1.一種ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,根據(jù)ZNF667的序列設(shè)計能夠產(chǎn)生干擾ZNF667蛋白表達(dá)的siRNA的DNA片段,插入到短發(fā)夾RNA干擾載體中構(gòu)建而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,以人ZNF667的mRNA序列為模板,以及載體啟動子啟動表達(dá)siRNA對序列的要求,設(shè)計合成能夠產(chǎn)生干擾ZNF667蛋白表達(dá)的siRNA的DNA片段。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,siRNA干擾的目標(biāo)基因ZNF667序列如下:
siRNA-1:CGAATATCTCTCACACGACAT;
siRNA-2:CGCCAATCATTTCTTATTGAA;
siRNA-3:CAACCCTTATTCTGCATCTAA。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,siRNA干擾的目標(biāo)基因ZNF667序列為siRNA-2:CGCCAATCATTTCTTATTGAA。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,選用的原始質(zhì)粒表達(dá)載體優(yōu)選為pRNAT-U6.1/Neo。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,DNA片段插入到載體時的酶切位點為BamH I和Hind III。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,根據(jù)ZNF667的序列設(shè)計能夠產(chǎn)生干擾ZNF667蛋白表達(dá)的siRNA的DNA片段,具體序列如下:
ZNF667-shRNA-1a鏈序列:
5’-GATCCCCGAATATCTCTCACACGACATCTCGAGATGTCGTGTGAGAGATATTCGTTTTTGGAT-3’
ZNF667-shRNA-1b鏈序列:
5’-AGCTATCCAAAAACGAATATCTCTCACACGACATCTCGAGATGTCGTGTGAGAGATATTCG GG-3’
ZNF667-shRNA-2a鏈序列:
5’-GATCCCCGCCAATCATTTCTTATTGAACTCGAGTTCAATAAGAAATGATTGGCG TTTTTGGAT-3’
ZNF667-shRNA-2b鏈序列:
5’-AGCTATCCAAAAAGCCAATCATTTCTTATTGAACTCGAGTTCAATAAGAAATGATTGGCG GG-3’
ZNF667-shRNA-3a鏈序列:
5’-GATCCCCAACCCTTATTCTGCATCTAACTCGAGTTAGATGCAGAATAAGGGTTG TTTTTGGAT-3’
ZNF667-shRNA-3b鏈序列:
5’-AGCTATCCAAAAACAACCCTTATTCTGCATCTAACTCGAGTTAGATGCAGAATAAGGGTTGGG-3’。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,構(gòu)建的三個Dp71短發(fā)夾干擾質(zhì)粒載體的序列見SEQ NO:17-19。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒,其特征在于,構(gòu)建的優(yōu)選短發(fā)夾干擾質(zhì)粒載體的序列見SEQ NO:18。
10.權(quán)利要求1-9任一項所述的ZNF667蛋白的短發(fā)夾RNA干擾質(zhì)粒的應(yīng)用方法,其特征在于,用于制備抑制肝癌的制劑。