本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種微生物復(fù)合菌劑及其制備方法與應(yīng)用。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有的農(nóng)業(yè)種植土壤已經(jīng)大部分被過量使用化肥農(nóng)藥所污染，嚴(yán)重危害了蔬菜、糧食的種植食品安全。中國擁有50000多條流域面積在100平方公里以上的河流，絕大多數(shù)已經(jīng)遭受到程度不同的水污染侵害，包括長江在內(nèi)的七大水系無一幸免，而河水是主要的飲用水源，污染物通過飲水可直接毒害人體，也可通過食物鏈和灌溉農(nóng)田間接危及人身健康。此外，養(yǎng)殖業(yè)有機肥、污泥、人畜糞便的處理壓力也非常大。針對以上問題，人們采取了多種措施，有些用微生物方法進行處理，但是效果有待提高。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種微生物復(fù)合菌劑及其制備方法與應(yīng)用。
為實現(xiàn)上述目的及其他相關(guān)目的，本發(fā)明首先提供一種微生物復(fù)合菌劑，包括：芽孢桿菌、沙雷氏菌、硫化細(xì)菌及酵母菌。
可選地，所述微生物復(fù)合菌劑中，芽孢桿菌、沙雷氏菌、硫化細(xì)菌及酵母菌的質(zhì)量比例為(1-10)：(1-10)：(1-10)：(1-20)。
可選地，所述微生物復(fù)合菌劑為液體菌劑。
可選地，所述液體菌劑的pH值范圍是3-5。
可選地，所述液體菌劑中，細(xì)菌計數(shù)不少于1×105cuf/g。
可選地，所述微生物復(fù)合菌劑為粉劑。
可選地，所述粉劑中包含乳糖。
本發(fā)明還提供所述微生物復(fù)合菌劑的一種制備方法，包括如下步驟：將芽孢桿菌、酵母菌、沙雷氏菌、硫化細(xì)菌加入同一液體培養(yǎng)基進行混合培養(yǎng)，得到所述微生物復(fù)合菌劑的液體菌劑。
可選地，所述液體培養(yǎng)基包括水、蛋白胨、糖蜜及尿素，混合培養(yǎng)溫度范圍是30-40℃。
可選地，進一步將所述液體菌劑冷凍干燥，得到所述微生物復(fù)合菌劑的粉劑。
可選地，被冷凍干燥的液體菌劑中添加有乳糖。
本發(fā)明還提供所述微生物復(fù)合菌劑的另一種制備方法，包括如下步驟：將芽孢桿菌、酵母菌、沙雷氏菌、硫化細(xì)菌分別培養(yǎng)，得到各菌的液體發(fā)酵液，并取各菌的液體發(fā)酵液按比例混合，得到所述微生物復(fù)合菌劑的液體菌劑。
可選地，進一步將所述液體菌劑冷凍干燥，得到所述微生物復(fù)合菌劑的粉劑。
本發(fā)明還提供所述微生物復(fù)合菌劑用于污水處理劑、農(nóng)業(yè)種植土壤改良劑、養(yǎng)殖業(yè)有機肥處理劑、污泥處理劑、人畜糞便處理劑或動物飼料改良劑的用途。
如上所述，本發(fā)明的微生物復(fù)合菌劑及其制備方法與應(yīng)用，具有以下有益效果：制備與使用方法簡單易操作，可廣泛應(yīng)用于污水的處理，農(nóng)業(yè)種植土壤污染治理與修復(fù)改良，恢復(fù)被污染土壤的生長力，對鹽堿地改良、養(yǎng)殖業(yè)有機肥的發(fā)酵除臭，和多種有機物有降解作用，對廁所和化糞池的降解與除臭效果顯著，對畜牧業(yè)，家禽的飼料進行少量添加后，可預(yù)防動物的腸道疾病，增加動物的免疫力，效果顯著。
具體實施方式
以下通過特定的具體實例說明本發(fā)明的實施方式，本領(lǐng)域技術(shù)人員可由本說明書所揭露的內(nèi)容輕易地了解本發(fā)明的其他優(yōu)點與功效。本發(fā)明還可以通過另外不同的具體實施方式加以實施或應(yīng)用，本說明書中的各項細(xì)節(jié)也可以基于不同觀點與應(yīng)用，在沒有背離本發(fā)明的精神下進行各種修飾或改變。
實施例1微生物復(fù)合菌劑的制備
制備步驟；
1、將芽胞桿菌、酵母菌、沙雷氏菌、硫化細(xì)菌的粉劑放置入滅過菌的發(fā)酵罐凈化水中。
2、將蛋白胨，糖蜜，尿素等培養(yǎng)基和營養(yǎng)劑投放入發(fā)酵罐，并進行攪拌。本實施例中，各種材料的質(zhì)量配比為：滅菌水885份、蛋白胨50份、糖蜜50份、尿素5份、芽胞桿菌2份、酵母菌4份、殺雷氏菌2份、硫化細(xì)菌2份。攪拌時間為2-3分鐘。
3、將發(fā)酵罐自動加溫至35-38℃，25小時后，PH值達(dá)4，按照國家標(biāo)準(zhǔn)GB、T4789、2-2008檢測細(xì)菌計數(shù)。
本實施例中，沙門氏菌和志賀氏菌不得檢出，細(xì)菌計數(shù)約為1×106cuf/g。
培養(yǎng)得到的微生物復(fù)合菌劑不具有毒性及環(huán)境污染。
實施例2微生物復(fù)合菌劑的制備
制備步驟：
1、各菌的發(fā)酵培養(yǎng)
培養(yǎng)基：LB
培養(yǎng)條件：在35-37℃下?lián)u瓶培養(yǎng)至菌濃度約為108～1011個/ml。
分別將芽孢桿菌、沙雷氏菌、硫化細(xì)菌、酵母菌的斜面種接種入LB液體培養(yǎng)基，各菌分別培養(yǎng)。
2、復(fù)合菌劑的配置：取各菌的液體發(fā)酵液按下表重量比例混合制得復(fù)合菌劑：
表1
復(fù)合菌劑配制完成后4℃保存。
實施例3微生物復(fù)合菌劑的制備
為了提高微生物復(fù)合菌劑的保存期限，將實施例1或?qū)嵤├?制得的液體菌劑冷凍干燥，得到所述微生物復(fù)合菌劑的粉劑，使得微生物復(fù)合菌劑保質(zhì)期得到延長，例如保質(zhì)期可以達(dá)到2年時間。
本實施例中，在冷凍干燥前，在液體菌劑中添加乳糖作為保護劑，可以提高各菌的存活率。
實施例4農(nóng)業(yè)種植土壤污染修復(fù)治理處理
處理對象：種植貧瘠鈣化土壤修復(fù)治理
處理步驟：
1)包括下列步驟：
a.將蔬菜大棚內(nèi)一畝修復(fù)治理的貧瘠而鈣化的污染土壤上平均施入動、植物有機肥一噸。
b.投入本發(fā)明的微生物復(fù)合菌劑粉劑5公斤(成本約10元人民幣)。
c.用大棚小型拖拉機旋轉(zhuǎn)爬犁將有機復(fù)合肥和微生物菌劑、被修復(fù)治理的土壤，均勻打碎混合。
d.再經(jīng)滴灌軟管將水施入土壤，時間約5分鐘；
e.將大棚密閉五天。
二、5天后土壤抽樣檢測方法
1、菌落總數(shù)測定方法：依據(jù)為“中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 4789.2-2008”發(fā)布的檢測標(biāo)準(zhǔn)。
2、在大棚內(nèi)不同地點采樣土壤樣品。
3、微生物總數(shù)量測試：各預(yù)處理樣品液用無菌生理鹽水梯度稀釋菌液至10-6倍，分別取10-5、10-6倍稀釋液0.1mL滴入無菌營養(yǎng)瓊脂平板上，用無菌涂布棒涂布均勻，菌落計數(shù)法測定土壤中的細(xì)菌數(shù)量。
三、試驗材料
1、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(NA)
牛肉膏3g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，瓊脂粉20g/L，pH7.0～7.2，0.1Mpa，滅菌30min。
2、稀釋液
NaCl 8.5g/L，pH7.0～7.2，0.1MPa，滅菌30min。
三、測試結(jié)果
樣品名稱：栽培土壤
樣品：分8份不同地點采集樣品
樣品包裝：塑料袋簡易裝(濕樣)
檢驗?zāi)康模何⑸锟倲?shù)量
樣品來源：大棚土壤
檢測所依據(jù)：“中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 4789.2-2008”發(fā)布的檢測標(biāo)準(zhǔn)。
菌落總數(shù)檢測結(jié)果：B1-8對照組為5.2×107cfu/ml；B1-8施菌組為2.05×108cfu/ml
檢測結(jié)論：施菌樣品(B1-8施菌)菌落總數(shù)都高出未施菌樣品10倍以上，菌落形態(tài)類型也大大豐于未施菌土樣，反映出施加微生物樣品含有更多平衡土壤pH酸堿值，改善土壤結(jié)構(gòu)，營造優(yōu)勢有益菌群，保持土壤活力。有益微生物菌調(diào)節(jié)植物根系生態(tài)環(huán)境，形成優(yōu)勢菌落，防止土傳病蟲害。解除化肥、農(nóng)藥及有害因子對土壤和植物的影響和破壞，修復(fù)已貧瘠化和鈣化的土壤，使土壤重現(xiàn)種植活力，降解和轉(zhuǎn)化土壤中的有毒有害物質(zhì)，提高農(nóng)作物的產(chǎn)量與質(zhì)量，保障食用植物的安全性，此數(shù)據(jù)說明本發(fā)明的復(fù)合菌劑改良對修復(fù)農(nóng)業(yè)種植土壤污染的能力十分優(yōu)良。
實施例5對動物糞便的除臭和降解處理
1、實驗材料：
雞糞和豬糞的混合材料共10Kg
氨氮的測定(氣相分子吸收光譜法)HJT 195-2005
本發(fā)明的復(fù)合菌劑粉劑200g
2、實驗
2.1、第一天上午將10Kg豬和雞的混合糞投入一帶有攪拌的反應(yīng)容器中，投入復(fù)合菌劑200g，通入空氣，流量控制在每小時1.2升，攪拌下加熱保溫，溫度控制在35～39℃。將整體的反應(yīng)容器稱量為22.5Kg。
第二天上午9：00分，關(guān)上電源，稱量為16.5Kg，減量6Kg，直接用手掌向鼻子方向招聞，已經(jīng)嗅覺不出動物糞便的臭味，氨氮的去除率達(dá)到99.32％，說明本發(fā)明的復(fù)合菌劑降解動物糞便和除臭的能力十分優(yōu)良。
實施例6動物飼料的改良
在雞飼料中添加本發(fā)明的微生物復(fù)合菌劑，食用20天后，與食用未添加本發(fā)明的微生物復(fù)合菌劑的雞群相比，雞發(fā)病率顯著降低。說明本發(fā)明的微生物復(fù)合菌作為飼料改良劑，有助于預(yù)防動物的腸道疾病，增加動物的免疫力
實施例7污水處理
將本發(fā)明的微生物復(fù)合菌劑投入污水中，并通過曝氣泵往污水中曝氣，持續(xù)曝氣24小時以上，檢測結(jié)果顯示，污水中的氨氮濃度明顯下降。本實施例中，既可以直接將微生物復(fù)合菌劑的粉劑投入污水中，也可以首先將微生物復(fù)合菌劑的粉劑與液體培養(yǎng)基混合，擴培得到液體復(fù)合菌劑，再將液體復(fù)合菌劑投入污水中。例如20g左右的粉劑可以擴培得到半噸液體復(fù)合菌劑，可以有效降低使用成本
綜上所述，本發(fā)明的微生物復(fù)合菌劑的制備方法簡單易操作，使用方法簡單，可廣泛應(yīng)用于污水的處理，農(nóng)業(yè)種植土壤污染治理與修復(fù)改良，恢復(fù)被污染土壤的生長力，對鹽堿地改良、養(yǎng)殖業(yè)有機肥的發(fā)酵除臭，和多種有機物有降解作用，對廁所和化糞池的降解與除臭效果顯著，對畜牧業(yè)，家禽的飼料進行少量添加后，可預(yù)防動物的腸道疾病，增加動物的免疫力，效果顯著。所以，本發(fā)明有效克服了現(xiàn)有技術(shù)中的種種缺點而具高度產(chǎn)業(yè)利用價值。
上述實施例僅例示性說明本發(fā)明的原理及其功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟悉此技術(shù)的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對上述實施例進行修飾或改變。因此，舉凡所屬技術(shù)領(lǐng)域中具有通常知識者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與技術(shù)思想下所完成的一切等效修飾或改變，仍應(yīng)由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。