本發(fā)明涉及材質(zhì)鑒別領(lǐng)域，尤其涉及一種基于pcr(聚合酶鏈反應(yīng)polymerasechainreaction，pcr)技術(shù)的用于動(dòng)物毛皮鑒別的引物和方法。

背景技術(shù)：

動(dòng)物毛皮是從動(dòng)物身上剝?nèi)〉膸坏母?，一般以裘皮形式使用，主要有貂皮、狐皮、貉皮、獺兔皮及黃狼皮等。貂皮素有“裘中之王”之稱(chēng)，商品價(jià)值高。中國(guó)是全球最大的毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖國(guó)家，皮張產(chǎn)量占到全球的一半以上。我國(guó)貂皮產(chǎn)量近年來(lái)增長(zhǎng)迅速，據(jù)中國(guó)皮革協(xié)會(huì)中國(guó)貂、狐、貉取皮數(shù)量統(tǒng)計(jì)報(bào)告(2015年)》的報(bào)告顯示：2015年中國(guó)水貂取皮數(shù)量4450萬(wàn)張左右，狐貍?cè)∑?shù)量1450萬(wàn)張左右。貂皮種類(lèi)繁多，以水貂較為常見(jiàn)，還有石貂、松貂、漁貂、掃雪貂等品種，而紫貂最為名貴。某些商家利用普通消費(fèi)者缺乏高檔皮毛知識(shí)，在商品上標(biāo)示山貂、黃金貂、艾狐貂、青根貂等近似的名稱(chēng)或類(lèi)別，混淆消費(fèi)者。

目前，毛皮鑒別常采用宏觀觀察法和顯微鏡觀察法，尚無(wú)可靠、穩(wěn)定、可重復(fù)的標(biāo)準(zhǔn)鑒別方法。由于觀察法受檢驗(yàn)人員對(duì)動(dòng)物毛皮的認(rèn)知及經(jīng)驗(yàn)等主觀因素的影響，一些形態(tài)接近或經(jīng)過(guò)特殊處理工藝的皮毛樣品鑒別仍存在難點(diǎn)。尤其對(duì)于同一品種的不同品系裘皮毛絨纖維類(lèi)別的鑒別，盡管應(yīng)用光學(xué)顯微鏡并借助其他工具，仍很難區(qū)別。因此，如何方便、準(zhǔn)確、快速地鑒別毛皮種類(lèi)一直是質(zhì)檢部門(mén)和廣大消費(fèi)者關(guān)注的焦點(diǎn)。

dna是一切物種的遺傳信息，隨著分子生物學(xué)和生物信息學(xué)手段的發(fā)展，以dna為基礎(chǔ)的物種鑒別發(fā)展迅速，在分子生物水平上實(shí)現(xiàn)物種鑒別，突破了傳統(tǒng)方法依據(jù)動(dòng)物纖維形態(tài)結(jié)構(gòu)鑒別的局限性。但是由于動(dòng)物毛皮都經(jīng)過(guò)鞣制、漂白和染色處理，鞣制皮張中的dna含量少，高度降解，且含有大量的酶抑制物，將該方法直接應(yīng)用于皮毛鑒別，提取足夠量的dna成為pcr檢測(cè)的技術(shù)難點(diǎn)。

目前以dna為基礎(chǔ)的物種鑒別研究主要關(guān)注尋找不同物種的特異基因進(jìn)行種及以上水平物種鑒別。當(dāng)前的研究已能夠高效鑒別差異很小的物種。1992年美國(guó)hamlymp.e.等首次設(shè)計(jì)了綿羊特異性pcr探針，可區(qū)分從綿羊毛、山羊絨、馬海毛中分離出的dna。日本紡織檢查協(xié)會(huì)(jsif)采用dna分析法可定性鑒別狐貍毛、貂皮、馬皮、豬皮和牛皮等動(dòng)物纖維或毛皮。francesc等人利用pcr-rflp技術(shù)成功區(qū)分了美洲貂和歐洲貂和林鼬。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種基于pcr(聚合酶鏈反應(yīng)polymerasechainreaction，pcr)技術(shù)的用于動(dòng)物毛皮鑒別的引物和方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，滿足相關(guān)領(lǐng)域應(yīng)用的需要。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是：

一種基于pcr技術(shù)的用于動(dòng)物毛皮鑒別的引物，其特征在于，包括核苷酸序列1-6中的至少一種。

進(jìn)一步地，包括核苷酸序列1-6，需要說(shuō)明的是，核苷酸序列1-2屬于貂屬，核苷酸序列3-4屬于鼬屬，核苷酸序列5-6屬于水貂。

一種基于pcr技術(shù)的用于動(dòng)物毛皮鑒別的方法，其特征在于，包括：

步驟(1)：對(duì)動(dòng)物毛皮中的dna進(jìn)行提取，并測(cè)定dna質(zhì)量；

步驟(2)：以提取的dna為模板，分別使用引物進(jìn)行pcr擴(kuò)增；

步驟(3)：pcr擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)電泳，根據(jù)出現(xiàn)的目標(biāo)的片段大小判斷結(jié)果。

進(jìn)一步地，如果需要進(jìn)一步地鑒別物種，還包括步驟(4)：將pcr擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，并與公用數(shù)據(jù)庫(kù)中的物種特異性序列進(jìn)行序列匹配分析，進(jìn)一步地區(qū)分物種來(lái)源。

具體地，所述序列匹配分析是指：把測(cè)序得到的序列信息，與數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取的該物種序列信息進(jìn)行比較，與已知序列相似度達(dá)到95％以上的即認(rèn)為是該物種的序列。

進(jìn)一步地，所述步驟(1)中關(guān)于對(duì)動(dòng)物毛皮中的dna進(jìn)行提取的方法為改良ctab法，具體包括：加入ctab裂解液和蛋白酶k，置于50-60℃水浴鍋中過(guò)夜裂解；加入酚-三氯甲烷-異戊醇，顛倒混勻后離心；取上清，加入三氯甲烷-異戊醇，混勻后離心；轉(zhuǎn)移上清至另一離心管中，加入異丙醇混勻，2-8℃下離心，棄上清，用70％乙醇洗滌沉淀，2-8℃下離心，棄上清，室溫下晾干；沉淀加入te緩沖液(tris–hcl和edta)；按照rochedna提取試劑盒說(shuō)明將提取的dna過(guò)柱，提取的dna保存至2-8℃環(huán)境下備用。

進(jìn)一步地，所述步驟(2)中關(guān)于pcr擴(kuò)增的步驟為：pcr反應(yīng)體系包含dna模板、pcr預(yù)混液和引物；pcr反應(yīng)條件為：90-95℃預(yù)變性3-10min，90-95℃變性20-50s，50-66℃退火20-50s，70-75℃延伸20-50s，至少30個(gè)循環(huán)。

進(jìn)一步地，所述步驟(3)中，pcr擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)2％瓊脂糖凝膠電泳，120v恒壓，電泳30min。

本發(fā)明請(qǐng)求保護(hù)動(dòng)物毛皮成分鑒別的特異性引物，其含有貂屬、鼬屬和水貂特異性引物，其核苷酸序列如表1所示。

本發(fā)明請(qǐng)求保護(hù)所述引物的試劑盒或檢測(cè)試劑。

本發(fā)明請(qǐng)求保護(hù)所述的成分鑒別在動(dòng)物毛皮、及其制成服裝、配飾中的應(yīng)用，所述動(dòng)物為貂屬(紫貂、松貂、美洲貂、日本貂)、鼬屬(黃鼬、艾鼬)和水貂。

本發(fā)明請(qǐng)求保護(hù)所述的引物在動(dòng)物毛皮材質(zhì)鑒定中的應(yīng)用。

本發(fā)明請(qǐng)求保護(hù)一種基于pcr的動(dòng)物毛皮鑒別方法，應(yīng)用所述的引物，以待測(cè)的動(dòng)物毛皮的dna為模板，使用pcr方法進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)電泳后的目的片段大小和測(cè)序結(jié)果及序列匹配分析進(jìn)行判定。

所述的動(dòng)物毛皮dna是指：將樣本進(jìn)行ctab提取法或者試劑盒提取方法后獲得的dna，包括染色體dna和線粒體dna。

所述的pcr方法是指：利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(pcr)在taqdna聚合酶的作用下，擴(kuò)增特定的dna片段。通過(guò)瓊脂糖電泳，分離擴(kuò)增的目的片段，目的片段長(zhǎng)度見(jiàn)表1。

所述的測(cè)序并序列匹配分析是指：將pcr反應(yīng)片段測(cè)序，得到完整的序列。把測(cè)序得到的序列信息與開(kāi)放數(shù)據(jù)庫(kù)中的線粒體基因組序列信息進(jìn)行比較，與某物種的同源性達(dá)到95％以上的，即認(rèn)定含有該物種的來(lái)源的dna。

本發(fā)明建立了利用pcr技術(shù)對(duì)動(dòng)物毛皮鑒別方法的研究及應(yīng)用，能夠準(zhǔn)確、客觀的提供出檢測(cè)結(jié)果，且該方法具有穩(wěn)定性、可重復(fù)性。本發(fā)明改良了動(dòng)物毛皮dna提取方法，該方法簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)、高效，適用于經(jīng)過(guò)鞣制、染色和制樣等加工步驟的動(dòng)物毛皮制品。本發(fā)明設(shè)計(jì)了貂屬和鼬屬通用引物，簡(jiǎn)化操作流程、降低實(shí)驗(yàn)成本、提高檢測(cè)效率。貂屬引物可擴(kuò)增出紫貂、松貂、美洲貂、日本貂線粒體nd2基因，鼬屬引物可擴(kuò)增出黃鼬、艾鼬線粒體nd4基因，水貂引物可擴(kuò)增出水貂coi基因；各引物之間無(wú)交叉反應(yīng)，特異性良好，檢出限均為20pg。本技術(shù)方案的建立是利用pcr技術(shù)鑒定貂屬和鼬屬毛皮的方法，克服了宏觀觀察法、顯微鏡觀察法人為主觀判斷的缺點(diǎn)，可作為動(dòng)物毛皮種類(lèi)鑒別的仲裁方法。對(duì)規(guī)范市場(chǎng)行為，促進(jìn)毛皮生產(chǎn)及其國(guó)內(nèi)外貿(mào)易的順利開(kāi)展具有實(shí)際意義，及廣闊的應(yīng)用前景。

附圖說(shuō)明

圖1是貂屬引物擴(kuò)增圖；

圖2是貂屬基因序列比對(duì)圖(紫貂)；

圖3是貂屬基因序列比對(duì)圖(掃雪貂)；

圖4是貂屬和鼬屬基因擴(kuò)增檢出限；

圖5是鼬屬引物擴(kuò)增圖；

圖6是鼬屬基因序列比對(duì)圖(黃鼬)；

圖7是鼬屬基因序列比對(duì)圖(艾鼬)；

圖8是水貂coi基因擴(kuò)增圖；(其中，58-63水貂，66、77紫貂，67、78艾虎，76、41、42黃狼，75青根貂，79掃雪貂)

圖9是水貂基因序列比對(duì)圖；

圖10是水貂基因擴(kuò)增檢出限；

圖11-1是毛皮服裝水貂特異性基因擴(kuò)增圖；

圖11-2是毛皮服裝貂屬特異性基因擴(kuò)增圖；

圖11-3是毛皮服裝鼬屬特異性基因擴(kuò)增圖；(其中，58水貂，77紫貂，67艾虎，42黃狼，79掃雪貂，81、82、90-96是服裝樣品編號(hào))

圖12是毛皮服裝鼬屬基因序列比對(duì)圖。

具體實(shí)施方式

一種基于pcr技術(shù)的用于動(dòng)物毛皮鑒別的引物，其特征在于，包括核苷酸序列1-6中的至少一種，具體地：

核苷酸序列1：atccatgctccttatgctag；

核苷酸序列2：gtatargatagataagggggcg；

核苷酸序列3：catcgtctatattgttctgtctagc；

核苷酸序列4：tagggcagtgatgataatgtttact；

核苷酸序列5：gggggctttggaaactga；

核苷酸序列6：gcttcttccttgagtctta。

一種基于pcr技術(shù)的用于動(dòng)物毛皮鑒別的方法，包括：

步驟(1)：首先選擇有代表性的部位剪樣，對(duì)動(dòng)物毛皮樣品的總dna進(jìn)行直接提取，并測(cè)定dna質(zhì)量；

步驟(2)：以動(dòng)物毛皮dna為模板，分別使用貂屬、鼬屬和水貂的引物進(jìn)行pcr擴(kuò)增；

步驟(3)：pcr擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖電泳，根據(jù)是否出現(xiàn)目標(biāo)大小的片段來(lái)判斷結(jié)果；

步驟(4)：如果需要進(jìn)一步鑒別物種，需要將pcr擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序，并與公共數(shù)據(jù)庫(kù)的物種特異性序列匹配分析，進(jìn)一步區(qū)分物種來(lái)源。

本發(fā)明采用改良的ctab法從鞣制的動(dòng)物毛皮制品中提取到足夠的dna，然后分別采用貂屬(包括常見(jiàn)的紫貂、松貂、美洲貂、日本貂)、鼬屬(包括黃鼬、艾鼬)和水貂的特異性引物，利用pcr技術(shù)分別進(jìn)行擴(kuò)增，之后鑒別動(dòng)物毛皮中是否含有貂屬、鼬屬或水貂成分，檢出限為20pg。

為了實(shí)現(xiàn)快速經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)目的，本發(fā)明設(shè)計(jì)了常見(jiàn)貂屬、鼬屬和水貂的特異性引物，各擴(kuò)增產(chǎn)物可以通過(guò)測(cè)序后與公共數(shù)據(jù)庫(kù)的物種特異性序列匹配分析，進(jìn)一步區(qū)分物種來(lái)源。

所述的dna為動(dòng)物毛皮樣本中的總dna。

下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例作詳細(xì)說(shuō)明，本實(shí)施例在以本發(fā)明技術(shù)方案為前提下進(jìn)行實(shí)施，給出了詳細(xì)的實(shí)施方式和具體的操作過(guò)程。本發(fā)明的保護(hù)范圍涉及發(fā)明方法、步驟或條件的修改或替換，包括但不限于下述的實(shí)施例。

若未特別指明，實(shí)施例中所用的化學(xué)試劑均為常規(guī)市售試劑，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段。

主要儀器設(shè)備：pcr儀(abi，美國(guó))、電泳儀(biorad，美國(guó))、冷凍研磨機(jī)(spexsampleprep，美國(guó))；超微量分光光度計(jì)(denovix公司，美國(guó))、高速臺(tái)式離心機(jī)(eppendorf5417r，德國(guó))、微量移液器(10μl，100μl，1000μl)；主要試劑：ctab裂解液、氯仿：異戊醇(24:1)、tris飽和酚、dna提取試劑盒(roche，德國(guó))、pcr預(yù)混液(takara，中國(guó))

具體的，本發(fā)明所述的所述方法，包括如下步驟：

樣品制備：各樣品分別剪取5x5cm大小，盡量將樣品剪碎，也可使用液氮粉碎，得到較為均勻的待測(cè)樣本。處理完畢后，每個(gè)樣品稱(chēng)取約100mg于2ml離心管中，作為實(shí)驗(yàn)樣本。

總dna提?。翰捎酶牧糲tab法，加入0.8mlctab裂解液和40μl蛋白酶k，置于56℃水浴鍋中過(guò)夜裂解。加入等體積的酚-三氯甲烷-異戊醇(25：24：1，v/v/v)。顛倒混勻后，10000g離心5min。取上清，加入等體積三氯甲烷-異戊醇(24：1)，混勻后10000g離心5min，轉(zhuǎn)移上清至另一離心管中，加入0.8倍異丙醇混勻，4℃下10000g離心10min，棄上清，用70％乙醇洗滌沉淀一次，4℃下12000g離心10min，棄上清，室溫下晾干。沉淀加入200μl0.1×te緩沖液(10mmtris–hcl,1mmedta；ph8.0)。按照rochedna提取試劑盒說(shuō)明將提取的dna過(guò)柱，提取的dna稀釋至20ng/μl左右4℃?zhèn)溆谩?/p>

pcr擴(kuò)增：pcr反應(yīng)體系為20μl，包含dna模板1～2μl(約含20ngdna)，pcr預(yù)混液10μl，上下游引物(10mmol/l)各0.4μl，以超純水補(bǔ)足體積。pcr儀反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性5min，95℃變性30s，56℃退火30s(水貂引物退火溫度為63℃)，72℃延伸30s，35個(gè)循環(huán)。pcr產(chǎn)物經(jīng)2％瓊脂糖凝膠電泳，120v恒壓，電泳30min。

引物序列見(jiàn)表1：

表1動(dòng)物毛皮特異性檢測(cè)引物信息表

檢測(cè)結(jié)果分析：電泳后觀察水貂引物擴(kuò)增片段為158bp，貂屬引物擴(kuò)增片段為232bp，鼬屬引物擴(kuò)增片段為251bp。如需進(jìn)一步獲得物種信息，可將pcr產(chǎn)物測(cè)序，并與文后列出的物種特異性序列匹配分析，與已知序列相似度達(dá)到95％以上的即認(rèn)為是該物種的序列。

實(shí)施例1貂屬引物的特異性

收集國(guó)內(nèi)大型水貂紫貂養(yǎng)殖場(chǎng)和皮毛交易市場(chǎng)的紫貂、掃雪貂鞣制的皮張9條，以及常見(jiàn)易于混淆的動(dòng)物毛皮15條，經(jīng)改良ctab法提取dna，pcr法擴(kuò)增貂屬引物，檢測(cè)貂屬成分。樣品信息詳見(jiàn)表2。

表2.用于檢測(cè)貂屬特異性的樣品信息

由圖1可見(jiàn)，陽(yáng)性、陰性及空白對(duì)照擴(kuò)增正常，貂屬引物中紫貂、掃雪貂擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，水貂、青根貂、黃狼和艾虎等均為陰性；引物特異性較好。

pcr擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)序列比對(duì)，掃雪貂與松貂(林貂)martesmartes的線粒體nd2基因一致性達(dá)到99％；紫貂與紫貂(黑貂)marteszibellina的線粒體nd2基因一致性達(dá)到99％。見(jiàn)圖2、圖3。

貂屬引物的檢出限檢測(cè)：將紫貂dna(約含20ngdna)進(jìn)行1:10逐級(jí)稀釋至0.2pg，進(jìn)行貂屬成分檢測(cè)。將樣品稀釋至20pg時(shí)，能夠擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，檢出貂屬成分；當(dāng)樣品dna低于20pg時(shí)，未擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，未檢出貂屬成分，方法檢出限為20pg。見(jiàn)圖4。

實(shí)施例2鼬屬引物的特異性

收集國(guó)內(nèi)大型皮毛動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)和皮毛交易市場(chǎng)的黃狼、艾虎鞣制的皮張18條，以及常見(jiàn)易于混淆的動(dòng)物毛皮15條，經(jīng)改良ctab法提取dna，pcr法擴(kuò)增鼬屬引物，檢測(cè)鼬屬成分。樣品信息詳見(jiàn)表3。

表3.用于檢測(cè)鼬屬特異性的樣品信息

由圖5可見(jiàn)，陽(yáng)性、陰性及空白對(duì)照擴(kuò)增正常，鼬屬引物中黃狼、艾虎擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，水貂、青根貂、紫貂和掃雪貂等均為陰性；引物特異性較好。

pcr擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)序列比對(duì)，黃狼與黃鼬(黃鼠狼)mustelasibirica的線粒體nd4基因一致性達(dá)到99％；艾虎與艾鼬mustelaeversmannii的線粒體nd4基因一致性達(dá)到97％。見(jiàn)圖6、圖7。

鼬屬引物的檢出限檢測(cè)：將黃狼dna(約含20ngdna)進(jìn)行1:10逐級(jí)稀釋至0.2pg，進(jìn)行鼬屬成分檢測(cè)。將樣品稀釋至20pg時(shí)，能夠擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，檢出鼬屬成分；當(dāng)樣品dna低于20pg時(shí)，未擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，未檢出鼬屬成分，方法檢出限為20pg。見(jiàn)圖4。

實(shí)施例3水貂引物的特異性

收集國(guó)內(nèi)大型皮毛動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)和皮毛交易市場(chǎng)的進(jìn)口、雜交水貂鞣制的皮張14條，以及常見(jiàn)易于混淆的動(dòng)物毛皮13條，經(jīng)改良ctab法提取dna，pcr法擴(kuò)增水貂引物，檢測(cè)水貂成分。樣品信息詳見(jiàn)表4。

表4.用于檢測(cè)水貂特異性的樣品信息

由圖8可見(jiàn)，陽(yáng)性、陰性及空白對(duì)照擴(kuò)增正常，水貂引物中僅水貂擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，黃狼、艾虎、紫貂和掃雪貂等均為陰性；引物特異性較好。

pcr擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)序列比對(duì)，水貂與水貂neovisonvison的線粒體coi基因一致性達(dá)到100％。見(jiàn)圖9。

水貂引物的檢出限檢測(cè)：將水貂dna(約含20ngdna)進(jìn)行1:10逐級(jí)稀釋至0.2pg，進(jìn)行水貂成分檢測(cè)。將樣品稀釋至20pg時(shí)，能夠擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，檢出水貂成分；當(dāng)樣品dna低于20pg時(shí)，未擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，未檢出水貂成分，方法檢出限為20pg。見(jiàn)圖10。

實(shí)施例4市售成品服裝動(dòng)物成分檢測(cè)

分別在河北大營(yíng)毛皮市場(chǎng)、海寧皮革城和淘寶、京東等網(wǎng)絡(luò)店鋪購(gòu)入毛皮服裝10件，由檢驗(yàn)人員依據(jù)上海市社會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《皮革和毛皮材質(zhì)鑒別通用方法》，使用常規(guī)法檢測(cè)動(dòng)物毛皮，判定服裝主要材質(zhì)是否與標(biāo)簽標(biāo)示一致。同時(shí)，自服裝上取樣，提取dna，使用pcr方法檢測(cè)水貂、貂屬和鼬屬成分。兩種方法進(jìn)行對(duì)比。樣品信息見(jiàn)表5。

表5市售動(dòng)物毛皮服裝樣品表

常規(guī)法檢測(cè)結(jié)果:采用手感目測(cè)法和顯微鏡觀察法，對(duì)毛皮服裝材質(zhì)進(jìn)行鑒別，結(jié)果見(jiàn)表6。

表6常規(guī)檢測(cè)法鑒別結(jié)果

pcr法鑒別毛皮服裝成分結(jié)果:成衣在腋下、底邊處分別取樣，各4cm²。將皮張剪成直徑5mm左右小塊，使用冷凍研磨機(jī)研磨成粉末，提取dna。用pcr法分別擴(kuò)增水貂、貂屬和鼬屬基因。結(jié)果見(jiàn)表7，圖片見(jiàn)圖11-1至11-3。

表7pcr法檢測(cè)毛皮服裝鑒別結(jié)果

10件成衣的14件樣品中，常規(guī)法檢測(cè)可以確定材質(zhì)的10件樣品，pcr法檢測(cè)結(jié)果均與之一致。標(biāo)簽標(biāo)示內(nèi)容與材質(zhì)鑒定結(jié)果完全一致的僅有5件，其中只有1件成衣的標(biāo)簽標(biāo)示與材質(zhì)鑒定結(jié)果完全一致。

常規(guī)法檢測(cè)無(wú)法確定的樣品為4件(占28.6％)，通過(guò)pcr法檢測(cè)進(jìn)行進(jìn)一步的分析。使用我們?cè)O(shè)計(jì)并驗(yàn)證的水貂、貂屬、鼬屬特異性引物，分別進(jìn)行擴(kuò)增，結(jié)果兩件拼貂大衣中一件檢出水貂成分和鼬屬成分，一件未檢出水貂成分、檢出鼬屬成分；還有兩件服裝均檢出鼬屬成分，經(jīng)測(cè)序比對(duì)同源性均>98％。見(jiàn)圖12。

以上對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施例進(jìn)行了詳細(xì)描述，但其只是作為范例，本發(fā)明并不限制于以上描述的具體實(shí)施例。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，任何對(duì)本發(fā)明進(jìn)行的等同修改和替代也都在本發(fā)明的范疇之中。因此，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍下所作的均等變換和修改，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。