本發(fā)明涉及抗病毒藥物，更具體的說是涉及ssc-mir-148a-5p在制備抗pdcov增殖藥物和疫苗中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、豬德爾塔冠狀病毒(porcine?deltacoronavirus,pdcov)是一種豬腸道致病性腹瀉病原，可誘發(fā)豬出現(xiàn)水樣腹瀉、嘔吐、脫水和死亡。目前尚無商業(yè)化疫苗和特異性藥物用于防治該病毒引發(fā)的豬腹瀉病，迫切需要發(fā)展新的抗病毒策略。

2、microrna(mirna/mir)是非編碼rna家族的成員，其在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控功能基因的表達(dá)，廣泛參與多種生物學(xué)過程的調(diào)控。研究發(fā)現(xiàn)，禽mir-148a-5p(gga-mir-148a-5p)能夠顯著調(diào)控j亞群禽白血病病毒(avian?leukosis?virus?subgroup?j，alv-j)和鴨坦布蘇病毒(duck?tembusu?virus，dtmuv)的復(fù)制，但豬源mir-148a-5p能否調(diào)控豬易感病毒的增殖尚不清楚。

3、本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，豬mir-148a-5p(ssc-mir-148a-5p)能夠調(diào)節(jié)pdcov在豬小腸上皮細(xì)胞(intestinal?porcine?epithelial?cell?line?j2，ipec-j2)中的增殖，本發(fā)明從新的角度為抗pdcov增殖藥物和疫苗的制備提供了分子靶標(biāo)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明提供了ssc-mir-148a-5p在制備抗pdcov增殖藥物和疫苗中的應(yīng)用。

2、本發(fā)明將增加ssc-mir-148a-5p表達(dá)的模擬物(核苷酸序列如seq?id?no.1所示)和降低ssc-mir-148a-5p表達(dá)的抑制劑(核苷酸序列如seq?id?no.2所示)分別轉(zhuǎn)染至豬小腸上皮細(xì)胞(intestinal?porcine?epithelial?cell?line?j2，ipec-j2)，轉(zhuǎn)染后24h使用pdcov-tj1毒株感染細(xì)胞，感染病毒后以熒光定量pcr技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中pdcov?m基因的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)pdcov?m基因的表達(dá)量分別顯著減少和升高，表明ssc-mir-148a-5p能夠抑制pdcov在ipec-j2細(xì)胞中的增殖。本發(fā)明為抗pdcov增殖藥物和疫苗的制備提供了候選mirna。

3、aaaguucugagacacuccgacu，seq?id?no.1；

4、agtcggagtgtctcagaacttt，seq?id?no.2。

5、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

6、ssc-mir-148a-5p在制備抗pdcov增殖藥物和疫苗中的應(yīng)用；

7、所述ssc-mir-148a-5p的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；

8、aaaguucugagacacuccgacu，seq?id?no.1。

9、上述的ssc-mir-148a-5p作為靶點(diǎn)在制備治療和/或預(yù)防pdcov的藥物和/或疫苗中的應(yīng)用。

10、進(jìn)一步的，需增加ssc-mir-148a-5p的表達(dá)量。

11、一種抗pdcov增殖的藥物，包括增加ssc-mir-148a-5p表達(dá)量的物質(zhì)。

12、進(jìn)一步的，所述增加ssc-mir-148a-5p表達(dá)量的物質(zhì)的核苷酸序列如下：

13、aaaguucugagacacuccgacu，seq?id?no.1。

14、經(jīng)由上述的技術(shù)方案可知，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明取得的有益效果為：本發(fā)明將增加ssc-mir-148a-5p表達(dá)的模擬物和降低ssc-mir-148a-5p表達(dá)的抑制劑分別轉(zhuǎn)染至豬小腸上皮細(xì)胞(ipec-j2)，轉(zhuǎn)染后24h使用pdcov感染細(xì)胞，感染病毒后24h以熒光定量pcr技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中pdcov?m基因的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)pdcov?m基因的表達(dá)量分別顯著減少和升高，表明ssc-mir-148a-5p能夠調(diào)節(jié)pdcov在ipec-j2細(xì)胞中的增殖。本發(fā)明為抗pdcov增殖藥物和疫苗的制備提供了新的候選mirna。

技術(shù)特征：

1.ssc-mir-148a-5p在制備抗pdcov增殖藥物和疫苗中的應(yīng)用；

2.權(quán)利要求1所述的ssc-mir-148a-5p作為靶點(diǎn)在制備治療和/或預(yù)防pdcov的藥物和/或疫苗中的應(yīng)用。

3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，需增加ssc-mir-148a-5p的表達(dá)量。

4.一種抗pdcov增殖的藥物，其特征在于，包括增加ssc-mir-148a-5p表達(dá)量的物質(zhì)。

5.如權(quán)利要求4所述的藥物，其特征在于，所述增加ssc-mir-148a-5p表達(dá)量的物質(zhì)的核苷酸序列如下：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了ssc?miR?148a?5p在制備抗PDCoV增殖藥物和疫苗中的應(yīng)用。屬于抗病毒藥物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明將增加ssc?miR?148a?5p表達(dá)的模擬物和降低ssc?miR?148a?5p表達(dá)的抑制劑分別轉(zhuǎn)染至豬小腸上皮細(xì)胞(IPEC?J2)，轉(zhuǎn)染后24h使用PDCoV感染細(xì)胞，感染病毒后24h以熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中PDCoV?M基因的表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)PDCoV?M基因的表達(dá)量分別顯著減少和升高，表明ssc?miR?148a?5p能夠調(diào)節(jié)PDCoV在IPEC?J2細(xì)胞中的增殖。本發(fā)明為抗PDCoV增殖藥物和疫苗的制備提供了新的候選miRNA。

技術(shù)研發(fā)人員：江珊,鄢明華,李富強(qiáng),任衛(wèi)科,田向?qū)W,李秀麗,路超,郭笑然,張莉,李程
受保護(hù)的技術(shù)使用者：天津市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/23