本發(fā)明涉及一類結構新穎的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物及含該類衍生物的藥物組合物及其用途。具體而言，該類二茂鐵甲酸衍生物對肺癌細胞株A549、大腸癌細胞株HCT-116和乳腺癌細胞株MCF-7具有較強的抑制活性?？勺鳛橹委熌[瘤、癌癥等疾病的藥物或先導化合物。
背景技術：
：癌癥已成為世界范圍內最重要的致死性疾病。癌癥可于任何年齡在各種器官及組織中發(fā)生，導致死亡的主要癌癥種類有：肺癌、胃癌、肝癌、結腸癌和乳腺癌等。近年來，肺癌成為發(fā)病率最高的惡性腫瘤。根據世界衛(wèi)生組織(WHO)統(tǒng)計：2008年全世界被診斷為肺癌的人數(shù)為1,600,000人，占癌癥總發(fā)病人數(shù)的13%，死亡人數(shù)1,400,000例，占癌癥總死亡人數(shù)的18%(JemalA,etal.CACancerJ.Clin.2011,61:69-90)；2010年，美國新增肺癌患者222,520人，死亡人數(shù)157,330例，其中死于非小細胞肺癌(NSCLC)患者占肺癌總死亡人數(shù)的85%(JemalA,etal.CACancerJ.Clin.2010,60:277-300)。從我國近年來城鄉(xiāng)前10位惡性腫瘤構成來看，肺癌已代替肝癌成為我國首位致死的惡性腫瘤，占全部惡性腫瘤死亡的22.7%(SheJ,etal.Chest.2013,143(4):1117-1126)。乳腺癌是全世界婦女目前面臨的最為常見的癌癥,每年約有138萬乳腺癌新發(fā)病例及45.8萬例死亡。據報道：美國每年新增232,340例乳腺癌患者。2011年，美國有接近40,000女性死于乳腺癌；印度每年有100,000新增乳腺癌患者被確診，而且每28位女性中有1位會患乳腺癌(YadavDK,etal.Curr.Med.Chem.2014,21(9):1160-1170)；在我國，乳腺癌也成為女性最常見的癌癥，截止2008年，我國總計有169,452例新發(fā)乳腺癌患者，449,08例死亡，分別占世界的12.2%和9.6%。我國乳腺癌全年檢出人數(shù)是歐洲(2008年共計332,000例，總人口四億九千八百萬)的一半，與美國(2008年共計182,000例，總人口三億零四百萬)基本相當。如果這一趨勢保持不變，到2021年，我國乳腺患者將高達250萬，發(fā)病率將從不到60例/10萬女性(年齡在55歲到69歲之間)增加到超過100例/10萬女性(FanL,etal.LancetOncol.2014,15:e279-289)。就全球來看，女性患乳腺癌數(shù)量在不斷增加，乳腺癌對婦女的生存造成巨大威脅。結腸癌和直腸癌統(tǒng)稱大腸癌，是消化道常見惡性腫瘤，發(fā)病率呈上升趨勢，平均每年遞增2%，在歐美國家病死率居腫瘤死亡的第2位，2003年美國大腸癌新發(fā)展病例數(shù)和死亡率均居第3位(徐富星.國際消化病雜志.2006,26(6):365-366)。近年來我國大腸癌的發(fā)病率以極快的速度上升，就全國范圍而言，大腸癌已上升至惡性腫瘤發(fā)病的第4位，在一些經濟發(fā)展較快的城市中，如上海已高居第2位(李德録,等。中國腫瘤.2011,20(6):413-418)。然而大部分癌癥患者發(fā)覺病情時已是中期至晚期，臨床治療總體效果較差，尤其是多藥耐藥性的不斷出現(xiàn)，使得癌癥的治療困難重重。因此，開發(fā)出活性高、副作用低的新型抗癌藥物來滿足臨床的需求迫在眉睫。二茂鐵（Ferrocene）是一種具有獨特的夾心結構化合物，二價鐵離子被夾在兩個平面環(huán)之間互為交錯構型。二茂鐵及其衍生物因其自身的特點：(1)芳香性，能發(fā)生取代反應，易進行修飾；(2)親脂性，能夠通過細胞膜與細胞內的各種酶相互作用；(3)低毒性，能夠在體內進行代謝。二茂鐵衍生物在醫(yī)學領域顯示出廣泛的藥理活性，尤其是在抗腫瘤領域藥理活性尤為突出：A.Rosenefeld等研究表明二茂鐵修飾的順鉑衍生物具有相當強的抑制白血病活性，而且其腎毒比cis-DDP低的多(A.Rosenfeld,etal.Inorg.Chim.Acat.1992,201:219)；E.W.Neuse等人研究表明二茂鐵衍生物具有獨特的抗腫瘤、抗癌活性(E.W.Neuse.J.Inorga.Organoment.PolymersandMaterials.2005,15(1):3-32)；X.F.Huang等合成了一系列含吡唑環(huán)的二茂鐵衍生物，活性研究表明部分化合物具有比5-氟尿嘧啶強的抗癌活性(X.F.Huang,etal.J.Organomet.Chem.2012,706-707:113-123)；W.Liu等合成了一系列二茂鐵脲衍生物，活性研究表明部分化合物具有較強的抑制HIV-1蛋白酶活性(W.Liu,etal.Appl.Organomet.Chem.2012,26:189-193)；美國專利申請8426462B2公開了含芳香環(huán)的二茂鐵衍生物對人乳腺癌細胞株MDA-MB-231和前列腺癌細胞株PC-3具有很強的抑制活性。二茂鐵作為抗腫瘤藥物設計合成的先導化合物(E.W.Neuse.J.Inorg.Organoment.P.2005,15(1):3-32;S.S.Braga,etal.Organometallics,2013,32:5626-5639)。異噁唑雜環(huán)是一種具有潛在生物活性的藥效團，通常被引入藥物分子以提高活性。在我們前期研究中，我們將異噁唑雜環(huán)引入二茂鐵母核，合成了一系列結構新穎的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵衍生物，并研究了其初步的體外抑肺癌細胞株A549、大腸癌細胞株HCT-116和乳腺癌細胞株MCF-7活性，結果表明大部分化合物對A549，HCT116和MCF-7細胞株具有很強的抑制活性(雍建平，等.申請公開號CN103601762A)?；谇捌诹己玫难芯炕A，為了豐富該類化合物的種類，我們繼續(xù)設計合成該類含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物，以期發(fā)現(xiàn)新的抗癌先導化合物或候選化合物。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于，提供了如式(I)所示的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物及其制備方法用途。其能體外抑大腸癌細胞株HCT-116、人肺癌細胞株A549和乳腺癌細胞株MCF-7研究結果表明：該類化合物對大腸癌細胞株HCT-116、人肺癌細胞株A549和乳腺癌細胞株MCF-7具有較強的抑制活性?？勺鳛榭拱┧幬锏暮蜻x化合物或先導化合物。本發(fā)明通過如下的技術方案實現(xiàn)：一種式(I)所示的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物，或其藥學上可接受的鹽，或組合物或溶劑化物：(I)其中：R選自鹵素、氰基、C1-6烷基、C1-6烷氧基或鹵代C1-6烷基；n為0-5的整數(shù)。當n大于1時，R可以為相同或不同的基團。Z選自NR1，S或O，其中R1為氫或C1-6烷基；根據本發(fā)明的優(yōu)選技術方案，式(I)中：Z優(yōu)選為NH或O；R選氟、氯、溴、氰基、甲基、乙基、叔丁基、甲氧基、硝基或三氟甲基，n優(yōu)選為1或2或3。根據本發(fā)明的優(yōu)選技術方案，式(I)中：R優(yōu)選為2-氟、2-溴、3-溴、4-乙基、4-叔丁基、2,3,5-三甲基、2-甲氧基、3-甲氧基、2-三氟甲基、4-硝基、4-氰基。根據本發(fā)明，所述式(I)所示的二茂鐵甲酸衍生物優(yōu)選為下述任一種化合物：。式(I)所示的二茂鐵甲酸衍生物，可以分別選擇與藥學上可接受的酸形成藥學上可接受的鹽。其中術語“藥學上可接受的鹽”包括但不限于與無機酸形成的鹽，如鹽酸鹽、磷酸鹽、二磷酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、亞磺酸鹽、硝酸鹽、及其類似鹽；也包括與有機酸形成的鹽，如乳酸、草酸、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、2-羥乙基磺酸鹽、苯甲酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、三氟乙酸或氨基酸和鏈烷酸鹽如醋酸鹽，HOOC-(CH2)n-COOH（其中n是1-4的整數(shù)）的鹽，及其類似鹽。類似地，藥學上可接受的陽離子包括但不限于鈉、鉀、鈣、鋁、鋰或銨。術語“溶劑化物”包括水合物和醇合物。本發(fā)明還提供一種藥物組合物，其包括前述任一項的式(I)所示的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，以及至少一種藥學上可接受的、惰性的、無毒的賦形劑或載體或稀釋劑。根據所述的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物還包含一種或多種選自填充劑、崩解劑、潤滑劑、助流劑、泡騰劑、矯味劑、防腐劑和包衣材料的藥學可接受的輔助材料。本發(fā)明還提供一種藥物制劑，其包含前述的式(I)所示的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物，或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，以及至少一種藥學上可接受的、惰性的、無毒的賦形劑或載體或稀釋劑。本發(fā)明提供一種藥物制劑，其特征在于，所述制劑優(yōu)選為固體口服制劑、液體口服制劑或注射劑。根據本發(fā)明的藥物制劑，所述的制劑選自片劑、分散片、腸溶片、咀嚼片、口崩片、膠囊、顆粒劑、口服溶液劑、注射用水針、注射用凍干粉針、大輸液或小輸液。本發(fā)明還提供一種用作藥物的式(I)所示的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽，尤其是一種有效用于治療腫瘤/癌癥的藥物或先導化合物。本發(fā)明還提供一種前述任意一項的式(I)所示的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于抗腫瘤或抗癌藥物中的應用。根據本發(fā)明所述的應用，其中所述的腫瘤或癌癥選自：膀胱癌，非小細胞肺癌，卵巢癌，乳腺癌，胃癌，食道癌，肺癌，頭頸癌，結腸癌，咽癌，和胰腺癌等，更優(yōu)選為非小細胞肺癌。本發(fā)明還提供了一種前述任一項式(I)所示的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物和/或藥學上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于抗腫瘤或癌癥藥物中的應用。本發(fā)明還提供了一種式(I)所示的含異噁唑雜環(huán)的二茂鐵甲酸衍生物的制備方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步驟：二茂鐵甲酸和3-取代苯基-5-羥甲基-異噁唑(式III)或3-取代苯基-5-氨甲基-異噁唑(式IV)，在干燥的有機溶劑和酯縮合劑體系中反應制備得到式I-1所示的二茂鐵脂類化合物或式I-2所示的二茂鐵酰胺類化合物。同時，對于Z為其他取代基的式(I)化合物，例如Z為S時，可以丙炔硫醇為原料，按照化合物(III)的合成過程制備3-取代苯基-5-巰基甲基-異噁唑，接著采用化合物I-1的合成過程制備。根據本發(fā)明，所述反應溫度為-20℃至回流條件，優(yōu)選室溫至回流條件。根據本發(fā)明，所述有機溶劑為芳烴、鹵代烴、四氫呋喃(THF)、二甲亞砜(DMSO)、二氧六環(huán)、乙腈、DMF及離子液體。優(yōu)選地，所述的溶劑選自苯，甲苯、二甲苯、二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、乙腈或DMF，更優(yōu)選四氫呋喃。根據本發(fā)明：所述的縮合劑(1)為DCC/DMAP或DCC,HOBt/DMAP或DCC/NMM或DCC/HATU等。根據本發(fā)明，所述式(III)的中間體3-取代苯基-5-羥甲基-異噁唑通過如下的方法制備：(1)取代苯甲醛與羥胺或羥胺鹽酸鹽在甲醇/水體系中，在碳酸鈉的催化下反應生成相應的苯甲醛肟；(2)將步驟(1)制得的苯甲醛肟與丙炔醇在N-溴丁二酰亞胺(NCS)和堿性縛酸劑的作用下通過1,3-偶極環(huán)加成反應形成式(III)異噁唑化合物。根據本發(fā)明，優(yōu)選地，所述的堿性縛酸劑選自有機堿或無機堿，所述有機堿選自三乙胺、三丙胺、DMAP、DMF、N-甲基嗎啉等；所述的無機堿選自碳酸鉀、氫化鈉、碳酸鈉等。更優(yōu)選的堿性縛酸劑為三乙胺。所述反應溫度為0℃至回流溫度，優(yōu)選為室溫至回流溫度。根據本發(fā)明，所述式(IV)的中間體3-取代苯基5-氨甲基-異噁唑通過如下的方法制備：(3)式(III)的異噁唑化合物(優(yōu)選通過前述方法獲得)與甲磺酰氯反應獲得式(V)化合物；根據本發(fā)明的優(yōu)選技術方案，步驟(3)中，所述磺酰氯選自：甲磺酰氯、苯磺酰氯、取代苯磺酰氯(如鹵代苯磺酰氯、烷基苯磺酰氯)等，更優(yōu)選為甲磺酰氯。所述反應溫度為-5℃至回流溫度，優(yōu)選室溫至回流溫度。所述反應溶劑選自苯、甲苯、鹵代芳烴、鹵代烷烴(如氯仿或二氯甲烷)、四氫呋喃、乙腈及離子液體。更優(yōu)選地，所述反應在二氯甲烷體系中回流反應。(4)式(V)化合物與疊氮化鈉反應，優(yōu)選在DMF體系中，60℃溫度下反應獲得式(VI)化合物；(5)式(VI)化合物與氯化銨及鋅粉、鐵粉或鈀碳催化還原制備式(IV)化合物，優(yōu)選所述催化劑在無機酸條件下進行催化，優(yōu)選為鹽酸或硫酸，所述催化劑優(yōu)選為鋅粉和氯化銨。步驟(5)中優(yōu)選的反應溶劑是水或有機溶劑(例如醇類，鹵代烴類，芳烴類等)或其混合物，優(yōu)選為乙醇和水的反應體系。優(yōu)選的合成路線如下所示：同時，對于Z為其他取代基的式(I)化合物，例如Z為S時，可采用丙炔基硫醇為原料，按照化合物(III)的合成過程制備3-取代苯基-5-巰基甲基-異噁唑，接著采用化合物I-1的合成過程來制備。術語”有效量”指的是，所述至少一種化合物和/或至少一種藥學上可接受的鹽對于能有效“治療”個體的一種疾病或不適的用量。如果是癌癥時，有效量能減少癌癥或腫瘤細胞的數(shù)目；縮小腫瘤的大??；抑制或阻止腫瘤細胞向周邊器官的侵入，例如，腫瘤蔓延入軟組織或骨骼中；抑制或阻止腫瘤的轉移；抑制或阻止腫瘤的生長；一定程度上減輕一種或多種與癌癥相關的癥狀；減少發(fā)病率和死亡率；提高生活質量；或者是上述效果的結合。有效量可以是通過抑制EGFR活性來減少疾病癥狀的用量。對于癌癥治療，體內實驗的效果可以通過評估如存活期、疾病進展時間(TimetoDiseaseProgression，TTP)、反應率(ResponseRates，RR)、持續(xù)反應期和/或生活質量來測量。專業(yè)人員已經意識到，有效量可以隨著給藥的途徑、賦形劑的劑量、以及與其他藥物的合用而變化。術語“有效量”還可指得是所述至少一種化合物和/或其至少一種藥學上可接受的鹽對抑制EGFR的過度表達和/或活性過高有效的劑量。本發(fā)明所述的二茂鐵甲酸衍生物的制備方法，其特征在于，二茂鐵甲酸衍生物通過以二茂鐵甲酰氯分別和3-取代苯基-5-羥甲基-異噁唑(式III)或3-取代苯基-5-氨甲基-異噁唑(式IV)反應來制備；其中二茂鐵甲酰氯通過以二茂鐵甲酸和二氯亞砜或三氯氧磷或五氯化磷或草酰氯反應制備；如果需要，可以將(III)和(IV)中的任何官能團予以保護；并且其后，如果有必要以任何次序：(1)除去任何保護劑，（2）形成式(I)化合物的藥物組合物。本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明提供式(I)化合物、制備方法及醫(yī)藥用途，該類化合物對三種EGFR高表達的腫瘤株（A549,HCT116和MCF-7）均具有較強的抑制活性，其中化合物YJP-2抑制A549,HCT116和MCF-7腫瘤株的IC50分別為：244.7,401.8和699.3μM；化合物YJP-4對A549和MCF-7腫瘤株具有很強的抑制活性，其IC50分別為：184.2和139.2μM；化合物YJP-9對三種腫瘤株A549,HCT116和MCF-7均具有很強的抑制活性，其IC50分別為：290.2,246.9和144.0μM；該類化合物可以作為治療腫瘤、癌癥等疾病的候選藥物或先導化合物。具體實施方式下面結合實施例對本發(fā)明作進一步的說明。需要說明的是，下述實施例不能作為對本發(fā)明保護范圍的限制，任何在本發(fā)明基礎上做出的改進都不違背本發(fā)明的精神。其中，中間體和目標化合物的合成過程均以實施例中的代表說明，其余的中間體和目標化合物的合成過程同代表化合物。儀器與試劑：AVANCEIII核磁共振儀(400MHz,DMSO-d6,TMS為內標)，離子阱液質連用儀(DECAX-30000LCQDecaXP)，ShimadzuFTIR-8400S(日本島津制作所生產)，XT5數(shù)字顯示顯微熔點測定儀(北京市科儀電光儀器廠制造，溫度未經校正)，可調波長式微孔板酶標儀(MolecularDeviesSPECTRAMAX190).實施例1中間體3-取代苯基-5-羥甲基-異噁唑(II)及3-取代苯基-5-氨甲基-異噁唑(III)的合成以取代苯甲醛為原料，通過合成肟、1,3-偶極環(huán)加成反應、甲磺酰酯化反應、疊氮化、還原反應制備(R為2-氟、2-溴、3-溴、2,4,6-三甲基、4-叔丁基、4-乙基、2-甲氧基、3-甲氧基、2-三氟甲基、4-硝基或4-氰基；n為1，或3),具體見如下路線：中間體3-取代苯基-5-羥甲基-異噁唑(II)及3-取代苯基-5-氨甲基-異噁唑(III)的具體的合成過程詳見申請人在前期申請的公開號為CN103360382A、CN103664991A和CN103601762A。實施例2二茂鐵甲酸-[(3-(4-乙基-苯基)-異噁唑-5-基)-甲氧基-]-酯的合成過程：將0.23g(1mmol)的二茂鐵甲酸和8mL干燥的THF加入50mL單口圓底燒瓶，攪拌下將0.206g(1mmol)DCC和0.122g(1mmol)DMAP加入反應體系，0℃反應30min后，接著將0.203g(1mmol)3-(4-乙基-苯基)-5-羥甲基-異噁唑加入反應體系，0℃反應30min后自然升至室溫反應，整個反應過程在氮氣保護下進行。TLC檢測反應完成后，反應液減壓濃縮，殘渣柱分離(V（石油醚）：V（乙酸乙酯）=5:1~2:1)即得目標化合物二茂鐵甲酸-[(3-(4-乙基-苯基)-異噁唑-5-基)-甲氧基-]-酯(YJP-1)。其余的化合物按照二茂鐵甲酸-[(3-(4-乙基-苯基)-異噁唑-5-基)-甲氧基-]-酯的合成過程合成出（YJP-2，YJP-3，YJP-4，YJP-5,YJP-6,YJP-7,YJP-8,YJP-9,YJP-10,YJP-21）。實施例3N-[(3-(4-乙基-苯基)-異噁唑-5-基)-甲基]-二茂鐵甲酰胺的合成過程將0.23g(1mmol)的二茂鐵甲酸和8mL干燥的THF加入50mL單口圓底燒瓶，攪拌下將0.206g(1mmol)DCC，0.135g(1mmol)HOBT和0.122g(1mmol)DMAP加入反應體系，0℃反應30min后，接著將0.202g(1mmol)3-(4-乙基-苯基)-異噁唑-5-羥甲基-甲胺加入反應體系，0℃反應30min后自然升至室溫反應，整個反應過程在氮氣保護下進行。TLC檢測反應完成后，反應液減壓濃縮，殘渣柱分離V（石油醚）：V（乙酸乙酯）=5:1~2:1）即得目標化合物N-[(3-(4-乙基-苯基)-異噁唑-5-基)-甲基]-二茂鐵甲酰胺(YJP-11)。其余的化合物按照N-[(3-(4-乙基-苯基)-異噁唑-5-基)-甲基]-二茂鐵甲酰胺的合成過程合成出（YJP-12，YJP-13，YJP-14,YJP-15,YJP-16,YJP-17,YJP-18,YJP-19,YJP-20,YJP-22）。其結構均通過1HNMR,ESI-MS等分析方法進行了表征。優(yōu)選出的化合物的物性常數(shù)及光譜數(shù)據以列表的形式進行說明：優(yōu)選出的化合物的編號及名稱如下表所示：表1優(yōu)選化合物代號及名稱代號名稱代號名稱YJP-1二茂鐵甲酸-{[3-(4-乙基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-11N-{[3-(4-乙基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺YJP-2二茂鐵甲酸-{[3-(4-叔丁基-苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-12N-{[3-(4-叔丁基-苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺YJP-3二茂鐵甲酸-{[3-(2,4,6-三甲基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-13N-{[3-(24,6-三甲基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺YJP-4二茂鐵甲酸-{[3-(2-三氟甲基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-14N-{[3-(2-三氟甲基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺YJP-5二茂鐵甲酸-{[3-(4-硝基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-15N-{[3-(4-硝基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺YJP-6二茂鐵甲酸-{[3-(2-甲氧基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-16N-{[3-(2-甲氧基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺YJP-7二茂鐵甲酸-{[3-(3-甲氧基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-17N-{[3-(3-甲氧基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基-}-二茂鐵甲酰胺YJP-8二茂鐵甲酸-{[3-(2-氟苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-18N-{[3-(2-氟苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基-}-二茂鐵甲酰胺YJP-9二茂鐵甲酸-4-{[3-(2-溴苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-19N-{[3-(2-溴苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺YJP-10二茂鐵甲酸-4-{[3-(3-溴苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-20N-{[3-(3-溴苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺YJP-21二茂鐵甲酸-{[3-(4-氰基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氧基}-酯YJP-22N-{[3-(4-氰基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺表2表1化合物的1HNMR編號1HNMR(400MHz,CDCl3)YJP-11.21(t,3H,CH3,J=7.2Hz),2.62(q,2H,CH2,J=7.6Hz),4.23(s,5H),4.43(s,2H),4.88(s,2H),5.25(s,2H,isoxazole-CH2),6.57(s,1H,Hofisoxazole),7.22(d,2H,J=8.0Hz),7.67(d,2H,J=8.0Hz).YJP-21.35(s,9H,3CH3),4.17(s,5H),4.44(t,2H,J=1.6Hz),4.85(t,2H,J=1.6Hz),5.37(s,2H,isoxazole-CH2),6.68(s,1H,Hofisoxazole),7.48(d,2H,J=8.4Hz),7.76(d,2H,J=8.4Hz).YJP-32.15(s,6H,2CH3),2.31(s,3H,CH3),4.14(s,5H),4.44(t,2H,J=1.6Hz),4.86(t,2H,J=1.6Hz),5.40(s,2H,isoxazole-CH2),6.33(s,1H,Hofisoxazole),6.93(s,2H).YJP-44.17(s,5H),4.44(t,2H,J=1.6Hz),4.86(t,2H,J=1.6Hz),5.40(s,2H,isoxazole-CH2),6.61(s,1H,Hofisoxazole),7.56-7.65(m,3H),7.81(d,1H,J=7.6Hz).YJP-54.18(s,5H),4.46(t,2H,J=1.6Hz),4.85(t,2H,J=1.6Hz),5.41(s,2H,isoxazole-CH2),6.77(s,1H,Hofisoxazole),8.02(d,2H,J=8.8Hz),7.76(d,2H,J=8.8Hz).YJP-63.82(s,3H,OCH3),4.10(s,5H),4.38(t,2H,J=1.6Hz),4.77(t,2H,J=1.6Hz),5.31(s,2H,isoxazole-CH2),6.82(s,1H,Hofisoxazole),6.91-6.98(m,2H),7.32-7.36(m,1H),7.82(dd,1H,J=1.6,1.6Hz).YJP-73.82(s,3H,OCH3),4.10(s,5H),4.38(t,2H,J=1.6Hz),4.77(t,2H,J=1.6Hz),5.31(s,2H,isoxazole-CH2),6.82(s,1H,Hofisoxazole),6.91-6.98(m,3H),7.32-7.36(m,1H).YJP-84.46(s,5H),4.54(t,2H,J=1.6Hz),4.62(t,2H,J=1.6Hz),5.20(s,2H,isoxazole-CH2),6.89(s,1H,Hofisoxazole),7.08-7.18(m,3H),7.92(dd,1H,J=6.4,0.8Hz).YJP-94.10(s,5H),4.36(t,2H,J=1.6Hz),4.78(t,2H,J=1.6Hz),5.33(s,2H,isoxazole-CH2),6.77(s,1H,Hofisoxazole),7.19-7.33(m,2H),7.56-7.62(m,2H).YJP-104.17(s,5H),4.45(t,2H,J=1.6Hz),4.86(t,2H,J=1.6Hz),5.38(s,2H,isoxazole-CH2),6.68(s,1H,Hofisoxazole),7.31-7.35(m,1H),7.59(d,1H,J=7.6Hz),7.76(d,1H,J=8.0Hz),7.98(d,1H,J=1.6Hz).YJP-111.21(t,3H,CH3,J=7.2Hz),2.62(q,2H,CH2,J=7.6Hz),4.23(s,5H),4.43(s,2H),4.62(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.88(s,2H),5.25(s,2H,isoxazole-CH2),6.57(s,1H,Hofisoxazole),7.22(d,2H,J=8.0Hz),7.67(d,2H,J=8.0Hz).YJP-121.35(s,9H,3CH3),4.17(s,5H),4.44(t,2H,J=1.6Hz),4.62(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.85(t,2H,J=1.6Hz),5.37(s,2H,isoxazole-CH2),6.68(s,1H,Hofisoxazole),7.48(d,2H,J=8.4Hz),7.76(d,2H,J=8.4Hz).YJP-132.15(s,6H,2CH3),2.31(s,3H,CH3),4.14(s,5H),4.44(t,2H,J=1.6Hz),4.62(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.86(t,2H,J=1.6Hz),5.40(s,2H,isoxazole-CH2),6.33(s,1H,Hofisoxazole),6.93(s,2H).YJP-144.17(s,5H),4.44(t,2H,J=1.6Hz),4.62(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.86(t,2H,J=1.6Hz),5.40(s,2H,isoxazole-CH2),6.61(s,1H,Hofisoxazole),7.56-7.65(m,3H),7.81(d,1H,J=7.6Hz).YJP-154.18(s,5H),4.46(t,2H,J=1.6Hz),4.62(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.85(t,2H,J=1.6Hz),5.41(s,2H,isoxazole-CH2),6.77(s,1H,Hofisoxazole),8.02(d,2H,J=8.8Hz),7.76(d,2H,J=8.8Hz).YJP-163.82(s,3H,OCH3),4.10(s,5H),4.38(t,2H,J=1.6Hz),4.62(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.77(t,2H,J=1.6Hz),5.31(s,2H,isoxazole-CH2),6.82(s,1H,Hofisoxazole),6.91-6.98(m,2H),7.32-7.36(m,1H),7.82(dd,1H,J=1.6,1.6Hz).YJP-173.82(s,3H,OCH3),4.10(s,5H),4.38(t,2H,J=1.6Hz),4.62(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.77(t,2H,J=1.6Hz),5.31(s,2H,isoxazole-CH2),6.82(s,1H,Hofisoxazole),6.91-6.98(m,3H),7.32-7.36(m,1H).YJP-184.46(s,5H),4.54(t,2H,J=1.6Hz),4.56(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.62(t,2H,J=1.6Hz),5.20(s,2H,isoxazole-CH2),6.89(s,1H,Hofisoxazole),7.08-7.18(m,3H),7.92(dd,1H,J=6.4,0.8Hz).YJP-194.10(s,5H),4.36(t,2H,J=1.6Hz),4.63(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.78(t,2H,J=1.6Hz),5.33(s,2H,isoxazole-CH2),6.77(s,1H,Hofisoxazole),7.19-7.33(m,2H),7.56-7.62(m,2H).YJP-204.17(s,5H),4.45(t,2H,J=1.6Hz),4.70(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.86(t,2H,J=1.6Hz),5.38(s,2H,isoxazole-CH2),6.68(s,1H,Hofisoxazole),7.31-7.35(m,1H),7.59(d,1H,J=7.6Hz),7.76(d,1H,J=8.0Hz),7.98(d,1H,J=1.6Hz).YJP-214.18(s,5H),4.46(t,2H,J=1.6Hz),4.85(t,2H,J=1.6Hz),5.41(s,2H,isoxazole-CH2),6.77(s,1H,Hofisoxazole),8.02(d,2H,J=8.8Hz),7.76(d,2H,J=8.8Hz).YJP-224.18(s,5H),4.46(t,2H,J=1.6Hz),4.62(t,1H,NH-CO,J=4.5Hz),4.85(t,2H,J=1.6Hz),5.41(s,2H,isoxazole-CH2),6.77(s,1H,Hofisoxazole),8.02(d,2H,J=8.8Hz),7.76(d,2H,J=8.8Hz).實施例4N-{[3-(4-乙基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺的鹽酸鹽和醋酸鹽的制備(1)N-{[3-(4-乙基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺鹽酸鹽的制備:將0.5mmolN-[(3-苯基-異噁唑-5-基)-甲基-]-二茂鐵甲酰胺加入20mL（V:V,1:1）5%的鹽酸溶液和甲醇混合溶液中，氮氣保護下攪拌30min后，室溫緩慢蒸發(fā)結晶即得N-{[3-(4-乙基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺鹽酸鹽，淡黃色固體，收率：70%。(2)N-{[3-(4-乙基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺乙酸鹽的制備:將0.5mmolN-{[3-(4-乙基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺加入盛有10mL干燥二氯甲烷的50mL單口圓底燒瓶中，氮氣保護下攪拌，緩慢滴加入2mL冰乙酸，攪拌30min，冷卻后冷藏結晶，過濾，真空干燥后即得N-{[3-(4-乙基苯基)-異噁唑-5-基]-甲氨基}-二茂鐵甲酰胺乙酸鹽，淡黃色固體，收率：82%。實施例5抗癌活性實驗采用MTT法進行了抑大腸癌細胞株(HCT-116)、人肺癌細胞株(A549)和乳腺癌細胞株MCF-7活性篩選。具體的實驗篩選過程如下：(1)將處于對數(shù)生長期的大腸癌細胞株HCT-116接種于96孔培養(yǎng)板培養(yǎng)，待細胞長至90%,將1μL1×10-4M的藥品加入，其濃度設3個復孔，并設置陽性對照（吉非替尼），陰性對照為1μLDMSO。之后在37℃、5%CO2條件下培養(yǎng)12小時;(2)接著在每個孔中加入20μL5mg/mL的MTT溶液，放置4小時后將培養(yǎng)基吸出;(3)每孔加入100μLDMSO，用可調波長式微孔酶標儀測595nm波長下的吸光度值(A595)。采用如下的公式計算抑制率。(2)抑肺癌細胞株A549和乳腺癌細胞株MCF-7的實驗過程同大腸癌細胞株HCT-116的篩選過程。優(yōu)選的化合物抑制大腸癌細胞株(HCT-116)、人肺癌細胞株A549和乳腺癌細胞株MCF-7的活性結果見下表3、表4和表5。表3式I中部分實施例化合物抑制大腸癌細胞株(HCT-116)活性測試結果表4式I中部分實施例化合物抑制人肺癌細胞株(A549)活性測試結果表5式I中部分實施例化合物抑制乳腺癌細胞株(MCF-7)活性測試結果當前第1頁1 2 3