本發(fā)明屬于藥物合成領(lǐng)域，具體涉及一種1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的制備方法。
背景技術(shù)：
：聚乙二醇(polyethyleneglycol，peg)是由環(huán)氧乙烷與水或乙二醇逐步發(fā)生加成聚合而得到的一類分子量較低的水溶性聚醚。小分子量的低聚聚乙二醇為無(wú)色、無(wú)臭有吸濕性的粘稠液體，分子中既有醚鏈，又有羥基,故具有獨(dú)特的溶解性能,能與水、醇混溶，微溶于醚。聚乙二醇(polyethyleneglycol,peg)近年來(lái)已廣泛用于修飾生物大分子及小分子藥物的結(jié)構(gòu)。聚乙二醇目前在藥用輔料、藥物制劑生產(chǎn)、修飾藥物分子等方面得到廣泛應(yīng)用，它是實(shí)現(xiàn)藥物傳輸過(guò)程及控釋過(guò)程的重要中間體。因?yàn)榫垡叶季哂袃?yōu)異的生物相容性，對(duì)一些生物相容性差的活性分子可以用官能團(tuán)化的聚乙二醇改性。將一些生物相容性差的有生物活性的分子用官能團(tuán)化的聚乙二醇修飾，可以提高活性分子的生物相容性、水溶性，甚至提高生物活性分子的穩(wěn)定性和降低其毒性。peg修飾技術(shù)逐漸應(yīng)用于許多有機(jī)小分子藥物，目前也取得了一定的進(jìn)展。聚乙二醇和小分子藥物鏈接后的新化合物也就具備了聚乙二醇的許多優(yōu)良性質(zhì)，如優(yōu)異的生物相容性。實(shí)驗(yàn)表明聚乙二醇在體內(nèi)可以被組織液溶解，從而可以隨著體液被機(jī)體代謝出體外，沒(méi)有任何的毒副作用。因此它打開(kāi)了某些活性分子在醫(yī)學(xué)應(yīng)用上的限制，備受矚目。1965年英國(guó)科學(xué)家banghan等人提出脂質(zhì)體(liposomes)這一概念。脂質(zhì)體又稱微脂粒，是具有靶向給藥功能的一種新型藥物制劑。脂質(zhì)體在水中時(shí)，分子親水部分插入水中，其疏水尾部伸向空氣，充分?jǐn)嚢韬螅ǔ?huì)形成雙分子層膜的球型囊泡，直徑在25～1000nm之間。在生物學(xué)中脂質(zhì)體通常是指當(dāng)兩性分子分散在水相中時(shí)，分子的疏水部分傾向于聚集在一起以避開(kāi)水相，其親水的頭部包頭在水相中，從而形成了有雙分子層結(jié)構(gòu)的封閉囊泡。藥劑學(xué)中脂質(zhì)體一般定義是通過(guò)類脂質(zhì)的雙分子層結(jié)構(gòu)將藥物包封起來(lái)而形成微型囊泡體。藥劑學(xué)中脂質(zhì)體將藥物送入細(xì)胞內(nèi)部，就是利用了脂質(zhì)體可以和細(xì)胞膜融合這一特點(diǎn)，目前脂質(zhì)體通常用于轉(zhuǎn)基因，或制備藥物。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)領(lǐng)域中，脂質(zhì)體被廣泛用于藥物傳遞系統(tǒng)。由于在血液中脂質(zhì)體的磷脂成分傾向于聚集融合，容易與載脂蛋白結(jié)合，接著發(fā)生互換，脂質(zhì)體膜形成孔洞。同時(shí)補(bǔ)體系統(tǒng)被脂質(zhì)體激活，生成攻膜復(fù)合體，脂質(zhì)體膜中形成親水性通道，引起包封藥物的滲漏，水、電解質(zhì)的大量進(jìn)入，最終脂質(zhì)體會(huì)滲透裂解，最后由單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)快速清除。脂質(zhì)體在血液循環(huán)中的半衰期較短(一般為30分鐘)，其主動(dòng)靶向性和穩(wěn)定性較差。由于血液中存在多種破壞因素，發(fā)揮藥物載體的關(guān)鍵因素就是血液中脂質(zhì)體的穩(wěn)定性。在脂質(zhì)體膜表面引入聚合物分子，形成空間穩(wěn)定的脂質(zhì)體，不但解決了脂質(zhì)體的發(fā)展所遇到的瓶頸期，也為制劑領(lǐng)域注入了新的活力。其中最常用的、研究最多的聚合物分子就是聚乙二醇(peg)，聚乙二醇結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，兩端的羥基很容易衍生化，修飾藥物時(shí)候可以增加體內(nèi)半衰期，降低免疫原性，同時(shí)還可以增加藥物的水溶性。peg可以延長(zhǎng)脂質(zhì)體的血循環(huán)，對(duì)脂質(zhì)體滲漏也有一定積極影響，還具有被動(dòng)靶向、在空間穩(wěn)定免疫脂質(zhì)體中的橋接等作用。peg修飾的脂質(zhì)體是將peg分子直接連接脂質(zhì)體，或者用peg分子包衣脂質(zhì)體，從而改進(jìn)藥物分子的細(xì)胞內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)特性，比如提高脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，防止其非特異性吸收等。peg化脂質(zhì)體的合成過(guò)程較為簡(jiǎn)單，成本較低，生物相容性好，對(duì)藥物的修飾效果較為理想。近年來(lái)，peg修飾脂質(zhì)體的應(yīng)用已成為提高藥物療效及減少毒副作用的有效手段。研究發(fā)現(xiàn)peg長(zhǎng)度能影響rna的體內(nèi)表達(dá)，因此一般使用所含peg平均分子量為1kda～3kda的脂質(zhì)體。分子量較低(如500或750da)的peg不形成穩(wěn)定的脂質(zhì)體。近年來(lái)，有學(xué)者利用小干擾rna脂質(zhì)體藥物用于多種疾病的治療研究，如老年視黃斑退化、肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肥胖癥，以及抗病毒和帕金森病等的治療。由于sirna分子量高，存在聚陰離子中心，帶有較強(qiáng)的的負(fù)電，所以他們的幾何體不能以自由擴(kuò)散的方式穿過(guò)由雙脂層構(gòu)筑的細(xì)胞膜。因此，sirna輸送載體是sirna治療成功的關(guān)鍵，而陽(yáng)離子脂質(zhì)體是一種較為常見(jiàn)的sirna藥物的傳遞手段。有研究表明，在這類陽(yáng)離子脂質(zhì)體的材料中，還需要添加一種聚乙二醇化的脂質(zhì)體材料，其中mpeg-1,2-二肉豆蔻酸甘油酯，即mpeg-dmg就是其中一種關(guān)鍵材料，它可以通過(guò)與聚陰離子核酸的經(jīng)典作用自組裝成大分子納米顆粒，然后以這種方式封裝sirna，從而有效地將sirna輸送至胞漿并釋放出sirna，與其靶位結(jié)合進(jìn)而引發(fā)目標(biāo)mrna降解。這類脂質(zhì)體系統(tǒng)被證明在治療高膽固醇血癥方面有廣闊的前景。但是目前在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)上沒(méi)有mpeg2000-dmg銷售，而且在國(guó)外定制價(jià)格極其昂貴，這也嚴(yán)重制約了國(guó)內(nèi)sirna藥物的研究。我們?cè)诓殚営嘘P(guān)mpeg2000-dmg的合成文獻(xiàn)后，發(fā)現(xiàn)這類關(guān)于材料的合成報(bào)道較少，湯杰等人采用新的路線進(jìn)行mpeg2000-dmg的合成：以(r)-(-)-甘油醇縮丙酮為原料經(jīng)過(guò)加芐基保護(hù)、脫叉酮保護(hù)、dcc縮合、還原、邁克爾加成、對(duì)硝基氯甲酸苯酯活化、醇胺?；绕卟降玫侥繕?biāo)產(chǎn)物。但是操作過(guò)程工藝復(fù)雜，且反應(yīng)過(guò)程中涉及氰基的還原，反應(yīng)過(guò)程中會(huì)有劇毒揮發(fā)等等不利條件，其反應(yīng)需要嚴(yán)謹(jǐn)?shù)臈l件不利于工業(yè)化生產(chǎn)，反應(yīng)溫度的控制也使得能耗增加，綜合經(jīng)濟(jì)價(jià)值不高，因此該工藝路線仍需改進(jìn)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提出更優(yōu)的一種1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的制備方法，該制備方法原料簡(jiǎn)單易得，步驟較短，純化簡(jiǎn)單，污染少，無(wú)毒性。一種1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的制備方法，包括以下步驟：1)將mpeg-oh、rcl在堿和有機(jī)溶劑存在的條件下進(jìn)行磺?；磻?yīng)，制得mpeg-r，再通過(guò)氨化反應(yīng)制成mpeg-nh2；2)將1,2-二肉豆蔻酸甘油酯與活化劑在堿的催化下在有機(jī)溶劑中制得1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化劑；3)將制得的1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化劑與mpeg-nh2在堿的催化下于有機(jī)溶劑中，縮合得到最終產(chǎn)物peg-1,2-二肉豆蔻酸甘油酯,其中r為甲磺酸基、對(duì)甲苯磺酸基、對(duì)硝基苯磺酸基中的一種，所述mpeg-oh的結(jié)構(gòu)式為：其中n為10-1000的整數(shù)。進(jìn)一步地，所述堿為三乙胺、氫氧化鈉、吡啶、4-二甲氨基吡啶中的一種。進(jìn)一步地，所述有機(jī)溶劑為二氯甲烷、四氫呋喃、二氧六環(huán)中的一種。進(jìn)一步地，所述步驟1)的磺酰化反應(yīng)是于反應(yīng)的溫度為0℃～20℃，反應(yīng)的時(shí)間為10～15h的條件下制得mpeg-r。進(jìn)一步地，所述步驟1)的氨化反應(yīng)是在溫度40-60℃，10-20h條件下進(jìn)行。進(jìn)一步地，所述步驟1)中的mpeg-oh、rcl和堿的摩爾比為1：1.1：1.3。進(jìn)一步地，所述步驟2)將1,2-二肉豆蔻酸甘油酯與活化劑是于反應(yīng)溫度為10℃～40℃，反應(yīng)的時(shí)間為1～5h的條件下制得活化的1,2-二肉豆蔻酸甘油酯。進(jìn)一步地，所述步驟2)中的活化劑是對(duì)硝基氯甲酸苯酯。進(jìn)一步地，所述步驟2)將1,2-二肉豆蔻酸甘油酯與對(duì)硝基氯甲酸苯酯在溫度為30℃條件下反應(yīng)3h得到1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化劑。該制備方法的路線如下：，其中n為10-1000的整數(shù)，r＝甲磺酸基、對(duì)甲苯磺酸基、對(duì)硝基苯磺酸基。同現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明在實(shí)現(xiàn)制備1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的過(guò)程中，具有以下有益效果：1.無(wú)需柱層析分離純化，大大降低了純化難度；2.制備反應(yīng)過(guò)程，不涉及劇毒試劑或溶劑，對(duì)極大的降低了對(duì)環(huán)境的污染，綠色環(huán)保；3.其制備過(guò)程對(duì)設(shè)備要求低，操作簡(jiǎn)單，一方面，極大的簡(jiǎn)化了操作流程，降低成本，對(duì)于1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的制備進(jìn)入工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)具有重要意義，另一方面，有效地降低了操作中的危險(xiǎn)系數(shù)；4.制備過(guò)程中，同時(shí)可以篩選出高的產(chǎn)率和純度1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化劑，即活化后的1,2-二肉豆蔻酸甘油酯。具體實(shí)施步驟制備1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的方法，包括以下步驟：1)將mpeg-oh、rcl在堿與有機(jī)溶劑存在的條件下于反應(yīng)的溫度為0℃～20℃，反應(yīng)的時(shí)間為10～15h的條件下進(jìn)行磺?；磻?yīng)，制得mpeg-r，再于溫度40-60℃，10-20h條件下進(jìn)行氨化反應(yīng)制成mpeg-nh2；其中mpeg、rcl和堿的摩爾比為1：1.1：1.3；2)將1,2-二肉豆蔻酸甘油酯與第二活化劑在堿的催化下于有機(jī)溶劑中制得1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化劑；3)于反應(yīng)溫度為10℃～40℃，反應(yīng)的時(shí)間為1～5h的條件下將活化的1,2-二肉豆蔻酸甘油酯與mpeg-nh2在堿的催化下于第三有機(jī)溶劑中，縮合得到最終產(chǎn)物1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物，即peg-1,2-二肉豆蔻酸甘油酯,其中r為甲磺酸基、對(duì)甲苯磺酸基、對(duì)硝基苯磺酸基中的一種，所述mpeg-oh的結(jié)構(gòu)式為：其中n為10-1000的整數(shù)，其中堿為三乙胺、氫氧化鈉、吡啶、4-二甲氨基吡啶(dmap)中的一種；活化劑是對(duì)硝基氯甲酸苯酯；有機(jī)溶劑為四氫呋喃、二氯甲烷、二氧六環(huán)中的一種。該制備方法的路線如下：實(shí)施例1(1)將100gmpeg5000，2.62g三乙胺加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取4.2g對(duì)甲苯磺酰氯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，滴畢溫度0℃，反應(yīng)12h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到磺酰化的粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)品運(yùn)用二氯甲烷重結(jié)晶，得到100g純品mpeg5000-tos，產(chǎn)率：90％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.811(t，j＝6.4hz，2h)；7.422(t，j＝6.4hz，2h)；3.739(t，j＝4.4hz，2h)；3.685～3.636(m，452h)；3.240(s，3h)；2.353(s，3h)；(2)將步驟(1)得到的100gmpeg5000-tos加入到100ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季銨堿，升溫到50℃，攪拌15h。反應(yīng)結(jié)束，冷卻至室溫，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干得到固體。用二氯甲烷重結(jié)晶，得到90g純品mpeg5000-nh2，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.682～3.630(m，452h)；2.830(t，j＝6.4hz，2h)；3.242(s，3h)；2.102(s，2h)；(3)將50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取20g對(duì)硝基氯甲酸苯酯于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，于溫度為10℃條件下反應(yīng)5h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到粗產(chǎn)物。層析柱純化，得到55g活化的dmg，產(chǎn)率：99％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)將步驟(3)得到的12g活化的dmg加入到500ml二氧六環(huán)中，加入90gmpeg5000-nh2，4-二甲氨基吡啶，室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝7，然后旋干水相，再用200ml二氧六環(huán)溶解，抽濾，無(wú)水硫酸鈉干燥濾液，旋干濾液，經(jīng)過(guò)二氯甲烷重結(jié)晶，得到90g純品產(chǎn)物，產(chǎn)率：96％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.410～5.335(m，1h)；4.528(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.328(m，2h)；4.335(t，j＝4.8hz，1h)；3.662～3.617(m，454h)；3.240(s，3h)；2.377～2.314(m，4h)；1.632(t，j＝6.8hz，4h)；1.294(s，40h)；0.896(t，j＝6.4hz，6h)。實(shí)施例2(1)將100gmpeg500，10.4g氫氧化鈉加入到300ml四氫呋喃中，攪拌，稱取41.5g對(duì)甲苯磺酰氯溶于200ml四氫呋喃，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，滴畢20℃下反應(yīng)15h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到磺酰化的粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)品運(yùn)用二氯甲烷重結(jié)晶，得到100g純品mpeg500-tos，產(chǎn)率：90％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.822(t，j＝6.4hz，2h)；7.401(t，j＝6.4hz，2h)；3.754(t，j＝4.4hz，2h)；3.672～3.638(m，42h)；3.240(s，3h)；2.351(s，3h)；(2)將步驟(1)得到的100gmpeg500-tos加入到150ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季銨堿，升溫到60℃，攪拌10h。反應(yīng)結(jié)束，冷卻至室溫，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干得到固體。用二氯甲烷重結(jié)晶，得到90g純品mpeg500-nh2，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.682～3.636(m，42h)；2.825(t，j＝6.4hz，2h)；3.241(s，3h)；2.124(s，2h)；(3)將50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取20g對(duì)硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，在30℃下反應(yīng)2h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到粗產(chǎn)物。層析柱純化，得到58g活化的dmg，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)將步驟(3)得到的58g活化的dmg加入到400ml四氫呋喃中，加入40gmpeg500-nh2，4-二甲氨基吡啶，室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝7，然后旋干水相，再用200ml四氫呋喃溶解，抽濾，無(wú)水硫酸鈉干燥濾液，旋干濾液，經(jīng)過(guò)二氯甲烷重結(jié)晶，得到60g純品產(chǎn)物，產(chǎn)率：97％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.426～5.334(m，1h)；4.522(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.326(m，2h)；4.330(t，j＝4.8hz，1h)；3.672～3.644(m，44h)；3.241(s，3h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)。實(shí)施例3(1)將100gmpeg500，20.5g吡啶加入到300ml四氫呋喃中，攪拌，稱取49g對(duì)硝基苯磺酰氯溶于200ml四氫呋喃，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，滴畢20℃下反應(yīng)15h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到磺?；拇之a(chǎn)物。粗產(chǎn)品運(yùn)用二氯甲烷重結(jié)晶，得到100g純品mpeg500-tos，產(chǎn)率：90％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.822(t，j＝6.4hz，2h)；7.401(t，j＝6.4hz，2h)；3.754(t，j＝4.4hz，2h)；3.672～3.638(m，42h)；3.240(s，3h)；2.351(s，3h)；(2)將步驟(1)得到的100gmpeg500-tos加入到150ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季銨堿，升溫到60℃，攪拌10h。反應(yīng)結(jié)束，冷卻至室溫，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干得到固體。用二氯甲烷重結(jié)晶，得到90g純品mpeg500-nh2，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.682～3.636(m，42h)；2.825(t，j＝6.4hz，2h)；3.241(s，3h)；2.124(s，2h)；(3)將50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取20g對(duì)硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，在25℃下反應(yīng)2.5h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到粗產(chǎn)物。層析柱純化，得到58g活化的dmg，產(chǎn)率：97％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)將步驟(3)得到的58g活化的dmg加入到400ml四氫呋喃中，加入40gmpeg500-nh2，4-二甲氨基吡啶，室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝7，然后旋干水相，再用200ml四氫呋喃溶解，抽濾，無(wú)水硫酸鈉干燥濾液，旋干濾液，經(jīng)過(guò)二氯甲烷重結(jié)晶，得到60g純品產(chǎn)物，產(chǎn)率：95％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.426～5.334(m，1h)；4.522(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.326(m，2h)；4.330(t，j＝4.8hz，1h)；3.672～3.644(m，44h)；3.241(s，3h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)。實(shí)施例4(1)將100gmpeg5000，3.2g4-二甲氨基吡啶加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取2.5g甲磺酰氯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，滴畢溫度0℃，反應(yīng)12h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到磺酰化的粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)品運(yùn)用二氯甲烷重結(jié)晶，得到100g純品mpeg5000-tos，產(chǎn)率：90％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.811(t，j＝6.4hz，2h)；7.422(t，j＝6.4hz，2h)；3.739(t，j＝4.4hz，2h)；3.685～3.636(m，452h)；3.240(s，3h)；2.353(s，3h)；(2)將步驟(1)得到的100gmpeg5000-tos加入到100ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季銨堿，升溫到50℃，攪拌15h。反應(yīng)結(jié)束，冷卻至室溫，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干得到固體。用二氯甲烷重結(jié)晶，得到90g純品mpeg5000-nh2，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.682～3.630(m，452h)；2.830(t，j＝6.4hz，2h)；3.242(s，3h)；2.102(s，2h)；(3)將50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取20g對(duì)硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，于溫度為40℃條件下反應(yīng)1h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到粗產(chǎn)物。層析柱純化，得到55g活化的dmg，產(chǎn)率：96％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)將步驟(3)得到的12g活化的dmg加入到500ml二氧六環(huán)中，加入90gmpeg5000-nh2，4-二甲氨基吡啶，室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝7，然后旋干水相，再用200ml二氧六環(huán)溶解，抽濾，無(wú)水硫酸鈉干燥濾液，旋干濾液，經(jīng)過(guò)二氯甲烷重結(jié)晶，得到90g純品產(chǎn)物，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.410～5.335(m，1h)；4.528(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.328(m，2h)；4.335(t，j＝4.8hz，1h)；3.662～3.617(m，454h)；3.240(s，3h)；2.377～2.314(m，4h)；1.632(t，j＝6.8hz，4h)；1.294(s，40h)；0.896(t，j＝6.4hz，6h)。實(shí)施例5(1)將100gmpeg2000，66g三乙胺加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取10.5g對(duì)甲苯磺酰氯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，滴畢0℃下反應(yīng)15h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到磺酰化的粗產(chǎn)物。粗產(chǎn)品運(yùn)用二氯甲烷重結(jié)晶，得到105g純品mpeg2000-tos，產(chǎn)率：91％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.812(t，j＝6.4hz，2h)；7.402(t，j＝6.4hz，2h)；3.734(t，j＝4.4hz，2h)；3.675～3.630(m，178h)；3.240(s，3h)；2.351(s，3h)；(2)將步驟(1)得到的105gmpeg2000-tos加入到100ml甲醇中，再加入400ml氨水，加入10g季銨堿，升溫到40℃，攪拌20h。反應(yīng)結(jié)束，冷卻至室溫，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干得到固體。用二氯甲烷重結(jié)晶，得到90g純品mpeg2000-nh2，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.692～3.631(m，178h)；2.831(t，j＝6.4hz，2h)；3.240(s，3h)；2.125(s，2h)；(3)將50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取20g對(duì)硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，在溫度為20℃下反應(yīng)2h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到粗產(chǎn)物。層析柱純化，得到55g活化的dmg，產(chǎn)率：95％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)將步驟(3)得到的35g活化的dmg加入到500ml二氯甲烷中，加入90gmpeg2000-nh2，4-二甲氨基吡啶，室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝7，然后旋干水相，再用200ml二氯甲烷溶解，抽濾，無(wú)水硫酸鈉干燥濾液，旋干濾液，經(jīng)過(guò)二氯甲烷重結(jié)晶，得到100g純品產(chǎn)物，產(chǎn)率：97％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.415～5.335(m，1h)；4.525(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.322(m，2h)；4.334(t，j＝4.8hz，1h)；3.682～3.639(m，180h)；3.241(s，3h)；2.379～2.314(m，4h)；1.635(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.893(t，j＝6.4hz，6h)。實(shí)施例6(1)將100gmpeg20000，0.66g三乙胺加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取1.05g對(duì)甲苯磺酰氯溶于20ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，滴畢溫度10℃下反應(yīng)12.5h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到磺?；拇之a(chǎn)物。粗產(chǎn)品運(yùn)用二氯甲烷重結(jié)晶，得到95g純品mpeg20000-tos，產(chǎn)率：90％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.801(t，j＝6.4hz，2h)；7.429(t，j＝6.4hz，2h)；3.759(t，j＝4.4hz，2h)；3.687～3.636(m，1816h)；3.240(s，3h)；2.358(s，3h)；(2)將步驟(1)得到的95gmpeg20000-tos加入到100ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季銨堿，升溫到50℃，攪拌15h。反應(yīng)結(jié)束，冷卻至室溫，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，無(wú)水硫酸鈉干燥，旋干得到固體。用二氯甲烷重結(jié)晶，得到85g純品mpeg20000-nh2，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.687～3.630(m，1816h)；2.839(t，j＝6.4hz，2h)；3.233(s，3h)；2.096(s，2h)；(3)將50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，攪拌，稱取20g對(duì)硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴條件下滴加至反應(yīng)體系中，在30℃溫度下反應(yīng)3h。反應(yīng)結(jié)束，加300ml水洗，分液，無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，旋干得到粗產(chǎn)物。層析柱純化，得到40g活化的dmg，產(chǎn)率：98％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)將步驟(3)得到的3g活化的dmg加入到500ml二氯甲烷中，加入85gmpeg20000-nh2，4-二甲氨基吡啶，室溫?cái)嚢?h。反應(yīng)結(jié)束，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph＝7，然后旋干水相，再用200ml二氯甲烷溶解，抽濾，無(wú)水硫酸鈉干燥濾液，旋干濾液，經(jīng)過(guò)二氯甲烷重結(jié)晶，得到80g純品產(chǎn)物，產(chǎn)率：99％。核磁數(shù)據(jù)如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.410～5.329(m，1h)；4.524(t，j＝8hz，1h)；4.331～4.318(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；3.655～3.632(m，1818h)；3.240(s，3h)；2.377～2.310(m，4h)；1.631(t，j＝6.8hz，4h)；1.289(s，40h)；0.894(t，j＝6.4hz，6h)。不同活化劑活化dmg的實(shí)驗(yàn)結(jié)果活化劑反應(yīng)時(shí)間/溫度中間體純度產(chǎn)率對(duì)硝基氯甲酸苯酯5h/10℃過(guò)柱99％對(duì)硝基氯甲酸苯酯2h/30℃過(guò)柱98％對(duì)硝基氯甲酸苯酯2.5h/25℃過(guò)柱97％對(duì)硝基氯甲酸苯酯1h/40℃過(guò)柱96％對(duì)硝基氯甲酸苯酯2h/20℃過(guò)柱95％對(duì)硝基氯甲酸苯酯3h/30℃過(guò)柱98％當(dāng)前第1頁(yè)12