7-羥乙基白楊素的合成方法及其在制備抗缺氧藥物中的應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術領域，特別是涉及7-羥乙基白楊素的合成方法及其在制備 抗缺氧藥物中的應用。
【背景技術】
[0002] 缺氧（hypoxia)是指因組織供氧不足或用氧障礙導致組織的代謝、功能和形態(tài)結(jié) 構(gòu)發(fā)生異常變化的病理過程，涉及高原環(huán)境醫(yī)學、航空與航天醫(yī)學、運動醫(yī)學等各個學科， 許多病理過程如休克、栓塞、缺血-再灌注等也與器官組織的缺血缺氧有關。高原環(huán)境醫(yī)學 中，缺氧是其所遇到的首要問題。我國的高原面積約有310萬平方千米，占國土面積的1/3， 其中，海拔3000m以上高原占國土面積的1/6,高原地區(qū)的邊境線長達數(shù)千公里，與十多個 國家接壤，是世界上高原面積最大、邊境線最長的國家。高原地區(qū)特有的低壓、低氧環(huán)境常 常使初到高原的人極易出現(xiàn)頭痛、心悸、胸悶、氣短、乏力、睡眠障礙、惡心、嘔吐等急性高原 反應，嚴重時還會出現(xiàn)高原肺水腫、高原腦水腫等致命性疾病。隨著我國西部大開發(fā)戰(zhàn)略的 實施、青藏鐵路的開通，高原地區(qū)經(jīng)濟建設的加速發(fā)展、旅游資源的開發(fā)以及周邊地區(qū)軍事 對峙的加劇，急性高原反應就成為制約高原地方經(jīng)濟、軍事和社會發(fā)展的瓶頸。目前抗缺氧 損傷防護藥物非常缺乏，因此，研究與開發(fā)高效經(jīng)濟的抗缺氧損傷藥物具有十分重要的意 義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目提供了一種步驟簡單，產(chǎn)率較高合成7-羥乙基白楊素方法，以及所述 7-羥乙基白楊素在制備抗缺氧藥物中的應用。
[0004]本發(fā)明實現(xiàn)上述目的所采用的技術方案如下：
[0005]7-羥乙基白楊素的合成方法，包括，在溫度為40_65°C，白楊素與環(huán)氧乙烷由堿催 化反應1-6小時得到7-羥乙基白楊素。
[0006]進一步，所述堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙胺或吡啶。
[0007]進一步，所述白楊素與堿的質(zhì)量比為100 : (1~4)。
[0008] 進一步，所述白楊素與環(huán)氧乙烷的摩爾比I:(1~3)。
[0009]本發(fā)明的方法所用原料來源豐富，合成步驟簡單，反應條件溫和，產(chǎn)率高，可達 85%以上，成本較低，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
[0010] 7-羥乙基白楊素在制備抗缺氧藥物中的應用。
[0011] 所述抗缺氧藥物可用預防和治療各種缺氧性損傷疾病，如高原低壓性缺氧導致的 急性高原病、腦缺血缺氧性疾病和心肌缺血缺氧性疾病等。
[0012] 一種抗缺氧損傷藥物，包括作為唯一活性藥物成分的7-羥乙基白楊素，以及藥用 輔料。
[0013] 實驗一：小鼠密閉缺氧耐受力實驗
[0014]I、實驗方法：取健康BALB/C小鼠50只，雄性，適應性飼養(yǎng)3d后隨機分成5組：缺 氧模型組、乙酰唑胺組OSOmg.kg-1)、？-羥乙基白楊素低劑量組（USmg.kg-1)、？-羥乙基白 楊素中劑量組（250mg.kg，和7-羥乙基白楊素高劑量組（500mg.kg，，每組10只。灌胃給 藥5天，給藥體積為0. 4mL-20g'缺氧模型組給等體積的生理鹽水。最后一次給藥后50min， 將小鼠分別放入盛有5g鈉石灰的250mL廣口瓶內(nèi)（每瓶只放1只小鼠），用凡士林涂抹瓶 口，密封，使之不漏氣，立即計時，直至呼吸停止。以小鼠在密閉廣口瓶內(nèi)存活時間為指標， 比較各藥物組耐缺氧時間。結(jié)果見表1。
[0015] 2、實驗結(jié)果：如表1結(jié)果所示，與缺氧模型組相比，7-羥乙基白楊素低、中、高三個 劑量組均能延長小鼠在常壓密閉缺氧環(huán)境中的存活時間，且呈劑量依賴性，其中7-羥乙基 白楊素高劑量組的存活時間延長率達到48. 55%，與乙酰唑胺陽性對照組比較均具有顯著 性差異（P< 0. 01)。
[0016] 表1灌胃不同劑量7-羥乙基白楊素對密閉缺氧小鼠存活時間的影響（X土s，n= 10)
[0017]
[0018]
[0019] 注：#P< 0? 05,##P< 0? 01，與缺氧模型組相比
[0020] 實驗二：小鼠急性減壓缺氧耐受力實驗
[0021] 1、實驗方法：取健康小鼠60只，雄性，飼養(yǎng)性適應3d后隨機分為3組：缺氧模型 組、乙酰唑胺對照組（250mg.kg-1)、7_羥乙基白楊素高劑量組（500mg.kg-1)，每組20只。灌 胃給藥5天，給藥體積為0. 4mL? 20g'缺氧模型組給等體積的生理鹽水。最后一次給藥后 50min，將動物放入低壓艙，密閉艙門，以lOOOm/min的速度減壓上升海拔高度至5000m和 8000m時分別各停留5min，最終上升至海拔高度10000m，維持此高度Ih后，調(diào)節(jié)進孔閥門， 緩慢降至正常海拔高度，打開艙門，觀察統(tǒng)計Ih內(nèi)動物死亡率，并對實驗結(jié)果進行方差分 析。
[0022] 2、實驗結(jié)果：如表2結(jié)果所示，與缺氧模型組和乙酰唑胺組相比，7-羥乙基白楊素 高劑量組可延長小鼠減壓密閉缺氧存活時間（P< 〇. 01)，Ih內(nèi)死亡率為60%，說明7-羥乙 基白楊素能有效降低小鼠在急性缺氧條件下的死亡率。
[0023] 表27-羥乙基白楊素對小鼠急性減壓耐缺氧能力的影響
[0024]
[0025] 注：##P< 0? 01，與缺氧模型組相比
[0026] 實驗三：7_羥乙基白楊素對模擬高原缺氧小鼠腦組織損傷的保護作用
[0027] 1、實驗方法
[0028] 取健康BABL/C小鼠40只，雄性，適應性飼養(yǎng)3d后隨機分成4組：正常對照組、缺 氧模型組、乙酰唑胺組（250mg/kg)和7-羥乙基白楊素高劑量組（500mg/kg)，每組10只。 灌胃給藥5天，給藥體積為0.4mLCOg'正常組和缺氧模型組給予同體積的生理鹽水，正常 組小鼠不缺氧，最后一次給藥后50min，將其余各組小鼠放入低壓低氧動物實驗艙，密閉艙 門，以lOm/s速度減壓上升海拔高度至8000m，維持此高度9h后，調(diào)節(jié)進氣孔閥門，以20m/ s速度降至與外界大氣壓相同海拔高度（相當于1450m海拔高度），打開艙門，迅速活殺小 鼠，摘取大腦，生理鹽水洗三次，濾紙吸干，_80°C冰箱冷藏備用。用于測定生化指標檢測，均 按照試劑盒說明書操作。
[0029] 2、實驗結(jié)果
[0030] ①7-羥乙基白楊素對模擬高原缺氧小鼠腦組織能量代謝的影響
[0031] 如表3結(jié)果所示，與正常對照組相比，缺氧模型組小鼠腦組織LD含量和LDH活力 顯著升高（P<0. 01);與缺氧模型組相比，預先用7-羥乙基白楊素處理的小鼠腦組織LD含 量顯著降低（P< 0.01)，LDH活力明顯升高（P< 0.05)。
[0032] 表37-羥乙基白楊素對模擬高原缺氧小鼠腦組織LD和LDH的影響（x土s，n= 10)
[0033]
[0034] 注：*P< 0. 05廣P< 0. 01，與正常組相比：
[0035]sP< 0? 05，##P< 0? 01，與缺氧模型組相比。
[0036] 如表4結(jié)果所示，與正常對照組相比，缺氧模型組小鼠腦組織ATP含量、K+Na+-ATP 和Ga2+Mg2+-ATP酶活力均有所下降，而7-羥乙基白楊素高劑量組上述指標下降幅度均明顯 小于缺氧模型組，與正常對照組接近（P> 〇. 05)。
[0037] 表47-羥乙基白楊素對模擬高原缺氧小鼠腦組織ATP和ATPase的影響（X土s，n = 10)
[0038]
[0039]
[0040] 注：*P< 0? 05,**P< 0? 01，與正常組相比；
[0041] #P< 0? 05,##P< 0? 01，與缺氧模型組相比。
[0042] 實驗結(jié)果顯示，低壓氧艙模擬高原缺氧6h后，小鼠腦組織ATP含量、K+Na+-ATP和 Ga2+Mg2+-ATP酶活性明顯下降，LD含量升高，LDH下降，而7-羥乙基白楊素可以逆轉(zhuǎn)這些變 化趨勢，并在一定程度上緩解糖酵解產(chǎn)生大量LD所致的細胞損傷。
[0043] ②7-羥乙基白楊素對模擬高原缺氧小鼠腦組織抗氧化能力的影響
[0044] 如表5所示，與正常對照組相比，缺氧模型組腦組織MDA含量顯著升高（P< 0. 01) S0D、T-A0C活力顯著降低（P<0.01);與缺氧模型組相比，預先用7-羥乙基白楊素給藥處 理后，小鼠腦組織MDA含量顯著降低（P<0? 05)，SOD、T-AOC活力明顯升高（P<0? 01)。
[0045] 表57-羥乙基白楊素對模擬高原缺氧小鼠腦組織S0D、MDA和T-AOC的影響（X土s，