本發(fā)明屬于合成化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種teixobactin及其制備方法。

背景技術(shù)：

在當(dāng)今抗生素領(lǐng)域，細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生速度比開發(fā)新抗生素的速度還要快，這使得耐藥性問題已經(jīng)成為了一個(gè)公共健康問題，迫切需要發(fā)現(xiàn)新型抗生素。大多數(shù)新型抗生素都是在土壤的微生物中獲得的，而這種方式依賴于微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，但99％的微生物在實(shí)驗(yàn)室條件下不可培養(yǎng)，可培養(yǎng)的這部分微生物到20世紀(jì)60年代已經(jīng)被充分研究，在其中發(fā)現(xiàn)新的抗生素已經(jīng)比較困難。顯然，99％不可培養(yǎng)的微生物是一個(gè)豐富抗生素的寶庫，其中有大量未被發(fā)現(xiàn)的化合物有望成為新一代的抗菌藥。2015年，美國東北大學(xué)kimlewis研究團(tuán)隊(duì)用一種稱為ichip的新裝置來分離和培養(yǎng)普通實(shí)驗(yàn)室條件下不可培養(yǎng)的細(xì)菌，從土壤中一種被命名為eleftheriaterrae的不可培養(yǎng)的革蘭氏陰性菌中分離得到一個(gè)分子量為1242的化合物，將其命名為teixobactin，進(jìn)一步結(jié)構(gòu)鑒定確定teixobactin有一個(gè)大環(huán)酯肽的結(jié)構(gòu)，總共含有11個(gè)氨基酸，包括非天然氨基酸l-allo-enduracididine(簡稱l-allo-end)，n-甲基-d-苯丙氨酸，以及其它三個(gè)d-氨基酸，結(jié)構(gòu)式如下式i所示：

teixobactin對測試的大多數(shù)致病菌，包括難治療的腸球菌、結(jié)核分枝桿菌在內(nèi)的最低抑菌濃度1μgml^-1以下，對艱難梭狀芽胞桿菌和炭疽桿菌的活性尤其好，最低抑菌濃度分別為5ngml^-1和20ngml^-1。teixobactin對金黃色葡萄球菌活性良好，對指數(shù)增長末期的細(xì)菌殺滅效果好于萬古霉素。進(jìn)一步研究表明teixobactin對肽聚糖合成有很強(qiáng)的抑制，但與dna、rna或蛋白質(zhì)沒有作用。長時(shí)間在低濃度teixobactin中培養(yǎng)金黃色葡萄球菌也不能得到有耐藥性的變異體，這也意味著teixobactin的靶點(diǎn)并非蛋白質(zhì)。研究表明，與萬古霉素一致，teixobactin的靶點(diǎn)是肽聚糖的前體lipidii，而非某個(gè)特定的蛋白質(zhì)，但對于耐萬古霉素的腸球菌(含有修飾的lipidii)，teixobactin仍有活性，顯示其仍可以結(jié)合這類修飾的lipidii。另外，teixobactin也可與革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁中另一種成分磷壁酸的前體lipidiii有效結(jié)合。

因?yàn)閠eixobactin在抗菌方面卓越的生物活性，也引起了合成化學(xué)家的興趣，許多課題組都對teixobactin及其類似物進(jìn)行了合成研究，但截止目前僅有兩個(gè)課題組完成了teixobactin的全合成。2016年payne課題組完成了teixobactin的固相全合成，首先用固相法合成了十一肽的關(guān)環(huán)前體，再在液相中完成關(guān)大環(huán)和脫保護(hù)反應(yīng)。li課題組合成設(shè)計(jì)將teixobactin分為大環(huán)片段和側(cè)鏈片段分別合成；其中，大環(huán)片段和側(cè)鏈片段的合成步驟中都涉及固相合成。除了上述全合成研究，多個(gè)課題組展開了對teixobactin分子的類似物合成研究。固相全合成teixobactin需要大量保護(hù)的氨基酸單體，分子中含有的非天然氨基酸l-allo-end大量制備有一定的困難，因而現(xiàn)有合成方法效率低，大多數(shù)課題組選擇將其換為易得的arg氨基酸來合成teixobactin的類似物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，提供一種teixobactin及其制備方法，通過該全新的液相合成方法，解決現(xiàn)有teixobactin固相合成困難、合成效率低的技術(shù)問題。

為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一方面，本發(fā)明提供一種teixobactin的制備方法，包括如下步驟：

利用式xvii所示的化合物與boc-l-ala進(jìn)行第一接肽反應(yīng)得到式vii所示的化合物；

利用式xviii所示的化合物與alloc-l-ser進(jìn)行第二接肽反應(yīng)，然后與fmoc-l-ile進(jìn)行酯化反應(yīng)得到式viii所示的化合物；

將式vii所示的化合物和式viii所示的化合物進(jìn)行第一縮合反應(yīng)并環(huán)化得到環(huán)片段式iii所示的化合物；

液相合成側(cè)鏈六肽式ii所示的化合物；

將式iii所示的化合物與式ii所示的化合物進(jìn)行第二縮合反應(yīng)再脫保護(hù)得到teixobactin雙鹽酸鹽；

其中，上述化合物結(jié)構(gòu)式如下：

另一方面，本發(fā)明還提供一種teixobactin化合物，其由上述teixobactin的制備方法合成。

本發(fā)明提供的teixobactin化合物，根據(jù)對teixobactin的逆合成分析，選擇d-thr8和l-ala9之間的酰胺鍵作為關(guān)環(huán)位點(diǎn)高效的合成了大環(huán)片段；側(cè)鏈六肽以“3+3”液相接肽方式合成；二個(gè)片段對接后最終經(jīng)脫保護(hù)和hplc純化得到天然產(chǎn)物teixobactin。這是teixobactin的首次液相全合成研究，液相全合成為天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)修飾奠定了基礎(chǔ)。

具體實(shí)施方式

為了使本發(fā)明要解決的技術(shù)問題、技術(shù)方案及有益效果更加清楚明白，以下結(jié)合實(shí)施例，對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。

對于teixobactin(式i)的逆合成分析如下所示。切斷l(xiāng)-ile6與l-ser7之間的酰胺鍵，可以將目標(biāo)分子分為六肽側(cè)鏈片段(式ii)和五肽大環(huán)片段(式iii)。其中六肽側(cè)鏈可以對稱性的分解為三肽(式iv)和三肽(式v)。

對于大環(huán)片段可選擇的關(guān)環(huán)位點(diǎn)包括d-thr8和l-ala9之間的酰胺鍵，l-ala9和l-allo-end10之間的酰胺鍵和l-allo-end10和l-ile11之間的酰胺鍵，或者l-ile11和d-thr8之間的酯鍵。本發(fā)明選擇d-thr8和l-ala9之間的酰胺鍵作為關(guān)大環(huán)的位點(diǎn)得到線性前體(式vi)，這樣首先避開了位阻較大的異亮氨酸，其次選擇在兩個(gè)不同構(gòu)型的氨基酸之間關(guān)環(huán)可以顯著提高效率。關(guān)環(huán)位點(diǎn)的羧基和氨基使用烯丙酯和alloc(即烯丙氧羰基)保護(hù)，可以在pd(ph3p)4/et2nh條件下同時(shí)脫除再關(guān)環(huán)；也可以選用叔丁酯和boc(即叔丁氧羰基)，關(guān)環(huán)反應(yīng)之前用三氟乙酸處理脫除。五肽關(guān)環(huán)前體通過“2+3”接肽反應(yīng)得到。因l-allo-end較難合成，因而將其放在二肽片段式vii中，以減少該片段合成的線性步驟。另外一個(gè)三肽片段則是化合物式viii。

一方面，本發(fā)明實(shí)施例提供了一種teixobactin的制備方法，包括如下步驟：

s01：利用式xvii所示的化合物與boc-l-ala進(jìn)行第一接肽反應(yīng)得到式vii所示的化合物；

s02：利用式xviii所示的化合物與alloc-l-ser進(jìn)行第二接肽反應(yīng)，然后與fmoc-l-ile進(jìn)行酯化反應(yīng)得到式viii所示的化合物；

s03：將式vii所示的化合物和式viii所示的化合物進(jìn)行第一縮合反應(yīng)并環(huán)化得到環(huán)片段式iii所示的化合物；

s04：液相合成側(cè)鏈六肽式ii所示的化合物；

s05：將式iii所示的化合物與式ii所示的化合物進(jìn)行第二縮合反應(yīng)再脫保護(hù)得到teixobactin雙鹽酸鹽；

其中，上述化合物結(jié)構(gòu)式如下：

本發(fā)明提供的teixobactin化合物，根據(jù)對teixobactin的逆合成分析，選擇d-thr8和l-ala9之間的酰胺鍵作為關(guān)環(huán)位點(diǎn)高效的合成了大環(huán)片段；側(cè)鏈六肽以“3+3”液相接肽方式合成；二個(gè)片段對接后最終經(jīng)脫保護(hù)和hplc純化得到天然產(chǎn)物teixobactin。這是teixobactin的首次液相全合成研究，液相全合成為天然產(chǎn)物結(jié)構(gòu)修飾奠定了基礎(chǔ)。

具體地，上述步驟s01中，式xvii所示的化合物的合成過程包括：對式ix所示的化合物的二級羥基進(jìn)行tbs保護(hù)，得到式x所示的化合物；將式x所示的化合物的氮原子鄰位的亞甲基氧化為羰基，得到式xi所示的化合物；將式xi所示的化合物的開環(huán)生成式xii所示的化合物，然后依次進(jìn)行光延反應(yīng)、三甲基膦還原、cbz保護(hù)的胍基化、脫tbs保護(hù)、分子內(nèi)sn2反應(yīng)，得到式xvii所示的化合物。優(yōu)選地，首先用tbs(即叔丁基二甲基硅基)保護(hù)式ix所示的化合物的二級羥基得到式x所示的化合物，再以ruo2水合物催化氧化氮原子鄰位亞甲基為羰基得到內(nèi)酰胺化合物(式xi所示的化合物)，該反應(yīng)可以在10-20g規(guī)模進(jìn)行。該內(nèi)酰胺化合物在氮原子上有一個(gè)boc保護(hù)，可以看作是活化的普通酰胺，可以在硼氫化鈉/乙醇/緩沖溶液)的作用下開環(huán)；其中，緩沖溶液的ph＝7，本發(fā)明一實(shí)施例中優(yōu)選緩沖溶液為pbs磷酸鹽緩沖溶液，包含na2hpo4/nah2po4，在該優(yōu)選條件下反應(yīng)規(guī)模可達(dá)到5-10g。該反應(yīng)依賴于反應(yīng)體系的ph值，本實(shí)施例中還原中tbs基團(tuán)發(fā)生了遷移得到式xii所示的化合物，并利用mitsunobu反應(yīng)(光延反應(yīng))將二級羥基轉(zhuǎn)化為疊氮基團(tuán)，同時(shí)翻轉(zhuǎn)手性中心，粗產(chǎn)物直接用三甲基膦還原，將疊氮轉(zhuǎn)化為氨基產(chǎn)物即式xiii所示的化合物，式xiii所示的化合物與式xiv所示的胍基化試劑反應(yīng)將氨基轉(zhuǎn)化為cbz(即芐氧羰基)保護(hù)的胍基得式xv所示的化合物，tbaf(即四丁基氟化銨)脫去tbs保護(hù)得到一級醇化合物式xvi所示的化合物。用甲磺酰氯將一級羥基轉(zhuǎn)化為易離去的甲磺酸酯，分子內(nèi)sn2反應(yīng)關(guān)上五元環(huán)得到非天然氨基酸式xvii所示的化合物。作為一個(gè)具體實(shí)施例，通過式ix所示的化合物制備得到式xii所示的化合物的具體反應(yīng)流程、化學(xué)反應(yīng)式如下所示，整個(gè)過程以8步反應(yīng)、32％總產(chǎn)率合成。

具體地，在上述步驟s01中，第一接肽反應(yīng)過程包括：將式xvii所示的化合物酸性條件下脫除boc和叔丁酯得到第一中間體；將第一中間體在鹽酸/甲醇條件下甲酯化得到第二中間體；將第二中間體再與boc-l-ala在pyaop條件下接肽得式vii所示的化合物，pyaop即為(3h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧基)三-1-吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽。作為一個(gè)具體實(shí)施例，通過式xvii所示的化合物制備得到式vii所示的化合物的具體反應(yīng)流程、化學(xué)反應(yīng)式如下所示。

具體地，在上述步驟s02中，式viii所示的化合物的合成過程包括：先將式xviii所示的化合物與alloc-l-ser進(jìn)行第二接肽反應(yīng)后，用tbs選擇性保護(hù)一級羥基得到式xx所示的化合物，然后其二級羥基與fmoc-l-ile酯化反應(yīng)得到式viii所示的化合物。即d-蘇氨酸叔丁酯(式xviii所示的化合物)與alloc-l-ser接肽得到二肽即式xix所示的化合物，tbs選擇性保護(hù)一級羥基得到式xx所示的化合物，二級羥基與fmoc-l-ile接酯鍵得到式viii所示的化合物。具體過程如下。作為一個(gè)具體實(shí)施例，通過式xviii所示的化合物制備得到式viii所示的化合物的具體反應(yīng)流程、化學(xué)反應(yīng)式如下所示。

具體地，在上述步驟s03中，式iii所示的化合物的合成過程包括：對式viii所示的化合物用二乙胺脫除fmoc(即笏甲氧羰基)保護(hù)得式xxi所示的化合物；對式vii所示的化合物用lioh水解甲酯得式xxii所示的化合物；將式xxi所示的化合物和式xxii所示的化合物在pyaop作用下縮合，再脫除boc、叔丁酯和tbs，最后關(guān)環(huán)得式iii所示的化合物。更進(jìn)一步地，式xxi所示的化合物與式xxii所示的化合物，二者在pyaop作用下縮合得到保護(hù)基調(diào)整后的關(guān)環(huán)前體式vi所示的化合物，該關(guān)環(huán)前體在三氟乙酸作用下同時(shí)脫除boc、叔丁酯和tbs，并在hatu條件下以75％產(chǎn)率得到大環(huán)片段式iii所示的化合物；其中，hatu為2-(7-氧化苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯，是一種常用多肽縮合試劑。作為一個(gè)具體實(shí)施例，通過式viii所示的化合物和式vii所示的化合物制備得到式iii所示的化合物的具體反應(yīng)流程、化學(xué)反應(yīng)式如下所示。

具體地，上述步驟s04中，液相合成側(cè)鏈六肽片段式ii所示的化合物過程為：用側(cè)鏈trt(即三苯基甲基)保護(hù)的cbz-d-gln和d-allo-異亮氨酸甲酯縮合得到式xxiv所示的化合物，然后用lioh水解甲酯再與l-異亮氨酸甲酯縮合得到式v所示的化合物；cbz-n-me-d-苯丙氨酸式和l-異亮氨酸甲酯縮合得到式xxvi所示的化合物，然后用lioh水解甲酯再與l-絲氨酸甲酯縮合，并用tbs保護(hù)游離羥基，得到式iv所示的化合物；將式v所示的化合物和式iv所示的化合物縮合得到式ii所示的化合物。六肽的n-端使用cbz保護(hù)，而c-端用甲酯保護(hù)策略，d-谷氨酰胺側(cè)鏈上的酰胺基團(tuán)用trt保護(hù)，絲氨酸的羥基以tbs保護(hù)。上述保護(hù)基之間相互正交，可以方便的選擇性脫除。三肽式v所示的化合物用二氯化鈀/氫氣條件脫除cbz后得到氨基(式xxvii所示的化合物)，水解三肽片段式iv所示的化合物中的甲酯得到羧酸(式xxviii所示的化合物)。作為一個(gè)具體實(shí)施例，制備式ii所示的化合物具體反應(yīng)流程、化學(xué)反應(yīng)式如下所示。式xxvii與式xxviii縮合可以以46％產(chǎn)率得到六肽片段式ii所示的化合物，進(jìn)一步水解c-端甲酯得到羧酸式xxix所示的化合物，為后續(xù)接肽做好準(zhǔn)備。

具體地，上述步驟s05中，第二縮合反應(yīng)過程如下：式iii所示的化合物脫alloc保護(hù)，式ii所示的化合物水解c-端甲酯，然后兩者縮合得到式xxx所示化合物；將式xxx所示化合物經(jīng)脫保護(hù)、hplc分離、稀鹽酸凍干得到teixobactin的雙鹽酸鹽。優(yōu)選地，在完成大環(huán)和側(cè)鏈片段的合成后，用四(三苯基膦)鈀/二乙胺的條件脫除大環(huán)片段式iii所示的化合物的alloc保護(hù)基，并與側(cè)鏈羧酸式xxix所示的化合物縮合得到式xxx所示化合物。為了進(jìn)行最后的脫保護(hù)，首先酸性的二氯化鈀/氫氣條件下可脫除三個(gè)cbz和tbs。但該條件酸性較弱，無法脫除trt。trt保護(hù)基在三氟乙酸/三異丙基硅烷的條件下被脫除。式xxx所示化合物粗產(chǎn)物經(jīng)hplc分離得到天然產(chǎn)物teixobactin的雙三氟乙酸鹽，再用稀鹽酸重復(fù)凍干三次得到teixobactin雙鹽酸鹽，作為一個(gè)具體實(shí)施例，通過式iii所示的化合物制備得到teixobactin雙鹽酸鹽的具體反應(yīng)流程、化學(xué)反應(yīng)式如下所示。

天然產(chǎn)物teixobactin與合成樣品teixobactin的1hnmr數(shù)據(jù)對比如表1。

表1

另一方面，本發(fā)明實(shí)施例還提供了一種teixobactin化合物，其由上述teixobactin的制備方法合成。

另外，如果沒有特別說明，本實(shí)施例中所有試劑都是從試劑公司購得，未經(jīng)任何純化處理直接使用，所有反應(yīng)是在氮?dú)獗Ｗo(hù)下的無水條件下進(jìn)行操作。試劑和溶劑純化參照purificationoflaboratorychemicals(w.l.f.armarego,christinalilinchai,elsevierinc.2009)。溶劑使用前均重蒸。四氫呋喃用鈉-二苯甲酮體系處理，二氯甲烷和二甲基甲酰胺用氫化鈣處理，甲醇用鎂屑處理。反應(yīng)通過tlc監(jiān)測，使用的薄層硅膠板采用gf254(60-f250，0.2mm，青島海洋化工廠)，用uv(波長254nm)或碘顯色，或者用磷鉬酸、茚三酮溶液浸泡，然后加熱顯色。快速柱層析用青島海洋硅膠60(230-400meshastm)或者e.merck硅膠60(230-400meshastm)。一般使用乙酸乙酯和正己烷作為淋洗劑，操作中采用的比例為二者的體積比。¹hnmr和¹³cnmr采用brükeravance-500(¹h:500mhz,¹³c:125mhz)核磁共振儀測定，氘代試劑一般使用氘代氯仿，溶劑殘留峰：δ-h＝7.26ppm，δ-c＝77.0ppm；高分辨質(zhì)譜由abiq-starelite高分辨質(zhì)譜儀測定，使用esi條件。旋光值由rudolphautopoli型旋光儀測定(波長589nm，樣品池長100mm，溫度20℃)，數(shù)據(jù)記錄格式：濃度(c單位為g/100ml，溶劑)。

本發(fā)明先后進(jìn)行過多次試驗(yàn)，現(xiàn)舉一部分試驗(yàn)結(jié)果作為參考對發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)描述，下面結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)說明。

實(shí)施例1化合物式xvii合成

將化合物式ix(9.47g,33.0mmol,1.0equiv.)溶解于二氯甲烷(200ml)中，冷卻到0℃后，依次加入咪唑(5.53g,82.5mmol,2.5equiv.)，tbscl(7.46g,49.5mmol,1.5equiv.)和dmap(0.40g,3.3mmol,0.1equiv.)，室溫反應(yīng)5h。反應(yīng)用飽和氯化銨溶液(100ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×100ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(200ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到無色油狀液體，即化合物式x(12.73g,96％)。rf＝0.18(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/20)；[α]d²⁰＝-44.2(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ4.44–4.35(m,1h),4.30–4.14(m,1h),3.63–3.50(m,1h),3.39–3.22(m,1h),2.21–2.07(m,1h),2.03–1.93(m,1h),1.47–1.38(m,18h),0.86(s,9h),0.04(s,3h),0.04(s,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ172.20,172.12,154.41,154.01,80.93,80.89,79.78,79.57,70.36,69.55,58.73,58.53,54.59,54.25,39.77,38.83,28.39,28.31,27.98,27.94,25.70,17.98,-4.85,-4.89,-4.93ppm；hrms(m/z):calculatedforc20h39no5sina⁺[m+na]⁺:424.2490,found424.2490。

將高碘酸鈉(1.87g,8.72mmol,3.5equiv.)溶解于水(20ml)中，再加入二氧化釕水合物(85mg,～0.63mmol,～0.25equiv.)，得到黃色溶液，化合物式x(1.00g,2.49mmol,1.0equiv.)溶解于乙酸乙酯(10ml)中，并加入到上述溶液中，室溫反應(yīng)12h。分液后，水相用乙酸乙酯(3×20ml)萃取，合并有機(jī)相，依次用飽和亞硫酸鈉溶液(50ml)和飽和食鹽水(50ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色固體，即化合物式xi(0.80g,77％)。rf＝0.18(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/20)；[α]d²⁰＝+36.0(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ4.46–4.36(m,2h),2.31(ddd,j＝13.0,8.3,1.5hz,1h),2.16(dt,j＝13.1,9.9hz,1h),1.50(s,9h),1.47(s,9h),0.89(s,9h),0.16(s,3h),0.12(s,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ172.05,170.20,149.46,83.47,82.40,69.73,55.88,32.16,27.91,25.68,18.24,-4.50,-5.34ppm；hrms(m/z):calculatedforc20h37no6sina⁺[m+na]⁺:438.2282,found438.2282。

將化合物式xi(5.00g,12.0mmol,1.0equiv.)溶解于乙醇(50ml)中，加入磷酸鹽緩沖液(ph＝7.0,25ml)，冷卻到0℃后加入硼氫化鈉(1.82g,48.0mmol,4.0equiv.)，室溫反應(yīng)3h。減壓旋蒸除去乙醇，水相用乙酸乙酯(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，依次用飽和氯化銨溶液(100ml)和飽和食鹽水(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到無色油狀液體，即化合物式xii(3.48g,69％)。rf＝0.36(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/10)；[α]d²⁰＝+18.2(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ5.40(d,j＝7.4hz,1h),4.24–4.14(m,1h),3.77(ddt,j＝8.5,5.9,4.2hz,1h),3.59(dd,j＝10.0,4.1hz,1h),3.48(dd,j＝10.0,6.2hz,1h),2.01–1.88(m,1h),1.84–1.73(m,1h),1.44(s,9h),1.42(s,9h),0.88(s,9h),0.05(s,3h),0.05(s,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ171.67,155.47,81.74,79.59,69.06,66.54,52.03,35.60,28.31,27.94,25.84,18.22,-5.41,-5.44ppm；hrms(m/z):calculatedforc20h41no6sina⁺[m+na]⁺:442.2595,found442.2598.

將化合物式xii(3.76g,8.97mmol,1.0equiv.)溶解于四氫呋喃(50ml)中，冷卻到0℃，依次逐滴加入三苯基膦(3.53g,13.46mmol,1.5equiv.)，dead(2.11ml,13.46mmol,1.5equiv.)和dppa(2.89ml,13.46mmol,1.5equiv.)，室溫反應(yīng)2h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)淬滅，分液后，水相用乙酸乙酯(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到淺黃色油狀液體(疊氮化產(chǎn)物與一些不可分離的雜質(zhì))。該液體直接溶解在四氫呋喃/水(50ml/5ml)中，冷卻到0℃，逐滴加入三甲基膦溶液(1.0m,17.94ml,17.94mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)3h。減壓旋蒸除去三甲基膦和四氫呋喃，水相用乙酸乙酯(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到無色油狀液體，即化合物式xiii(2.86g,兩步76％)。rf＝0.33(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/1)；[α]d²⁰＝-0.6(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ5.88(d,j＝8.6hz,1h),4.31–4.23(m,1h),3.44(dd,j＝9.8,4.6hz,1h),3.35(dd,j＝9.8,6.5hz,1h),2.88–2.79(m,1h),1.68–1.58(m,2h),1.41(s,9h),1.39(s,9h),0.84(s,9h),0.00(s,6h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ172.15,155.78,81.51,79.36,68.53,52.12,50.08,36.53,28.29,27.96,25.84,18.22,-5.42,-5.45ppm；hrms(m/z):calculatedforc20h42n2o5sih⁺[m+h]⁺:419.2936,found419.2934.

將化合物式xiii(300mg,0.718mmol,1.0equiv.)溶解于乙腈(10ml)中，加入化合物式xiv(543mg,1.436mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)3h。直接濃縮后硅膠柱層析分離得到無色油狀液體，即化合物式xv(491mg,94％)。rf＝0.45(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/10)；[α]d²⁰＝-31.0(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ11.69(s,1h),8.65(d,j＝8.4hz,1h),7.41–7.27(m,10h),5.55(d,j＝8.0hz,1h),5.18(q,j＝12.0hz,2h),5.12(d,j＝2.6hz,2h),4.40–4.29(m,1h),4.04(s,1h),3.74–3.61(m,2h),2.17–2.05(m,1h),1.97–1.87(m,1h),1.46(s,9h),1.40(s,9h),0.92(s,9h),0.06(s,3h),0.06(s,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ171.36,163.62,155.72,155.23,153.49,136.90,134.73,128.69,128.61,128.32,127.84,127.75,81.71,79.36,68.09,66.95,64.26,51.98,49.50,33.69,28.27,27.95,25.81,18.19,-5.57,-5.59ppm；hrms(m/z):calculatedforc37h56n4o9sih⁺[m+h]⁺:729.3889,found729.3884.

將化合物式xv(4.34g,5.96mmol,1.0equiv.)溶解于四氫呋喃(50ml)中，冷卻到0℃，逐滴加入tbaf溶液(1.0m,11.92ml,11.92mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)5h。反應(yīng)液用乙酸乙酯(200ml)稀釋，用飽和食鹽水(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色泡沫，即化合物式xvi(3.26g,89％)。rf＝0.36(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/2)；[α]d²⁰＝+1.6(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ11.72(s,1h),8.67(d,j＝7.8hz,1h),7.40–7.24(m,10h),5.50(d,j＝7.7hz,1h),5.18(s,2h),5.08(s,2h),4.29–4.20(m,1h),4.17–4.08(m,1h),3.72(ddd,j＝31.2,11.4,3.7hz,2h),2.16–2.04(m,1h),1.95–1.86(m,1h),1.45(s,9h),1.40(s,9h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ171.21,163.37,156.15,155.53,153.62,136.66,134.63,128.74,128.66,128.47,128.37,127.99,127.88,82.41,79.86,68.23,67.00,64.18,51.28,50.57,33.91,28.27,27.90ppm；hrms(m/z):calculatedforc31h42n4o9h⁺[m+h]⁺:615.3025,found615.3027.

將化合物式xvi(2.36g,3.84mmol,1.0equiv.)溶解于二氯甲烷(20ml)中，冷卻到0℃，依次逐滴加入二異丙基乙基胺(2.01ml,11.52mmol,3.0equiv.)和甲磺酰氯(0.36ml,4.61mmol,1.2equiv.)，室溫反應(yīng)2h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色泡沫，即化合物式xvii(2.24g,98％)。rf＝0.35(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/2)；[α]d²⁰＝-17.2(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ9.27(s,1h),7.55–7.19(m,10h),5.38(d,j＝18.7hz,1h),5.26(s,2h),5.18(s,2h),4.35–4.21(m,1h),4.07–3.89(m,2h),3.61–3.51(m,1h),2.15–2.01(m,1h),1.77–1.63(m,1h),1.45(s,9h),1.43(s,9h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ170.74,170.01,155.77,151.08,150.90,136.69,135.27,128.55,128.31,128.26,128.15,128.06,127.79,82.89,80.28,68.30,67.28,51.46,49.62,42.42,39.81,28.28,27.97ppm；hrms(m/z):calculatedforc31h40n4o8h⁺[m+h]⁺:597.2919,found597.2911.

實(shí)施例2化合物式vii合成

將化合物式xvii(540mg,0.91mmol,1.0equiv.)溶解于水/三氟乙酸(0.5ml/10ml)中，反應(yīng)6h。減壓旋蒸除去溶劑，得到氨基酸粗產(chǎn)品。在0℃下，將乙酰氯(2ml)逐滴加入甲醇(10ml)，并將上一步得到的氨基酸粗產(chǎn)品溶解在甲醇(2ml)中逐滴加入，室溫反應(yīng)12h。減壓旋蒸除去溶劑，得到甲酯粗產(chǎn)品。將甲酯粗產(chǎn)品溶解于二氯甲烷(20ml)中，依次加入boc-l-ala(344mg,1.82mmol,2.0equiv.)，二異丙基乙基胺(0.63ml,3.64mmol,4.0equiv.)和pyaop(1.42g,2.73mmol,3.0equiv.)，室溫反應(yīng)12h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×20ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(50ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色泡沫，即化合物式vii(379mg,67％)。rf＝0.43(silica,乙酸乙酯/正己烷＝2/1)；[α]d²⁰＝-63.4(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.44–7.24(m,10h),5.47–5.27(m,1h),5.22(s,2h),5.18(s,2h),4.84–4.72(m,1h),4.31–4.09(m,1h),4.07–3.98(m,1h),3.94(t,j＝9.8hz,1h),3.73(s,3h),3.54–3.41(m,1h),2.15–1.75(m,2h),1.46–1.39(m,9h),1.36(d,j＝7.1hz,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ174.59,173.65,171.62,171.47,155.53,136.83,134.95,128.66,128.58,128.39,128.35,128.21,127.93,127.77,80.33,79.79,68.45,67.63,67.30,50.24,28.68,28.36,27.94,18.54ppm；hrms(m/z):calculatedforc31h39n5o9na⁺[m+na]⁺:648.2640,found648.2654.

將化合物式vii(330mg,0.53mmol,1.0equiv.)溶解于四氫呋喃(5ml)中，lioh·h2o(33mg,0.79mmol,1.5equiv.)溶解于水(5ml)中，并逐滴加入底物的四氫呋喃溶液中，室溫反應(yīng)1h。減壓旋蒸除去四氫呋喃，水相用1.0m鹽酸酸化至ph＝2，并用乙酸乙酯(3×20ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后得到化合物式xxii粗產(chǎn)物，不需要純化，直接用于下一步。

實(shí)施例3化合物式viii合成

將化合物式xviii(570mg,3.26mmol,1.0equiv.)溶解于二氯甲烷(50ml)中，依次加入alloc-l-ser(616mg,3.26mmol,1.0equiv.)，二異丙基乙基胺(1.70ml,9.78mmol,3.0equiv.)和edci(1.25g,6.52mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)12h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色泡沫，即化合物式xix(790mg,70％)。rf＝0.24(silica,乙酸乙酯/正己烷＝2/1)；[α]d²⁰＝-16.4(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.39(d,j＝8.9hz,1h),6.18(d,j＝7.7hz,1h),5.93–5.81(m,1h),5.28(dq,j＝17.3,1.6hz,1h),5.18(dq,j＝10.3,1.3hz,1h),4.55(d,j＝5.6hz,2h),4.44(dd,j＝8.9,3.4hz,1h),4.36(s,1h),4.23(q,j＝5.3,4.7hz,1h),3.96(dd,j＝11.3,4.2hz,1h),3.76–3.68(m,1h),1.44(s,9h),1.20(d,j＝6.4hz,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ171.28,169.96,156.38,132.45,117.94,82.76,68.19,66.06,63.07,58.57,56.31,27.96,20.08ppm；hrms(m/z):calculatedforc15h26n2o7na⁺[m+na]⁺:369.1632,found369.1630.

將化合物式xix(1.37g,3.96mmol,1.0equiv.)溶解于二氯甲烷(25ml)中，加入咪唑(531mg,7.92mmol,2.0equiv.)，將tbscl(718mg,4.75mmol,1.2equiv.)溶解于二氯甲烷(25ml)中，在0℃下，加入上述溶液，室溫反應(yīng)2h。反應(yīng)用飽和氯化銨溶液(50ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到無色油狀液體，即化合物式xx(1.22g,67％)。rf＝0.45(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/2)；[α]d²⁰＝+18.6(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.09(d,j＝8.8hz,1h),5.94–5.83(m,1h),5.71(d,j＝6.9hz,1h),5.28(dd,j＝17.2,1.5hz,1h),5.18(dd,j＝10.4,1.3hz,1h),4.55(d,j＝5.7hz,2h),4.45(dd,j＝8.7,3.0hz,1h),4.27–4.17(m,2h),4.05–3.98(m,1h),3.72(dd,j＝10.0,6.2hz,1h),2.52(s,1h),1.44(s,9h),1.16(d,j＝6.4hz,3h),0.85(s,9h),0.05(s,6h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ170.34,169.57,156.02,132.48,117.92,82.41,68.33,65.95,63.25,57.96,56.33,27.95,25.78,19.93,18.18,-5.51,-5.57ppm；hrms(m/z):calculatedforc21h40n2o7sina⁺[m+na]⁺:483.2497,found483.2494.

將化合物式xx((1.22g,2.65mmol,1.0equiv.)溶解于二氯甲烷(20ml)中，依次加入fmoc-l-ile(1.12g,3.18mmol,1.2equiv.)，edci(1.27g,6.63mmol,2.5equiv.)和dmap(32mg,0.265mmol,0.1equiv.)，室溫反應(yīng)5h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×20ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色泡沫，即化合物式viii(1.22g,67％)。rf＝0.30(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/5)；[α]d²⁰＝-21.6(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.77(d,j＝7.6hz,2h),7.62(t,j＝7.5hz,2h),7.40(td,j＝7.3,1.9hz,2h),7.32(tt,j＝7.5,1.6hz,2h),7.04(d,j＝9.2hz,1h),5.96–5.85(m,1h),5.66(s,1h),5.44(qd,j＝6.4,2.8hz,1h),5.37(d,j＝9.2hz,1h),5.31(dq,j＝17.2,1.6hz,1h),5.22(dq,j＝10.4,1.4hz,1h),4.70(dd,j＝9.2,2.8hz,1h),4.60(d,j＝5.7hz,2h),4.45(dd,j＝10.6,7.3hz,1h),4.36(dd,j＝10.6,6.9hz,1h),4.33–4.26(m,1h),4.23(t,j＝7.0hz,1h),4.08(dd,j＝10.1,3.7hz,1h),3.77(dd,j＝10.0,5.9hz,1h),1.94–1.80(m,2h),1.44(s,9h),1.29(d,j＝6.4hz,3h),1.22–1.10(m,1h),0.97–0.92(m,6h),0.89(s,9h),0.08(s,6h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ170.46,168.02,155.98,143.97,143.81,141.31,132.46,127.68,127.05,125.08,119.95,118.07,82.93,71.75,67.04,66.10,63.15,58.86,55.94,47.27,37.80,27.93,25.83,24.71,18.24,17.16,15.39,11.47,-5.45,-5.53ppm；hrms(m/z):calculatedforc42h61n3o10sina⁺[m+na]⁺:818.4018,found818.4015.

將化合物式viii(400mg,0.50mmol,1equiv.)溶解于二氯甲烷(5ml)中，加入二乙胺(2.5ml)，室溫反應(yīng)6h。減壓旋蒸除去溶劑，用油泵抽1h，化合物式xxi粗產(chǎn)物不需要純化，直接用于下一步。

實(shí)施例4大環(huán)片段化合物式iii合成

將上面得到的化合物式xxi和化合物式xxii溶解于二氯甲烷中，依次加入二異丙基乙基胺(0.44ml,2.50mmol,5.0equiv.)，pyaop(521mg,1.00mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)12h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(50ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(100ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色泡沫，即化合物式vi(298mg,51％)。rf＝0.38(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/1)。¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ9.74(s,1h),9.65(s,1h),8.31(d,j＝9.8hz,1h),7.43–7.29(m,10h),7.25(d,j＝12.1hz,1h),6.38(s,1h),5.98–5.85(m,1h),5.51–5.39(m,1h),5.35–5.24(m,1h),5.22–5.13(m,4h),4.85–4.68(m,3h),4.63–4.48(m,3h),4.37(dd,j＝7.9,3.8hz,1h),4.19(t,j＝7.2hz,1h),4.13–4.02(m,2h),3.96(t,j＝10.0hz,2h),3.38–3.28(m,1h),2.48(d,j＝13.8hz,1h),2.34–2.15(m,1h),1.97–1.84(m,1h),1.80–1.70(m,1h),1.69–1.57(m,1h),1.44(d,j＝7.1hz,3h),1.40(s,9h),1.34(s,9h),1.23(d,j＝6.6hz,3h),0.94–0.89(m,6h),0.84(s,9h),0.01(s,3h),0.01(s,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ175.39,174.76,170.91,170.85,170.35,169.47,168.09,167.88,155.92,155.68,153.07,150.82,145.07,135.11,134.67,133.09,132.42,128.85,128.76,128.61,128.58,128.29,118.03,117.34,82.76,82.36,78.91,77.31,71.90,70.88,68.49,68.00,66.04,65.38,64.52,63.17,60.05,57.54,57.47,56.61,55.95,55.79,52.69,51.53,51.02,38.06,37.16,35.81,31.89,29.66,29.62,29.32,28.30,28.01,27.85,26.31,25.80,25.40,22.65,19.14,18.24,17.65,17.17,16.81,15.45,14.07,13.60,11.78,-5.52,-5.55ppm；

將化合物式vi36mg,0.031mmol,1.0equiv.)溶解于三氟乙酸/二氯甲烷(2ml/2ml)中，室溫反應(yīng)4h。減壓旋蒸除去溶劑，用油泵抽1h，得到脫保護(hù)產(chǎn)物粗產(chǎn)品，直接用于下一步反應(yīng)。將上述粗產(chǎn)品溶解于二甲基甲酰胺(20ml)中，依次加入nmm(68μl,0.62mmol,20equiv.)，hatu(118mg,0.31mmol,10equiv.)，hoat(21mg,0.155mmol,5equiv.)，室溫反應(yīng)48h。減壓旋蒸除去二甲基甲酰胺，殘?jiān)匦掠枚燃淄?50ml)溶解，依次用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)和飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到黃色固體，即化合物式iii(21mg,75％)。¹hnmr(500mhz,cd3od)δ7.46–7.24(m,10h),5.97–5.84(m,1h),5.55(dt,j＝8.2,4.1hz,1h),5.30(dq,j＝17.3,1.7hz,1h),5.23(d,j＝16.2hz,2h),5.20–5.13(m,2h),5.09(d,j＝12.6hz,1h),4.63–4.56(m,1h),4.56–4.49(m,2h),4.33–4.26(m,1h),4.21(d,j＝8.4hz,1h),4.11(q,j＝7.4hz,1h),4.03(d,j＝6.0hz,2h),3.91(dd,j＝10.8,5.2hz,1h),3.87–3.77(m,2h),3.76–3.64(m,1h),3.05–2.85(m,1h),2.14(s,2h),1.78(s,1h),1.50(s,1h),1.38(d,j＝7.4hz,3h),1.28(d,j＝6.5hz,3h),1.19–1.07(m,1h),0.97–0.79(m,6h)ppm；

實(shí)施例5化合物式v合成

將化合物式xxiii(200mg,0.38mmol,1.0equiv.)和d-allo-ile-ome(103mg,0.57mmol,1.5equiv.)溶解于二氯甲烷(10ml)中，依次加入二異丙基乙基胺(0.27ml,1.52mmol,4.0equiv.)和pyaop(396mg,0.76mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)12h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×20ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色固體化合物式xxiv(235mg,96％)。tlc:rf＝0.50(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/1)；[α]d²⁰＝-0.2(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.42–7.14(m,20h),5.98(d,j＝7.1hz,1h),5.17–5.04(m,2h),4.56(dd,j＝8.6,4.1hz,1h),4.23(q,j＝6.8hz,1h),3.66(s,3h),2.62–2.47(m,2h),2.18–2.06(m,1h),2.04–1.95(m,1h),1.95–1.84(m,1h),1.35–1.23(m,1h),1.16–1.05(m,1h),0.87(t,j＝7.4hz,3h),0.73(d,j＝7.0hz,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ172.53,172.04,171.72,156.21,144.58,136.44,128.76,128.49,128.08,128.03,127.93,127.00,70.73,66.84,55.78,53.89,52.10,36.86,33.43,29.45,26.18,14.49,11.72ppm；hrms(m/z):calculatedforc39h43n3o6na⁺[m+na]⁺:672.3044,found672.3052.

將化合物式xxiv(117mg,0.18mmol,1.0equiv.)溶解于四氫呋喃(5ml)中，lioh·h2o(15mg,0.36mmol,2.0equiv.)溶解于水(5ml)中，并逐滴加入底物的四氫呋喃溶液中，室溫反應(yīng)1h。減壓旋蒸除去四氫呋喃，水相用1.0m鹽酸酸化至ph＝2，并用乙酸乙酯(3×20ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后得到羧酸粗產(chǎn)物，不需要純化，直接用于下一步。將羧酸和l-ile-ome(49mg,0.27mmol,1.5equiv.)溶解于二氯甲烷(20ml)中，依次加入二異丙基乙基胺(0.13ml,0.72mmol,4.0equiv.)和pyaop(234mg,0.45mmol,2.5equiv.)，室溫反應(yīng)12h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×20ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色固體，即化合物式v(119mg,88％)。rf＝0.42(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/1)；[α]d²⁰＝+22.8(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.40–7.29(m,5h),7.29–7.13(m,15h),6.88(dd,j＝18.7,7.9hz,2h),6.20(d,j＝5.9hz,1h),5.14(d,j＝12.2hz,1h),5.07(d,j＝12.2hz,1h),4.49(dd,j＝8.2,5.5hz,1h),4.40(dd,j＝8.5,4.7hz,1h),4.10–4.01(m,1h),3.61(s,3h),2.62–2.51(m,1h),2.50–2.38(m,1h),2.17–2.06(m,1h),2.06–1.95(m,2h),1.94–1.83(m,1h),1.49–1.36(m,1h),1.34–1.24(m,1h),1.24–1.06(m,2h),0.94–0.81(m,9h),0.76(d,j＝6.9hz,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ172.28,171.94,171.70,171.15,156.67,144.48,136.24,128.67,128.50,128.24,128.18,127.93,127.04,70.80,67.09,56.80,56.72,55.25,51.86,37.28,36.28,33.55,28.02,26.44,25.27,15.52,14.10,11.61,11.45ppm；hrms(m/z):calculatedforc45h54n4o7na⁺[m+na]⁺:785.3885,found785.3882.

將化合物式v(80mg,0.100mmol,1.0equiv.)溶解于甲醇(2ml)中，加入二氯化鈀(9mg,0.050mmol,0.5equiv.)，在氫氣下室溫反應(yīng)2h。過濾，減壓旋蒸除去溶劑，濃縮后得到胺化合物式xxvii粗產(chǎn)物，不需要純化，直接用于下一步。

實(shí)施例6化合物式iv合成

將化合物式xxv(200mg,0.64mmol,1.0equiv.)和l-ile-ome(174mg,0.96mmol,1.5equiv.)溶解于二氯甲烷(10ml)中，依次加入二異丙基乙基胺(0.45ml,2.56mmol,4.0equiv.)，edci(246mg,1.28mmol,2.0equiv)和hoat(87mg,0.64mmol,1.0equiv.)，室溫反應(yīng)12h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(10ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×20ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到無色油狀液體，即化合物式xxvi(195mg,69％)。rf＝0.41(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/5)；[α]d²⁰＝+90.0(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.39–7.07(m,10h),6.67(d,j＝8.6hz,1h),5.11(s,2h),5.08–5.01(m,1h),4.98–4.84(m,1h),4.58–4.47(m,1h),3.68(s,3h),3.47–3.28(m,1h),2.97(dd,j＝14.4,9.1hz,1h),2.90(s,3h),1.88–1.77(m,1h),1.38–1.26(m,1h),1.13–0.97(m,1h),0.87(t,j＝7.4hz,3h),0.82(d,j＝6.7hz,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ171.95,170.19,157.40,137.26,136.53,128.97,127.95,127.62,126.57,67.70,67.51,60.99,60.08,56.58,51.90,37.56,37.37,34.28,33.97,30.99,30.38,25.08,15.52,11.49ppm；hrms(m/z):calculatedforc25h32n2o5na⁺[m+na]⁺:463.2203,found463.2204.

將化合物式xxvi(1.50g,3.41mmol,1.0equiv.)溶解于四氫呋喃(20ml)中，lioh·h2o(286mg,6.82mmol,2.0equiv.)溶解于水(20ml)中，并逐滴加入底物的四氫呋喃溶液中，室溫反應(yīng)1h。減壓旋蒸除去四氫呋喃，水相用1.0m鹽酸酸化至ph＝2，并用乙酸乙酯(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(50ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后得到羧酸粗產(chǎn)物，不需要純化，直接用于下一步。將羧酸和l-ser-ome(796mg,5.12mmol,1.5equiv.)溶解于二氯甲烷(20ml)中，依次加入二異丙基乙基胺(2.97ml,17.05mmol,5.0equiv.)和pyaop(3.55g,6.82mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)12h。反應(yīng)用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×50ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(50ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色固體(1.35g,75％)。rf＝0.41(silica,乙酸乙酯/正己烷＝2/1)；[α]d²⁰＝+65.2(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.40–7.06(m,10h),6.79–6.63(m,1h),5.18–4.99(m,2h),4.83(t,j＝8.0hz,1h),4.69–4.46(m,2h),4.32(t,j＝7.6hz,1h),4.01–3.91(m,1h),3.90–3.81(m,1h),3.74(s,3h),3.40–3.27(m,1h),3.17–3.06(m,1h),3.06–2.96(m,1h),2.85(s,3h),1.86(s,1h),1.47–1.33(m,1h),1.13–0.96(m,1h),0.94–0.77(m,6h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ171.26,171.17,170.95,170.74,170.63,157.28,157.21,156.08,137.08,136.53,136.28,136.13,128.95,128.87,128.66,128.55,128.49,128.14,128.04,127.95,127.69,127.04,126.69,67.76,67.69,67.10,62.67,61.26,58.06,56.88,54.79,54.75,54.65,52.60,52.51,38.84,36.46,34.35,31.59,26.34,24.72,15.42,14.26,11.58,11.17ppm；hrms(m/z):calculatedforc28h37n3o7na⁺[m+na]⁺:550.2524,found550.2526.

將前述產(chǎn)物(105mg,0.20mmol,1.0equiv.)溶解于二氯甲烷(5ml)中，冷卻到0℃后，依次加入咪唑(54mg,0.80mmol,4.0equiv.)和tbscl(60mg,0.40mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)4h。反應(yīng)用飽和氯化銨溶液(10ml)淬滅，分液后，水相用二氯甲烷(3×10ml)萃取，合并有機(jī)相，用飽和食鹽水(10ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色泡沫，即化合物式iv(121mg,94％)。rf＝0.49(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/2)；[α]d²⁰＝+77.2(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.40–7.06(m,10h),6.70(d,j＝8.3hz,1h),6.53(d,j＝8.0hz,1h),5.17–4.86(m,3h),4.65–4.57(m,1h),4.35(dd,j＝8.4,5.6hz,1h),4.05(ddd,j＝12.8,10.2,2.9hz,1h),3.82(ddd,j＝10.1,6.8,3.1hz,1h),3.74(d,j＝8.7hz,3h),3.38(dd,j＝14.4,7.1hz,1h),2.98(dd,j＝14.3,9.3hz,1h),2.89(s,3h),1.90–1.78(m,1h),1.44(ddt,j＝10.7,7.7,3.9hz,1h),1.11(ddt,j＝14.4,9.5,7.3hz,1h),0.94–0.79(m,15h),0.03(s,3h),0.03(s,3h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ170.39,170.09,169.64,157.21,137.24,136.52,128.95,128.82,128.54,128.47,128.43,128.04,127.97,127.91,127.75,127.63,126.59,67.54,63.22,60.80,57.62,56.52,54.40,54.26,52.33,52.25,37.78,37.49,34.40,34.27,30.83,26.22,25.65,24.89,18.11,15.18,11.65,11.48,-5.55,-5.74ppm；hrms(m/z):calculatedforc34h51n3o7sina⁺[m+na]⁺:664.3388,found664.3396.

將化合物式iv(60mg,0.094mmol,1.0equiv.)溶解于甲苯(5ml)中，加入三甲基氫氧化錫(86mg,0.470mmol,5.0equiv.)，70℃反應(yīng)24h。用乙酸乙酯(20ml)稀釋，飽和氯化銨溶液(10ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后得到羧酸化合物式xxviii粗產(chǎn)物，不需要純化，直接用于下一步。

實(shí)施例7側(cè)鏈六肽片段化合物式ii合成

將上面得到的化合物式xxvii和化合物式xxviii溶解于二甲基甲酰胺(5ml)中，依次加入二異丙基乙基胺(98μl,0.564mmol,6.0equiv.)和pyaop(147mg,0.282mmol,3.0equiv.)，室溫反應(yīng)12h。減壓旋蒸除去溶劑，重新用二氯甲烷(50ml)溶解，用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)和飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色固體，即化合物式ii(53mg,46％)。rf＝0.32(silica,乙酸乙酯/正己烷＝1/1)；[α]d²⁰＝+30.6(c1.0,chcl3)；¹hnmr(500mhz,cdcl3)δ7.48–6.99(m,25h),6.85(s,1h),6.71(s,1h),6.25(dd,j＝24.7,8.7hz,1h),5.11(q,j＝11.9,11.4hz,2h),4.59–4.42(m,1h),4.41–4.28(m,2h),4.28–4.16(m,2h),3.94(d,j＝6.3hz,1h),3.73(d,j＝6.9hz,1h),3.64(s,3h),3.23(dd,j＝13.9,6.0hz,1h),3.10(dd,j＝13.9,10.2hz,1h),2.71(d,j＝26.5hz,1h),2.56(d,j＝7.2hz,1h),2.53–2.41(m,1h),2.26–2.15(m,1h),2.13–2.06(m,1h),1.98–1.83(m,2h),1.48–1.35(m,2h),1.23–1.13(m,2h),1.12–0.99(m,2h),0.96–0.74(m,27h),0.04(s,6h)ppm；¹³cnmr(125mhz,cdcl3)δ172.78,172.08,171.92,171.30,171.16,170.34,170.03,157.17,144.57,136.85,136.03,130.84,129.01,128.77,128.71,128.61,128.54,128.22,127.85,126.92,126.78,70.71,67.78,65.52,64.32,63.43,62.59,60.33,59.15,57.75,57.15,56.91,56.78,56.54,56.09,53.49,52.11,52.02,37.72,37.57,37.40,37.15,36.40,36.26,34.35,34.08,33.62,31.90,30.66,30.59,29.66,29.62,29.31,28.02,26.30,26.18,25.80,25.22,25.16,25.03,24.80,23.15,18.17,15.73,15.59,15.52,15.43,15.25,14.50,14.25,14.16,11.58,11.52,11.42,11.37,11.19,-5.43,-5.49ppm；hrms(m/z):calculatedforc70h95n7o11sina⁺[m+na]⁺:1260.6751,found1260.6746.

將化合物式ii(10mg,0.0081mmol,1.0equiv.)溶解于甲苯(2ml)中，加入三甲基氫氧化錫(7mg,0.0405mmol,5.0equiv.)，70℃反應(yīng)24h。用乙酸乙酯(20ml)稀釋，飽和氯化銨溶液(10ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥，濃縮后得到羧酸化合物式xxix粗產(chǎn)物，不需要純化，直接用于下一步。

實(shí)施例8teixobactin化合物式i的合成：

將化合物式iii(10mg,0.0113mmol,1.0equiv.)和四(三苯基膦)鈀(3mg,0.0028mmol,0.25equiv.)溶解于二氯甲烷(1ml)中，冷卻至0℃，加入二乙胺(10μl)室溫反應(yīng)1h。減壓旋蒸除去溶劑，濃縮后得到胺粗產(chǎn)物，不需要純化，直接用于下一步。將上面得到的胺化合物與化合物式xxix溶解于二甲基甲酰胺(1ml)中，依次加入二異丙基乙基胺(14μl,0.0810mmol,10.0equiv.)，edci(9mg,0.0486mmol,6.0equiv.)和hoat(2mg,0.0162mmol,2.0equiv.)，室溫反應(yīng)12h。減壓旋蒸除去溶劑，重新用二氯甲烷(50ml)溶解，用飽和碳酸氫鈉溶液(20ml)和飽和食鹽水(20ml)洗滌，無水硫酸鈉干燥。濃縮后硅膠柱層析分離得到白色固體，即化合物式xxx(14mg,86％)。

將化合物式xxx(6mg,0.003mmol,1.0equiv.)溶解于甲醇(2ml)中，加入二氯化鈀(1mg,0.006mmol,2.0equiv.)，在氫氣下室溫反應(yīng)6h。過濾，減壓旋蒸除去溶劑，得到trt保護(hù)的天然產(chǎn)物teixobactin，不需要純化，直接用三氟乙酸/二氯甲烷(1ml/0.5ml)溶解，加入三異丙基硅烷(0.1ml)，室溫反應(yīng)6h。減壓旋蒸除去溶劑，直接用hplc分離。洗脫劑：乙腈(加0.1％三氟乙酸)/水(加0.1％三氟乙酸)。洗脫梯度：5％至95％乙腈/水。流速：1ml/min。保留時(shí)間：15.38min。得到的產(chǎn)物經(jīng)低溫凍干得到teixobactin的雙三氟乙酸鹽，再用5mm鹽酸反復(fù)溶解，低溫凍干三次，得到teixobactin的雙鹽酸(1.5mg,40％)。¹hnmr和¹³cnmr數(shù)據(jù)見表1。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。