǎn)率為 50 %。
[0059] 4匪1?(4001抱，〇)(：13)5:1.26(8,311，〇1 3)，1.46(8,911，七811)，1.53(8,911，七811)，1. 79 (m，2H，CH2)，2. 00 ~2. 20 (m，2H，CH2)，2. 38 (m，2H，CH2)，4. 13 (m，2H，CH2-O)。
[0060] (3-3)n為5時(shí)，中間體化合物（IV-5)的合成
[0061] 加入溴己酸乙酯368mg(l. 5eq.)，反應(yīng)在70 °C條件下加熱回流過夜。旋干 溶劑，加水后用50mLX3次乙酸乙酯萃取，用飽和食鹽水洗滌，硫酸鎂干燥后旋掉溶 劑得到棕黃色油狀粗產(chǎn)物378. 9mg。對粗產(chǎn)物進(jìn)行柱層析純化，產(chǎn)物為黃色油狀物 (IV-5) 182mg(0? 46mmol)，反應(yīng)產(chǎn)率為 42 %。
[0062] 1HNMR(400MHz，CDCl3)S:1. 27 (s，3H，CH3), 1.44 ~1.54 (2s，18H，tBu)，1.78 ~ 2. 03 (m，6H，CH2)，2. 35 ~2. 40 (m，2H，CH2)，4. 13 (m，2H，CH2-O)。
[0063] (4)中間體化合物（V-n)的合成
[0064] 將50mLSchlenk瓶在真空線下除水除氧充氬氣后加入15mL甲醇。將I. 38mmol 原料（IV-n)加入到反應(yīng)瓶中，稱取NiCl249. 2mg(0. 21mmol)，Boc20 602. 37mg(2. 76mmol)分 別加入到反應(yīng)瓶中，待充分溶解后冰浴加入硼氫化鈉426.62mg(11.27mm〇l)反應(yīng)過夜。加 入二乙基三胺0. 264mL，反應(yīng)Ih后旋干反應(yīng)溶劑。加入飽和碳酸氫鈉水溶液后用50mLX3 次乙酸乙酯進(jìn)行萃取，萃取液用飽和食鹽水洗兩次，硫酸鎂干燥后旋蒸得油狀粗產(chǎn)物。用柱 層析對產(chǎn)物進(jìn)行純化，產(chǎn)品為黃色油狀物（V-n)，反應(yīng)產(chǎn)率約為56%。
[0065] 1HNMR(400MHz,CDCl3) (V-3) 8 :1. 24(m,3H,CH3), 1.43 ~ 1. 60 (m, 27H,tBu)，1. 61 ~1. 75 (m, 6H,CH2)，2. 25 ~2. 30 (m, 2H,CH2)，3. 66 (m, 2H,CH2-N)，4. 11 (m，2H，CH2-O)。ESI-MS:m/z497. 2722 [M+Na]。
[0066] (5)中間體化合物（VI-n)的合成
[0067] 將反應(yīng)原料（V-n) (0. 126mmol)用10yL甲醇溶解后，加入濃度為IM氫氧化鈉水 溶液315yL，于油浴鍋中60°C加熱條件下攪拌近8h。放置室溫冷卻。冰浴下用IM鹽酸水 溶液調(diào)至偏酸性（pH值在4-6)，加入IOmL水，用二氯甲燒多次萃取產(chǎn)物，將萃取液用飽和食 鹽水洗一次，硫酸鎂干燥，旋干后得白色固體產(chǎn)物（VI-n)，反應(yīng)產(chǎn)率約為78%。
[0068]1HNMR(400MHz，CDCl3) (VI-3)S:1. 40 ~I. 46(m，27H，tBu)，1. 58,I. 72(m， 2H，CH2)，2. 16 (m，2H，CH2)，2. 30 ~2. 38 (m，2H，CH2)，3. 67 (m，2H，CH2-N)。ESI-MS:m/z 469. 2442 [M+Na]〇
[0069] (6)中間體化合物（VII-n)的合成
[0070] 將四乙酰氧基葡萄糖鹽酸鹽0?144g(0. 37mmol)加入6mL二氯甲烷，加入4-二甲 氨基吡啶（DMAP)O. 135g(l.IOmmol)。攪拌半個(gè)小時(shí)后加入原料（VI-n)0. 44mmol和1-乙 基-(3-二甲基氨基丙基）碳酰二亞胺鹽酸鹽（EDC)0.085g(0.44mmol)，密封反應(yīng)進(jìn)行12h。 加入IOmL二氯甲烷，有機(jī)相用5mLX2次飽和碳酸氫鈉水溶液清洗，硫酸鎂干燥后旋蒸，柱 層析法對產(chǎn)物進(jìn)行純化，得白色固體粉末（VII-n)，反應(yīng)產(chǎn)率約為47%。
[0071] 1H NMR(400MHz，CDCl3) (VII-3) S : L 39~1. 45 (m，27H，tBu)，1. 62 (m，2H，CH2)，2. 0 I (s，8H，Ac)，2. 07~2. 09 (m，4H，CH2)，3. 62 (m，2H，CH2-N)，3. 79, 4. 10, 4. 26, 4. 82, 5. 59, 5. 91 (m，7H，glucose)。ESI-MS:m/z798. 3546[M+Na]〇
[0072] (7)中間體化合物（VIII-n)的合成
[0073] 將0. 05mmol原料（VII-n)溶于0. 333mL二氯甲烷中，向其中緩慢滴加0. 333mL TFA，室溫下反應(yīng)5h。旋蒸除去反應(yīng)溶劑。將旋干得到的白色固體溶于少量二氯甲烷中，加 入到50mL乙醚中得到白色絮狀不溶物。過濾后用少量二氯甲烷溶解，加入TEA進(jìn)行中和反 應(yīng)半小時(shí)，旋干后得白色固體粉末（VIII-n)，反應(yīng)產(chǎn)率約為36%。
[0074]1HNMR(400MHz,D2O) (VIII-3) 8 ：1. 64 (m, 2H,CH2), 2. 03 (s, 8H,Ac), 2.0 8 (m, 2H,CH2)，2. 23 (m, 2H,CH2)，3. 50 (m, 2H,CH2-N)，3. 80, 4. 15, 4. 30, 5. 05, 5. 36 ~ 5. 51 (m, 7H,glucose)〇
[0075] (8)DAP-n-DG的合成
[0076] 取原料（VIII-n)20mg，于青霉素小瓶中加入0. 5mL濃度為2mol.L1的鹽酸，壓蓋。 95°C金屬浴下反應(yīng)lOmin，脫去葡萄糖上的Ac保護(hù)官能團(tuán)。再加入0. 5mL濃度為2mol*L1 的NaOH溶液中和至pH7左右。即得到DAP-n-DG。
[0077] 實(shí)施例2三羰基锝-99m標(biāo)記的配合物的制備
[0078] 分別稱取硼氫化鈉5. 5mg、酒石酸鉀鈉20mg、碳酸鈉4mg置于青霉素小瓶中，蓋上 膠塞后鋁蓋密封，用抽氣針抽取空氣，向其中通入CO氣體10-20min。將從醫(yī)用99Mo-99mTc發(fā) 生器中淋洗獲得的高锝酸鈉Na[99mTcO4]淋洗液2mL(約2mCi^mL^，加入反應(yīng)瓶中，搖勻溶 解后在75°C金屬浴加熱條件下反應(yīng)30min，即得到三羰基锝-99m中間體。加入Imol?L1 鹽酸，調(diào)節(jié)pH值為7。
[0079] 將IOmgDAP-2-DG溶于0? 5mL0? 5mol?L1的pH7. 0磷酸緩沖液中，加入三羰基 锝-99m中間體溶液中。在95°C加熱條件下反應(yīng)15min。即得到99mTc(CO) 3-DAP-2-DG。
[0080] 通過薄層層析及HPLC鑒定，其放射化學(xué)純度均大于99%。HPLC中保留時(shí) 間為 10. 31min。HPLC條件為：高效液相色譜儀HITACHI(D-2000);KromaislC18 柱 250X4. 6mm，5y