本發(fā)明涉及一種蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其在調(diào)控植物雄性不育中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：黃瓜屬于葫蘆科甜瓜屬，為重要的園藝作物，在世界各地普遍栽培，是我國(guó)主栽蔬菜作物之一。糖是植物光合作用的主要產(chǎn)物，也是植物長(zhǎng)距離運(yùn)輸和貯藏的主要形式，更是協(xié)調(diào)植物源庫(kù)關(guān)系的重要信號(hào)分子。葉片制造的糖經(jīng)過(guò)韌皮部長(zhǎng)距離運(yùn)輸，到達(dá)并在花、果實(shí)、種子等庫(kù)器官中卸出，其在庫(kù)器官中卸出的方式、卸出的速度對(duì)產(chǎn)量和品質(zhì)形成具有重要作用。對(duì)大多數(shù)植物來(lái)說(shuō)，蔗糖是其光合產(chǎn)物的主要運(yùn)輸形式，少數(shù)作物以棉籽糖家族系列寡糖為主要運(yùn)輸形式。糖到達(dá)庫(kù)器官以后會(huì)以多種方式卸出，分解或重新轉(zhuǎn)運(yùn)的過(guò)程需要各種轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和酶的參與，其代謝轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜。蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白作為運(yùn)輸蔗糖的工具，參與韌皮部糖卸載，在很大程度上調(diào)節(jié)著植株源庫(kù)關(guān)系，調(diào)節(jié)著植株碳素分配。在黃瓜中研究蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的作用及分子機(jī)理，有利于豐富和完善同化物源庫(kù)運(yùn)輸細(xì)胞學(xué)路徑理論體系，為實(shí)現(xiàn)黃瓜優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)栽培提供理論參考。植物雄性不育一直是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)，因?yàn)樵陔s交育種中雄性不育系可以極大地節(jié)省人工，節(jié)約時(shí)間，減少種子生產(chǎn)成本，著名的三系法雜交水稻育種就是應(yīng)用了雄性不育系大大提高了種子生產(chǎn)效率。黃瓜的花屬于雌雄異花同株，雌花包括下位的子房和上位的柱頭及花瓣、萼片，雄花包括花藥、花瓣、花萼?；ㄆ鞴僭谥仓晟L(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中屬于非常強(qiáng)大的庫(kù)，花從分化到開(kāi)放的整個(gè)發(fā)育過(guò)程一般需要在數(shù)天之內(nèi)完成，此過(guò)程需要大量的糖分供應(yīng)，糖分供應(yīng)不及時(shí)往往會(huì)造成花器官發(fā)育異常甚至敗育。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供一種蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其在調(diào)控植物雄性不育中的應(yīng)用。本發(fā)明提供的蛋白質(zhì)，獲自黃瓜，命名為cssut1蛋白，是如下(a1)或(a2)：(a1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(a2)將序列表中序列1所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物雄性育性相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。為了使(a1)中的cssut1蛋白便于純化和檢測(cè)，可在由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)的氨基末端或羧基末端連接上如表1所示的標(biāo)簽。表1標(biāo)簽的序列標(biāo)簽殘基序列poly-arg5-6(通常為5個(gè))rrrrrpoly-his2-10(通常為6個(gè))hhhhhhflag8dykddddkstrep-tagii8wshpqfekc-myc10eqkliseedl上述(a2)中的cssut1蛋白可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進(jìn)行生物表達(dá)得到。上述(a2)中的cssut1蛋白的編碼基因可通過(guò)將序列表中序列2所示的dna序列中缺失一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的密碼子，和/或進(jìn)行一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)的錯(cuò)義突變，和/或在其5′端和/或3′端連上表1所示的標(biāo)簽的編碼序列得到。編碼所述cssut1蛋白的基因(cssut1基因)也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。所述cssut1基因?yàn)槿缦?b1)-(b3)中任一所述的dna分子：(b1)編碼區(qū)如序列表中序列2所示的dna分子；(b2)在嚴(yán)格條件下與(b1)限定的dna序列雜交且編碼與植物雄性育性相關(guān)蛋白的dna分子；(b3)與(b1)或(b2)限定的dna序列具有90％以上同源性且編碼與植物雄性育性相關(guān)蛋白的dna分子。上述嚴(yán)格條件可為用0.1×sspe(或0.1×ssc)，0.1％sds的溶液，在dna或者rna雜交實(shí)驗(yàn)中65℃下雜交并洗膜。含有所述cssut1基因的重組表達(dá)載體、表達(dá)盒、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明還保護(hù)cssut1蛋白或cssut1基因在調(diào)控植物雄性育性中的應(yīng)用。本發(fā)明還保護(hù)cssut1蛋白或cssut1基因在植物育種中的應(yīng)用。所述植物育種是為了選育雄性不育的植物。本發(fā)明還保護(hù)一種培育轉(zhuǎn)基因植物的方法，包括如下步驟：抑制目的植物中cssut1基因的表達(dá)，得到雄性不育的轉(zhuǎn)基因植物。所述方法中，所述“抑制目的植物中cssut1基因的表達(dá)”是通過(guò)干擾載體實(shí)現(xiàn)的。所述干擾載體可通過(guò)ti質(zhì)粒、ri質(zhì)粒、植物病毒載體、直接dna轉(zhuǎn)化、顯微注射、電導(dǎo)、農(nóng)桿菌介導(dǎo)等常規(guī)生物學(xué)方法轉(zhuǎn)化到目的植物中。所述干擾載體具體可為含有干擾片段的重組表達(dá)載體。所述干擾片段包括區(qū)段甲和區(qū)段乙。所述區(qū)段甲和所述區(qū)段乙為反向互補(bǔ)序列。所述區(qū)段甲的序列如序列表的序列3所示。所述干擾片段具體可為序列表的序列4所示。所述干擾載體具體可為在載體pfgc1008的多克隆位點(diǎn)中插入了序列表的序列4所示的雙鏈dna分子得到的重組表達(dá)載體。所述干擾載體具體可為將載體pfgc1008的asci和spei酶切位點(diǎn)之間的小片段取代為了序列表的序列4所示的dna分子得到的重組表達(dá)載體。本發(fā)明還保護(hù)一種培育雄性不育植物的方法，包括如下步驟：抑制目的植物中cssut1蛋白的活性和/或表達(dá)量，得到雄性不育的植物。以上任一所述目的植物具體可為雙子葉植物。所述雙子葉植物可為葫蘆科植物。所述葫蘆科植物可為黃瓜屬植物。所述黃瓜屬植物具體可為黃瓜，例如新泰密刺黃瓜。本發(fā)明還保護(hù)以上任一所述方法在植物育種中的應(yīng)用。所述植物育種是為了選育雄性不育的植物。本發(fā)明還保護(hù)一種特異dna分子，包括區(qū)段甲和區(qū)段乙。所述區(qū)段甲和所述區(qū)段乙為反向互補(bǔ)序列。所述區(qū)段甲的序列如序列表的序列3所示。所述特異dna分子如序列表的序列4所示。本發(fā)明還保護(hù)一種干擾載體，是將所述特異dna分子導(dǎo)入表達(dá)載體得到的。所述干擾載體具體可為在載體pfgc1008的多克隆位點(diǎn)中插入了序列表的序列4所示的雙鏈dna分子得到的重組表達(dá)載體。所述干擾載體具體可為將載體pfgc1008的asci和spei酶切位點(diǎn)之間的小片段取代為了序列表的序列4所示的dna分子得到的重組表達(dá)載體。本發(fā)明還保護(hù)所述特異dna分子或所述干擾載體在植物育種中的應(yīng)用。所述植物育種是為了選育雄性不育的植物。以上任一所述植物具體可為雙子葉植物。所述雙子葉植物可為葫蘆科植物。所述葫蘆科植物可為黃瓜屬植物。所述黃瓜屬植物具體可為黃瓜，例如新泰密刺黃瓜。以上任一所述雄性不育具體可表現(xiàn)為雄花無(wú)法生長(zhǎng)和/或雄花花藥表面無(wú)花粉散出和/或雄花花粉無(wú)活力。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種黃瓜蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白cssut1及其編碼基因，下調(diào)cssut1基因的表達(dá)量會(huì)導(dǎo)致黃瓜植株雄性不育。本發(fā)明可以應(yīng)用到黃瓜育種中，對(duì)提高育種效率有著積極的作用。附圖說(shuō)明圖1為黃瓜不同組織部位cssut1基因表達(dá)量分析。圖2為干擾載體pfgc1008-rnai-cssut1部分原件示意圖。圖3為轉(zhuǎn)基因干擾植株鑒定結(jié)果。圖4為干擾植株(rnai)雄花生長(zhǎng)速度觀察結(jié)果。圖5為干擾植株(rnai)花粉粒染色觀察結(jié)果。具體實(shí)施方式以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均為自常規(guī)生化試劑商店購(gòu)買得到的。以下實(shí)施例中的定量試驗(yàn)，均設(shè)置三次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果取平均值。新泰密刺黃瓜：參考文獻(xiàn)：chengj，wangz，yaof，eta1.down-regulatingcsht1，acucumberpollen-specifichexosetransporter，inhibitspollengermination，tubegrowth，andseeddevelopment.[j].plantphysiology，2015，168(2)：635-47.；公眾可以從中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)獲得。載體pfgc1008：參考文獻(xiàn)：chench，yins，liuxw，，liub，yangs，xuesd，caiyl，blackk，liuhl，dongmm，zhangyq，zhaoby，renhz(2016)thewd-repeatproteincsttg1regulatesfruitwartformationthroughinteractionwiththehomeodomain-leucinezipperiproteinmict.plantphysiology171：1156-1168；公眾可以從中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)獲得。農(nóng)桿菌lba4404：參考文獻(xiàn)：chengj，wangz，yaof，etal.down-regulatingcsht1，acucumberpollen-specifichexosetransporter，inhibitspollengermination，tubegrowth，andseeddevelopment.[j].plantphysiology，2015，168(2)：635-47.；公眾可以從中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)獲得。ms固體培養(yǎng)基：ms培養(yǎng)基4.43g，蔗糖30g，植物凝膠2.5g，補(bǔ)水至1l，調(diào)ph5.7-5.8。ms分化培養(yǎng)基：ms培養(yǎng)基4.43g，蔗糖30g，植物凝膠2.5g，6-ba0.5mg，aba1mg，補(bǔ)水至1l，ph5.7-5.8。ms培養(yǎng)基：北京西美杰科技有限公司，貨號(hào)：m519。實(shí)施例1、cssut1蛋白及其編碼基因的獲得對(duì)各品種黃瓜基因組進(jìn)行序列分析、區(qū)段截取和功能驗(yàn)證，從新泰密刺黃瓜中發(fā)現(xiàn)一種蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，將其命名為cssut1蛋白，如序列表的序列1所示。將編碼cssut1蛋白的基因命名cssut1基因，如序列表的序列2所示。實(shí)施例2、黃瓜不同組織部位cssut1基因表達(dá)量分析分別取長(zhǎng)至初瓜期的新泰密刺黃瓜的根(r)、莖(s)、幼葉(yl)、成熟葉(ml)、雄花(mf)、雌花(ff)和果實(shí)(f)。提取上述材料的總rna，并合成第一鏈cdna，采用qrt-pcr的方法檢測(cè)cssut1基因的表達(dá)情況(以tubllin基因?yàn)閮?nèi)參基因)，采用引物ysut1-f和引物ysut1-r組成的引物對(duì)檢測(cè)cssut1基因的表達(dá)，采用引物tub-f和引物tub-r組成的引物對(duì)檢測(cè)tubllin基因的表達(dá)。ysut1-f：5’-cgtggttacaaaggttgctgag-3’；ysut1-r：5’-gcggatacgatgaactgtgga-3’；tub-f：5’-acgctgttggtggtggtac-3’；tub-r：5’-agaggggtaaacagtgaatc-3’。結(jié)果如圖1所示。結(jié)果表明，cssut1基因在黃瓜的雄花中特異性表達(dá)，其他部位較低或檢測(cè)不到。實(shí)施例3、轉(zhuǎn)基因植株的獲得一、干擾載體的構(gòu)建1、提取新泰密刺黃瓜的總rna，并反轉(zhuǎn)錄為cdna，以cdna為模板，采用cssut1-rnai-1f和cssut1-rnai-1r組成的引物對(duì)進(jìn)行pcr擴(kuò)增，回收pcr擴(kuò)增產(chǎn)物。cssut1-rnai-1f：5’-aggcgcgccatcggttggttcccatttatcat-3’；cssut1-rnai-1r：5’-atttaaatccccagcacgaacaccaa-3’。cssut1-rnai-1f和cssut1-rnai-1r中，下劃線分別標(biāo)注asci和swai酶切位點(diǎn)。2、用限制性內(nèi)切酶asci和swai雙酶切步驟1的pcr擴(kuò)增產(chǎn)物，回收酶切產(chǎn)物。3、用限制性內(nèi)切酶asci和swai雙酶切載體pfgc1008，回收約10907bp的載體骨架。4、將步驟2的酶切產(chǎn)物和步驟3的載體骨架連接，得到重組載體pfgc1008-rnai-1。根據(jù)測(cè)序結(jié)果，對(duì)重組載體pfgc1008-rnai-1進(jìn)行結(jié)構(gòu)描述如下：將載體pfgc1008的asci和swai酶切位點(diǎn)之間的小片段取代為了序列表中序列3所示的dna分子。5、提取新泰密刺黃瓜的總rna，并反轉(zhuǎn)錄為cdna，以cdna為模板，采用cssut1-rnai-2f和cssut1-rnai-2r組成的引物對(duì)進(jìn)行pcr擴(kuò)增，回收pcr擴(kuò)增產(chǎn)物。cssut1-rnai-2f：5’-gactagtatcggttggttcccatttatcat-3’；cssut1-rnai-2r：5’-cgcggatccccccagcacgaacaccaa-3’。cssut1-rnai-2f和cssut1-rnai-2r中，下劃線分別標(biāo)注spei和bamhi酶切位點(diǎn)。6、用限制性內(nèi)切酶spei和bamhi雙酶切步驟5的pcr擴(kuò)增產(chǎn)物，回收酶切產(chǎn)物。7、用限制性內(nèi)切酶spei和bamhi雙酶切步驟4得到的重組載體pfgc1008-rnai-1，回收約11190bp的載體骨架。8、將步驟6的酶切產(chǎn)物和步驟7的載體骨架連接，得到干擾載體pfgc1008-rnai-cssut1。根據(jù)測(cè)序結(jié)果，對(duì)干擾載體pfgc1008-rnai-cssut1進(jìn)行結(jié)構(gòu)描述如下：將載體pfgc1008的asci和spei酶切位點(diǎn)之間的小片段取代為了序列表中序列4所示的dna分子。干擾載體pfgc1008-rnai-cssut1部分原件示意圖如圖2所示。二、轉(zhuǎn)基因干擾植株的獲得1、將步驟一得到的干擾載體pfgc1008-rnai-cssut1導(dǎo)入農(nóng)桿菌lba4404，得到重組農(nóng)桿菌。2、取步驟1得到的重組農(nóng)桿菌，接種至含有25μg/ml利福平和100μg/ml氯霉素的yeb液體培養(yǎng)基中，120rpm、28℃培養(yǎng)至菌液od600nm達(dá)到0.6-0.8；將菌液5000rpm離心5min收集菌體沉淀，將菌體沉淀用1/2ms液體培養(yǎng)基洗滌2次后，重新懸浮于1/2ms液體培養(yǎng)基中，調(diào)整菌液od600nm為0.2-0.3。3、取新泰密刺黃瓜種子，播種于ms固體培養(yǎng)基中28℃恒溫暗培養(yǎng)至種子萌發(fā)2天后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。4、取步驟3萌發(fā)2天后的黃瓜幼嫩子葉，去除生長(zhǎng)點(diǎn)后將每片子葉均勻分成2塊，只保留靠近生長(zhǎng)點(diǎn)一半的部分。5、將步驟4處理后的黃瓜子葉浸沒(méi)在步驟2得到的農(nóng)桿菌菌液中侵染15分鐘，然后用滅菌的濾紙吸干多余菌液，將黃瓜子葉接種至ms分化培養(yǎng)基中，黑暗條件28℃培養(yǎng)2天后收獲外植體。6、將步驟5得到的外植體接種至含有500mg/l羧芐青霉素的ms分化培養(yǎng)基上，25℃、2000lx光照強(qiáng)度(14h光照/10h黑暗)培養(yǎng)，待抗性芽長(zhǎng)至1cm時(shí)，將其切下移入含有200mg/l羧芐青霉素的ms固體培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，獲得t0代植株，待植株根系發(fā)育好后，移入盛有無(wú)菌土的花盆中，覆膜保溫保濕，28℃、2000lx光照強(qiáng)度(12h光照/12h黑暗)培養(yǎng)，10天后除去覆膜，14天后定植于日光溫室，進(jìn)行常規(guī)田間管理。7、取步驟6的t0代植株的葉片，提取總rna并反轉(zhuǎn)錄為cdna，以edna為模板，采用引物35s2-f和35s2-r進(jìn)行pcr鑒定。35s2-f：5’-tggttagagaggcttacgcagcaggtc-3’；35s2-r：5’-ccatctttgggaccactgtcggca-3’。將pcr產(chǎn)物進(jìn)行電泳，如果得到特異性條帶，則待測(cè)植株鑒定為陽(yáng)性。設(shè)置采用新泰密刺黃瓜(野生型)cdna為模板的野生型對(duì)照(wt)。設(shè)置采用水為模板的陰性對(duì)照(-)。設(shè)置采用干擾載體pfgc1008-rnai-cssut1為模板的陽(yáng)性對(duì)照(+)。鑒定結(jié)果如圖3所示。8、取步驟7鑒定為陽(yáng)性的t0代植株的葉片，提取總rna，采用實(shí)施例2中的方法檢測(cè)cssut1基因的表達(dá)情況。檢測(cè)結(jié)果如圖3所示。結(jié)果表明，rnai14中cssut1基因的表達(dá)量下降最顯著。9、將t0代rnai14植株自交，得到t1代植株。取若干rnai14株系的t1代植株，按照步驟7和步驟8的方法進(jìn)行鑒定和表達(dá)量檢測(cè)。結(jié)果如圖3所示。結(jié)果表明，t1代植株中，rnai14-1中cssut1基因的表達(dá)量下降最顯著。三、轉(zhuǎn)空載體植株的獲得采用載體pfgc1008代替干擾載體pfgc1008-rnai-cssut1，按照步驟二進(jìn)行操作，得到轉(zhuǎn)空載體植株。實(shí)施例4、轉(zhuǎn)基因干擾植株的表型觀察待測(cè)植株為：新泰密刺黃瓜(wt)、實(shí)施例3構(gòu)建的t1代轉(zhuǎn)基因干擾植株(rnai14-1、rnai14-6和rnai14-8)和實(shí)施例3構(gòu)建的t1代轉(zhuǎn)空載體植株。1、選取待測(cè)植株同一節(jié)位、庫(kù)強(qiáng)相似、大小相同的早期雄花進(jìn)行連續(xù)多天的觀察。結(jié)果如圖4所示。結(jié)果表明干擾植株(rnai)的雄花生長(zhǎng)速度明顯慢于野生型(wt)，雄花發(fā)育后期甚至生長(zhǎng)停滯，無(wú)法開(kāi)放，然后變黃萎蔫凋落。轉(zhuǎn)空載體植株表型與野生型(wt)相同。2、取待測(cè)植株開(kāi)花當(dāng)天的雄花，去掉花瓣萼片，在體式顯微鏡下觀察花藥表面的花粉散出情況。結(jié)果如圖5a所示。結(jié)果表明，野生型(wt)花藥表面有大量花粉粒，而干擾植株(rnai)花藥表面無(wú)花粉散出。轉(zhuǎn)空載體植株表型與野生型(wt)相同。3、取待測(cè)植株開(kāi)花當(dāng)天雄花花藥，摩擦載玻片使花粉散落到載玻片上，滴一滴碘-碘化鉀溶液，染色5min，然后蓋上蓋玻片在顯微鏡下觀察。結(jié)果如圖5b所示。結(jié)果表明，野生型(wt)花粉大量散出且被染成藍(lán)黑色，活力強(qiáng)，干擾植株(rnai)花藥摩擦后幾乎無(wú)花粉散出，僅有的1-2顆花粉粒也不能被碘-碘化鉀染成藍(lán)色，沒(méi)有花粉活力。說(shuō)明干擾植株(rnai)是完全雄性不育的。轉(zhuǎn)空載體植株表型與野生型(wt)相同。<110>中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)<120>蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白及其在調(diào)控植物雄性不育中的應(yīng)用<160>4<210>1<211>495<212>prt<213>黃瓜（cucumissativusl.）<400>1metgluhisglyglyvalvalserlysglymetalaseraspproser151015sersertyrglnlysileileilevalalaalailealaalaglyval202530glnpheglytrpalaleuglnleuserleuleuthrprotyrvalgln354045glnleuglyvalserhisthrtrpseralapheiletrpleucysgly505560proleuserglyleuilevalglnprothrvalglytyrtyrserasp65707580argcysthrserargpheglyargargargpropheilevalalagly859095serthrphevalalathralavalpheleuileglyphealaalaasp100105110ileglyhisalavalglyaspproleuasnlysprothrlysproarg115120125alavalalailephevalvalglyphetrpvalleuaspvalalaasn130135140asnmetleuglnglyprocysargalaleuleualaaspmetsercys145150155160asnasnhislyslysmetargmetalaasnglyphepheserphephe165170175metglyvalglyasnvalleuglytyralaalaglysertyrasnlys180185190leutyrlyspheleuprophethrleuthrlysalacysaspsertyr195200205cysalaasnleulysthrcyspheleuileaspilevalpheleuleu210215220leuvalthrthrphealavalleumetvalsergluasnglnpheasp225230235240proleugluileaspgluglualathrprophepheglylysleuphe245250255glyalaleulyslysleuglulyspromettrpleuleuleuleuval260265270thralaleuasntrpileglytrpphepropheilemettyraspthr275280285asptrpmetglyleugluvaltyrglyglylysprolysglyserpro290295300glugluvallysphetyraspleuglyvalargalaglyalaleugly305310315320leumetvalasnserphevalleuglypheseralaleuglyileglu325330335proileserargileleuglyglyleuargtrptrptrpglyileval340345350asnileilephethrvalcysmetglyserthrvalvalvalthrlys355360365valalagluargtrpargservalasnglyleuargproproproleu370375380asnvalargalaglyalapheserilephealaileleuglyilepro385390395400leuservalthrpheservalprophealaleualaserilepheser405410415sergluseraspalaglyglnglyleuserleuglyileleuasnleu420425430pheilevalileproglnpheilevalseralavalserglyproleu435440445aspalaalapheglyglyglyasnleuproalaphevalmetglygly450455460ilealaserphealaseralametcysalametphevalleuproasp465470475480proproproglnseraspvalserleuthrmetglyglyglyhis485490495<210>2<211>1488<212>dna<213>黃瓜（cucumissativusl.）<400>2atggagcatggaggtgttgtgtcgaaggggatggcgtcagacccttcaagttcgtaccaa60aaaataataatagttgcagctattgcagccggagtccaatttggttgggctctacagctt120tcattgctaacaccttacgtccaacaacttggagtttcacatacatggtccgctttcata180tggctttgcggaccattatcaggacttattgtgcaacccactgtcgggtactacagtgat240cgctgcacctctaggtttggtcgtcgtcggccgttcattgttgctggatctacttttgtg300gcaactgcagttttcctcattggctttgctgcagacattgggcatgcagtgggtgatccg360cttaacaaacccacaaaaccaagagctgttgccatctttgtggttggattttgggttctt420gatgttgctaacaacatgctccaaggcccttgtagagctctgttggcagatatgtcatgt480aacaaccacaagaagatgagaatggccaatggatttttctcattcttcatgggggtaggg540aatgttttggggtacgcagctgggtcctataacaaactctacaaattccttcccttcaca600ctaaccaaagcatgtgacagttactgtgccaacctcaaaacatgcttcttgatcgacatt660gtattccttctcctcgttaccacgttcgctgtgttgatggtgagcgagaaccaatttgac720ccattggagattgacgaagaagcaacaccctttttcgggaaattgtttggagcactcaag780aagttggagaagccaatgtggcttttgttgctggtaacagccttgaactggatcggttgg840ttcccatttatcatgtacgatactgactggatgggtttggaagtgtacggaggaaagcca900aaggggagtcctgaagaagtcaagttctatgaccttggtgttcgtgctggggcccttggg960ttgatggtaaactcatttgttttgggattttcagctttgggaattgagccaataagtcgt1020attttaggaggcctcagatggtggtggggaattgttaacattatatttacagtttgcatg1080ggatccaccgtcgtggttacaaaggttgctgagcgttggaggtccgttaatggtttgcgt1140cctcctccactaaacgtcagggcaggagcattttcgatctttgcgatattgggtattcca1200ttgtcagtcacttttagtgttccatttgcgcttgcgtccatcttttcttcagaatcggat1260gcgggtcaaggcctctccttgggaattctcaacctcttcattgtcattccacagttcatc1320gtatccgcagttagtgggccattagatgctgctttcggaggaggaaacttacccgcattc1380gtaatgggtggaattgcttcttttgcaagtgcaatgtgtgcaatgttcgtcctccccgat1440ccaccacctcaatccgatgtctccttaacaatgggcggtggtcattga1488<210>3<211>121<212>dna<213>黃瓜（cucumissativusl.）<400>3atcggttggttcccatttatcatgtacgatactgactggatgggtttggaagtgtacgga60ggaaagccaaaggggagtcctgaagaagtcaagttctatgaccttggtgttcgtgctggg120g121<210>4<211>623<212>dna<213>人工序列<220><223><400>4atcggttggttcccatttatcatgtacgatactgactggatgggtttggaagtgtacgga60ggaaagccaaaggggagtcctgaagaagtcaagttctatgaccttggtgttcgtgctggg120gatttaaatccccagatgaacatggcatcgtggtgattgatgaaactgctgctgtcggct180ttaacctctctttaggcattggtttcgaagcgggcaacaagccgaaagaactgtacagcg240aagaggcagtcaacggggaaactcagcaagcgcacttacaggcgattaaagagctgatag300cgcgtgacaaaaaccacccaagcgtggtgatgtggagtattgccaacgaaccggataccc360gtccgcaaggtgcacgggaatatttcgcgccactggcggaagcaacgcgtaaactcgacc420cgacgcgtccgatcacctgcgtcaatgtaatgttctgcgacgctcacaccgataccatca480gcgatctctttgatggggatccccccagcacgaacaccaaggtcatagaacttgacttct540tcaggactcccctttggctttcctccgtacacttccaaacccatccagtcagtatcgtac600atgataaatgggaaccaaccgat623當(dāng)前第1頁(yè)12