1.一種基于連續(xù)色譜技術(shù)同時(shí)提取分離甘草酸、甘草總黃酮的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)按甘草粉末:氨醇溶液為1g:6L的比例加入燒杯中,攪拌均勻后,將其倒入滲濾裝置中,再按甘草粉末:氨醇溶液為1g:34L的比例向滲濾柱中加入氨醇溶液,設(shè)置流入速度為5-10 ml/min,調(diào)節(jié)流出速度與流入速度一致,收集滲濾液,得甘草提取液;
(2)將甘草提取液上樣至陰離子交換樹脂色譜柱上進(jìn)行吸附,收集上樣流出液;再用體積分?jǐn)?shù)為50-90%乙醇溶液洗脫吸附在色譜柱上的少量甘草總黃酮,洗脫流速為10-20 ml/min,收集乙醇洗脫液;合并上樣流出液與乙醇洗脫液,將合并液旋蒸至溶液中不含有乙醇為止;
(3)再將旋蒸液上樣至聚酰胺樹脂色譜柱上進(jìn)行吸附,用旋蒸液6倍體積量的70%乙醇溶液洗脫,收集甘草總黃酮乙醇洗脫液,再旋蒸干燥,得到甘草總黃酮,用蘆丁比色法測定其純度;
(4)再用0.25-0.75mol/L的 NaOH水溶液洗脫吸附在陰離子交換樹脂色譜柱上的甘草酸,洗脫流速為5-10 ml/min,收集NaOH洗脫液;用1mol/L稀鹽酸調(diào)節(jié)NaOH洗脫液pH 至7并旋蒸干燥,得到含鹽甘草酸粗品;
(5)用純甲醇溶解含鹽甘草酸粗品,過濾除去鹽分,收集濾液并旋蒸干燥,得到甘草酸粗品;用冰醋酸將甘草酸粗品重結(jié)晶,過濾得到甘草酸,用HPLC法測定其純度;
該方法采用的生產(chǎn)裝置為一個(gè)由12支色譜柱組成的在一個(gè)邏輯控制閥控制下的連續(xù)色譜分離系統(tǒng),系統(tǒng)內(nèi)的色譜柱分為四個(gè)區(qū),分別為吸附區(qū)、甘草總黃酮解析區(qū)、甘草酸解析區(qū)和樹脂再生區(qū),每個(gè)區(qū)分別對(duì)應(yīng)1個(gè)進(jìn)口、1個(gè)出口,該生產(chǎn)裝置共4個(gè)進(jìn)口、4個(gè)出口;吸附區(qū)用于步驟(2)中甘草酸的吸附,甘草總黃酮解析區(qū)用于步驟(3)中甘草總黃酮的解析,甘草酸解析區(qū)用于步驟(4)中甘草酸的解析,樹脂再生區(qū)用于陰離子樹脂的再生。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于連續(xù)色譜技術(shù)同時(shí)提取分離甘草酸、甘草總黃酮的方法,其特征在于:所述氨醇溶液為0.5%氨水與50-90%乙醇的水溶液,0.5%氨水占水溶液體積分?jǐn)?shù)的0-1%,50-90%乙醇占水溶液體積分?jǐn)?shù)的50-100%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于連續(xù)色譜技術(shù)同時(shí)提取分離甘草酸、甘草總黃酮的方法,其特征在于:所述陰離子交換樹脂色譜柱為D261、D285、D941、330、D301、D900型陰離子交換樹脂;陰離子交換樹脂色譜柱的上樣流速為10—20 ml/min。