等。作為給電子基團(tuán)，可列舉例如碳數(shù)1~6的烷基；羥 基、碳數(shù)1~6的烷氧基等。
[0028] 酶反應(yīng)前的溶液所含的前述式（1)所示的化合物和酶反應(yīng)后的溶液所含的前述 式⑶所示的化合物中，Z體和E體的存在比例沒有特別限制。該存在比例依賴于化合物的 制造條件等。以基于后述的實施例中使用的E體含有率的計算式算出的含有率表示，E體 含有率通常為0. 3~20%、特別為2~12%。鑒于本發(fā)明的目的，期望Z體的存在比例充 分高于E體的存在比例，通過使用本發(fā)明的制造方法，可以簡便且高收率地得到Z體。
[0029] 通過以上的酶反應(yīng)，得到式（3)所示的化合物的鹽的水溶液。該酶反應(yīng)中，通過式 (1)所示的化合物中的7位的酰胺保護(hù)基的脫保護(hù)而生成作為副產(chǎn)物的苯乙酸或其衍生物 (以下，這些總稱為"苯乙酸類")。通過酶反應(yīng)得到的式（3)所示的化合物的鹽的水溶液中 含有16~17%左右的苯乙酸類。該含有率是基于后述的實施例中使用的苯乙酸含有率的 計算式算出的值。該苯乙酸類對于本制造方法的目標(biāo)物、即Z體的含有率高的鏈烯基頭孢 烯化合物來說是雜質(zhì)，因此有必要盡量排除其存在。
[0030] 因此，本發(fā)明中，為了降低苯乙酸或其衍生物的含量，接下來對前述通過酶反應(yīng)得 到的式（3)所示的化合物的鹽的水溶液進(jìn)行下述（A)或（B)的處理工序。
[0031] (A)使用有機溶劑，對包含前述脫保護(hù)反應(yīng)的副產(chǎn)物、即苯乙酸或其衍生物的下述 式⑶所示的7 -氨基一3 - [ (E/Z) - 2 - (4 -甲基噻唑一5 -基）乙烯基]-3 -頭 孢烯一 4 一羧酸或其鹽的水溶液進(jìn)行前述苯乙酸或其衍生物的萃取處理的工序。
[0032] ⑶進(jìn)行使該7 -氨基一 3 - [ (E/Z) - 2 -（4 一甲基噻唑一 5 -基）乙烯基]一 3 -頭孢烯一 4 一羧酸或其鹽從包含前述脫保護(hù)反應(yīng)的副產(chǎn)物、即苯乙酸或其衍生物的下 述式⑶所示的7-氨基一3 - [(E/Z) -2 - (4-甲基噻唑一5-基）乙烯基]-3 - 頭孢烯一 4 一羧酸或其鹽的水溶液中析出的析晶處理的工序。
[0033] 以下，對前述（A)的處理工序進(jìn)行說明。
[0034] 從可靠進(jìn)行苯乙酸類的萃取除去的觀點出發(fā)，優(yōu)選在萃取處理之前，通過無機酸 將由前述酶反應(yīng)得到的式（3)所示的化合物的鹽的水溶液的PH調(diào)整至酸性區(qū)域、具體地說 為2以下、特別是1以下，將水溶液中的式（3)所示的化合物的鹽制成對應(yīng)的無機酸鹽的形 態(tài)。作為無機酸，可列舉鹽酸、硝酸、硫酸等。
[0035]作為用于萃取處理的有機溶劑，可列舉（1)低級羧酸的低級烷基酯類、（2)酮類、 (3)醚類、（4)取代或未取代的芳香族烴類、（5)鹵代烴類、（6)脂肪族烴類、（7)環(huán)烷烴類。 這些有機溶劑可單獨或組合2種以上使用。作為（1)低級羧酸的低級烷基酯類，可列舉甲酸 甲酯、甲酸乙酯、甲酸丙酯、甲酸丁酯、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酸甲酯、 丙酸乙酯等。作為（2)酮類，可列舉甲基丙基酮、甲基丁基酮、甲基異丁基酮、二乙基酮等。 作為（3)醚類，可列舉二乙醚、乙基丙基醚、乙基丁基醚、二丙醚、二異丙醚、二丁醚、甲基溶 纖劑、二甲氧基乙烷等。作為（4)取代或未取代的芳香族烴類，可列舉苯、甲苯、二甲苯、氯 苯、茴香醚等。作為（5)鹵代烴類，可列舉二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、三氯乙烷、二溴乙烷、 二氯丙烷、四氯化碳等。作為（6)脂肪族烴類，可列舉戊烷、己烷、庚烷、辛烷等。作為（7) 環(huán)烷烴類，可列舉環(huán)戊烷、環(huán)己烷、環(huán)庚烷、環(huán)辛烷等。
[0036] 這些有機溶劑當(dāng)中，優(yōu)選20°C時對水的溶解度為1重量％以下的物質(zhì)。具體地說， 優(yōu)選甲苯、氯仿、氯苯等，特別優(yōu)選甲苯。
[0037] 使用極性高、對水的溶解度高的有機溶劑時，有機溶劑在萃取處理的鏈烯基頭孢 烯化合物的水溶液中溶解。將溶解有有機溶劑的鏈烯基頭孢烯化合物的水溶液供于后面詳 述的借助活性炭的處理時，活性炭吸附有機溶劑，因此，E體的吸附除去效率降低，難以提高 Z體的純度。因此，使用對水的溶解度高的有機溶劑時，在進(jìn)行借助活性炭的處理之前，將萃 取處理后的水溶液濃縮從而從該水溶液中除去有機溶劑的濃縮工序是很有必要的。使用對 水的溶解度在20°C時為1重量％以下這樣的溶解度低的有機溶劑時，不需要濃縮工序，因 而在工業(yè)上有利。
[0038] 相對于前述水溶液中的鏈烯基頭孢烯化合物1kg，這些有機溶劑優(yōu)選使用5~50 升、更優(yōu)選使用10~30升。此外，優(yōu)選在0~20°C下進(jìn)行萃取處理。只要為該優(yōu)選的比 率，則可在萃取處理中有效降低苯乙酸類的含有率。
[0039] 本發(fā)明的制造方法中，優(yōu)選在萃取處理后，將苯乙酸類的含有率降低至8%以下。 該含有率是基于后述的實施例中使用的苯乙酸含有率的計算式算出的值。通過反復(fù)多次萃 取處理，苯乙酸類的含有率逐漸降低。用1次萃取處理不能使苯乙酸類的含有率成為8%以 下時，優(yōu)選進(jìn)行多次溶劑萃取。
[0040] 以下，對前述⑶的處理工序進(jìn)行說明。
[0041] 從使式（3)所示的化合物析出并有效回收的觀點出發(fā)，通過無機酸將由前述酶反 應(yīng)得到的式（3)所示的化合物的鹽的水溶液的pH調(diào)整至弱酸性區(qū)域（具體地說pH3. 5~ 4. 8、特別是pH3. 5~4. 5)，將水溶液中的式（3)所示的化合物的鹽制成容易以游離的酸的 形態(tài)析出的狀態(tài)。另外，pH調(diào)整可以通過在該水溶液中添加鹽酸、硝酸、硫酸等無機酸來進(jìn) 行。
[0042] 接下來，通過將該水溶液保持在優(yōu)選20°C以下、更優(yōu)選1~10°C下，可以使水溶液 中的式（3)所示的化合物析出。另外，析晶處理可以在攪拌下進(jìn)行，也可以在靜置下進(jìn)行。 析出物即式（3)所示的化合物通過常規(guī)方法進(jìn)行固液分離，利用包含苯乙酸類的處理液進(jìn) 行回收。
[0043]本發(fā)明的制造方法中，在析晶處理后，將苯乙酸類的含有率降低至8%以下是優(yōu)選 的。該含有率是基于后述的實施例中使用的苯乙酸含有率的計算式算出的值。與前述（A) 的萃取處理相比，析晶處理的苯乙酸類的分離除去效率高，因此，只要在前述的PH3. 5~ 4. 8且20°C以下的條件下，用1次析晶處理就可以將苯乙酸類的含有率降低至2%以下。另 外，用1次析晶處理沒有將苯乙酸類的含有率降低至8%以下、優(yōu)選2%以下時，優(yōu)選進(jìn)行多 次析晶處理。
[0044]另外，根據(jù)需要，也可以將前述（A)的處理工序和前述（B)的處理工序組合進(jìn)行。 此時，先進(jìn)行哪一種處理工序沒有特別限制。
[0045]接著，使前述（A)的處理工序或前述（B)的處理工序結(jié)束后的式（3)所示的7 - 氨基一 3 - [ (E/Z) - 2 -（4 一甲基噻唑一 5 -基）乙烯基]一 3 -頭孢烯一 4 一羧酸或 其鹽（鏈烯基頭孢烯化合物）的水溶液與活性炭接觸，吸附除去該水溶液中所含的鏈烯基 頭孢烯化合物的E體，提高Z體的含有率。進(jìn)行了前述（A)的處理工序的情況下，可以使利 用有機溶劑完成萃取處理的水溶液直接與活性炭接觸。進(jìn)行了前述（B)的處理工序的情況 下，將通過該處理工序得到的析出物（式（3)所示的化合物）溶解于水中制成水溶液，使該 水溶液與活性炭接觸。任一種情況下，與活性炭接觸的水溶液中的鏈烯基頭孢烯化合物的 濃度，從處理效率的觀點出發(fā)優(yōu)選為0. 1~5重量％，更優(yōu)選為0. 5~4重量％。
[0046]將與活性炭接觸的水溶液的pH設(shè)為7. 1~9. 0的弱堿性區(qū)域、或者pH2. 0以下、 尤其是〇. 8~1. 4的酸性區(qū)域，從活性炭處理中沒有晶體的析出物、并且可以有效地進(jìn)行活 性炭處理的觀點出發(fā)是優(yōu)選的。尤其設(shè)為PH2. 0以下、特別為0. 8~1. 4的酸性區(qū)域時，由 于通過活性炭處理還可以同時吸附除去通過前述（A)或者（B)的處理工序沒有完全除去的 苯乙酸類，因此從可以得到苯乙酸類進(jìn)一步降低的目標(biāo)物的觀點考慮，是優(yōu)選的。pH的調(diào)整 可以使用氨水、胺類、前述的無機酸等。作為胺類，可以列舉三甲胺、三乙胺等。
[0047] 活性炭與水溶液中的鏈烯基頭孢烯化合物接觸的方法沒有特別限制。作為接觸方 法，可采用例如在鏈烯基頭孢烯化合物的水溶液中添加活性炭的方法、反之在活性炭中添 加鏈烯基頭孢烯化合物的水溶液的方法?；蛘?，作為接觸方法，還可以采用將活性炭填充到 柱中，將鏈烯基頭孢烯化合物的水溶液用泵等送到柱中，使其在柱內(nèi)通過、進(jìn)而使其在柱內(nèi) 多次循環(huán)的方法；將過濾器等成形體中含有活性炭的裝置與鏈烯基頭孢烯化合物的水溶液 接觸的方法?；钚蕴康牧颗c鏈烯基頭孢烯化合物的量的比率沒有特別限制。例如，從可使 Z體的損失率減少的觀點出發(fā)，優(yōu)選相對于水溶液中所含的鏈烯基頭孢烯化合物100重量 份，使10~200重量份、特別是20~100重量份活性炭與其接觸。此外，只要為該優(yōu)選