技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及抗原蛋白表達(dá)技術(shù),具體涉及基于桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)制備包裹鯉皰疹病毒II型抗原的多角體的方法,通過設(shè)計(jì)重組家蠶核型多角體病毒BmNPV?VP3?cyHV?polh,ORF72、ORF66、ORF81和ORF82的1?186、993?1197、603?783、85?186區(qū)域序列與家蠶質(zhì)型多角體病毒結(jié)構(gòu)蛋白VP3基因1?279區(qū)域的編碼序列串聯(lián)融合序列由桿狀病毒P10啟動(dòng)子控制;家蠶質(zhì)型多角體蛋白基因由桿狀病毒的多角體蛋白基因啟動(dòng)子控制。用該病毒接種家蠶或家蠶培養(yǎng)細(xì)胞,重組病毒表達(dá)的鯉皰疹病毒II型的抗原蛋白可包裹進(jìn)家蠶質(zhì)型多角體內(nèi)。形成的多角體可以通過簡(jiǎn)單的差速離心實(shí)現(xiàn)純化;純化的多角體在堿性條件下裂解后,可以通過離心使多角體蛋白沉淀,而鯉皰疹病毒II型抗原留存在上清中,從而可以快速、方便地獲得鯉皰疹病毒II型抗原。
技術(shù)研發(fā)人員:貢成良;曹廣力;胡小龍;薛仁宇;劉波;李坤
受保護(hù)的技術(shù)使用者:蘇州大學(xué)
文檔號(hào)碼:201710109641
技術(shù)研發(fā)日:2017.02.27
技術(shù)公布日:2017.06.13