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同時獲取以及檢測多個目標(biāo)區(qū)域序列的引物、試劑盒和方法與流程

文檔序號:11899218閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種多重PCR引物,其特征在于,所述多重PCR引物由以下引物對組成:

SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示引物對、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示引物對、SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示引物對、SEQ ID NO:13和SEQ ID NO:14所示引物對、SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16所示引物對以及SEQ ID NO:19和SEQ ID NO:20所示引物對。

2.權(quán)利要求1所述的多重PCR引物,其特征在于,所述多重PCR引物還包括以下引物對中的至少一對:SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示引物對,SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示引物對,SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示引物對,SEQ ID NO:17和SEQ ID NO:18所示引物對,SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22所示引物對,SEQ ID NO:23和SEQ ID NO:24所示引物對,SEQ ID NO:25和SEQ ID NO:26所示引物對以及SEQ ID NO:27和SEQ ID NO:28所示引物對。

3.權(quán)利要求1或2所述的多重PCR引物在獲得和/或檢測EGFR基因序列以及在檢測EGFR、KRAS和/或BRAF基因序列中的用途。

4.一種試劑盒,其包括權(quán)利要求1或2所述的多重PCR引物。

5.權(quán)利要求4所述的試劑盒在獲得和/或檢測EGFR基因序列以及在擴(kuò)增和/或檢測EGFR、KRAS和/或BRAF基因序列中的用途。

6.一種擴(kuò)增基因序列目標(biāo)區(qū)域的方法,其特征在于,所述方法包括利用權(quán)利要求1或2所述的多重PCR引物進(jìn)行所述擴(kuò)增。

7.一種EGFR、KRAS和/或BRAF基因檢測的方法,其特征在于,包括:

(1)利用權(quán)利要求6所述的方法對待測樣品中的至少一部分核酸進(jìn)行擴(kuò)增,獲得擴(kuò)增產(chǎn)物;

(2)分析所述擴(kuò)增產(chǎn)物,以獲得EGFR、KRAS和/或BRAF基因檢測結(jié)果。

8.權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述核酸為DNA和/或RNA。

9.權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述核酸為RNA,步驟(1)包括:

(1-1)利用所述多重PCR引物中的上游或下游引物將所述RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA;以及

(1-2)利用所述多重PCR引物中對應(yīng)的下游或上游引物對所述cDNA進(jìn)行擴(kuò)增,獲得擴(kuò)增產(chǎn)物。

10.權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,步驟(2)包括:

(2-1)對所述擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序;以及

(2-2)將測序結(jié)果分別與EFGR、KRAS和/或BRAF基因野生型序列比對,以確定EFGR、KRAS和/或BRAF基因的突變位點(diǎn)。

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