一種醋酸格拉替雷的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于多肽藥物制備方法技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種醋酸格拉替雷的制備方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 醋酸格拉替雷為L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-賴氨酸和L-酪氨酸的無規(guī)聚合混合物 的醋酸鹽，它們的平均摩爾比為0. 427 :0. 141 :0. 095 :0. 338,平均分子量為5000-9000Da， 結(jié)構(gòu)式為：（C5H9NO4 ?C3H7NO2 ?C6H14N2O2 ?C9H11NO3)x ?XC2H4O2，是由以色列藥廠TEVA所研發(fā) 制造的，商品名為Copaxone?，于1996年或美國FDA核準(zhǔn)用于治療多發(fā)性硬化癥，藥品為白 色至灰白色的滅菌凍晶粉末，包裝另附注射用水調(diào)制成注射液用。
[0003] 國內(nèi)外有關(guān)格拉替雷制備的報道很多，最早在Euro.J.Immune. 1242 (1971， Tietelbaumetal)和US3849550中對格拉替雷的制備方法進(jìn)行了描述，其中描述的方 法都是以L-丙氨酸、L-酪氨酸、Y_芐基-L-谷氨酸和N-三氟乙?；?L-賴氨酸-N-羧 酸酐為原料通過開環(huán)聚合得到受保護(hù)的格拉替雷，再通過酸解、堿裂解及純化得到醋酸格 拉替雷。后續(xù)的專利US5800808、US6048898、US6362161、US6620847、US7199098、CN 102844325、CN102718963、CN102112485、CN103641897 等均按照該方法進(jìn)行制備格拉替 雷。
[0004] 專利WO2004/043995中以L-丙氨酸、L-酪氨酸、Z或帶有取代基Z的L-賴氨酸 和芐酯或帶有取代基芐酯的L-谷氨酸-N-羧酸酐為原料制備受保護(hù)的格拉替雷，并在冰醋 酸中通過催化氫解后直接得到醋酸格拉替雷粗品，再經(jīng)純化得到醋酸格拉替雷，該方法的 優(yōu)點是合成步驟少，且與酸解相比在去保護(hù)過程中不會切斷肽鏈，但該方法需在高壓反應(yīng) 釜中進(jìn)行會提高生產(chǎn)成本和操作難度。
[0005] 專利CN103265624中以L-丙氨酸、Z或帶有取代基Z的L-酪氨酸、Z或帶有取代 基Z的L-賴氨酸和芐酯或帶有取代基芐酯的L-谷氨酸-N-羧酸酐為原料制備受保護(hù)的格 拉替雷，再在冰醋酸中通過酸解/或氫解后得到醋酸格拉替雷粗品，再經(jīng)純化得到醋酸格 拉替雷，該方法的優(yōu)點是通過Z或帶有取代基Z基團(tuán)對酪氨酸的保護(hù)使酚羥基不易氧化，從 而減少了副產(chǎn)物的產(chǎn)生；但通過酸解去保護(hù)會切斷肽鏈從而降低產(chǎn)率，另外，采用催化氫解 法去保護(hù)需在高壓反應(yīng)釜中進(jìn)行從而提高了生產(chǎn)成本和操作難度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足而提供一種能夠提高生產(chǎn)效率，降低生 產(chǎn)成本的醋酸格拉替雷的制備方法。
[0007] 本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的： 一種醋酸格拉替雷的制備方法，步驟如下： 1)、以L-丙氨酸-N-羧酸酐、L-酪氨酸-N-羧酸酐、受保護(hù)的L-谷氨酸-N-羧酸酐和 受保護(hù)的L-賴氨酸-N-羧酸酐為原料，在二氧六環(huán)中堿催化下進(jìn)行開環(huán)聚合，制備得到受 保護(hù)的格拉替雷； 2) 、將步驟1)中獲得的受保護(hù)的格拉替雷與堿解劑進(jìn)行裂解反應(yīng)后得到格拉替雷粗 品； 3) 、將步驟2)中獲得的格拉替雷粗品進(jìn)行純化制得醋酸格拉替雷。
[0008] 上述醋酸格拉替雷的制備方法中，所述L-丙氨酸-N-羧酸酐的結(jié)構(gòu)為：
【主權(quán)項】
1. 一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：步驟如下： 1) 、以L-丙氨酸-N-羧酸酐、L-酪氨酸-N-羧酸酐、受保護(hù)的L-谷氨酸-N-羧酸酐和 受保護(hù)的L-賴氨酸-N-羧酸酐為原料，在二氧六環(huán)中堿催化下進(jìn)行開環(huán)聚合，制備得到受 保護(hù)的格拉替雷； 2) 、將步驟1)中獲得的受保護(hù)的格拉替雷與堿解劑進(jìn)行裂解反應(yīng)后得到格拉替雷粗 品； 3) 、將步驟2)中獲得的格拉替雷粗品進(jìn)行純化制得醋酸格拉替雷。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：所述的步驟 1)中的L-丙氨酸-N-羧酸酐、L-酪氨酸-N-羧酸酐、受保護(hù)的L-谷氨酸-N-羧酸酐和 受保護(hù)的L-賴氨酸-N-羧酸酐的反應(yīng)用量摩爾比為：0.90-1.05 :0.20-0. 25 :0.25-0. 30 : 0. 75-0. 85〇
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：所述的步驟1) 中的溶劑是1，4-二氧六環(huán)，且其用量是所用保護(hù)氨基酸總質(zhì)量的16-20倍。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：所述的步驟1) 中的聚合溫度為25-35 °C。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：所述的步驟1) 中的堿催化劑為二乙胺或三乙胺，且其用量為所用保護(hù)氨基酸總質(zhì)量的〇. 6-1. 0%。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：所述的步驟2) 中的堿解劑的濃度為5-10%wt，其用量為每克受保護(hù)的格拉替雷需要10-20 mL堿解劑，所 述的堿裂解反應(yīng)溫度為25-35°C，反應(yīng)時間為5-10小時。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：所述的步驟3) 中的純化為透析純化、超濾； 所述的透析純化為將醋酸格拉替雷粗品溶液放入2000 Da的透析袋中，并置于pH為 5. 5±0. 3的醋酸銨緩沖溶液中透析至pH達(dá)到6. 5-7. 0,再將滲余物用1. 0%的醋酸再回收 直至pH達(dá)到4. 0-4. 5,并用水滲濾直至pH達(dá)到5. 0-5. 5,最后通過3000 Da分子量截留膜 進(jìn)行濃縮并凍干； 所述的超濾為將醋酸格拉替雷粗品溶液用冰醋酸調(diào)pH至5. 0-5. 5,采用3000Da 濾膜進(jìn)行超濾。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：所述的步驟2) 中的堿解劑為氫氧化鈉與甲醇或者乙醇的水溶液、氫氧化鋇與甲醇或者乙醇的水溶液、氫 氧化鋰與甲醇或者乙醇的水溶液的一種或者兩種及以上混合。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種醋酸格拉替雷的制備方法，其特征在于：所述的步驟1) 中的受保護(hù)的L-谷氨酸-N-羧酸酐采用酯基對L-谷氨酸-N-羧酸酐進(jìn)行保護(hù)，所述的酯 基為乙酯或者甲酯。
【專利摘要】本發(fā)明屬于多肽藥物制備方法技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種醋酸格拉替雷的制備方法，以L-丙氨酸-N-羧酸酐、L-酪氨酸-N-羧酸酐、受保護(hù)的L-谷氨酸-N-羧酸酐和受保護(hù)的L-賴氨酸-N-羧酸酐為原料，在二氧六環(huán)中堿催化下進(jìn)行開環(huán)聚合，制備得到受保護(hù)的格拉替雷，本發(fā)明提供的制備方法工藝操作簡單、收率高及成本低，并具有廣泛的應(yīng)用前景和經(jīng)濟價值。
【IPC分類】C07K1-02, C07K1-06, C07K14-00
【公開號】CN104610436
【申請?zhí)枴緾N201510053303
【發(fā)明人】張寶國, 毛影, 劉志慶, 李沁沁, 朱贊梅, 劉霞麗, 羅峰
【申請人】鄭州大明藥物科技有限公司
【公開日】2015年5月13日
【申請日】2015年2月3日