本發(fā)明屬于茶葉的綜合開(kāi)發(fā)利用領(lǐng)域，主要涉及一種茶葉醇溶蛋白的提取方法。
背景技術(shù)：
：我國(guó)是茶葉生產(chǎn)加工大國(guó)，茶園面積和產(chǎn)量逐年增長(zhǎng)，出現(xiàn)茶資源供過(guò)于求的趨勢(shì)。中國(guó)茶產(chǎn)業(yè)消費(fèi)報(bào)告指出，2015年中國(guó)茶園面積為287.75億m2，占世界茶園總面積的78.57%；茶葉產(chǎn)量227.8萬(wàn)噸，占世界茶葉總產(chǎn)量的43.11%，茶葉消費(fèi)量沒(méi)有相應(yīng)的增長(zhǎng)，而大量茶葉功能性提取物產(chǎn)業(yè)和茶飲料產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展，年產(chǎn)大量茶渣。同時(shí)，還有大量的未被采摘的鮮葉以及夏秋茶低檔茶。這些茶渣、茶鮮葉和夏秋低檔茶資源量大，但未有效地開(kāi)發(fā)利用途徑，造成茶葉資源浪費(fèi)。故如何合理利用大量茶渣成為急需解決的問(wèn)題。多途徑、全方位綜合利用茶葉資源符合國(guó)家茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略。目前茶渣大部分作為肥料處理。在茶渣中含有大量的未被利用的蛋白。茶葉中蛋白質(zhì)含量約15%~30%（以干重計(jì)算），比小麥、大米和玉米等主要糧食作物的蛋白質(zhì)含量高。其中約82%為谷蛋白，14%為醇溶蛋白，3%為白蛋白和約1%為球蛋白。其中，谷蛋白溶于稀酸或稀堿，白蛋白溶于水，球蛋白溶于鹽類(lèi)。可見(jiàn)，茶葉中大部分蛋白質(zhì)不溶于水，殘留在茶渣中，不能被人體吸收利用。目前，對(duì)于茶葉蛋白質(zhì)的研究開(kāi)發(fā)相對(duì)較少，更未見(jiàn)對(duì)茶葉醇溶蛋白相關(guān)研究?，F(xiàn)有的關(guān)于茶葉蛋白質(zhì)的專(zhuān)利主要有：解新安等人申請(qǐng)?zhí)枮?01610212197.4的“一種微波輔助提取茶渣蛋白的工藝方法”的發(fā)明專(zhuān)利，主要用微波輔助提高茶渣蛋白提取效率；潘順順等人申請(qǐng)?zhí)枮?01610313547.6的“一種綠茶茶渣中蛋白的提取方法”的發(fā)明專(zhuān)利，主要利用酶解破壁，堿溶酸沉得到茶蛋白；張士康等人申請(qǐng)?zhí)枮?01110225665.9的“一種茶葉蛋白產(chǎn)品的提取方法”的發(fā)明專(zhuān)利，主要利用超聲輔助堿提茶葉蛋白；王洪新等人申請(qǐng)?zhí)枮?01010236137.9的“一種從茶葉制備茶葉蛋白乳化劑的方法”的發(fā)明專(zhuān)利，主要利用茶渣經(jīng)過(guò)果膠酶+纖維素酶復(fù)合酶法輔助熱水提取出茶葉蛋白質(zhì)。針對(duì)這些研究主要是對(duì)堿提茶葉蛋白的研究。還未見(jiàn)有關(guān)茶葉醇溶蛋白相關(guān)研究。醇溶蛋白是一種植物種子的儲(chǔ)存蛋白，不溶于水，可溶于50%~90%乙醇溶液中。醇溶蛋白可以作為一種食品保鮮膜，為生物可降解材料，在人體內(nèi)分解不會(huì)產(chǎn)生有害物質(zhì)，生物相容性良好，醇溶蛋白制備的載藥系統(tǒng)具有優(yōu)良的緩釋效果和一定的肝靶向效應(yīng)。此外，醇溶蛋白還具有一定的美容護(hù)膚作用。在茶葉中醇溶蛋白也是主要蛋白之一，對(duì)茶葉中醇溶蛋白的開(kāi)發(fā)有利于茶葉資源的綜合利用。經(jīng)查新，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)到茶葉醇溶蛋白提取方法的研究報(bào)道或?qū)＠_(kāi)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有的茶鮮葉、低檔茶、茶渣等綜合利用技術(shù)中存在的不足之處，提供一種茶葉醇溶蛋白的提取方法，該方法提取茶葉中醇溶蛋白的方法工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)成本低。本發(fā)明解決現(xiàn)有技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案如下：一種茶葉醇溶蛋白的提取方法，包括以下幾個(gè)步驟：s1.原料預(yù)處理：茶鮮葉先微波干燥殺青，再烘干，將干燥的茶鮮葉、茶葉或茶渣作為原料進(jìn)行清洗除雜脫酚，干燥后粉碎備用；s2.茶蛋白浸提：采用醇提制得茶葉蛋白質(zhì)提取液；s3.對(duì)茶葉蛋白質(zhì)提取液進(jìn)行脫色；s4.對(duì)茶葉蛋白質(zhì)提取液進(jìn)行旋蒸濃縮處理；s5.從步驟s4獲得的濃縮液中沉淀出茶蛋白；s6.將s5中沉淀出的茶蛋白經(jīng)干燥，即得茶葉醇溶蛋白。作為優(yōu)選，步驟s1中原料經(jīng)沸水浴洗滌，料液比為1:20~1:40(w/v)，去除原料中的灰塵和殘留的酚類(lèi)物質(zhì)，瀝干后干燥。作為優(yōu)選，步驟s2中所述浸提具體過(guò)程為：向原料中加入5~30倍重量的60~85%(v/v)醇溶液在30~80℃下攪拌浸提1~6h。作為優(yōu)選，所述醇溶液為乙醇溶液或異丙醇或叔丁醇。作為優(yōu)選，步驟s1中原料粉碎后，過(guò)60~100目篩，室溫儲(chǔ)藏備用。作為優(yōu)選，步驟s3所述脫色具體操作為：向蛋白質(zhì)提取液中緩慢加入3~5%的體積比濃度為30%的雙氧水溶液，在20~30℃下攪拌混合反應(yīng)30~120min。作為優(yōu)選，步驟s4中所述濃縮過(guò)程為采用真空濃縮，溫度控制在40~60℃，濃縮至原體積的15~40%。作為優(yōu)選，步驟s5中所述沉淀過(guò)程為靜置1h得蛋白質(zhì)沉淀。作為優(yōu)選，步驟s6所述干燥采取噴霧干燥或真空冷凍干燥。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于采用醇提蛋白的方法，進(jìn)行工藝優(yōu)化，提取茶葉中的醇溶蛋白。本發(fā)明具有工藝簡(jiǎn)單，能耗低，效率高，過(guò)程中不需要加入不同種類(lèi)的試劑，提取成本低，對(duì)環(huán)境污染小，提取條件溫和等優(yōu)點(diǎn)。且提取茶葉醇溶蛋白具有一定的成膜性，可開(kāi)發(fā)成為一種食品綠色保鮮膜。附圖說(shuō)明圖1為乙醇濃度對(duì)茶葉醇溶蛋白提取的影響。圖2為料液比對(duì)茶葉醇溶蛋白提取的影響。圖3為提取時(shí)間對(duì)茶葉醇溶蛋白提取的影響。圖4為提取溫度對(duì)茶葉醇溶蛋白提取的影響。具體實(shí)施方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案更加清晰明白，下面結(jié)合以乙醇溶液作為提取溶劑舉例，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。本發(fā)明所用設(shè)備儀器和試劑均為本領(lǐng)域所常用。應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的舉例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。實(shí)施例1醇提茶葉蛋白的方法一種茶葉醇溶蛋白的提取方法，步驟為：s1.原料預(yù)處理：茶鮮葉先微波干燥殺青，再烘干，將干燥的茶鮮葉、茶葉或茶渣作為原料進(jìn)行沸水浴清洗除雜脫酚，洗滌時(shí)料液比1：25(w/v)，干燥后粉碎過(guò)80目篩，備用；s2.茶蛋白浸提：向原料中加入5~30倍60-85%(v/v)乙醇溶液在30~80℃下提取1-6h，8000r/min離心5min，棄去殘?jiān)么既艿鞍滋崛∫?；s3.對(duì)茶葉蛋白質(zhì)提取液進(jìn)行脫色：按蛋白質(zhì)提取液中體積的4%加入濃度為30%的雙氧水溶液，在25℃下攪拌混合反應(yīng)60min；s4.對(duì)茶葉蛋白質(zhì)提取液進(jìn)行旋蒸濃縮處理：對(duì)蛋白質(zhì)提取液進(jìn)行真空旋轉(zhuǎn)濃縮，溫度控制在40℃，濃縮至原體積的25%；s5.從步驟s4獲得的濃縮液中沉淀出茶蛋白：經(jīng)脫色濃縮后的蛋白質(zhì)提取液靜置1h，使蛋白質(zhì)充分沉淀，8000r/min離心5min，棄去上清液，得蛋白質(zhì)提取物沉淀；s6.將s5中沉淀出的茶蛋白經(jīng)真空冷凍干燥，即得茶葉醇溶蛋白。茶葉醇溶蛋白提取率可達(dá)4.23~10.48%，經(jīng)無(wú)水乙醇室溫洗滌2次，每次2h，最終茶葉醇溶蛋白純度可達(dá)45.36~68.04%。實(shí)施例2乙醇濃度對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響組1-6制備步驟同實(shí)施例1，組1-6不同之處及不同乙醇濃度對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響如表1和附圖1。表1乙醇濃度對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響組別料液比（w/v）乙醇溶液濃度(v/v)茶蛋白浸提時(shí)間提取溫度提取率組11:1060%4h50℃5.08%組21:1065%4h50℃5.48%組31:1070%4h50℃6.40%組41:1075%4h50℃7.60%組51:1080%4h50℃7.09%組61:1085%4h50℃6.77%實(shí)施例3料液比對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響組7-12制備步驟同實(shí)施例1，組7-12不同之處及不同料液比對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響見(jiàn)表2和附圖2。表2料液比對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響組別料液比（w/v）乙醇溶液濃度(v/v)茶蛋白浸提時(shí)間提取溫度提取率組71:575%4h50℃3.78%組81:1075%4h50℃8.03%組91:1575%4h50℃8.55%組101:2075%4h50℃8.96%組111:2575%4h50℃9.33%組121:3075%4h50℃9.65%實(shí)施例4提取時(shí)間對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響組13-18制備步驟同實(shí)施例1，組13-18不同之處及不同提取時(shí)間對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響如表3和附圖3所示。表3提取時(shí)間對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響組別料液比（w/v）乙醇溶液濃度(v/v)茶蛋白浸提時(shí)間提取溫度提取率組131:1075%1h50℃6.33%組141:1075%2h50℃6.68%組151:1075%3h50℃6.77%組161:1075%4h50℃6.71%組171:1075%5h50℃6.58%組181:1075%6h50℃6.06%實(shí)施例5提取溫度對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響組19-24制備步驟同實(shí)施例1，組19-24不同之處及不同提取溫度對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響如表4和附圖4所示。表4提取溫度對(duì)茶葉醇溶蛋白提取率的影響組別料液比（w/v）乙醇溶液濃度(v/v)茶蛋白浸提時(shí)間(h)提取溫度(℃)提取率組191:1075%4305.60%組201:1075%4406.70%組211:1075%4507.47%組221:1075%4607.69%組231:1075%4707.91%組241:1075%4808.10%以上所述，僅為本發(fā)明部分具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12