本發(fā)明屬于西洋參多糖加工領(lǐng)域,具體涉及一種應(yīng)用酶解提取西洋參多糖的方法。
背景技術(shù):
西洋參食用價值和藥用價值均很高,生物活性和藥理作用十分廣泛。西洋參中的多糖是重要的功效成分,西洋參多糖的作用有降血脂、增強免疫力、消炎、抗衰老、抗病毒等。因此西洋參多糖的提取研究和開發(fā)應(yīng)用具有重要價值。西洋參多糖的提取方法有熱水浸提法、稀酸法、水提醇沉法、稀堿法、酶解技術(shù)、微波技術(shù)、超濾法、超聲輔助提取技術(shù)、超臨界流體萃取技術(shù)等。西洋參多糖的研究仍然存在較多問題,一是傳統(tǒng)的分離純化時間長得率低;二是西洋參多糖結(jié)構(gòu)分析困難,目前關(guān)于西洋參多糖結(jié)構(gòu)的主要集中在相對分子質(zhì)量、單糖組成上,具體的糖苷鍵連接方式、更高級結(jié)構(gòu)以及結(jié)構(gòu)與活性之間的關(guān)系仍需要深入研究。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是提供一種酶解提取西洋參多糖的方法,用纖維素酶和木瓜蛋白酶按一定比例進行復(fù)合,確定pH值,溫度,時間等參數(shù),來提高西洋參多糖提取率,同時用酶法提取西洋參多糖,化學(xué)物質(zhì)少可能提高西洋參的活性。
本發(fā)明按照以下步驟改性醇法大豆?jié)饪s蛋白:
(1)、配制質(zhì)量濃度1:25的西洋參溶液,調(diào)節(jié)pH值為4.5~7,恒溫水浴45~70℃,加入占西洋參溶液質(zhì)量1~3.5%復(fù)合酶,反應(yīng)0.2~2.5h,酶解后的樣品水浴回流,離心,收集濾液,濾渣重復(fù)提取1次,合并濾液;
(2)、將步驟(1)將濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮直至粘稠,粘稠物冷卻后的加乙醇,使其達到一定體積分數(shù),靜置過夜沉淀,離心,收集沉淀。既得產(chǎn)品。
本試驗所用原料為脫脂西洋參,實驗證明,水提醇沉法提取西洋參多糖,西洋參粗多糖提取率為 21.25%;酶解技術(shù)提取西洋參多糖的方法,西洋參多糖提取率為27.43%,酶解技術(shù)提取西洋參多糖的方法提高了提取率6.18%,多糖提取率提高明顯。
具體實施方式
具體實施方式一:本實施方式按照下述方法提取西洋參多糖。
(1)、將脫脂西洋參與蒸餾水調(diào)成一定濃度的溶液用復(fù)合酶進行酶解,酶解后的樣品水浴回流,離心,收集濾液,濾渣重復(fù)提取1次,合并濾液;
(2)、將步驟(1)將濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮直至粘稠,粘稠物冷卻后的加乙醇,使其達到一定體積分數(shù),靜置過夜沉淀,離心,收集沉淀。
在本實施方式中, 步驟(1)中所述的西洋參溶液的濃度比為1:25;所述的酶處理條件為:pH值4.5~7,水浴溫度45~70℃,加復(fù)合酶(纖維素酶:木瓜蛋白酶為1:1~1:6),反應(yīng)時間0.2~2.5h;更優(yōu)選的,pH值6.51,水浴溫度60.22℃,復(fù)合酶(纖維素酶:木瓜蛋白酶為1:4)酶添加量2.02%,反應(yīng)時間1.2h。
在本實施方式中,步驟(2)中所述的粘稠物冷卻后的加乙醇,使其達到80%體積分數(shù)。
具體實施方式二:本實施方式按照下述方法提取西洋參多糖
(1)配制質(zhì)量濃度比為1:25的西洋參溶液,調(diào)節(jié)pH值為6.51,恒溫水浴60.22℃,加入2.02%的復(fù)合酶(纖維素酶:木瓜蛋白酶為1:4),反應(yīng)1.2h,酶解后的樣品水浴回流,離心,收集濾液,濾渣重復(fù)提取1次,合并濾液;
(2)、將步驟(1)將濾液置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中減壓濃縮直至粘稠,粘稠物冷卻后的加乙醇,使其達到80%體積分數(shù),靜置過夜沉淀,離心,收集沉淀。
實驗所得西洋參多糖提取率為27.43%。