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一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片及其制備方法和應(yīng)用方法

文檔序號:40404969發(fā)布日期:2024-12-20 12:28閱讀:11來源:國知局
一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片及其制備方法和應(yīng)用方法

本發(fā)明涉及農(nóng)藥殘留檢測,具體涉及一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片及其制備方法和應(yīng)用方法。


背景技術(shù):

1、農(nóng)藥殘留普遍存在于各種農(nóng)產(chǎn)品中,包括茶葉、水果和蔬菜,并已成為世界上最廣泛討論的問題之一有些農(nóng)藥殘留,特別是內(nèi)源性農(nóng)藥,很難清除,可引起癌癥、激素紊亂、哮喘、過敏、過敏和其他疾病因此,開發(fā)可靠的檢測技術(shù)來監(jiān)測農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留水平至關(guān)重要。傳統(tǒng)的方法,如氣相色譜法和高效液相色譜法,往往需要耗時的樣品處理,并且很難檢測到原處的農(nóng)藥殘留針對上述問題,已經(jīng)報道了多種檢測方法,包括電化學(xué)方法、表面增強拉曼光譜和比色法。側(cè)向免疫層析法具有預(yù)處理簡單、靈敏度高、反應(yīng)速度快、特異性強等優(yōu)點,是一種很有前途的農(nóng)藥殘留檢測方法。

2、一般有機磷農(nóng)藥前處理常用的技術(shù):液液萃取、固相萃取技術(shù)、quechers方法,這些檢測方法存在耗時長,抗干擾性差,操作繁瑣,有機溶劑用量大等問題。酶聯(lián)免疫法和膠體金試紙條的前處理方法雖然操作比儀器檢測方法要簡單,但前處理方式會用到勻漿或者切碎等,這樣的前處理方式會增加基質(zhì)效應(yīng)干擾,并且只能檢測農(nóng)產(chǎn)品表面的農(nóng)藥殘留,而不能檢測農(nóng)產(chǎn)品內(nèi)部的農(nóng)藥殘留。


技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)不足,本發(fā)明提出了一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片及其制備方法和應(yīng)用方法,可以同時以方便和微創(chuàng)的方式檢測農(nóng)產(chǎn)品表面和內(nèi)部的農(nóng)藥殘留。

2、為實現(xiàn)以上目的,本發(fā)明的技術(shù)方案通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn):

3、第一方面,本發(fā)明提出了一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的制備方法,包括以下步驟:

4、s1:將聚乙二醇二丙烯酸酯、三乙胺和丙烯酰氯以99:0.5:0.5的質(zhì)量比混合后得到混合溶液;

5、s2:將所述混合溶液注入到硅膠微針模具中,真空放置后利用紫外線照射該混合溶液,得到pegda貼片;

6、s3:將所述pegda貼片浸入濃度為50mmol/l表面修飾的多壁碳納米管懸浮液中進行超聲浸泡,室溫放置后揭起上層透明膜,得到微針貼片。

7、進一步地,步驟s2中紫外線的照射條件為:照射強度為8-12mw/cm2,例如可以是8、9、10、11、12mw/cm2;波長為365nm,照射時間為40-50min,例如可以是40、41、42、45、47、50min;

8、步驟s2中真空放置的時間為12-18min,例如可以是12、14、15、18min。

9、進一步地,步驟s3中表面修飾的多壁碳納米管包括羥基修飾多壁碳納米管、羧基化多壁碳納米管和氨基化多壁碳納米管,優(yōu)選為羥基修飾多壁碳納米管。

10、進一步地,步驟s3中超聲浸泡的時間為25-35min,例如可以是25、27、30、32、35min。

11、進一步地,步驟s3中的室溫放置的時間為10-15h,例如可以是10、11、12、13、15h。

12、第二方面,本發(fā)明提出了一種采用上述方法制備的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片。

13、第三方面,本發(fā)明提出了所述的方法制備的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片在檢測農(nóng)產(chǎn)品中毒死蜱和/或甲基對硫磷的應(yīng)用。

14、第四方面,本發(fā)明提出了一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的應(yīng)用方法,所述應(yīng)用方法包括:

15、將按照上述方法制備的微針貼片按壓在待測物的不同部位;

16、按壓后用pbs緩沖液浸泡微針貼片,得到洗脫液;

17、吸取洗脫液與金標(biāo)混合抗體混勻,混勻靜置后將液體轉(zhuǎn)移至膠體金試紙條的樣品墊上,通過膠體金讀卡儀讀取檢測結(jié)果。

18、進一步地,所述pbs緩沖液的濃度為0.02mol/l,ph為7.4。

19、進一步地,微針貼片每次按壓后停頓6-12s。

20、進一步地,所述膠體金試紙條按以下步驟制備:

21、制備膠體金:將質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的氯金酸溶液加熱至沸騰后再加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%的檸檬酸三鈉溶液,繼續(xù)加熱直至溶液顏色趨于穩(wěn)定后,得到膠體金溶液;

22、制備膠體金試紙條:將毒死蜱半抗原-牛血清蛋白偶聯(lián)物用pbs緩沖液稀釋至濃度為0.3mg/ml,噴于nc膜上,為t1線;在t1檢測線上5mm處噴涂甲基對硫磷半抗原-牛血清蛋白偶聯(lián)物,用pbs緩沖液稀釋至濃度為0.5mg/ml,為t2線;在t2線上5mm處噴涂羊抗鼠二抗,為c線;

23、組裝膠體金試紙條:把nc膜、樣品墊、吸水墊貼在pvc底板上,使樣品墊與nc膜在長度方向上重合0.3cm,nc膜與吸水墊在長度方向上重合0.3cm,然后用切條機切割成寬度為3mm的試紙條,得到膠體金試紙條。

24、進一步地,所述金標(biāo)混合抗體按以下步驟制備:

25、向膠體金溶液中加入9μl/ml毒死蜱和甲基對硫磷抗體,37℃搖床振蕩30min,加入濃度為10%peg-20000振蕩10min,再加入質(zhì)量體積比為5%bsa,振蕩10min;

26、反應(yīng)后,放入高速冷凍離心機以12000r/min,離心5min,棄上清液,下層沉淀用100μl/ml重懸液溶解,得到金標(biāo)混合抗體。

27、本發(fā)明提供的一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片及其制備方法和應(yīng)用方法,與現(xiàn)有技術(shù)相比優(yōu)點在于:

28、本發(fā)明提出的微針貼片由經(jīng)表面修改的多壁碳納米管、聚乙二醇二丙烯酸酯、三乙胺和丙烯酰氯制備而成,其中,pegda具有無毒、生物相容性好、免疫原性低、使用方便等優(yōu)點,在紫外線照射下,pegda分子鏈末端的丙烯酸酯雙鍵斷裂,并與其他pegda分子結(jié)合形成交聯(lián)點和網(wǎng)絡(luò),pegda分子之間形成穩(wěn)定的化學(xué)鍵,從而形成一個整體的水凝膠結(jié)構(gòu),多壁碳納米管的加入可以提高吸附率、降低基質(zhì)效應(yīng)的干擾。本發(fā)明制成的微針貼片具有出色的膨脹能力,能夠快速有效地吸收農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留,將微針貼片按壓農(nóng)產(chǎn)品表面,通過針尖進入蔬菜細胞內(nèi)部來收集農(nóng)藥殘留,再通過洗脫流程得到洗脫液后用膠體金試紙條進行檢測,可以以最小的侵入方式刺穿植物,檢測內(nèi)部農(nóng)藥,適用于真實樣品的現(xiàn)場采樣和檢測,并防止樣品在檢測過程中被破壞。

29、本發(fā)明通過在mwnts的表面進行表面處理,可以改善mwnts在有機溶劑或水溶劑中的分散性差的問題,以提高其在溶劑中的分散性。



技術(shù)特征:

1.一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的制備方法,其特征在于,步驟s2中紫外線的照射條件為:照射強度為8-12mw/cm2,波長為365nm,照射時間為40-50min;

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的制備方法,其特征在于,步驟s3中表面修飾的多壁碳納米管包括羥基修飾多壁碳納米管、羧基化多壁碳納米管和氨基化多壁碳納米管。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的制備方法,其特征在于,步驟s3中超聲浸泡的時間為25-35min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的制備方法,其特征在于,步驟s3中的室溫放置的時間為10-15h。

6.一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片,其特征在于,采用權(quán)利要求1-5任一項所述的方法制備。

7.按照權(quán)利要求1-5任一項所述的方法制備的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片在檢測農(nóng)產(chǎn)品中毒死蜱和/或甲基對硫磷的應(yīng)用。

8.一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的應(yīng)用方法,其特征在于,所述應(yīng)用方法包括:

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的應(yīng)用方法,其特征在于,

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片的應(yīng)用方法,其特征在于,微針貼片每次按壓后停頓6-12s。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種檢測農(nóng)藥殘留的微針貼片及其制備方法和應(yīng)用方法,涉及農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提出的微針貼片由經(jīng)表面修改的多壁碳納米管、聚乙二醇二丙烯酸酯、三乙胺和丙烯酰氯制備而成,制成的微針貼片具有出色的膨脹能力,能夠快速有效地吸收農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留,將微針貼片按壓在農(nóng)產(chǎn)品表面,通過針尖進入蔬菜細胞內(nèi)部來收集農(nóng)藥殘留,再通過洗脫流程得到洗脫液后用免疫層析試紙條進行檢測,可以以最小的侵入方式刺穿植物或人體的角質(zhì)層,檢測內(nèi)部農(nóng)藥,適用于真實樣品的現(xiàn)場采樣和檢測,并防止樣品在檢測過程中被破壞。

技術(shù)研發(fā)人員:魏茂瓊,王麗,沙凌杰,陶匯海,蘭珊珊,林濤,劉宏程
受保護的技術(shù)使用者:云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2024/12/19
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