本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，更具體而言，涉及一種皮膚美容的方法以及其中使用的美容儀和美容霜。

背景技術(shù)：

膠原蛋白被稱為“骨中之骨，膚中之膚，肉中之肉”，可以說是真皮層強(qiáng)有力的后盾，其對(duì)皮膚的作用不言而喻。皮膚成分中有70％是由膠原蛋白組成，皮膚有如一個(gè)大套子緊緊包住身體各處，表面積相當(dāng)大，人體四肢活動(dòng)時(shí)，皮膚中膠原蛋白發(fā)揮功能，使皮膚具有保護(hù)功能，又有適當(dāng)彈性及堅(jiān)硬度。膠原蛋白的含量處于較高的水平能夠使得皮膚更加具有彈性，皺紋更少，這是每個(gè)女性所追尋的目標(biāo)。但隨著年齡的增長，體內(nèi)尤其是皮膚中的膠原蛋白急劇降低。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，包括紫外線、空氣污染、飲食、輻射等在內(nèi)的諸多外來因素可影響膠原蛋白的含量，這些因素可能通過激活膠原酶來破壞膠原蛋白致使膠原蛋白的含量有所降低，進(jìn)而增加皺紋的數(shù)量。為了維持膠原蛋白在較高的水平，達(dá)到美容除皺的目的，必須抑制外來因素對(duì)膠原酶的激活作用。通過使用膠原蛋白酶的特異性抑制劑，可以特異性抑制皮膚中的膠原酶的活性，維持體內(nèi)尤其是皮膚中的膠原蛋白的高水平，從而實(shí)現(xiàn)美容除皺。

現(xiàn)有技術(shù)CN1618480A中已經(jīng)公開了一種結(jié)合光物理和生物化學(xué)的皮膚美容方法。該方法利用特定波長的低能量光波，按照特定的程序釋放時(shí)，能穿透面部皮膚表皮層，激活真皮層的纖維細(xì)胞產(chǎn)生膠原蛋白，并促進(jìn)代謝殘余物質(zhì)的清除。同時(shí)，被破壞的代謝平衡誘發(fā)皮膚內(nèi)的自然修復(fù)機(jī)制，使光活化的結(jié)果不能保持。為此，CN1618480A還包含一類以脂溶性的膠原酶抑制物為核心的外敷用品，它與上述光學(xué)儀器同步使用，可使皮膚內(nèi)的膠原蛋白維持在高水平，從而達(dá)到面部皮膚去皺紋，增強(qiáng)彈性和消除眼袋和黑眼圈的長期效果。具體而言，所述膠原酶抑制劑是具有以下結(jié)構(gòu)的OL－1肽：Benzoyl-Pro-D-Leu-D-Ala-NHOH。

現(xiàn)有技術(shù)CN102076706A也公開了一種類似的肽：

X.sup.1-X.sup.2-X.sup.3-NHOH；

其中X.sup.1是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：脯氨酸、羥基脯氨酸、硫代脯氨酸和丙氨酸；X.sup.2是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：谷氨酰胺、谷氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和苯丙氨酸；和X.sup.3是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和肌氨酸；其中α-氨基酸X.sup.1的羧基與α-氨基酸X.sup.2的氨基形成肽鍵，α-氨基酸X.sup.2的羧基與α-氨基酸X.sup.3的氨基形成肽鍵，且α-氨基酸X.sup.3的羧基與-NHOH形成酰胺基；所述α-氨基酸X.sup.1的氨基的氫原子可被選自以下基團(tuán)組成的組的取代基取代：乙?；?、苯甲?；?、芐氧基、t-丁氧基羰基、芐氧基羰基、p-氨基苯甲?；-氨基-芐基和p-羥基苯甲?；?；或其藥學(xué)可接受的鹽。并進(jìn)一步公開了一種具體的肽：苯甲?；?脯氨酸-D-亮氨酸-D-丙氨酸-NHOH。

經(jīng)過我們后續(xù)的研究發(fā)現(xiàn)，上述以脂溶性的膠原酶抑制物為核心的外敷用品在單獨(dú)使用時(shí)對(duì)美容除皺的效果欠佳。為了開發(fā)一種能夠單獨(dú)使用來達(dá)到美容除皺效果的皮膚美容的方法以及其中使用的美容儀和美容霜，申請(qǐng)人進(jìn)行了大量的試驗(yàn)，最終發(fā)現(xiàn)了一類新穎的膠原酶抑制劑以及以其為基礎(chǔ)的美容霜，當(dāng)敷于皮膚時(shí)，其可以長期維持高水平的膠原蛋白，從而達(dá)到美容除皺的效果。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明涉及一種具有以下結(jié)構(gòu)的肽，該肽相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)而言，在單獨(dú)使用時(shí)對(duì)美容除皺的效果較好。該肽的結(jié)構(gòu)如下：

X.sup.1-X.sup.2-X.sup.3-X.sup.4-X.sup.5-NHOH

其中X.sup.1是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：脯氨酸、羥基脯氨酸、硫代脯氨酸和丙氨酸；

X.sup.2是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：谷氨酰胺、谷氨酸、亮氨酸、異亮氨酸和苯丙氨酸；

X.sup.3是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和蘇氨酸；

X.sup.4是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：蘇氨酸和絲氨酸；

X.sup.5是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：纈氨酸、脯氨酸和亮氨酸；

其中α-氨基酸X.sup.1的羧基與α-氨基酸X.sup.2的氨基形成肽鍵，α-氨基酸X.sup.2的羧基與α-氨基酸X.sup.3的氨基形成肽鍵，α-氨基酸X.sup.3的羧基與α-氨基酸X.sup.4的氨基形成肽鍵，α-氨基酸X.sup.4的羧基與α-氨基酸X.sup.5的氨基形成肽鍵，且α-氨基酸X.sup.5的羧基與-NHOH形成酰胺基；所述α-氨基酸X.sup.1的氨基的氫原子可被選自以下基團(tuán)組成的組的取代基取代：乙?；⒈郊柞；?、芐氧基、t-丁氧基羰基、芐氧基羰基、p-氨基苯甲?；-氨基-芐基和p-羥基苯甲?；换蚱渌帉W(xué)可接受的鹽。

進(jìn)一步地，其中X.sup.1是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：脯氨酸和丙氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.1是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：脯氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.2是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：亮氨酸和異亮氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.2是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：亮氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.3是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：甘氨酸和丙氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.3是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：丙氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.4是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：蘇氨酸和絲氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.4是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：蘇氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.5是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：纈氨酸、脯氨酸和亮氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.5是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：纈氨酸和脯氨酸。

進(jìn)一步地，其中X.sup.5是選自以下L型或D型氨基酸組成的組的氨基酸的殘基：纈氨酸。

進(jìn)一步地，其中所述肽為Benzoyl-Pro-D-Leu-D-Ala-Thr-Val-NHOH。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種美容霜，其中含有上述任一肽和可用于化妝品的添加劑。

進(jìn)一步地，其中所述肽為Benzoyl-Pro-D-Leu-D-Ala-Thr-Val-NHOH。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種皮膚美容方法，包括在待處理的皮膚部位涂擦上述任一美容霜。

本發(fā)明的肽相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)如CN1618480A、CN102076706A的肽而言，具有以下區(qū)別：

(1)本發(fā)明的肽為X.sup.1-X.sup.2-X.sup.3-X.sup.4-X.sup.5-NHOH，CN 1618480A的肽為Benzoyl-Pro-D-Leu-D-Ala-NHOH，CN 102076706A的肽為X.sup.1-X.sup.2-X.sup.3-NHOH，可見本發(fā)明的肽的長度與現(xiàn)有技術(shù)不同。

(2)在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上，經(jīng)過大量的試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，插入兩個(gè)如上所述的氨基酸殘基后，美容效果明顯增強(qiáng)，并且能夠長期的保持該美容除皺的效果。

具體而言，為了改進(jìn)美容效果，申請(qǐng)人在現(xiàn)有技術(shù)上作了大量的試驗(yàn)，如：改變氨基酸殘基的種類，但美容效果沒有任何改進(jìn)；增加氨基酸殘基的數(shù)量從而使肽的長度增加，但發(fā)現(xiàn)在簡單的增加肽的長度如7個(gè)氨基酸殘基時(shí)僅在包含5個(gè)氨基酸殘基時(shí)才能取得較好的效果。在此基礎(chǔ)上，申請(qǐng)人嘗試改變部分氨基酸殘基的種類，發(fā)現(xiàn)僅在X.sup.4為極性氨基酸的殘基、X.sup.5為非極性氨基酸的殘基時(shí)，才能夠獲得最佳的美容效果，具體原因未知。

附圖說明

圖1：本發(fā)明美容霜刺激成纖維細(xì)胞合成膠原蛋白。其中，肌動(dòng)蛋白(actin)的含量作為總蛋白的加樣對(duì)照。左列：對(duì)照組；中間列：使用Benzoyl-Pro-D-Leu-D-Ala-D-Ala-Thr-NHOH(編號(hào)8)的組；右列：使用Benzoyl-Pro-D-Leu-D-Ala-Thr-Val-NHOH(編號(hào)9)的組。上圖：膠原蛋白；下圖：actin。

具體實(shí)施方式

下面通過一些實(shí)施例來具體地說明本發(fā)明。

實(shí)施例：美容霜美膚除皺試驗(yàn)

一.美容霜的使用方法

用溫水仔細(xì)清洗眼睛周圍,特別是眼角的皮膚；

用手指在眼睛周圍,特別是眼角的皮膚上均勻地敷上一薄層本發(fā)明的美容霜以及對(duì)照組的美容霜；

每個(gè)治療者每天治療1次,持續(xù)12周；

專業(yè)美容師和治療者獨(dú)立地分別每周一次記錄療效；

美容師用我們提供的相機(jī)拍攝記錄每個(gè)治療者的眼角皺紋變化；

治療結(jié)束后，統(tǒng)計(jì)治療有效性；對(duì)于任何一個(gè)測(cè)試者，只有測(cè)試者本人評(píng)估和專業(yè)美容師的評(píng)估一致，我們才認(rèn)為該項(xiàng)指標(biāo)的變化是有效的。

二.試驗(yàn)結(jié)果

招募20-55歲眼角有皺紋或眼部皮膚狀況需要改進(jìn)(包括眼袋，黑眼圈等)的女士，分成多組，每組至少5人，進(jìn)行不同的肽的美容效果的試驗(yàn)，結(jié)果如下：

表1不同的肽的美容效果

^a總分為10分，分?jǐn)?shù)越高，表明美容效果越好，具體評(píng)估方式參見CN1618480A和CN102076706A。

從表1可以看出，在保持氨基酸殘基數(shù)量不變的情況下，僅改變氨基酸殘基的種類，打分維持在4分至5分之間，并沒有獲得美容效果的任何改進(jìn)。逐漸增加氨基酸殘基的數(shù)量至7個(gè)氨基酸殘基，發(fā)現(xiàn)在包含5個(gè)氨基酸殘基時(shí)打分明顯高于其他氨基酸殘基數(shù)量時(shí)的打分。在此基礎(chǔ)上，申請(qǐng)人嘗試在保持氨基酸殘基的數(shù)量為5個(gè)的基礎(chǔ)上，改變部分氨基酸殘基的種類，從結(jié)果可以看出，盡管其他氨基酸殘基的組合的打分介于6.5分至7.7分之間，此時(shí)美容除皺效果優(yōu)于其他氨基酸殘基數(shù)量時(shí)的打分，但在X.sup.4為極性氨基酸Thr的殘基、X.sup.5為非極性氨基酸Val的殘基時(shí)，打分高達(dá)9.5，獲得了最佳的美容效果。

三.膠原蛋白含量檢測(cè)

為了進(jìn)一步驗(yàn)證美容效果的改善是否與膠原蛋白的含量增加相關(guān)，測(cè)試了對(duì)照組以及上述試驗(yàn)結(jié)果中效果最優(yōu)的兩組(肽分別為Benzoyl-Pro-D-Leu-D-Ala-D-Ala-Thr-NHOH(編號(hào)8)和Benzoyl-Pro-D-Leu-D-Ala-Thr-Val-NHOH(編號(hào)9))中的膠原蛋白含量，具體試驗(yàn)方法可參見CN1618480A等現(xiàn)有技術(shù)。測(cè)試結(jié)果發(fā)現(xiàn)，相對(duì)于對(duì)照組，編號(hào)8和編號(hào)9的肽均能顯著提升皮膚中膠原蛋白的含量，并且編號(hào)9的肽的提升效果更佳顯著，如圖1所示。該檢測(cè)結(jié)果進(jìn)一步佐證了編號(hào)9的肽能夠抑制皮膚內(nèi)的膠原酶的活性，從而增加膠原蛋白的含量，實(shí)現(xiàn)最佳的美容除皺的效果。

由此可見，盡管本發(fā)明的肽僅在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上插入了2個(gè)氨基酸殘基，但申請(qǐng)人出乎意料地發(fā)現(xiàn)在X.sup.4為極性氨基酸Thr的殘基、X.sup.5為非極性氨基酸Val的殘基時(shí)，才能獲得最佳的美容效果，這與現(xiàn)有技術(shù)是背道而馳的。

上述實(shí)施例意圖僅僅是示例性的，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到或?qū)⒛軌蚴褂貌怀^常規(guī)實(shí)驗(yàn)來確定多種等同物。所有這些等同物被認(rèn)為在所要求保護(hù)的主題的范圍內(nèi)，并且被所附權(quán)利要求所涵蓋。因?yàn)樾薷膶?duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員將是顯而易見的，所以意圖要求保護(hù)的主題僅由所附權(quán)利要求的范圍限制。