專利名稱：一種制備1→6連接的、具有1,2反式糖苷鍵吡喃寡糖的新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于有生物活性的寡糖的制備技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及能用于合成1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵的吡喃式寡糖合成方法。
1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵的吡喃式寡糖存在于很多天然產(chǎn)物中，如酵母細(xì)胞壁多糖含有α1→6連接的甘露寡糖片段，而植物的細(xì)胞壁的多糖含有β1→6連接的半乳寡糖片段，它們都具有1，2反式糖苷鍵的結(jié)構(gòu)。在已報(bào)道的1→6連接的合成中，都是用保護(hù)-去保護(hù)的逐步合成策略。我們的研究組首次報(bào)道了通過(guò)原酸酯的中間體，用不保護(hù)的、或部分保護(hù)的糖基受體，能夠選擇性地得到1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵的雙糖及三糖(見(jiàn)王為孔繁祚J.Org.Chem.63(1998)5744；王 為 孔繁祚Angew.Chem.Int.Ed.38(1999)1247；孔繁祚 王 為 中國(guó)發(fā)明專利971257788.4)。
本發(fā)明的目的在于由活化的糖基供體與不保護(hù)的或部分保護(hù)的糖基受體直接偶連，不經(jīng)過(guò)原酸酯的中間體，獲得1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵的吡喃式寡糖的方法。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的以?；?、還原端活化的糖為糖基供體，以不保護(hù)的、或部分保護(hù)的糖苷為糖基受體，在LEWIS酸催化下進(jìn)行偶連，得到保護(hù)的寡糖，按常規(guī)方法去除保護(hù)，即得到游離的寡糖。
本發(fā)明的合成方法在于用乙?；?、1位為活化基團(tuán)的單糖為糖基供體，用不保護(hù)的單糖苷為糖基受體，將它們?nèi)苡谟袡C(jī)溶劑中，LEWIS酸催化作用下發(fā)生偶連，得到1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵的雙糖。如 X=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3將所得的雙糖3按常規(guī)方法苯甲?；蛞阴；缓髮⑦€原端活化，即得到雙糖供體。如
R=?；鵛=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3將所得的雙糖3按常規(guī)方法苯甲?；?，再選擇性地去除乙酰基，即得到雙糖受體。如 按單糖供體1與單糖受體2的偶連條件，使1與雙糖受體7偶連，或雙糖供體5與單糖受體2偶連，都能得到三糖。如 X=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3按雙糖3轉(zhuǎn)化為雙糖供體5的條件，三糖8或9可轉(zhuǎn)化為三糖供體11，而按雙糖3轉(zhuǎn)化為雙糖受體7的條件，三糖8或9可轉(zhuǎn)化為三糖供體13，如 R=苯甲酰基X=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3按單糖供體1與單糖受體2偶連的條件，使雙糖供體5與雙糖受體7偶連，或單糖供體1與三糖受體13偶連，或三糖供體11與單糖受體2偶連，都能得到四糖。如 R=?；鵛=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3按三糖8轉(zhuǎn)化為三糖供體11及三糖受體13的條件，四糖14分別轉(zhuǎn)化為四糖供體16及四糖受體18。如 R=?；鵛=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3按單糖供體1與單糖受體2的偶連條件，使四糖供體16與四糖受體18偶連，得到八糖19。如 R=苯甲?；闯Ｒ?guī)方法去除保護(hù)，即得到游離的八糖。
用所制備的單、雙、三、四糖供體與所制備的單、雙、三、四糖受體以適當(dāng)方式組合，可方便地制備出五糖、六糖、七糖、八糖及更大的糖如九糖、十糖、十一糖、十二糖、十四糖、十六糖等。
所述的單糖為葡萄糖、半乳糖、甘露糖、塔羅糖、塔各糖、古勒糖、依德糖、阿羅糖。
所述的糖苷為烷基苷如甲基、乙基、烯丙基、烯丁基、芐基等。
所述的寡糖或由均一的單糖組成，或由權(quán)利2中所述的不同的單糖按任意組合方式而成，所述的有機(jī)溶劑為酰胺、鹵代烷、醚。
所述的LEWIS酸為銀鹽、三氟化硼、三甲基硅三氟甲磺酸酯。
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)的說(shuō)明。
(1)雙糖3的合成 將單糖供體1492毫克，1毫克分子(按Adv.Carbohydr.Chem Biochem 50，1994，21的方法制備)單糖受體2 242毫克，1.1毫克分子，溶于干燥的二甲基甲酰胺20毫升中，冷卻至-40℃，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，加入TMSOTf 10微升，使反應(yīng)物溫度自然升至室溫。4小時(shí)后加入三乙胺終止反應(yīng)，按常規(guī)方法處理反應(yīng)液，用硅膠柱層析法，以乙酸乙酯/石油醚為淋洗劑精制產(chǎn)物，得到3385毫克，產(chǎn)率70％。
(2)雙糖供體5的制備 將雙糖3550毫克，1毫克分子，溶于15毫升吡啶中，室溫、攪拌下加入苯甲酰氯1.3毫升，用TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)完成后，按常規(guī)方法處理反應(yīng)液，定量得到雙糖4。將4溶于10毫升二氯甲烷中，加入二氯化鈀100毫克，在室溫、攪拌下進(jìn)行反應(yīng)，用TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完成后，用常規(guī)方法處理反應(yīng)液，產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，得到1位為游離羥基的苯甲?；p糖744毫克，產(chǎn)率90％。將此雙糖826毫克，1毫克分子溶于15毫升干燥二氯甲烷中，加入三氯乙睛0.2毫升，2毫克分子，DBU 27微升，在室溫、攪拌下進(jìn)行反應(yīng)，用TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完成后，用常規(guī)方法處理反應(yīng)液，產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，得到雙糖供體5 920毫克，產(chǎn)率95％(3)雙糖受體7的合成 將雙糖3554毫克，1毫克分子，溶于15毫升吡啶中，室溫、攪拌下加入苯甲酰氯1.3毫升，用TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)完成后，按常規(guī)方法處理反應(yīng)液，定量得到雙糖4。將4溶于15毫升無(wú)水甲醇中，加入乙酰氯0.75毫升，用TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完成后，用常規(guī)方法處理反應(yīng)液，產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，得到雙糖受體7 625毫克，產(chǎn)率90％。
(4)三糖8及9的合成 按合成雙糖3的基本相同的條件，由1 541毫克，1.1毫克分子與7694毫克，1毫克分子(1+2)得到三糖8 720毫克，產(chǎn)率70％。或由5 1066毫克，1.1毫克分子與2 220毫克，1毫克分子(2+1)得到三糖9 720毫克，產(chǎn)率70％。
(5)三糖供體11的制備 將三糖8 1028毫克，1毫克分子溶于15毫升干燥吡啶，加入苯甲酰氯0.39毫升，3.3毫克分子，反應(yīng)在室溫、攪拌下進(jìn)行，用TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完成后，用常規(guī)方法處理反應(yīng)液，定量得到三糖10，將10溶于15毫升二氯甲烷中，加入二氯化鈀120毫克，在室溫、攪拌下進(jìn)行反應(yīng)，用TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完成后，用常規(guī)方法處理反應(yīng)液，產(chǎn)物用硅膠柱層析法精制，得到1位為游離羥基的三糖1170毫克，產(chǎn)率90％。將此三糖1300毫克，1毫克分子溶于15毫升干燥二氯甲烷中，加入三氯乙睛0.2毫升，2毫克分子，DBU 27微升，在室溫、攪拌下進(jìn)行反應(yīng)，用TLC監(jiān)測(cè)。反應(yīng)完成后，用常規(guī)方法處理反應(yīng)液，粗產(chǎn)物可直接用于下一步反應(yīng)。
(6)三糖受體13的制備 按3轉(zhuǎn)化7的方法，由1028毫克，1毫克分子的三糖8經(jīng)由10而得到三糖受體13，兩步合并的產(chǎn)率為90％。
(7)四糖的制備 按單糖供體1與單糖受體2偶連的條件，進(jìn)行雙糖供體5與雙糖受體7的偶連，得到四糖14 1501毫克，產(chǎn)率70％。從NMR譜圖上可看出，在δ5.17，5.05，4.82，4.73有四個(gè)H-1，在δ2.11，2.03，1.98，1.94四個(gè)CH3CO。
(8)四糖供體16的制備 按三糖8轉(zhuǎn)化為三糖供體11的條件，由四糖14 1502毫克，1毫克分子得到四糖供體16 1729毫克，產(chǎn)率90％。
(9)四糖受體18的制備 按三糖8轉(zhuǎn)化為三糖受體13的條件，由四糖14 1502毫克，1毫克分子得到四糖受體18 1478毫克，產(chǎn)率90％。
(10)八糖的制備 按單糖供體1與單糖受體2偶連的條件，進(jìn)行四糖供體16與四糖受體18的偶連，得到八糖19 3358毫克，產(chǎn)率70％。從NMR譜圖上可看出，在δ5.33-4.61有八個(gè)H-1，在δ2.09，2.03，1.97，1.89有四個(gè)CH3CO。
權(quán)利要求
1．本發(fā)明是關(guān)于一種制備1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵吡喃寡糖的新方法，其特征在于(1)用乙?；?、1位為活化基團(tuán)的單糖為糖基供體，用不保護(hù)的單糖苷為糖基受體，將它們?nèi)苡谟袡C(jī)溶劑中，LEWIS酸催化作用下發(fā)生偶連，得到1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵的雙糖。如 X=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3(2)將所得的雙糖3按常規(guī)方法苯甲?；蛞阴；缓髮⑦€原端活化，即得到雙糖供體。如 R=?；鵛=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3(3)將所得的雙糖3按常規(guī)方法苯甲?；?，再選擇性地去除乙?；吹玫诫p糖受體。如 (4)按單糖供體1與單糖受體2的偶連條件，使1與雙糖受體7偶連，或雙糖供體5與單糖受體2偶連，都能得到三糖。如 R=酰基X=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3(5)按雙糖3轉(zhuǎn)化為雙糖供體5的條件，三糖8或9可轉(zhuǎn)化為三糖供體11，而按雙糖3轉(zhuǎn)化為雙糖受體7的條件，三糖8或9可轉(zhuǎn)化為三糖供體13，如 R=苯甲酰基X=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3(6)按單糖供體1與單糖受體2偶連的條件，使雙糖供體5與雙糖受體7偶連，或單糖供體1與三糖受體13偶連，或三糖供體11與單糖受體2偶連，都能得到四糖。如 R=?；鵛=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3(7)按三糖8轉(zhuǎn)化為三糖供體11及三糖受體13的條件，四糖14分別轉(zhuǎn)化為四糖供體16及四糖受體18。如 R=?；鵛=Br，Cl或酯基如OC(NH)CCl3(8)按單糖供體1與單糖受體2的偶連條件，使四糖供體16與四糖受體18偶連，得到八糖19。如 按常規(guī)方法去除保護(hù)，即得到游離的八糖。(9)用所制備的單、雙、三、四糖供體與所制備的單、雙、三、四糖受體以適當(dāng)方式組合，可方便地制備出五糖、六糖、七糖、八糖及更大的糖如九糖、十糖、十一糖、十二糖、十四糖、十六糖等。
2．如權(quán)利1所述的一種制備1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵吡喃寡糖的新法，其特征在于所述的單糖為葡萄糖、半乳糖、甘露糖、塔羅糖、塔各糖、古勒糖、依德糖、阿羅糖。
3．如權(quán)利1所述的一種制備1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵吡喃寡糖的新方法，其特征在于所述的糖苷為烷基苷如甲基、乙基、烯丙基、烯丁基、芐基等。
4．如權(quán)利1所述的一種制備1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵吡喃寡糖的新方法，其特征在于所述的寡糖或由均一的單糖組成，或由權(quán)利2中所述的不同的單糖按任意組合方式而成，
5．如權(quán)利1所述的一種制備1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵吡喃寡糖的新方法，其特征在于所述的有機(jī)溶劑為酰胺、鹵代烷、醚。
6．如權(quán)利1所述的一種制備1→6連接的、具有1，2反式糖苷鍵吡喃寡糖的新方法，其特征在于所述的LEWIS酸為銀鹽、三氟化硼、三甲基硅三氟甲磺酸酯。
全文摘要
本發(fā)明涉及1→6連接的、具有1,2反式糖苷鍵的六碳吡喃糖寡糖的合成的新方法。用乙?；摹?位為三氯乙酰亞胺酯的糖為糖基供體,用不保護(hù)的或部分保護(hù)的吡喃糖苷為糖基受體,在LEWIS酸催化下,可方便地制取雙糖、三糖、四糖、五糖、六糖、七糖、八糖及更大的糖。
文檔編號(hào)C08B37/00GK1297892SQ9912511
公開日2001年6月6日 申請(qǐng)日期1999年11月25日 優(yōu)先權(quán)日1999年11月25日
發(fā)明者孔繁祚, 朱玉亮 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心