本發(fā)明涉及生物科技技術領域，尤其涉及一種用于提取dna的花生葉片組織研磨方法和裝置。

背景技術：

花生又名落花生，屬于一年生草本植物，由于其含油量高，被人們譽為“植物肉”。花生除了用于食用外，還可用于印染、造紙工業(yè)等，是我國重要的油料和經(jīng)濟作物。我國的花生種植面積和生產(chǎn)總量均居世界前列在國際上具有很強的競爭力。但是，我國目前花生的種質資源相對有限，一些抗病抗逆的種質資源相對缺乏，尤其是抗黃曲霉品種更加缺乏。

常規(guī)的雜交育種、誘變育種雖然可以對花生的遺傳基因進行一定的改良，但是都很難實現(xiàn)有目的性地進行花生遺傳基因改良。而轉基因育種可以任意選擇生產(chǎn)上的當家品種進行外源基因的導入，達到目的性狀基因的轉移和種質改良的目的。

現(xiàn)有花生轉基因育種的常用方法有農(nóng)桿菌介導法和基因槍法。無論是采用農(nóng)桿菌介導法和基因槍法都需要對花生葉片組織進行研磨，以便提取花生葉片組織中的花生dna。已有技術中，為提取花生葉片組織中的花生dna，通常采用研缽和缽杵相互配合在液氮中實現(xiàn)對花生葉片組織的研磨，研磨完成的花生葉片組織從研缽中轉移至相應的試管中進行花生葉片dna的提取。

由于已有技術中采用的是研缽和缽杵相互配合實現(xiàn)對花生葉片組織的研磨，大量的花生葉片組織研磨液大量粘連在研缽和缽杵，造成花生葉片組織液的浪費，當花生葉片組織較少時，更無法采用已有技術中的方法進行花生葉片dna的提取。如何減輕研磨過程對花生葉片組織的浪費，降低花生葉片dna的提取成本，已經(jīng)成為該領域亟待解決的技術難題。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明實施例提供一種用于提取dna的花生葉片組織研磨方法和裝置，旨在降低花生葉片組織研磨過程中對花生葉片組織的浪費，降低花生葉片dna的提取成本。

本發(fā)明提供的具體技術方案如下：

一方面，本發(fā)明實施例提供一種用于提取dna的花生葉片組織研磨方法，所述方法包括：

取0.1克~0.4克的新鮮花生葉片或者取0.01克~0.04克的干花生葉片，放置于離心管中，其中，所述新鮮花生葉片的含水率大于40%，干花生葉片的含水率小于20%，所述離心管為容積為1ml~2ml的帶密封蓋或壓蓋的管狀試樣容器；

將裝有所述新鮮花生葉片或者所述干花生葉片的所述離心管至于液氮中，所述液氮的溫度為零下196℃；

將100ul~300ul移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待所述移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將所述移液槍槍頭從所述酒精燈火焰的外焰部分移出，所述移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球，所述圓球的半徑為0.1mm~2mm；

將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s；

待裝有所述新鮮花生葉片或者所述干花生葉片的所述離心管在所述液氮中不再發(fā)出聲音時，將所述離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃的離心管板上，并從液氮中取出所述移液槍槍頭，將所述移液槍槍頭插入所述離心管中，利用所述移液槍槍頭尖端的圓球快速將所述離心管中的花生葉片搗碎，以便采用所述離心管進行提取花生葉片組織中dna的步驟。

可選的，所述取0.1克~0.4克的新鮮花生葉片或者取0.01克~0.04克的干花生葉片，放置于離心管中，具體為：

取0.2克的新鮮花生葉片或者取0.02克的干花生葉片，放置于離心管中，其中，所述離心管為尖底離心管，所述尖底離心管的底部內徑大于所述移液槍槍頭的尖端的圓球的直徑，所述尖底離心管的規(guī)格為1.5ml。

可選的，所述將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s，具體為：

將鑷子的尖端插入尖端為圓球的所述移液槍槍頭的內腔，以實現(xiàn)將所述鑷子卡在所述移液槍槍頭的內腔充當所述移液槍槍頭的手柄；

移動所述鑷子，將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~4s。

可選的，所述將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s，具體為：

將手柄插入尖端為圓球的所述移液槍槍頭的內腔，以實現(xiàn)將所述手柄卡在所述移液槍槍頭的內腔中，其中，所述手柄與所述移液槍槍頭的內腔相互配合實現(xiàn)將所述手柄卡在所述移液槍槍頭的內腔中，所述手柄為塑料手柄、木質手柄或金屬手柄中的一種；

移動所述手柄，將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~4s。

可選的，所述將100ul~300ul移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待所述移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將所述移液槍槍頭從所述酒精燈火焰的外焰部分移出，所述移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球，具體為：

將規(guī)格為200ul的移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待所述移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將所述移液槍槍頭從所述酒精燈火焰的外焰部分移出，所述移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球，其中，所述圓球的半徑為1.5mm。

可選的，所述將所述移液槍槍頭插入所述離心管中，利用所述移液槍槍頭尖端的圓球快速將所述離心管中的花生葉片搗碎，具體為：

將所述移液槍槍頭插入所述離心管中，所述移液槍槍頭尖端的圓球與所述離心管的底部往復性接觸和脫離；

通過所述移液槍槍頭尖端的圓球與所述離心管的底部之間的擠壓力，將所述離心管中的花生葉片組織搗碎，其中，搗碎后的所述花生葉片組織中無可視顆粒物。

另一方面，本發(fā)明實施例提供一種用于提取dna的花生葉片組織研磨裝置，所述裝置包括：

獲取模塊，用于取0.1克~0.4克的新鮮花生葉片或者取0.01克~0.04克的干花生葉片，放置于離心管中，其中，所述新鮮花生葉片的含水率大于40%，干花生葉片的含水率小于20%，所述離心管為容積為1ml~2ml的帶密封蓋或壓蓋的管狀試樣容器；

第一冷卻模塊，用于將裝有所述新鮮花生葉片或者所述干花生葉片的所述離心管至于液氮中，所述液氮的溫度為零下196℃；

第一處理模塊，用于將100ul~300ul移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待所述移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將所述移液槍槍頭從所述酒精燈火焰的外焰部分移出，所述移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球，所述圓球的半徑為0.1mm~2mm；

第二冷卻模塊，用于將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s；

第二處理模塊，用于待裝有所述新鮮花生葉片或者所述干花生葉片的所述離心管在所述液氮中不再發(fā)出聲音時，將所述離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃的離心管板上，并從液氮中取出所述移液槍槍頭，將所述移液槍槍頭插入所述離心管中，利用所述移液槍槍頭尖端的圓球快速將所述離心管中的花生葉片搗碎，以便采用所述離心管進行提取花生葉片組織中dna的步驟。

可選的，所述獲取模塊具體用于：

取0.2克的新鮮花生葉片或者取0.02克的干花生葉片，放置于離心管中，其中，所述離心管為尖底離心管，所述尖底離心管的底部內徑大于所述移液槍槍頭的尖端的圓球的直徑，所述尖底離心管的規(guī)格為1.5ml。

可選的，所述第二冷卻模塊具體用于：

將鑷子的尖端插入尖端為圓球的所述移液槍槍頭的內腔，以實現(xiàn)將所述鑷子卡在所述移液槍槍頭的內腔充當所述移液槍槍頭的手柄；

移動所述鑷子，將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~4s。

可選的，所述第二冷卻模塊具體用于：

將手柄插入尖端為圓球的所述移液槍槍頭的內腔，以實現(xiàn)將所述手柄卡在所述移液槍槍頭的內腔中，其中，所述手柄與所述移液槍槍頭的內腔相互配合實現(xiàn)將所述手柄卡在所述移液槍槍頭的內腔中，所述手柄為塑料手柄、木質手柄或金屬手柄中的一種；

移動所述手柄，將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~4s。

可選的，所述第一處理模塊具體用于：

將規(guī)格為200ul的移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待所述移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將所述移液槍槍頭從所述酒精燈火焰的外焰部分移出，所述移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球，其中，所述圓球的半徑為1.5mm。

可選的，所述第二處理模塊具體用于：

將所述移液槍槍頭插入所述離心管中，所述移液槍槍頭尖端的圓球與所述離心管的底部往復性接觸和脫離；

通過所述移液槍槍頭尖端的圓球與所述離心管的底部之間的擠壓力，將所述離心管中的花生葉片組織搗碎，其中，搗碎后的所述花生葉片組織中無可視顆粒物。

本發(fā)明的有益效果如下：

本發(fā)明實施例提供用于提取dna的花生組織研磨方法，通過酒精燈加熱將移液槍槍頭的尖端燒制成圓球，然后利用尖端燒制成圓球的移液槍槍頭與現(xiàn)有的離心管相配合，將經(jīng)液氮冷卻之后的花生葉片組織搗碎，以實現(xiàn)直接在該離心管中提取搗碎之后的花生葉片組織中的dna，相對于已有技術中采用研缽和缽杵相互配合的方式實現(xiàn)的花生葉片組織的搗碎，減輕了研磨過程對花生葉片組織的浪費，更加適合用于花生葉片組織較少時提取花生葉片組織dna；同時，相對于已有技術中使用自動化樣品研磨儀器，降低了花生葉片dna的提取成本和節(jié)約了花生葉片組織的使用量；由于本發(fā)明實施例的方法，在離心管中將花生葉片組織搗碎之后，不需要轉移搗碎之后的花生葉片組織即可實現(xiàn)對花生葉片組織dna的提取，避免了已有技術中研缽的使用和清洗工作，提高了花生葉片組織的利用率，同時節(jié)省了液氮的使用量，保證了花生葉片組織dna的提取效果，而且離心管和移液槍槍頭均是成本較低的試驗器常見器材，實現(xiàn)了花生葉片組織的快速、低成本搗碎，節(jié)省了試驗成本。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實施例中的技術方案，下面將對實施例描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發(fā)明實施例的一種用于提取dna的花生葉片組織研磨方法的方法流程示意圖；

圖2為本發(fā)明實施例的使用的尖端融化成為圓球的移液槍槍頭的結構示意圖；

圖3為本發(fā)明實施例的尖端融化成為圓球的移液槍槍頭與離心管相配合用于研磨花生葉片組織的示意圖；

圖4為本發(fā)明實施例的一種用于提取dna的花生葉片組織研磨裝置的結構框圖。

具體實施方式

為了使本發(fā)明的目的、技術方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結合附圖對本發(fā)明作進一步地詳細描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其它實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。

本發(fā)明的說明書和權利要求書及上述附圖中的術語“第一”、“第二”、“第三”、“第四”、“第五”、“第六”、“第七”和“第八”等（如果存在）是用于區(qū)別類似的對象，而不必用于描述特定的順序或先后次序。應該理解這樣使用的數(shù)據(jù)在適當情況下可以互換，以便這里描述的本發(fā)明的實施例例如能夠以除了在這里圖示或描述的那些以外的順序實施。

此外，術語“包括”和“具有”以及他們的任何變形，意圖在于覆蓋不排他的包含，例如，包含了一系列步驟或單元的過程、方法、系統(tǒng)、產(chǎn)品或設備不必限于清楚地列出的那些步驟或單元，而是可包括沒有清楚地列出的或對于這些過程、方法、產(chǎn)品或設備固有的其它步驟或單元。

為降低已有技術中花生葉片組織研磨過程中對花生葉片組織的浪費，降低花生葉片dna的提取成本，本發(fā)明實施例提供一種用于提取dna的花生葉片組織研磨方法和裝置，通過酒精燈加熱將移液槍槍頭的尖端燒制成圓球，然后利用尖端燒制成圓球的移液槍槍頭與現(xiàn)有的離心管相配合，將經(jīng)液氮冷卻之后的花生葉片組織搗碎，以實現(xiàn)直接在該離心管中提取搗碎之后的花生葉片組織中的dna，相對于已有技術中采用研缽和缽杵相互配合的方式實現(xiàn)的花生葉片組織的搗碎，減輕了研磨過程對花生葉片組織的浪費，更加適合用于花生葉片組織較少時提取花生葉片組織dna；同時，相對于已有技術中使用自動化樣品研磨儀器，降低了花生葉片dna的提取成本和節(jié)約了花生葉片組織的使用量；由于本發(fā)明實施例的方法，在離心管中將花生葉片組織搗碎之后，不需要轉移搗碎之后的花生葉片組織即可實現(xiàn)對花生葉片組織dna的提取，避免了已有技術中研缽的使用和清洗工作，提高了花生葉片組織的利用率，同時節(jié)省了液氮的使用量，保證了花生葉片組織dna的提取效果，而且離心管和移液槍槍頭均是成本較低的試驗器常見器材，實現(xiàn)了花生葉片組織的快速、低成本搗碎，節(jié)省了試驗成本。

下面將結合附圖1~附圖3對本發(fā)明實施例的用于提取dna的花生葉片組織研磨方法進行詳細的說明。

參考附圖1所示，本發(fā)明實施例的用于提取dna的花生葉片組織研磨方法包括如下步驟：

步驟110：取0.1克~0.4克的新鮮花生葉片或者取0.01克~0.04克的干花生葉片，放置于離心管中。

如果本發(fā)明實施例使用的是新鮮花生葉片，其中，新鮮花生葉片是從花生活體上摘取的花生葉片，新鮮花生葉片的含水率大于40%。在本發(fā)明實施例的用于提取dna的花生葉片組織研磨方法中，一次選取的新鮮花生葉片的重量可以在0.1克~0.4克之間；對于一次選取的新鮮花生葉片的具體重量，本發(fā)明實施例不做具體限定，只要在本發(fā)明實施例限定的范圍內即可。

其中，優(yōu)選的，本發(fā)明實施例選取的新鮮花生葉片的重量為0.1克~0.2克，這樣可以在保證本發(fā)明實施例的方法有效提取花生葉片組織的dna的同時，避免對試驗材料花生葉片的浪費，提高花生葉片的利用率和降低試驗成本。

如果本發(fā)明實施例使用的是干花生葉片，其中，干花生葉片是從曬干的花生本體上摘取的花生葉片，干花生葉片的含水率小于20%。在本發(fā)明實施例的用于提取dna的花生葉片組織研磨方法中，一次選取的干花生葉片的重量可以在0.01克~0.04克之間；對于一次選取的干花生葉片的具體重量，本發(fā)明實施例不做具體限定，只要在本發(fā)明實施例限定的范圍內即可。

其中，優(yōu)選的，本發(fā)明實施例選取的干花生葉片的重量為0.01克~0.02克，這樣可以在保證本發(fā)明實施例的方法有效提取花生葉片組織的dna的同時，避免對試驗材料干花生葉片的浪費，提高花生葉片的利用率和降低試驗成本。

需要說明的是，本發(fā)明實施例使用的離心管可以是容積為1ml~2ml的離心管，其中，該離心管為帶密封蓋或壓蓋的管狀試樣容器，屬于實驗室常見試驗器材；示例的，本發(fā)明實施例采用1ml尖底離心管或者1.5ml尖底離心管。

示例的，取0.2克的新鮮花生葉片或者取0.02克的干花生葉片，放置于1.5ml的尖底離心管的內腔201中，并且該尖底離心管的底部內徑大于移液槍槍頭的尖端的圓球的直徑。

步驟120：將裝有所述新鮮花生葉片或者所述干花生葉片的所述離心管至于液氮中。

將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進行冷卻，其中，液氮的溫度為零下196℃，由于液氮的溫度低，可以實現(xiàn)花生葉片和離心管的溫度的急速下降，避免花生葉片在冷卻的過程中花生葉片組織中的dna被破壞。

采用液氮對花生葉片進行冷卻，不僅可以避免花生葉片在冷卻的過程中花生葉片組織中的dna被破壞，而且還可以采用液氮對花生葉片進行快速冷卻之后，可以降低花生葉片的研磨難度，保證研磨過程不會破壞花生葉片組織中的dna的完整性。

步驟130：將100ul~300ul移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待所述移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將所述移液槍槍頭從所述酒精燈火焰的外焰部分移出，所述移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球。

其中，移液槍是移液器的一種，常用于實驗室少量或微量液體的移取，規(guī)格不同，不同規(guī)格的移液槍配套使用不同大小的槍頭，不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的形狀也略有不同，但工作原理及操作方法基本一致。

移液槍的量程范圍一般是0.1ul~5000ul，其中，不同量程范圍的移液槍使用不同的移液槍槍頭，示例的，本發(fā)明實施例可以選用量程為100ul~150ul的移液槍的槍頭，也可以選用量程為100ul~200ul的移液槍的槍頭，也可以選用量程為100ul~300ul的移液槍的槍頭。其中，優(yōu)選的，本發(fā)明實施例選用顏色為黃色的200ul的移液槍槍頭，選用200ul的移液槍槍頭與1.5ml的尖底離心管相配合，其中1.5ml的尖底離心管的大小和容積合適，并且200ul的移液槍槍頭的強度和長度也合適，并且兩者均是實驗室常用的儀器，成本均比較低，可以避免對試驗材料干花生葉片的浪費，提高花生葉片的利用率和降低試驗成本。

如圖2所示，首先，選一個容積為60ml或者150ml又或者200ml的酒精燈，將酒精燈點燃之后，待酒精燈燃燒一段時間之后，將100ul~300ul移液槍槍頭的尖端302置于酒精燈火焰的外焰部分進行加熱，加熱一段時間之后，移液槍槍頭的尖端302融化，融化產(chǎn)生的液體在移液槍槍頭的尖端302聚集。待移液槍槍頭的尖端302聚集的液體可以形成本發(fā)明所要求的圓球303之后，將100ul~300ul移液槍槍頭撤離酒精燈火焰的外焰部分，在空氣中冷卻之后，在移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成一個圓球303，示例的，如圖3所示，在移液槍槍頭的尖端302經(jīng)冷卻形成的圓球303的半徑為0.1mm~2mm。

需要說明的是，對于酒精燈燃燒多長時間才將移液槍槍頭至于酒精燈外焰進行加熱，本發(fā)明實施例不做具體限定，本領域技術人員可以根據(jù)實際需要進行選擇。同樣，對于移液槍槍頭至于酒精燈外焰的加熱時間，本發(fā)明實施例也不做具體限定，示例的，以本領域技術人員觀察到移液槍槍頭的尖端聚集的液體，可以在移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成一個半徑為0.1mm~2mm的圓球303為準。

經(jīng)酒精燈外焰加熱融化后的移液槍槍頭的尖端302，經(jīng)冷卻后在移液槍槍頭的尖端形成一個半徑為0.1mm~2mm的圓球303，其中，尖端帶有圓球的移液槍槍頭的一端是敞開的，另一端是密閉的，其中，敞開的一端用來安裝鑷子或者手柄。經(jīng)酒精燈外焰加熱后形成圓球的移液槍槍頭是密封的，可以避免用移液槍槍頭的尖端的圓球搗碎離心管中的花生葉片時，造成花生葉片組織液進入移液槍槍頭，有助于避免研磨過程對花生葉片組織造成浪費。

優(yōu)選的，本發(fā)明實施例將規(guī)格為200ul的移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將200ul的移液槍槍頭從酒精燈火焰的外焰部分移出，200ul的移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球，其中，該圓球的半徑為1.5mm。

步驟140：將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s。

將步驟130中制作的尖端帶有圓球的移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s，示例的，可以通過移液槍槍頭的大端301，在移液槍槍頭的內腔中安裝一個把手，用于將步驟130中制作的尖端302帶有圓球303的移液槍槍頭放置于液氮中進行冷卻。對于尖端為圓球的移液槍槍頭放置于液氮中的具體冷卻時間，本發(fā)明實施例不做具體限定，示例的，可以將尖端為圓球的移液槍槍頭放置于液氮中冷卻5s，保證尖端為圓球的移液槍槍頭溫度降低至零下20℃以下。

示例的，可以將手柄插入尖端為圓球的移液槍槍頭的內腔中，以實現(xiàn)將手柄卡在移液槍槍頭的內腔中，安裝的手柄用于將步驟130中制作的尖端帶有圓球的移液槍槍頭放置于液氮中進行冷卻；通過移動手柄，將尖端為圓球的移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s。需要說明的是，之所以在移液槍槍頭的內腔中安裝手柄，是為了避免將移液槍槍頭放置于液氮中進行冷卻時人手接觸到液氮，可以有效防止人手誤接觸到液氮而對人手造成凍傷。手柄為塑料手柄、木質手柄或金屬手柄中的一種，示例的，該手柄可以是特制的手柄，也可以是木棍，還可以是金屬桿等，其中，優(yōu)選的，該手柄為木質手柄或者塑料手柄，木質手柄和塑料手柄的導熱效果差，可以避免用戶將移液槍槍頭放置于液氮中進行冷卻時對用戶的手造成凍傷。

示例的，可以將鑷子的尖端插入尖端為圓球的移液槍槍頭的內腔中，以實現(xiàn)將鑷子卡在移液槍槍頭的內腔充當該移液槍槍頭的手柄，用于將步驟130中制作的尖端帶有圓球的移液槍槍頭放置于液氮中進行冷卻；通過移動鑷子，將尖端為圓球的移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~4s。需要說明的是，之所以將鑷子卡在移液槍槍頭的內腔充當該移液槍槍頭的手柄，是為了避免將移液槍槍頭放置于液氮中進行冷卻時人手接觸到液氮，可以有效防止人手誤接觸到液氮而對人手造成凍傷。

步驟150：待裝有所述新鮮花生葉片或者所述干花生葉片的所述離心管在所述液氮中不再發(fā)出聲音時，將所述離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃的離心管板上，并從液氮中取出所述移液槍槍頭，將所述移液槍槍頭插入所述離心管中，利用所述移液槍槍頭尖端的圓球快速將所述離心管中的花生葉片搗碎，以便采用所述離心管進行提取花生葉片組織中dna的步驟。

具體的，步驟120中將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進行冷卻，待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時，說明裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了接近液氮的溫度，即裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時，說明裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了零下196℃。

需要說明的是，裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進行冷卻，其冷卻的時間不能太長也不能太短，比如將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中冷卻的時間過長，將會由于冷凍時間過長導致花生葉片中的dna的完整性被破壞；如果將裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中冷卻的時間過短，將會提高花生葉片的研磨難度，不利于使用本發(fā)明實施例的花生葉片組織的研磨方法將花生葉片徹底研磨碎，不利于花生葉片組織dna的提取。本申請的發(fā)明人，經(jīng)過大量的試驗和研究之后，發(fā)現(xiàn)當裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管放置于液氮中進行冷卻，待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時，表明新鮮花生葉片或者干花生葉片在液氮中冷卻的溫度合適，即可保證花生葉片中dna的完整性，又降低了花生葉片的研磨難度。

其次，需要說明的是，由于不同的花生葉片，其含水率和導熱性質都不同，即不同的花生葉片在液氮中冷卻所需要的時間不同，因此，如何準確地控住花生葉片在液氮中冷卻的準確時間，是一直以來困擾本領域技術人員的亟待解決的技術難題。本發(fā)明的申請人經(jīng)過長期的實踐和大量的試驗之后發(fā)現(xiàn)，通過判斷花生葉片在液氮中冷卻時發(fā)出的聲音，可以準確判斷不同的花生葉片在液氮中冷卻所需要的準確時間，即裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在液氮中不再發(fā)出聲音時，表明裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了合適的溫度，此時將其取出進行研磨，可保證花生葉片中dna的完整性，又降低了花生葉片的研磨難度。

待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了零下196℃時，將離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃之間的離心管板上，并從液氮中取出移液槍槍頭，迅速將移液槍槍頭插入該離心管中，利用移液槍槍頭尖端的圓球快速將離心管中的花生葉片搗碎，待離心管中的新鮮花生葉片或者干花生葉片被搗碎之后，將移液槍槍頭從離心管中取出，然后將裝有搗碎的新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管轉移到其他的試驗裝置上，實現(xiàn)直接采用該離心管提取該離心管中的花生葉片組織中dna。

對于，采用該離心管內的搗碎的新鮮花生葉片或者干花生葉片提取花生葉片組織中dna的具體過程，本發(fā)明實施例在此不再累述，本領域技術人員可參考現(xiàn)有技術。

需要說明的是，離心管板需要提前進行降溫，保證離心管板的溫度降至零下20℃~零下30℃之間，這樣可以保證搗碎離心管內的新鮮花生葉片或者干花生葉片的過程中，離心管內的花生葉片組織不會溫度升高太多，可以保證花生葉片組織中的dna在花生葉片搗碎過程中，dna的完整性不會被破壞。

其次，需要說明的是，離心管板上設置有離心管安裝槽，可以將離心管固定在離心管安裝槽內，保證采用移液槍槍頭尖端的圓球快速將離心管中的花生葉片搗碎的過程中，裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管在離心管板上安裝牢靠。

具體的，待裝有新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管的溫度降到了零下196℃時，將離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃之間的離心管板上，然后將移液槍槍頭插入離心管中，然后移液槍槍頭尖端的圓球303與離心管的底部202往復性接觸和脫離；通過移液槍槍頭尖端的圓球303與離心管的底部202之間的擠壓力，將離心管中的花生葉片組織搗碎，其中，當離心管內的新鮮花生葉片或者干花生葉片搗碎至離心管內的花生葉片組織中無可視顆粒物，即可將移液槍槍頭從離心管中取出，然后將裝有搗碎的新鮮花生葉片或者干花生葉片的離心管轉移到其他的試驗裝置上，實現(xiàn)直接采用該離心管提取該離心管中的花生葉片組織中dna。

本發(fā)明實施例提供用于提取dna的花生組織研磨方法，通過酒精燈加熱將移液槍槍頭的尖端燒制成圓球，然后利用尖端燒制成圓球的移液槍槍頭與現(xiàn)有的離心管相配合，將經(jīng)液氮冷卻之后的花生葉片組織搗碎，以實現(xiàn)直接在該離心管中提取搗碎之后的花生葉片組織中的dna，相對于已有技術中采用研缽和缽杵相互配合的方式實現(xiàn)的花生葉片組織的搗碎，減輕了研磨過程對花生葉片組織的浪費，更加適合用于花生葉片組織較少時提取花生葉片組織dna；同時，相對于已有技術中使用自動化樣品研磨儀器，降低了花生葉片dna的提取成本和節(jié)約了花生葉片組織的使用量；由于本發(fā)明實施例的方法，在離心管中將花生葉片組織搗碎之后，不需要轉移搗碎之后的花生葉片組織即可實現(xiàn)對花生葉片組織dna的提取，避免了已有技術中研缽的使用和清洗工作，提高了花生葉片組織的利用率，同時節(jié)省了液氮的使用量，保證了花生葉片組織dna的提取效果，而且離心管和移液槍槍頭均是成本較低的試驗器常見器材，實現(xiàn)了花生葉片組織的快速、低成本搗碎，節(jié)省了試驗成本。

圖4為本發(fā)明實施例提供的一種用于提取dna的花生葉片組織研磨裝置的結構示意圖。如圖4所示，本發(fā)明實施例提供的一種用于提取dna的花生葉片組織研磨裝置包括：

獲取模塊401，用于取0.1克~0.4克的新鮮花生葉片或者取0.01克~0.04克的干花生葉片，放置于離心管中，其中，所述新鮮花生葉片的含水率大于40%，干花生葉片的含水率小于20%，所述離心管為容積為1ml~2ml的帶密封蓋或壓蓋的管狀試樣容器；

第一冷卻模塊402，用于將裝有所述新鮮花生葉片或者所述干花生葉片的所述離心管至于液氮中，所述液氮的溫度為零下196℃；

第一處理模塊403，用于將100ul~300ul移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待所述移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將所述移液槍槍頭從所述酒精燈火焰的外焰部分移出，所述移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球，所述圓球的半徑為0.1mm~2mm；

第二冷卻模塊404，用于將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~10s；

第二處理模塊405，用于待裝有所述新鮮花生葉片或者所述干花生葉片的所述離心管在所述液氮中不再發(fā)出聲音時，將所述離心管從液氮中取出放置于溫度為零下20℃~零下30℃的離心管板上，并從液氮中取出所述移液槍槍頭，將所述移液槍槍頭插入所述離心管中，利用所述移液槍槍頭尖端的圓球快速將所述離心管中的花生葉片搗碎，以便采用所述離心管進行提取花生葉片組織中dna的步驟。

進一步的，獲取模塊401具體用于：

取0.2克的新鮮花生葉片或者取0.02克的干花生葉片，放置于離心管中，其中，所述離心管為尖底離心管，所述尖底離心管的底部內徑大于所述移液槍槍頭的尖端的圓球的直徑，所述尖底離心管的規(guī)格為1.5ml。

進一步的，第二冷卻模塊404具體用于：

將鑷子的尖端插入尖端為圓球的所述移液槍槍頭的內腔，以實現(xiàn)將所述鑷子卡在所述移液槍槍頭的內腔充當所述移液槍槍頭的手柄；

移動所述鑷子，將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~4s。

進一步的，第二冷卻模塊404具體用于：

將手柄插入尖端為圓球的所述移液槍槍頭的內腔，以實現(xiàn)將所述手柄卡在所述移液槍槍頭的內腔中，其中，所述手柄與所述移液槍槍頭的內腔相互配合實現(xiàn)將所述手柄卡在所述移液槍槍頭的內腔中，所述手柄為塑料手柄、木質手柄或金屬手柄中的一種；

移動所述手柄，將尖端為圓球的所述移液槍槍頭放置于液氮中冷卻3s~4s。

進一步的，第一處理模塊403具體用于：

將規(guī)格為200ul的移液槍槍頭的尖端置于酒精燈火焰的外焰部分，待所述移液槍槍頭的尖端融化成為圓球之后，將所述移液槍槍頭從所述酒精燈火焰的外焰部分移出，所述移液槍槍頭的尖端經(jīng)冷卻形成圓球，其中，所述圓球的半徑為1.5mm。

進一步的，第二處理模塊405具體用于：

將所述移液槍槍頭插入所述離心管中，所述移液槍槍頭尖端的圓球與所述離心管的底部往復性接觸和脫離；

通過所述移液槍槍頭尖端的圓球與所述離心管的底部之間的擠壓力，將所述離心管中的花生葉片組織搗碎，其中，搗碎后的所述花生葉片組織中無可視顆粒物。

需要說明的是：上述實施例提供的用于提取dna的花生葉片組織研磨裝置，僅以上述各功能模塊的劃分進行舉例說明，實際應用中，可以根據(jù)需要而將上述功能分配由不同的功能模塊完成，即將設備的內部結構劃分成不同的功能模塊，以完成以上描述的全部或者部分功能。另外，上述實施例提供的用于提取dna的花生葉片組織研磨裝置與用于提取dna的花生葉片組織研磨方法實施例屬于同一構思，其具體實現(xiàn)過程詳見方法實施例，這里不再贅述。

本發(fā)明是參照根據(jù)本發(fā)明實施例的方法、設備（系統(tǒng)）、和計算機程序產(chǎn)品的流程圖和／或方框圖來描述的。應理解可由計算機程序指令實現(xiàn)流程圖和／或方框圖中的每一流程和／或方框、以及流程圖和／或方框圖中的流程和／或方框的結合?？商峁┻@些計算機程序指令到通用計算機、專用計算機、嵌入式處理機或其他可編程數(shù)據(jù)處理設備的處理器，使得通過該計算機或其他可編程數(shù)據(jù)處理設備的處理器執(zhí)行的指令可實現(xiàn)流程圖中的一個流程或多個流程和／或方框圖一個方框或多個方框中指定的功能。

這些計算機程序指令也可存儲在能引導計算機或其他可編程數(shù)據(jù)處理設備以特定方式工作的計算機可讀存儲器中，使得存儲在該計算機可讀存儲器中的指令產(chǎn)生包括指令裝置的制造品，該指令裝置實現(xiàn)在流程圖一個流程或多個流程和／或方框圖一個方框或多個方框中指定的功能。

這些計算機程序指令也可裝載到計算機或其他可編程數(shù)據(jù)處理設備上，使得在計算機或其他可編程設備上執(zhí)行一系列操作步驟以產(chǎn)生計算機實現(xiàn)的處理，從而在計算機或其他可編程設備上執(zhí)行的指令提供用于實現(xiàn)在流程圖的一個流程或多個流程和／或方框圖的一個方框或多個方框中指定的功能的步驟。

盡管已描述了本發(fā)明的優(yōu)選實施例，但本領域內的技術人員一旦得知了基本創(chuàng)造性概念，則可對這些實施例做出另外的變更和修改。所以，所附權利要求意欲解釋為包括優(yōu)選實施例以及落入本發(fā)明范圍的所有變更和修改。

顯然，本領域的技術人員可以對本發(fā)明實施例進行各種改動和變型而不脫離本發(fā)明實施例的精神和范圍。這樣，倘若本發(fā)明實施例的這些修改和變型屬于本發(fā)明權利要求及其等同技術的范圍之內，則本發(fā)明也意圖包含這些改動和變形在內。