本發(fā)明屬于微生物，具體涉及一種促進澳洲堅果生長的合成菌群及其構建方法與應用。

背景技術：

1、澳洲堅果因其豐富的營養(yǎng)價值和藥用價值而備受大眾市場青睞，是全球最受歡迎的堅果之一。隨著澳洲堅果市場需求量的與日俱增，中國澳洲堅果產(chǎn)業(yè)蓬勃發(fā)展，種植面積逐年增加。截至2020年，中國澳洲堅果種植面積達到26.87萬公頃，占世界種植面積的70.4％以上，已成為世界上種植面積最大、發(fā)展速度最快的國家。

2、生物菌劑已經(jīng)成為促進植物生長最有潛力的方法。例如芽孢桿菌(bacillus)、假單胞菌(pseudomonas)、木霉菌(trichoderma)、鏈霉菌(streptomyces)、黃桿菌(flavobacteria)、腸桿菌(enterobacter)、放線菌(actinomycetes)、沙雷氏菌(serratia)、產(chǎn)堿桿菌屬(alcaligenes)和克雷伯氏菌(klebsiella)等多種生物菌劑已經(jīng)廣泛應用于促進各種農(nóng)作物增產(chǎn)增量，并廣泛用于商業(yè)生產(chǎn)和應用中。此外，合成菌群(synthetic?microbial?community,syncom)已被證明在促進作物生長方面比單一菌株更有效果，這些合成菌群通過提供抗生素、次生代謝物、生物酶和其他對病原體有抑制作用，并能夠促進植物根系生長。雖然植物促生菌的研究已經(jīng)取得了大量的應用成果，但是對木本類促生效果，特別是澳洲堅果的促生研究甚少。因此，亟待開發(fā)有效的合成菌群促進澳洲堅果生長。

3、公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發(fā)明的總體背景的理解，而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域一般技術人員所公知的現(xiàn)有技術。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種促進澳洲堅果生長的合成菌群及其構建方法與應用。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下技術方案：

3、本發(fā)明的第一個目的在于提供一種合成菌群，所述合成菌群由枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27等體積混合而成。

4、更為具體的，枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27濃度均為1.0×108cfu/ml。

5、更為具體的，所述枯草芽孢桿菌x17，分類學名為bacillus?subtilis?x17，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號為gdmcc?no：64986；

6、所述熒光假單胞菌x62，分類學名為pseudomonasfluorescens?x62，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號為gdmcc?no：64987；

7、哈茨木霉菌z27，分類學名為trichoderma?harzianum?z27，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號為gdmcc?no：64988。

8、本發(fā)明的第二個目的在于提供所述的合成菌群在促進澳洲堅果生長中的應用。

9、本發(fā)明的第三個目的在于提供一種促進澳洲堅果生長合成菌群的構建方法，包括以下步驟：

10、s1.采集健康根際土壤，制備健康根際土壤懸浮液，用無菌水梯度稀釋后進行細菌和真菌培養(yǎng)，并對生長良好的真菌和細菌進行分離純化培養(yǎng)；

11、s2.對分離純化且生長較好的真菌和細菌進行平板對峙試驗，選擇兩兩無拮抗作用的細菌和真菌進行分子生物學鑒定，篩選有文獻報道具有促進作物生長的菌株構建合成菌群；

12、s3.通過盆栽試驗驗證合成菌群對作物的促生長效果。

13、更為具體的，步驟s2中，篩選的具有促進作物生長的菌株為枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27，其中，

14、所述枯草芽孢桿菌x17，分類學名為bacillus?subtilis?x17，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號為gdmcc?no：64986；

15、所述熒光假單胞菌x62，分類學名為pseudomonasfluorescens?x62，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號為gdmcc?no：64987；

16、所述哈茨木霉菌z27，分類學名為trichoderma?harzianum?z27，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號為gdmcc?no：64988。

17、更為具體的，步驟2中，構建的合成菌群由枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27等體積混合而成。

18、更為具體的，步驟2中，所述枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27的濃度均為1.0×108cfu/ml。

19、與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

20、本發(fā)明從健康根際土壤中分離篩選真菌和細菌，并將生長良好的菌株進行平板對峙試驗，篩選出兩兩之間無拮抗作用的菌株進行分子生物學鑒定。篩選有文獻報道具有促進作物生長的3株菌株，分別為：枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27，然后將3株構建成合成菌群，通過盆栽試驗驗證，本發(fā)明構建的合成菌群能夠促進澳洲堅果植株的生長及生物量的積累，同時還能提高土壤中可溶性有機氮、硝態(tài)氮和銨態(tài)氮的含量，提高β-葡糖苷酶、β-乙酰葡糖胺糖苷酶和酸性磷酸酶的酶活性，以及提高土壤微生物量碳氮磷，可為澳洲堅果的種植和經(jīng)濟發(fā)展提供支持。

21、保藏信息

22、枯草芽孢桿菌x17，分類學名為bacillus?subtilis?x17，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏號為gdmcc?no：64986。

23、熒光假單胞菌x62，分類學名為pseudomonasfluorescens?x62，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏號為gdmcc?no：64987。

24、哈茨木霉菌z27，分類學名為trichoderma?harzianum?z27，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏地址：廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏號為gdmcc?no：64988。

技術特征：

1.一種合成菌群，其特征在于，所述合成菌群由枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27等體積混合而成。

2.根據(jù)權利要求1所述的合成菌群，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27的濃度均為1.0×108cfu/ml。

3.根據(jù)權利要求1所述的合成菌群，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌x17，分類學名為bacillus?subtilis?x17，于2024年08月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏號為gdmcc?no：64986；

4.權利要求1-3任一項所述的合成菌群在促進澳洲堅果生長中的應用。

5.一種促進澳洲堅果生長合成菌群的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：

6.根據(jù)權利要求5所述的構建方法，其特征在于，步驟s2中，篩選的具有促進作物生長的菌株為枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27，其中，

7.根據(jù)權利要求5所述的構建方法，其特征在于，步驟2中，構建的合成菌群由枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27等體積混合而成。

8.根據(jù)權利要求7所述的構建方法，其特征在于，步驟2中，所述枯草芽孢桿菌x17、熒光假單胞菌x62和哈茨木霉菌z27的濃度均為1.0×108cfu/ml。

技術總結
本發(fā)明屬于微生物技術領域，具體涉及一種促進澳洲堅果生長的合成菌群及其構建方法與應用。一種合成菌群，所述合成菌群由枯草芽孢桿菌X17、熒光假單胞菌X62和哈茨木霉菌Z27等體積混合而成。本發(fā)明從健康根際土壤中分離篩選菌株，并將生長良好的菌株進行兩兩對峙試驗，篩選出兩兩之間無拮抗作用的菌株。經(jīng)分子生物學鑒定，篩選具有促生作用的3株菌株分別為：枯草芽孢桿菌X17、熒光假單胞菌X62和哈茨木霉菌Z27，然后將3株構建成合成菌群，通過盆栽試驗驗證，本發(fā)明構建的合成菌群能夠促進澳洲堅果植株的生長及生物量的積累，同時還能活化土壤，提高土壤養(yǎng)分含量、酶活性及微生物量碳氮磷含量，可為澳洲堅果的種植和經(jīng)濟發(fā)展提供支持。

技術研發(fā)人員：李德軍,姚小芳,劉秋梅,何尋陽
受保護的技術使用者：中國科學院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所
技術研發(fā)日：
技術公布日：2024/12/19