1.一種從煙草中提取飽和迷迭香酸的方法,其特征在于:該方法包含下述步驟:
(1)用乙醇水溶液浸提煙草樣品后,通過減壓濃縮得煙草浸膏;
(2)將煙草浸膏水溶后,采用有機(jī)溶劑萃取后,減壓濃縮萃取液至十分之一體積,得到萃取液;
(3)將D101大孔樹脂活化后,裝入層析柱中,純凈水沖洗至無醇味,將上一步驟中得到的萃取液至上而下倒入大孔樹脂層析柱中,然后,以不同濃度梯度的乙醇對大孔樹脂柱進(jìn)行洗脫;
(4)收集洗脫液后,對洗脫液進(jìn)行減壓濃縮,濃縮至十分之一體積后進(jìn)行毛細(xì)管取樣薄層層析,展開系統(tǒng)為氯仿:甲醇,顯色劑為5%硫酸乙醇溶液,顯示方法為加熱顯色,將含有相似成分的洗脫液進(jìn)行合并;減壓濃縮洗脫液至干得煙草極性提取物;
(5)采用薄層層析法,展開劑為氯仿:丙酮,合并顯示出棕黑色斑點(diǎn)的樣品減壓濃縮后得到致香類粗提物浸膏;
(6)致香類粗提物浸膏與硅膠攪拌均勻后,采用正相硅膠色譜柱進(jìn)行分離,流動(dòng)相為氯仿:甲醇梯度洗脫,收集各部分洗脫液;
(7)通過薄層層析法,展開劑為氯仿:丙酮,根據(jù)不同的Rf值,按照不同極性合并致香類物質(zhì),得到致香類細(xì)提物;
(8)對煙草細(xì)提物進(jìn)行正相柱層析,以甲醇:氯仿為流動(dòng)相梯度洗脫,TLC檢測分段為A-E5個(gè)部分,將其中的B段通過反相硅膠柱層析后,進(jìn)樣至半制備色譜系統(tǒng)中進(jìn)行分離;在色譜條件:流動(dòng)相為甲醇:水,體積比68:32,保留時(shí)間7.12分鐘,分離得到該單體化合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從煙草中提取飽和迷迭香酸的方法,其特征在于:所述的步驟(5)展開劑中氯仿:丙酮體積比為5:1。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從煙草中提取飽和迷迭香酸的方法,其特征在于:所述的步驟(7)展開劑中氯仿:丙酮體積比為10:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從煙草中提取飽和迷迭香酸的方法,其特征在于:所述的步驟(5)和(7)中所述的薄層層析法中顯色劑為α-萘酚5%乙醇溶液,顯色方法為加熱顯色。