本發(fā)明關(guān)于一種異體移植膠體套組及其使用方法。

背景技術(shù)：

1、生物醫(yī)學(xué)的研究過程中，通常會(huì)先以分離的細(xì)胞株做為研究模型，研究生物體內(nèi)的各種現(xiàn)象與生物機(jī)制；但在真實(shí)的生物體中，各種細(xì)胞之間具有復(fù)雜的交互作用，因此所觀察到的現(xiàn)象以及生物機(jī)制常常會(huì)與細(xì)胞模型獲得的結(jié)果具有差異，所以動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)研究中相當(dāng)重要的一個(gè)環(huán)節(jié)。

2、但是，目前進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，例如與腫瘤相關(guān)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，人類的腫瘤細(xì)胞并不容易于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)生長，因此目前已研發(fā)出一種將細(xì)胞培養(yǎng)于一凝膠狀培養(yǎng)基內(nèi)、再將其移植于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)的培養(yǎng)方法；但是目前使用的凝膠狀培養(yǎng)基，其使用的原料包含動(dòng)物性原料，但是每一批動(dòng)物性原料的質(zhì)量可能具有差異，且亦可能包含了病原菌或是內(nèi)毒素。又，現(xiàn)有的凝膠狀培養(yǎng)基需要于特定區(qū)間的溫度操作，使用上并不方便。雖然目前已有開發(fā)不同的細(xì)胞培養(yǎng)膠體，例如中國臺(tái)灣第twi746069b號(hào)專利，提供一種3d細(xì)胞培養(yǎng)膠體的套組，可用于進(jìn)行體外3d細(xì)胞培養(yǎng)，又例如中國臺(tái)灣第twi774661b專利提供一種培養(yǎng)基組成物，可應(yīng)用于懸浮培養(yǎng)細(xì)胞；但是這些培養(yǎng)基的應(yīng)用目前只限于體外培養(yǎng)細(xì)胞。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明關(guān)于一種異體移植膠體套組及其使用方法，本發(fā)明的異體移植膠體套組包含一膠體材料與一膠體溶液。

2、本發(fā)明所述的膠體材料包含0.1～5wt％的海藻酸鈉(sodium?alginate)、1～30wt％的明膠、0.5～2wt％的hepes(4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonicacid)緩沖液、1～800u/ml的肝素鈉與剩余百分比的純水。又膠體溶液包含0.2～10wt％的二價(jià)陽離子鹽類、0.01～1wt％的hepes緩沖液以及剩余百分比的純水。

3、于一實(shí)施例中，膠體材料包含5～15wt％的明膠。

4、于一實(shí)施例中，膠體材料包含0.5～1wt％的hepes緩沖液。

5、于一實(shí)施例中，膠體材料包含400～800u/ml肝素鈉。

6、于一實(shí)施例中，膠體溶液的二價(jià)陽離子鹽類包含氯化鍶、磷酸鈣、氯化鈣、與硫酸鈣其中至少之一。

7、于一實(shí)施例中，膠體溶液進(jìn)一步包含至少一生長因子。

8、于一實(shí)施例中，生長因子包含纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast?growth?factor)、轉(zhuǎn)化生長因子(transforming?growth?factor-β)、似胰島素生長因子(insulin-likegrowth?factor)、腫瘤衍生聚落刺激因子(tumor-derived?colony?stimulating?factor-1)、表皮生長因子(epidermal?growth?factor)、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子(stromal?cell-derived?factor-1)、血小板衍生生長因子(platelet-derived?growth?factor)或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial?cell?line?derived?neurotrophic?factor)。

9、本發(fā)明也關(guān)于一種上述異體移植膠體套組的使用方法，包含：準(zhǔn)備一膠體材料、一膠體溶液與一細(xì)胞培養(yǎng)溶液；將該細(xì)胞培養(yǎng)溶液與膠體溶液混合均勻，獲得一第一混合溶液；將該第一混合溶液與該膠體材料混合均勻并獲得一第二混合溶液。

10、于一實(shí)施例中，細(xì)胞培養(yǎng)溶液包含至少一種欲培養(yǎng)的細(xì)胞。

11、于一實(shí)施例中，第二混合溶液內(nèi)的細(xì)胞密度介于0.1×106～5×107細(xì)胞/毫升。

12、藉此，本發(fā)明的異體移植膠體材料的成分為合成的原料，成分單純且不具生物毒性，又，本發(fā)明的異體移植膠體套組可以依照個(gè)別試驗(yàn)的需求添加不同的細(xì)胞培養(yǎng)材料，例如添加不同的生長因子；本發(fā)明的異體移植膠體套組，形成的培養(yǎng)膠體的硬度會(huì)依材料比例不同有具有差異，適用的細(xì)胞株廣度高；此外本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)膠體套組可于室溫下操作，操作步驟簡易。

技術(shù)特征：

1.一種膠體材料，包含0.1～5wt％的海藻酸鈉、1～30wt％的明膠、0.5～2wt％的hepes緩沖液，1～800u/ml的肝素鈉與剩余百分比的純水。

2.一種異體移植膠體套組，包含一細(xì)胞膠體材料與一膠體溶液，其中，該細(xì)胞膠體材料包含0.1～5wt％的海藻酸鈉、1～30wt％的明膠、0.5～2wt％的hepes緩沖液、1～800u/ml的肝素鈉與剩余百分比的純水，以及其中該膠體溶液包含0.2～10wt％的二價(jià)陽離子鹽類、0.01～1wt％的hepes緩沖液以及剩余百分比的純水。

3.如權(quán)利要求2所述的異體移植膠體套組，其中，該膠體溶液的該二價(jià)陽離子鹽類包含氯化鍶、磷酸鈣、氯化鈣、與硫酸鈣其中至少之一。

4.如權(quán)利要求2所述的異體移植膠體套組，其中，該膠體溶液進(jìn)一步包含至少一生長因子。

5.如權(quán)利要求4所述的異體移植膠體套組，其中，該生長因子包含纖維細(xì)胞生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子、似胰島素生長因子、腫瘤衍生聚落刺激因子、表皮生長因子、基質(zhì)細(xì)胞衍生因子、血小板衍生生長因子或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞系衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子。

6.一種以權(quán)利要求2所述的異體移植膠體套組培養(yǎng)細(xì)胞的方法，包含：準(zhǔn)備一膠體材料、一膠體溶液與一細(xì)胞培養(yǎng)溶液；將該細(xì)胞培養(yǎng)溶液與膠體溶液混合均勻，獲得一第一混合溶液；將該第一混合溶液與該膠體材料混合均勻并獲得一第二混合溶液。

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，該細(xì)胞培養(yǎng)溶液包含至少一欲培養(yǎng)的細(xì)胞。

8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中，該第二混合溶液內(nèi)的細(xì)胞密度介于0.1×106～5×107細(xì)胞/毫升。

9.如權(quán)利要求6所述的方法，其中，該細(xì)胞培養(yǎng)溶液與該膠體溶液的混合比例為1：1～3：1。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種異體移植膠體套組及其使用方法，異體移植膠體套組包含膠體材料與膠體溶液，膠體材料包含海藻酸鈉、明膠與HEPES，膠體溶液包含二價(jià)陽離子鹽類；將膠體材料、膠體溶液與細(xì)胞混合后，獲得一異體移植膠體，此細(xì)胞培養(yǎng)膠體可應(yīng)用于建立動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀１景l(fā)明中異體移植膠體材料的成分為合成的原料，成分單純且不具生物毒性。本發(fā)明的異體移植膠體套組形成的培養(yǎng)膠體的硬度會(huì)依材料比例不同有具有差異，適用的細(xì)胞株廣度高；并可于室溫下操作，操作步驟簡易。以本發(fā)明異體移植膠體進(jìn)行細(xì)胞異體移植時(shí)，可使異體細(xì)胞良好的生長于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)，且不會(huì)殘留培養(yǎng)膠體。

技術(shù)研發(fā)人員：梁筑婷,林威宇,廖碧虹,蔡世杰,吳侑峻
受保護(hù)的技術(shù)使用者：基可生醫(yī)股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/19