本發(fā)明涉及一種從貓豆中提取兩種氨基酸的方法，具體涉及一種從貓豆中同時(shí)提取高純度酪氨酸和左旋多巴的方法。

背景技術(shù)：

貓豆，又名刺毛黎豆，是常春油麻藤的種子。常春油麻藤主要分布于亞熱帶、溫帶地區(qū)，生于灌木叢，溪谷，河邊，在中國(guó)境內(nèi)主要分布于四川、貴州、云南、陜西南部、湖北、浙江、江西、湖南、福建、廣東、廣西。貓豆具有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富、均衡的特點(diǎn)，尤其是蛋白質(zhì)豐富，其營(yíng)養(yǎng)成分與大豆、蠶豆等接近。此外，貓豆中富含左旋多巴，是提取天然左旋多巴最主要的原料藥材，其中，左旋多巴的含量最高可達(dá)到10%。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，貓豆中還有多種重要的氨基酸，其中，酪氨酸的含量最高可達(dá)到2%。

左旋多巴是一種抗震顫麻痹藥，是治療帕金森癥的首選藥物。酪氨酸是一種重要的原料藥和食品添加劑，由于其結(jié)構(gòu)與左旋多巴相似，因此，可以用于合成左旋多巴。

酪氨酸和左旋多巴的分子結(jié)構(gòu)式如下所示。

目前，大量獲得左旋多巴的方法主要有三種：天然植物提取法、化學(xué)合成法和微生物發(fā)酵法。在我國(guó)，普遍使用的是天然植物提取法，尤其是從貓豆中提取和分離左旋多巴。但是，由于左旋多巴的性質(zhì)不穩(wěn)定，在高溫或接觸空氣條件下易氧化、分解。因此，傳統(tǒng)的提取左旋多巴的方法收率普遍偏低。

目前，獲得酪氨酸的方法也有三種：蛋白質(zhì)水解法、化學(xué)催化法和微生物發(fā)酵法。國(guó)內(nèi)關(guān)于從貓豆原料中提取、分離酪氨酸的相關(guān)報(bào)道較少。

cn102267919a公開了一種貓豆左旋多巴的制備方法，是以貓豆為原料，通過(guò)預(yù)處理，酸水提，濃縮，萃取，脫色，結(jié)晶，干燥等步驟獲得左旋多巴。但是，該方法有機(jī)溶劑的用量過(guò)大；且整個(gè)過(guò)程對(duì)易氧化的左旋多巴未做任何保護(hù)措施，左旋多巴的收率偏低。

cn104311440a公開了一種從貓豆中提取左旋多巴的方法，是以貓豆為原料，通過(guò)破碎、高壓提取、雙水相萃取、后續(xù)處理等步驟獲得左旋多巴。但是，該方法提取條件苛刻，左旋多巴在提取過(guò)程中容易被破壞；且由于使用了高沸點(diǎn)的有機(jī)溶劑，將導(dǎo)致產(chǎn)品中溶劑殘留超標(biāo)。

cn1042703a公開了一種水滲漉-離子交換法提取左旋多巴新工藝，是以貓豆為原料，通過(guò)粉碎，酸水滲漉，陽(yáng)離子樹脂交換，洗脫，濃縮，精制等步驟獲得左旋多巴。但是，該方法酸水用量大，且離子交換樹脂的洗脫和再生同樣需要大量的酸、堿，對(duì)環(huán)境污染較大；且只能獲得左旋多巴一種產(chǎn)品，貓豆資源未得到充分利用。

cn104402748a公開了一種微波輔助從貓豆中提取左旋多巴的方法，是以貓豆為原料，通過(guò)粉碎，水、醋酸、抗壞血酸和果膠酶預(yù)處理，微波輔助提取，精濾，超濾，納濾，濃縮，結(jié)晶，分離，洗滌與干燥等步驟獲得左旋多巴。但是，該方法需要微波輔助，設(shè)備造價(jià)昂貴，投入較大，生產(chǎn)成本高；且左旋多巴的收率不高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。

cn104610080a公開了一種利用貓豆制備左旋多巴的方法，是通過(guò)除雜粉碎、酸水提、濃縮、萃取、脫色、結(jié)晶、干燥等步驟獲得左旋多巴。但是，該方法對(duì)各步驟都未采取保護(hù)措施，因此，左旋多巴的提取率和純度都不高。

cn105055494a公開了一種貓豆提取物的制備方法，是通過(guò)貓豆粉碎，加入果膠酶和淀粉酶，亞臨界萃取，陰陽(yáng)離子吸附，氨水洗脫，干燥，得到貓豆提取物。但是，該方法工藝復(fù)雜，設(shè)備要求高，提取物中左旋多巴的含量不超過(guò)15%。

上述諸多方法中，僅僅都只涉及貓豆中左旋多巴的提取和分離，均未涉及貓豆中另一種活性成分——酪氨酸的提取和分離。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是，克服現(xiàn)有技術(shù)存在的上述缺陷，提供一種產(chǎn)品純度、收率高，工藝過(guò)程可操作性強(qiáng)，不使用有毒有害有機(jī)溶劑，環(huán)保無(wú)污染，成本低，適宜于工業(yè)化生產(chǎn)的從貓豆中同時(shí)提取高純度酪氨酸和左旋多巴的方法。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案如下：一種從貓豆中同時(shí)提取高純度酪氨酸和左旋多巴的方法，包括以下步驟：

（1）原料粉碎、酶解：將貓豆原料粉碎，再加入水、蛋白酶制劑和抗氧化劑，混合均勻，酶解，得酶解物；

（2）提取、納濾：在步驟（1）所得酶解物中，加入低度醇水溶液，室溫下攪拌提取，過(guò)濾，納濾，得透過(guò)液；

（3）濃縮、析晶：將步驟（2）所得透過(guò)液濃縮，冷卻至室溫，調(diào)節(jié)ph值，攪拌析晶，過(guò)濾，真空干燥，得酪氨酸粗品；將過(guò)濾酪氨酸粗品后的濾液，調(diào)節(jié)ph值，攪拌析晶，過(guò)濾，真空干燥，得左旋多巴粗品；

（4）重結(jié)晶：分別在步驟（3）所得酪氨酸粗品或左旋多巴粗品中，加入酸性醇水溶液，在室溫下攪拌溶解，過(guò)濾，調(diào)節(jié)ph值，冷凍析晶，過(guò)濾，真空干燥，得高純酪氨酸或高純左旋多巴。

優(yōu)選地，步驟（1）中，所述貓豆原料粉碎后的粒徑為50～200目（更優(yōu)選80～120目）。優(yōu)選使用低溫粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎，可防止粉碎過(guò)程中機(jī)器零件摩擦產(chǎn)生的局部高溫破壞原料中的有效成分。所述貓豆原料中，酪氨酸的質(zhì)量含量為1～2%，左旋多巴的質(zhì)量含量為2～10%。

優(yōu)選地，步驟（1）中，所述蛋白酶制劑的酶活為5萬(wàn)～15萬(wàn)u/g（更優(yōu)選8萬(wàn)～12萬(wàn)u/g）。

優(yōu)選地，步驟（1）中，所述貓豆原料與水、蛋白酶制劑、抗氧化劑的質(zhì)量比為1:1～2:0.01～0.05:0.001～0.005。加入水的目的是將原料吸水膨脹，有利于酶解；若水的用量過(guò)多，則將降低蛋白酶的濃度，若水的用量過(guò)少，則原料膨脹不徹底，都不利于充分酶解。加入蛋白酶制劑的目的是將貓豆原料中的蛋白質(zhì)分解，得到多肽和氨基酸，從而提高酪氨酸和左旋多巴的含量；若蛋白酶制劑的用量過(guò)多，則將造成物資的浪費(fèi)，若蛋白酶制劑的用量少，則將不利于充分酶解。加入抗氧化劑的目的是保護(hù)酪氨酸和左旋多巴，使其在提取和分離過(guò)程中不被氧化、降解；若抗氧化劑的用量過(guò)多，則將造成物資的浪費(fèi)；若抗氧化劑的用量過(guò)少，則不利于起到保護(hù)的作用。

優(yōu)選地，步驟（1）中，所述抗氧化劑為維生素c、維生素e、β-胡蘿卜素、茶多酚或番茄紅素等中的一種或幾種。

優(yōu)選地，步驟（1）中，所述酶解的溫度為15～50℃（更優(yōu)選20～30℃），酶解的時(shí)間為2～14h（更優(yōu)選6～12h）。酶解的目的在于改變貓豆原料原有的植物組織結(jié)構(gòu)，同時(shí)提高酪氨酸和左旋多巴的含量，使其更快、更多的被提取出。若酶解溫度過(guò)低，則蛋白酶的催化活性低，難以充分水解蛋白質(zhì)；若酶解溫度過(guò)高，則將破壞蛋白酶和目標(biāo)產(chǎn)物。若酶解的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則將導(dǎo)致時(shí)間和能源的浪費(fèi)；若酶解的時(shí)間過(guò)短，則易造成酶解不充分。

優(yōu)選地，步驟（2）中，所述低度醇水溶液的用量為酶解物質(zhì)量的5～20倍。本發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，酪氨酸和左旋多巴以及雜質(zhì)在水中的溶解度均比較大，而在醇中的溶解度很小，只有醇的水溶液，特別是低度醇水溶液對(duì)酪氨酸和左旋多巴的選擇性好，有利于與雜質(zhì)相分離，提取率高。若低度醇水溶液的用量過(guò)少，則酪氨酸和左旋多巴的提取不完全；若低度醇水溶液的用量過(guò)多，則將增加納濾和濃縮的處理量，并增加溶劑的消耗。

優(yōu)選地，步驟（2）中，所述低度醇水溶液中的醇為甲醇、乙醇、異丙醇或正丁醇等中的一種或幾種，低度醇水溶液的體積濃度為5～50%。

優(yōu)選地，步驟（2）中，所述提取的時(shí)間為3～12h（更優(yōu)選4～8h）。若提取的時(shí)間過(guò)短，則酪氨酸和左旋多巴來(lái)不及充分溶解和滲透，造成收率偏低；若提取的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，則將導(dǎo)致時(shí)間和能源的浪費(fèi)。

優(yōu)選地，步驟（2）中，所述納濾所用納濾膜的截留分子量為0.5～2.0kda。納濾的目的是除去提取液中的淀粉、果膠、水溶性纖維、植物油脂、黃酮和色素等大分子類雜質(zhì)。

優(yōu)選地，步驟（3）中，所述濃縮的方式為降膜濃縮，濃縮至濃縮液總固形物質(zhì)量濃度為5～30%（更優(yōu)選15～25%）。使用降膜濃縮可確保在濃縮至目標(biāo)濃度的過(guò)程中，熱敏性、易氧化的酪氨酸和左旋多巴不被高溫破壞。

優(yōu)選地，步驟（3）中，析出酪氨酸粗品時(shí)，調(diào)節(jié)ph值至5.2～5.8。

優(yōu)選地，步驟（3）中，析出左旋多巴粗品時(shí)，調(diào)節(jié)ph值至3.3～3.7。

優(yōu)選地，步驟（3）中，用于調(diào)節(jié)ph值的酸性溶液為鹽酸、硫酸、磷酸、醋酸或檸檬酸等中的一種或幾種，酸的質(zhì)量濃度為5～10%。

優(yōu)選地，步驟（4）中，所述酸性醇水溶液的用量為左旋多巴粗品或酪氨酸粗品質(zhì)量的5～20倍（更優(yōu)選8～15倍）。采用酸性醇水溶液重結(jié)晶的原理是：酪氨酸和左旋多巴在酸性醇水溶液中溶解度很大，調(diào)節(jié)ph值到各自的等電點(diǎn)時(shí)，溶解度急劇變小，但是，ph值的變化對(duì)其中雜質(zhì)的溶解度并沒有波動(dòng)，從而達(dá)到精制的目的。本發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)，若重結(jié)晶用的溶劑與提取用溶劑一致，重結(jié)晶的效果往往不理想，通過(guò)改變?nèi)軇┑姆N類或性質(zhì)，有利于提高重結(jié)晶產(chǎn)品的得率和純度，因此，步驟（4）重結(jié)晶析晶選用的是酸性醇水溶液，而步驟（2）選用的是低度醇水溶液。若酸性醇水溶液的用量過(guò)少，溶解后，粗品中的雜質(zhì)濃度過(guò)高，容易析出雜質(zhì)，影響晶體的純度；若酸性醇水溶液的用量過(guò)少，溶解后，酪氨酸和左旋多巴在溶劑中的濃度太低，難以充分析出，導(dǎo)致收率偏低。

優(yōu)選地，步驟（4）中，所述酸性醇水溶液中的醇為甲醇、乙醇、異丙醇或正丁醇等中的一種或幾種，酸性醇水溶液中醇的體積濃度為50～80%。若醇的濃度過(guò)低，則酪氨酸和左旋多巴粗品將難以溶解；若醇的濃度過(guò)高，則酪氨酸和左旋多巴在其中的溶解度過(guò)大，將導(dǎo)致重結(jié)晶收率偏低。

優(yōu)選地，步驟（4）中，所述酸性醇水溶液中的酸為鹽酸、硫酸、磷酸、醋酸或檸檬酸等中的一種或幾種，酸性醇水溶液中酸的質(zhì)量濃度為0.5～10%（更優(yōu)選1～5%）。若酸的濃度過(guò)低，則酪氨酸和左旋多巴粗品將難以充分溶解；若酸的濃度過(guò)高，則將破壞酪氨酸和左旋多巴的分子結(jié)構(gòu)。

優(yōu)選地，步驟（4）中，析出高純酪氨酸時(shí)，調(diào)節(jié)ph值至5.3～5.7。重結(jié)晶時(shí)，調(diào)節(jié)的ph值范圍較步驟（3）析晶時(shí)小，是為了更接近等電點(diǎn)，使得析出的產(chǎn)物純度更高。

優(yōu)選地，步驟（4）中，析出高純左旋多巴時(shí)，調(diào)節(jié)ph值至3.4～3.6。重結(jié)晶時(shí)，調(diào)節(jié)的ph值范圍較步驟（3）析晶時(shí)小，是為了更接近等電點(diǎn)，使得析出的產(chǎn)物純度更高。

優(yōu)選地，步驟（4）中，用于調(diào)節(jié)ph值的堿性水溶液中的堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣或氨水等中的一種或幾種，堿的質(zhì)量濃度為0.5～10%。

本發(fā)明方法中，用酸或堿調(diào)節(jié)ph值的目的是：利用兩種氨基酸在其各自的等電點(diǎn)時(shí)溶解度最小的原理，使其析出。ph值高于或低于等電點(diǎn)，對(duì)應(yīng)的氨基酸的溶解度都會(huì)增大，從而導(dǎo)致析晶的收率偏低；若用于調(diào)節(jié)ph值的酸或堿的濃度過(guò)低，將導(dǎo)致加入酸或堿后的結(jié)晶溶劑體積過(guò)大，結(jié)晶的濃度降低，晶體析出量減少；若用于調(diào)節(jié)ph值的酸或堿的濃度過(guò)高，酸或堿加入時(shí)，將導(dǎo)致局部ph值過(guò)高或過(guò)低，都有可能破壞產(chǎn)品的分子結(jié)構(gòu)，使收率偏低。

優(yōu)選地，步驟（4）中，所述冷凍析晶的溫度為5～10℃，析晶的時(shí)間為6～24h。

本發(fā)明方法的原理為：通過(guò)使用低溫粉碎、室溫提取以及抗氧化劑的添加等手段，最大程度的保護(hù)了原料中的酪氨酸和左旋多巴，使其在整個(gè)提取、分離過(guò)程中不被破壞和氧化。同時(shí)，通過(guò)用蛋白酶將貓豆中的蛋白質(zhì)水解，提高了原料中酪氨酸和左旋多巴的含量，因此，收率會(huì)有大幅度的提升。另外，本發(fā)明人巧妙的利用左旋多巴的等電點(diǎn)為3.5，酪氨酸的等電點(diǎn)為5.66，兩種氨基酸等電點(diǎn)不同且相差較大，氨基酸在其等電點(diǎn)時(shí)溶解度最小的特性，通過(guò)依次調(diào)節(jié)ph值至相應(yīng)的等電點(diǎn)，可以使酪氨酸和左旋多巴分別結(jié)晶析出。

本發(fā)明方法的有益效果如下：

（1）本發(fā)明方法可以同時(shí)從貓豆中提取酪氨酸和左旋多巴，所得高純酪氨酸產(chǎn)品和高純左旋多巴產(chǎn)品均為白色結(jié)晶性粉末，經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)，所得高純酪氨酸的純度≥97.5%，收率≥85%，所得高純左旋多巴的純度≥99.8%，收率≥91%，產(chǎn)品質(zhì)量均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)；

（2）本發(fā)明方法采用溫和的粉碎和提取方式，并通過(guò)添加抗氧化劑和使用蛋白酶，保護(hù)產(chǎn)品不被破壞的同時(shí)還提高了產(chǎn)品的含量，因此，收率相比傳統(tǒng)工藝有大幅度的提升，提高了貓豆資源的利用率，且工藝過(guò)程可操作性強(qiáng)，不使用有毒有害有機(jī)溶劑，環(huán)保無(wú)污染，成本低，適宜于工業(yè)化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。

本發(fā)明實(shí)施例所使用的貓豆原料購(gòu)于廣西河池，其中，酪氨酸的質(zhì)量含量為1.5%，左旋多巴的質(zhì)量含量為9.6%；本發(fā)明實(shí)施例所使用的蛋白酶制劑為復(fù)合蛋白酶mf101，酶活為10萬(wàn)u/g，購(gòu)于安琪酵母股份有限公司；本發(fā)明實(shí)施例所使用的化學(xué)試劑和原料，如無(wú)特殊說(shuō)明，均通過(guò)常規(guī)商業(yè)途徑獲得。

本發(fā)明實(shí)施例中，采用高效液相色譜（hplc）外標(biāo)法檢測(cè)酪氨酸和左旋多巴的含量。

實(shí)施例1

（1）原料粉碎、酶解：將100kg貓豆原料用低溫粉碎機(jī)粉碎至粒徑為80目，再加入100kg水、1.5kg蛋白酶制劑和0.15kg維生素e，混合均勻，20℃下，酶解10h，得201kg酶解物；

（2）提取、納濾：在步驟（1）所得201kg酶解物中，加入1100kg體積濃度為20%的甲醇水溶液，室溫下攪拌提取4h，過(guò)濾，用截留分子量為1.0kda的納濾膜納濾，得1000kg透過(guò)液；

（3）濃縮、析晶：將步驟（2）所得1000kg透過(guò)液用降膜式濃縮器濃縮至總固形物質(zhì)量濃度為15%，冷卻至室溫，用質(zhì)量濃度5%的鹽酸水溶液調(diào)節(jié)ph值至5.3，攪拌析晶，過(guò)濾，真空干燥，得酪氨酸粗品2.1kg；將過(guò)濾酪氨酸粗品后的濾液，用質(zhì)量濃度5%的鹽酸水溶液調(diào)節(jié)ph值至3.4，攪拌析晶，過(guò)濾，真空干燥，得左旋多巴粗品11.3kg；

（4）重結(jié)晶：在2.1kg步驟（3）所得酪氨酸粗品中，加入21kg檸檬酸乙醇水溶液（其中，乙醇的體積濃度為70%，檸檬酸的質(zhì)量濃度為5%），在室溫下攪拌溶解，過(guò)濾，用質(zhì)量濃度5%的氨水水溶液調(diào)節(jié)ph值至5.6，在5℃下，冷凍析晶12h，過(guò)濾，真空干燥，得高純酪氨酸1.28kg；在11.3kg步驟（3）所得左旋多巴粗品中，加入113kg檸檬酸乙醇水溶液（其中，乙醇的體積濃度為70%，檸檬酸的質(zhì)量濃度為5%），在室溫下攪拌溶解，過(guò)濾，用質(zhì)量濃度5%的氨水水溶液調(diào)節(jié)ph值至3.5，在5℃下，冷凍析晶12h，過(guò)濾，真空干燥，得高純左旋多巴8.73kg。

經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)，所得高純酪氨酸精品的純度為98.5wt%，酪氨酸的總收率為85%；所得高純左旋多巴的純度為99.9wt%，左旋多巴的總收率為91%。

實(shí)施例2

（1）原料粉碎、酶解：將200kg貓豆原料用低溫粉碎機(jī)粉碎至粒徑為100目，再加入400kg水、8kg蛋白酶制劑和0.8kgβ-胡蘿卜素，混合均勻，30℃下，酶解7h，得605kg酶解物；

（2）提取、納濾：在步驟（1）所得605kg酶解物中，加入9075kg體積濃度為30%的乙醇水溶液，室溫下攪拌提取6h，過(guò)濾，用截留分子量為0.5kda的納濾膜納濾，得9000kg透過(guò)液；

（3）濃縮、析晶：將步驟（2）所得9000kg透過(guò)液用降膜式濃縮器濃縮至總固形物質(zhì)量濃度為20%，冷卻至室溫，用質(zhì)量濃度8%的硫酸水溶液調(diào)節(jié)ph值至5.7，攪拌析晶，過(guò)濾，真空干燥，得酪氨酸粗品4.3kg；將過(guò)濾酪氨酸粗品后的濾液，用質(zhì)量濃度8%的硫酸水溶液調(diào)節(jié)ph值至3.7，攪拌析晶，過(guò)濾，真空干燥，得左旋多巴粗品23.1kg；

（4）重結(jié)晶：在4.3kg步驟（3）所得酪氨酸粗品中，加入64.5kg鹽酸甲醇水溶液（其中，甲醇的體積濃度為80%，鹽酸的質(zhì)量濃度為1%），在室溫下攪拌溶解，過(guò)濾，用質(zhì)量濃度0.5%的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)ph值至5.7，在10℃下，冷凍析晶24h，過(guò)濾，真空干燥，得高純酪氨酸2.7kg；在23.1kg步驟（3）所得左旋多巴粗品中，加入346.5kg鹽酸甲醇水溶液（其中，甲醇的體積濃度為80%，鹽酸的質(zhì)量濃度為1%），在室溫下攪拌溶解，過(guò)濾，用質(zhì)量濃度0.5%的氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)ph值至3.4，在10℃下，冷凍析晶24h，過(guò)濾，真空干燥，得高純左旋多巴17.7kg。

經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)，所得高純酪氨酸精品的純度為98.0wt%，酪氨酸的總收率為90%；所得高純左旋多巴的純度為99.8wt%，左旋多巴的總收率為92%。

實(shí)施例3

（1）原料粉碎、酶解：將150kg貓豆原料用低溫粉碎機(jī)粉碎至粒徑為80目，再加入150kg水、3kg蛋白酶制劑和0.15kg茶多酚，混合均勻，20℃下，酶解12h，得302kg酶解物；

（2）提取、納濾：在步驟（1）所得302kg酶解物中，加入3020kg體積濃度為50%的甲醇水溶液，室溫下攪拌提取8h，過(guò)濾，用截留分子量為2.0kda的納濾膜納濾，得2800kg透過(guò)液；

（3）濃縮、析晶：將步驟（2）所得2800kg透過(guò)液用降膜式濃縮器濃縮至總固形物質(zhì)量濃度為25%，冷卻至室溫，用質(zhì)量濃度10%的醋酸水溶液調(diào)節(jié)ph值至5.7，攪拌析晶，過(guò)濾，真空干燥，得酪氨酸粗品3.2kg；將過(guò)濾酪氨酸粗品后的濾液，用質(zhì)量濃度10%的醋酸水溶液調(diào)節(jié)ph值至3.3，攪拌析晶，過(guò)濾，真空干燥，得左旋多巴粗品17kg；

（4）重結(jié)晶：在3.2kg步驟（3）所得酪氨酸粗品中，加入32kg鹽酸異丙醇水溶液（其中，異丙醇的體積濃度為50%，鹽酸的質(zhì)量濃度為1.5%），在室溫下攪拌溶解，過(guò)濾，用質(zhì)量濃度5%的氫氧化鉀水溶液調(diào)節(jié)ph值至5.6，在5℃下，冷凍析晶10h，過(guò)濾，真空干燥，得高純酪氨酸1.98kg；在17kg步驟（3）所得左旋多巴粗品中，加入170kg鹽酸異丙醇水溶液（其中，異丙醇的體積濃度為50%，鹽酸的質(zhì)量濃度為1.5%），在室溫下攪拌溶解，過(guò)濾，用質(zhì)量濃度5%的氫氧化鉀水溶液調(diào)節(jié)ph值至3.5，在5℃下，冷凍析晶10h，過(guò)濾，真空干燥，得高純左旋多巴13.25kg。

經(jīng)高效液相色譜法檢測(cè)，所得高純酪氨酸精品的純度為97.5wt%，酪氨酸的總收率為88%；所得高純左旋多巴的純度為99.9wt%，左旋多巴的總收率為92%。