一種卷枝毛霉dk1菌株及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物紡織技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種卷枝毛霉DKl菌株及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 卷枝毛霉在土壤、糞便、禾草及空氣等環(huán)境中存在。在高溫、高濕度以及通風(fēng)不良 的條件下生長良好。卷枝毛霉的用途很廣，可以產(chǎn)生果膠酶、木聚糖酶、漆酶、凝乳酶等。常 用的毛霉主要有魯氏毛霉和總狀毛霉。腐生，廣泛分布于植物殘體、腐敗有機物、動物糞便 和土壤中。
[0003] 在麻的初加工中，需要通過一種慪麻過程來預(yù)先處理部分膠質(zhì)（主要是果膠和半 纖維素）。慪麻過程實際上應(yīng)用了傳統(tǒng)的微生物技術(shù)，它是通過微生物和酶的協(xié)同作用緩慢 地去除附著在纖維表面非纖維素膠質(zhì)的過程。慪麻過程對麻纖維質(zhì)量影響很大，常用的慪 麻方式有雨露慪麻和酶法慪麻。
[0004] 此外，紡織加工中，必須進一步經(jīng)過煮煉脫膠，即去除果膠、半纖維素和木質(zhì)素等 非纖維素物質(zhì)（統(tǒng)稱為膠質(zhì)），才能獲得用于輕紡的纖維，實現(xiàn)其使用價值。目前，麻行業(yè)常 用的煮練方法主要是化學(xué)方法和酶法脫膠，化學(xué)脫膠工藝耗能大，設(shè)備損耗大，且排放的廢 水無法循環(huán)利用，污染問題嚴(yán)重。酶法脫膠就是將脫膠菌培養(yǎng)到菌生長的衰老期后進行過 濾或離心等處理，再用得到的粗酶液浸漬原麻。粗酶液可以將麻纖維中的果膠、半纖維素、 木質(zhì)素等物質(zhì)分解轉(zhuǎn)化為簡單的低分子物質(zhì)，從而完成麻纖維的脫膠過程。酶法脫膠工藝 無需專用設(shè)備，快速高效，無污染，生產(chǎn)的精干麻質(zhì)量好。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種卷枝毛霉DKl菌株及其應(yīng)用，該菌株生長 周期短，菌種不易被污染，處理成本低，處理后纖維質(zhì)量好，處理環(huán)境溫和，耐熱性能好，無 環(huán)境污染等優(yōu)點；能夠直接用于亞麻、黃麻、紅麻和竹纖維脫膠，具有脫膠周期短，纖維分散 率高，脫膠效率高。
[0006] 本發(fā)明的一種卷枝毛霉DKl菌株，其ITS序列如SEQ ID NO: 1所示。
[0007] 根據(jù)ITS測序Blast及聚類分析結(jié)果，該菌與卷枝毛霉相似性為99%，結(jié)合生理 生化試驗結(jié)果和鏡檢分析，命名此菌株為卷枝毛霉（Mucor circinelloides)DKl菌株。ITS 測序中，所采用的正向引物為：ITSl(5-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3'）、反向引物為ITS4(5' -T CCTCCGCTTATTGATATGC-3'），均為國際通用引物，由上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司合 成。
[0008] 本發(fā)明所采用的卷枝毛霉（Mucor circinelloides)DKl菌株，保藏單位名稱： CGMCC中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西 路1號院3號中國科學(xué)院微生物研宄所，保藏號為CGMCC NO. 10143,保藏日期為2014年12 月15日。建議分類命名為：卷枝毛霉（Mucor circinelloides)。
[0009] 本發(fā)明的一種卷枝毛霉DKl菌株的應(yīng)用，所述菌株應(yīng)用于慪麻制備亞麻、黃麻、紅 麻或竹纖維。
[0010] 所述具體慪麻工藝包括：
[0011] ⑴卷枝毛霉DKl菌株保存于PDA培養(yǎng)基，添加凍存緩沖液；
[0012] (2)在滅菌冷卻后的PDA培養(yǎng)基中，接入步驟⑴所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速200~ 400rpm，30~40°C下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時；
[0013] (3)將搖瓶培養(yǎng)后的PDA培養(yǎng)基接種入亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維發(fā)酵培養(yǎng) 基，在轉(zhuǎn)速200r/min、溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)24小時得到發(fā)酵菌液；
[0014] (4)準(zhǔn)備慪麻池；
[0015] (5)將制備的發(fā)酵菌液使用噴淋法噴灑到亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維上做慪麻 處理，慪麻后制得供紡織制品用亞麻、黃麻、紅麻或竹纖維，慪麻條件為自然溫度，PH自然； 噴淋法的工藝具體為每48小時向慪麻區(qū)域噴灑菌液8ml。
[0016] 所述步驟（1)中的凍存緩沖液每100mL的配方為：磷酸二氫鉀0. lg，磷酸氫二鉀 0. 02g，檸檬酸鈉0. 06g，七水合硫酸鎂0. 03g，甘油12ml，加水定容至100ml，制得。
[0017] 所述步驟（3)中的亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維發(fā)酵培養(yǎng)基配方為：亞麻、黃麻、 紅麻原麻或竹纖維25g，以亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹纖維的質(zhì)量為基準(zhǔn)，氯化鉀的質(zhì)量分?jǐn)?shù) 為1%，磷酸氫二鉀的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%，硫酸鎂的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%，硫酸亞鐵的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0. 02%，硫酸銨的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%，補水至5000ml定容。
[0018] 本發(fā)明的一種卷枝毛霉DKl菌株的應(yīng)用，所述菌株應(yīng)用于對亞麻、黃麻、紅麻或竹 紗線的煮練。
[0019] 所述煮練工藝包括：
[0020] (1)卷枝毛霉DKl菌株保存于PDA培養(yǎng)基，添加凍存緩沖液；
[0021] ⑵在滅菌冷卻后的PDA培養(yǎng)基中，接入步驟⑴所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速200~ 400rpm，30~40°C下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時；
[0022] (3)將搖瓶培養(yǎng)后的PDA培養(yǎng)基接種入亞麻、黃麻、紅麻或竹纖維發(fā)酵培養(yǎng)基，在 轉(zhuǎn)速200r/min、溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時得到發(fā)酵菌液；
[0023] (4)將滅菌后的亞麻、黃麻、紅麻或竹紗線與步驟（3)所得的發(fā)酵菌液按質(zhì)量比1 : 20混合，在40~50°C，200~400rpm搖床中煮練1-4天，隨后除去煮練液，沸煮，沖洗以去 除細(xì)菌，停止煮練。
[0024] 本發(fā)明的一種卷枝毛霉DKl菌株的應(yīng)用，所述菌株應(yīng)用于對亞麻、黃麻、紅麻原麻 或竹織物的脫膠。
[0025] 所述脫膠工藝包括：
[0026] (1)卷枝毛霉DKl菌株保存于PDA培養(yǎng)基，添加凍存緩沖液；
[0027] (2)在滅菌冷卻后的PDA培養(yǎng)基中，接入步驟⑴所得的菌一環(huán)，在轉(zhuǎn)速200~ 400rpm，30~40°C下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時；
[0028] (3)將搖瓶培養(yǎng)后的PDA培養(yǎng)基接種入亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹織物發(fā)酵培養(yǎng) 基，在轉(zhuǎn)速200r/min、溫度30°C條件下?lián)u瓶培養(yǎng)24~36小時得到發(fā)酵菌液；
[0029] (4)將滅菌后的亞麻、黃麻、紅麻原麻或竹織物與步驟（3)所得的發(fā)酵菌液按質(zhì)量 比1 :20混合，在40~50°C，200~400rpm搖床中脫膠1-4天，隨后除去脫膠液，沸煮，沖洗 以去除細(xì)菌，停止脫膠。
[0030] 所述的亞麻纖維可以用作服裝面料、裝飾織物、桌布、床上用品和汽車用品等產(chǎn)業(yè) 用品。
[0031] 所述的黃、紅麻纖維可以用作麻袋、麻布、造紙、繩索、織地毯和窗簾等紡織用品。
[0032] 所述的竹纖維可以用作夾克衫、休閑服、西裝套服等服裝面料、涼席、床單和毛巾、 窗簾、圍巾和浴巾、或醫(yī)療護理用品等。
[0033] 有益效果
[0034] (1)本發(fā)明能夠直接用于亞麻、黃麻、紅麻和竹纖維脫膠，具有脫膠周期短，纖維分 散率高，脫膠效率高；本發(fā)明的菌株生長周期短，菌種不易被污染，處理成本低，處理后纖維 質(zhì)量好，處理環(huán)境溫和，耐熱性能好，無環(huán)境污染等優(yōu)點；
[0035] (2)本發(fā)明工藝簡單，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)等特點，利用該體系進行亞麻、黃麻、 紅麻和竹纖維脫膠，具有脫膠周期短，纖維分散率高，脫膠效率高，纖維柔軟，精干麻質(zhì)量好 等優(yōu)點。
【附圖說明】
[0036] 圖1和圖2均為本發(fā)明菌株顯微鏡染色照片（油鏡）。
【具體實施方式】
[0037] 下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實施例僅用于說明本發(fā)明 而不用于限制本發(fā)明的范圍。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明講授的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可以對本發(fā)明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權(quán)利要求書所限定 的范圍。
[0038] 實施例1
[0039] 麻纖維和竹纖維慪麻或煮練菌種的篩選方法：
[0040] (1)慪麻基地獲取腐爛麻及其泥土，將腐爛麻及其泥土與PDA培養(yǎng)基按照Ig :20ml 比例置于PDA培養(yǎng)基中，富集培養(yǎng)10天。然后取0.1 mlPDA培養(yǎng)物涂布于分離培養(yǎng)基中， 30°C靜置培養(yǎng)1-4天，獲得野生型生物處理優(yōu)質(zhì)菌株。
[0041] (2)將步驟（1)中得到的菌株接種到PDA培養(yǎng)基中，30°C培養(yǎng)72h。添加凍存緩沖 液，存于_80°C。
[0042] 所述步驟（I)PDA培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15g，蒸餾水 1000 mL, pH 自然。
[0043] 所述步驟（2)凍存緩沖液每100mL的配方：磷酸二氫鉀0. lg，磷酸氫二鉀0. 02g， 檸檬酸鈉〇. 〇6g，七水合硫酸鎂0. 03g，甘油12ml，加水定容至100ml，制得。
[0044] 該菌株生長迅速，能產(chǎn)生黑灰色菌絲，毛霉菌絲呈棉絮狀，無隔膜，有多個細(xì)胞核， 可以通過孢囊孢子進行無性繁殖。
[0045] 實施例2
[0046] 利用卷枝毛霉DKl菌株制備漆酶的方法：
[0047] (1)卷枝毛霉DKl菌株保存于PDA培養(yǎng)基，添加凍存緩沖液；
[0048]