本發(fā)明屬于生物,涉及調(diào)控植物耐堿性的gsexpa8蛋白及其編碼基因和應用。
背景技術:
1、
2、鹽堿地的土壤環(huán)境是制約包括大豆在內(nèi)的農(nóng)作物種植面積和產(chǎn)量的重要因素之一,以堿為主的貧瘠土地表層使普通作物很難生長,其中的堿脅迫以碳酸氫鈉為主。
3、野生大豆具備強耐堿性,能在鹽堿地生存,是研究大豆耐堿性機制的重要材料。野生大豆的耐堿信號轉(zhuǎn)導途徑是目前研究的熱點。
技術實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的是提供調(diào)控植物耐堿性的gsexpa8蛋白及其編碼基因和應用。
2、本發(fā)明提供的蛋白質(zhì),命名為gsexpa8蛋白,為如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)或(a5):
3、(a1)seq?id?no:1所示的蛋白質(zhì);
4、(a2)seq?id?no:1中第2-250位所示的蛋白質(zhì);
5、(a3)在(a1)或(a2)所述蛋白質(zhì)的n端或/和c端連接標簽得到的融合蛋白;
6、(a4)將(a1)或(a2)所述蛋白質(zhì)經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的且與植物對堿脅迫的耐逆性相關的蛋白質(zhì);
7、(a5)來源于大豆且與(a1)或(a2)所述蛋白質(zhì)具有98%以上同一性且與植物對堿脅迫的耐逆性相關的蛋白質(zhì)。
8、所述標簽可為熒光蛋白標簽,例如gfp熒光蛋白標簽。
9、所述標簽還可為純化標簽,例如表1所示標簽。
10、表1標簽的序列
11、 標簽 殘基 序列 poly-arg 5-6(通常為5個) rrrrr poly-his 2-10(通常為6個) hhhhhh flag 8 dykddddk strep-tag?ii 8 wshpqfek c-myc 10 eqkliseedl
12、編碼gsexpa8蛋白的核酸分子也屬于本發(fā)明的保護范圍。
13、具體的,所述核酸分子可為dna分子。
14、具體的,所述核酸分子為如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4):
15、(b1)編碼區(qū)如seq?id?no:2所示的核酸分子;
16、(b2)編碼區(qū)如seq?id?no:2中第4-750位所示的核酸分子;
17、(b3)來源于大豆且與(b1)或(b2)具有95%以上同一性且編碼所述蛋白質(zhì)的核酸分子;
18、(b4)在嚴格條件下與(b1)或(b2)限定的核酸序列雜交且編碼所述蛋白質(zhì)的核酸分子。
19、含有所述核酸分子的表達盒、重組載體或重組微生物均屬于本發(fā)明的保護范圍。
20、具體的,含有所述核酸分子的重組載體如seq?id?no:3所示。
21、本發(fā)明還保護gsexpa8蛋白在調(diào)控植物對堿脅迫的耐逆性中的應用。
22、所述調(diào)控為正調(diào)控,gsexpa8蛋白豐度增加,植物對堿脅迫的耐逆性增高。
23、本發(fā)明還保護編碼gsexpa8蛋白的核酸分子在調(diào)控植物對堿脅迫的耐逆性中的應用。
24、所述調(diào)控為正調(diào)控,編碼gsexpa8蛋白的核酸分子豐度增加,植物對堿脅迫的耐逆性增高。
25、本發(fā)明還保護gsexpa8蛋白在制備對堿脅迫的耐逆性提高的植物中的應用。
26、本發(fā)明還保護編碼gsexpa8蛋白的核酸分子在制備對堿脅迫的耐逆性提高的轉(zhuǎn)基因植物中的應用。
27、本發(fā)明還保護含有所述核酸分子的表達盒、重組載體或重組微生物在制備對堿脅迫的耐逆性提高的轉(zhuǎn)基因植物中的應用。
28、本發(fā)明還提供了一種培育對堿脅迫的耐逆性提高的植物的方法,包括如下步驟:在受體植物中導入編碼gsexpa8蛋白的核酸分子,得到對堿脅迫的耐逆性提高的轉(zhuǎn)基因植物。具體的,所述核酸分子通過重組質(zhì)粒導入所述受體植物。具體的,所述核酸分子通過含有重組質(zhì)粒的重組農(nóng)桿菌導入所述受體植物。
29、本發(fā)明還提供了一種培育對堿脅迫的耐逆性提高的植物的方法,包括如下步驟:增加植物中gsexpa8蛋白的含量,得到對堿脅迫的耐逆性提高的植物。
30、本發(fā)明還保護以上任一所述方法在植物育種中的應用。所述植物育種的目標為培育對堿脅迫的耐逆性提高的植物。
31、以上任一所述堿脅迫可為鹽堿脅迫。
32、以上任一所述堿脅迫可為nahco3造成的堿脅迫。
33、以上任一所述植物可為單子葉植物或雙子葉植物。
34、以上任一所述植物可為豆科植物。
35、以上任一所述植物可為大豆屬植物,例如大豆東農(nóng)50。
36、本發(fā)明對于耐堿植物育種,特別是耐堿大豆育種具有重大應用推廣價值。
1.蛋白質(zhì),為如下(a1)或(a2)或(a3)或(a4)或(a5):
2.編碼權利要求1所述蛋白質(zhì)的核酸分子。
3.如權利要求2所述的核酸分子,其特征在于:所述核酸分子為如下(b1)或(b2)或(b3)或(b4):
4.含有權利要求2或3所述核酸分子的表達盒、重組載體或重組微生物。
5.權利要求1所述的蛋白質(zhì)或權利要求2或3所述核酸分子在調(diào)控植物對堿脅迫的耐逆性中的應用。
6.權利要求1所述蛋白質(zhì)在制備對堿脅迫的耐逆性提高的植物中的應用。
7.權利要求2所述核酸分子、權利要求3所述核酸分子、權利要求4所述表達盒、權利要求4所述重組載體或權利要求4所述重組微生物在制備對堿脅迫的耐逆性提高的轉(zhuǎn)基因植物中的應用。
8.一種培育對堿脅迫的耐逆性提高的植物的方法,包括如下步驟:在受體植物中導入權利要求2或3所述核酸分子,得到對堿脅迫的耐逆性提高的轉(zhuǎn)基因植物。
9.一種培育對堿脅迫的耐逆性提高的植物的方法,包括如下步驟:增加植物中權利要求1所述蛋白質(zhì)的含量,得到對堿脅迫的耐逆性提高的植物。
10.權利要求8或9所述方法在植物育種中的應用。