濾，得第二濾液；將第一濾液和第二濾液按照質(zhì)量比2. 5:1. 5合并，減壓濃縮、冷凍干燥、低 溫粉碎至粒徑為0. 2_即得中草藥提取物；
[0062] 所述復配酶的重量份數(shù)組成為：內(nèi)0 -葡聚糖酶20份，夕卜0 -葡聚糖酶18份， 0 _葡萄糖苷酶12份，木聚糖酶18份，戊聚糖酶18份，普魯蘭酶25份，0 -淀粉酶12份， 酸性蛋白酶12份，果膠酶12份，葡萄糖氧化酶6份，酸性磷酸酶8份，脂肪酶6份；
[0063] 所述乙醇濃度為75%。
[0064] 3.改性膳食纖維的制備
[0065] 所述改性膳食纖維的制備方法包括以下步驟：將菊粉、蘋果纖維、燕麥纖維、小麥 纖維、米糠、麩皮按質(zhì)量比14:8:4:3:2:1. 5均勻混合，加入其質(zhì)量5倍的水，室溫300W、 40KHz條件超聲提取12min，同時于電場強度30kV/cm，脈沖時間500ys，脈沖頻率250Hz 條件下進行高壓脈沖電場提?。挥萌樗嵴{(diào)節(jié)pH值為5. 5,加入混合物質(zhì)量0. 2%的生物酶， 于50°C酶解35min;酶解液減壓濃縮、冷凍干燥、低溫粉碎至粒徑為0. 2mm即得改性膳食纖 維；
[0066] 所述生物酶為木聚糖酶、纖維素酶、漆酶、果膠酶、單寧酶、淀粉酶和蛋白酶按質(zhì)量 比 9:6:4:3:2:2:1. 5 均勻混合。
[0067] 下述實施例2-5所使用的果膠分解物、中草藥提取物和改性膳食纖維均為實施例 1制備。
[0068] 實施例2
[0069] -種液體酸性果膠酶的制備方法，包括如下步驟：
[0070] 1)將發(fā)酵后獲得的酸性果膠酶發(fā)酵液添加200目硅藻土，用600目濾布預涂硅藻 土，采用板框過濾機進行過濾，操作壓力為〇. 18Mpa，得發(fā)酵粗酶液；
[0071] 所述硅藻土的添加量為每100mL發(fā)酵液添加lg ;
[0072] 2)將步驟1)發(fā)酵粗酶液于室溫下在電場強度25kV/cm，脈沖時間300ys，脈沖頻 率250Hz條件下進行高壓脈沖電場處理；
[0073] 3)步驟2)經(jīng)高壓脈沖電場處理的發(fā)酵粗酶液首先通過孔徑為0. 6ym的微濾膜微 濾，微濾進口壓力為0.llMPa，壓差0. 08MPa，酶液溫度25°C;然后通過孔徑為0. 01ym的超 濾膜超濾，超濾進口壓力為〇. 18MPa，壓差0. 09MPa，酶液溫度30°C;最后循環(huán)超濾得到濃縮 酶液；
[0074] 4)向步驟3)濃縮酶液中加入其質(zhì)量3%的穩(wěn)定劑，充分攪拌，均勻混合，用乳酸調(diào) 節(jié)pH值3. 5,然后于室溫下在電場強度35kV/cm，脈沖時間500ys，脈沖頻率250Hz條件下 進行高壓脈沖電場處理，靜置30min;
[0075] 所述穩(wěn)定劑的制備方法如下：按重量份數(shù)計，準確稱取果膠分解物30份，中草藥 提取物20份，改性膳食纖維12份，海藻糖12份，天然抗氧化劑8份，多元醇3份，金屬氯化 物2份，牛血清白蛋白0. 2份；首先取改性膳食纖維，加入其質(zhì)量8倍的去離子水，室溫浸泡 5h，邊升溫邊攪拌，50°C保溫25min，攪拌，充分溶解，繼續(xù)保溫，邊攪拌邊依次加入果膠分 解物、中草藥提取物、海藻糖、多元醇、金屬氯化物，然后降溫至30°C，邊攪拌邊依次加入牛 血清白蛋白、天然抗氧化劑均勻混合即得穩(wěn)定劑；
[0076] 所述天然抗氧化劑為葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏葉提取物按質(zhì)量比為 5:4:2均勻混合；
[0077] 所述多元醇由聚乙二醇、丙三醇、山梨醇、二硫蘇糖醇按質(zhì)量比6:5:2:2均勻混 合；
[0078] 所述金屬氯化物為氯化鋅、氯化鈣、氯化鈉、氯化鎂按質(zhì)量比2. 5:2:1. 5:0. 2均勻 混合；
[0079] 5)步驟4)經(jīng)調(diào)配、靜置后的濃縮酶液經(jīng)除菌過濾、無菌灌裝即得穩(wěn)定的液體酸性 果膠酶。
[0080] 經(jīng)上述方法制備的液體酸性果膠酶在室溫儲存12個月菌落總數(shù)為68CFU/mL;在 40°C和0°C條件下儲存12個月，酶活損失率分別為1%和0. 5%。
[0081] 實施例3
[0082] -種液體酸性果膠酶的制備方法，包括如下步驟：
[0083] 1)將發(fā)酵后獲得的酸性果膠酶發(fā)酵液添加100目硅藻土，用500目濾布預涂硅藻 土，采用板框過濾機進行過濾，操作壓力為〇. 14Mpa，得發(fā)酵粗酶液；
[0084] 所述硅藻土的添加量為每100mL發(fā)酵液添加0. 5g ;
[0085] 2)將步驟1)發(fā)酵粗酶液于室溫下在電場強度20kV/cm，脈沖時間200ys，脈沖頻 率200Hz條件下進行高壓脈沖電場處理；
[0086] 3)步驟2)經(jīng)高壓脈沖電場處理的發(fā)酵粗酶液首先通過孔徑為0. 4ym的微濾膜微 濾，微濾進口壓力為0.IMPa，壓差0. 07MPa，酶液溫度25°C;然后通過孔徑為0. 005ym的超 濾膜超濾，超濾進口壓力為〇. 15MPa，壓差0. 08MPa，酶液溫度25°C;最后循環(huán)超濾得到濃縮 酶液；
[0087] 4)向步驟3)濃縮酶液中加入其質(zhì)量0.5%的穩(wěn)定劑，充分攪拌，均勻混合，用乳酸 調(diào)節(jié)pH值2. 8,然后于室溫下在電場強度25kV/cm，脈沖時間400ys，脈沖頻率200Hz條件 下進行高壓脈沖電場處理，靜置20min;
[0088] 所述穩(wěn)定劑的制備方法如下：按重量份數(shù)計，準確稱取果膠分解物20份，中草藥 提取物15份，改性膳食纖維10份，海藻糖10份，天然抗氧化劑5份，多元醇2份，金屬氯化 物1份，牛血清白蛋白0. 1份；首先取改性膳食纖維，加入其質(zhì)量5倍的去離子水，室溫浸泡 4h，邊升溫邊攪拌，40°C保溫20min，攪拌，充分溶解，繼續(xù)保溫，邊攪拌邊依次加入果膠分 解物、中草藥提取物、海藻糖、多元醇、金屬氯化物，然后降溫至25°C，邊攪拌邊依次加入牛 血清白蛋白、天然抗氧化劑均勻混合即得穩(wěn)定劑；
[0089] 所述天然抗氧化劑為葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏葉提取物按質(zhì)量比 4:3:1均勻混合；
[0090] 所述多元醇由聚乙二醇、丙三醇、山梨醇、二硫蘇糖醇按質(zhì)量比5:4:1:1均勻混 合；
[0091] 所述金屬氯化物為氯化鋅、氯化鈣、氯化鈉、氯化鎂按質(zhì)量比2:1:1:0. 1均勻混 合；
[0092] 5)步驟4)經(jīng)調(diào)配、靜置后的濃縮酶液經(jīng)除菌過濾、無菌灌裝即得穩(wěn)定的液體酸性 果膠酶。
[0093] 經(jīng)上述方法制備的液體酸性果膠酶在室溫儲存12個月菌落總數(shù)為88CFU/mL;在 40°C和0°C條件下儲存12個月，酶活損失率分別為1.2%和0.8%。
[0094] 實施例4
[0095] 一種液體酸性果膠酶的制備方法，包括如下步驟：
[0096] 1)將發(fā)酵后獲得的酸性果膠酶發(fā)酵液添加300目硅藻土，用800目濾布預涂硅藻 土，采用板框過濾機進行過濾，操作壓力為〇. 24Mpa，得發(fā)酵粗酶液；
[0097] 所述硅藻土的添加量為每100mL發(fā)酵液添加1. 5g ;
[0098] 2)將步驟1)發(fā)酵粗酶液于室溫下在電場強度30kV/cm，脈沖時間300ys，脈沖頻 率300Hz條件下進行高壓脈沖電場處理；
[0099] 3)步驟2)經(jīng)高壓脈沖電場處理的發(fā)酵粗酶液首先通過孔徑為0. 8ym的微濾膜微 濾，微濾進口壓力為0. 12MPa，壓差0. 09MPa，酶液溫度30°C;然后通過孔徑為0. 015ym的 超濾膜超濾，超濾進口壓力為〇. 20MPa，壓差0.lOMPa，酶液溫度35°C;最后循環(huán)超濾得到濃 縮酶液；
[0100] 4)向步驟3)濃縮酶液中加入其質(zhì)量10%的穩(wěn)定劑，充分攪拌，均勻混合，用乳酸 調(diào)節(jié)pH值5. 2,然后于室溫下在電場強度40kV/cm，脈沖時間600ys，脈沖頻率300Hz條件 下進行高壓脈沖電場處理，靜置40min;
[0101] 所述穩(wěn)定劑的制備方法如下：按重量份數(shù)計，準確稱取果膠分解物40份，中草藥 提取物25份，改性膳食纖維15份，海藻糖15份，天然抗氧化劑10份，多元醇5份，金屬氯 化物3份，牛血清白蛋白0. 3份；首先取改性膳食纖維，加入其質(zhì)量12倍的去離子水，室溫 浸泡6h，邊升溫邊攪拌，60°C保溫30min，攪拌，充分溶解，繼續(xù)保溫，邊攪拌邊依次加入果 膠分解物、中草藥提取物、海藻糖、多元醇、金屬氯化物，然后降溫至35°C，邊攪拌邊依次加 入牛血清白蛋白、天然抗氧化劑均勻混合即得穩(wěn)定劑；
[0102] 所述天然抗氧化劑為葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏葉提取物按質(zhì)量比 6:5:3均勻混合；
[0103] 所述多元醇由聚乙二醇、丙三醇、山梨醇、二硫蘇糖醇按質(zhì)量比7:6:3:3均勻混 合；
[0104] 所述金屬氯化物為氯化鋅、氯化鈣、氯化鈉、氯化鎂按質(zhì)量比3:3:2:0. 3均勻混 合；
[0105] 5)步驟4)經(jīng)調(diào)配、靜置后的濃縮酶液經(jīng)除菌過濾、無菌灌裝即得穩(wěn)定的液體酸性 果膠酶。
[0106] 經(jīng)上述方法制備的液體酸性果膠酶在室溫儲存12個月菌落總數(shù)為76CFU/mL;在 40°C和0°C條件下儲存12個月，酶活損失率分別為1. 1%和1%。
[0107] 實施例5
[0108] 一種液體酸性果膠酶的制備方法，包括如下步驟：
[0109] 1)將發(fā)酵后獲得的酸性果膠酶發(fā)酵液添加100目硅藻土，用800目濾布預涂硅藻 土，采用板框過濾機進行過濾，操作壓力為〇. 14Mpa，得發(fā)酵粗酶液；
[0110] 所述硅藻土的添加量為每l〇〇mL發(fā)酵液添加1. 5g;
[0111] 2)將步驟1)發(fā)酵粗酶液于室溫下在電場強度30kV/cm，脈沖時間200ys，脈沖頻 率300Hz條件下進行高壓脈沖電場處理；
[0112] 3)步驟2)經(jīng)高壓脈沖電場處理的發(fā)酵粗酶液首先通過孔徑為0. 4ym的微濾膜微 濾，微濾進口壓力為0. 12MPa，壓差0. 07MPa，酶液溫度30°