技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種催化木糖的比酶活提高的葡萄糖脫氫酶突變體，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明成功構(gòu)建含有目的基因的重組菌株E.?coli?BL21(DE3)/pET?GDH(A258F)。重組菌E.?coli?BL21(DE3)/pET?GDH(A258F)誘導(dǎo)表達(dá)出突變酶A258F，粗酶液經(jīng)His?Trap親和層析純化后得到純酶A258F。通過(guò)優(yōu)化酶活測(cè)定條件，A258F在pH7.0的磷酸鉀緩沖液中于55℃中比酶活高達(dá)7.59U·mg?1的。這些工作為葡萄糖脫氫酶用于不對(duì)稱轉(zhuǎn)化反應(yīng)的輔酶循環(huán)提供了新的底物，解決了木糖資源不能有效利用的問(wèn)題，有助于降低生產(chǎn)成本，為工業(yè)中木糖利用提供了優(yōu)良菌種，為基因工程法改造酶的底物特異性奠定了基礎(chǔ)。

技術(shù)研發(fā)人員：張榮珍;徐巖
受保護(hù)的技術(shù)使用者：江南大學(xué)
文檔號(hào)碼：201611214798
技術(shù)研發(fā)日：2016.12.26
技術(shù)公布日：2017.05.31