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小米α?淀粉酶及其編碼基因與應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12167318閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.小米α淀粉酶在導(dǎo)致植物花粉敗育中的應(yīng)用,所述小米α淀粉酶基因具有:

1)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,或

2)在SEQ ID No.1所示的核苷酸序列中經(jīng)取代、缺失或添加一個(gè)或幾個(gè)核苷酸且具有同等功能的由1)衍生的核苷酸序列;或

3)在嚴(yán)格條件下與SEQ ID NO.1所示序列雜交且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列,所述嚴(yán)格條件為在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下雜交,并用該溶液洗膜;或

4)與1)、2)或3)的核苷酸序列具有90%以上同源性且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列。

2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述小米α淀粉酶的氨基酸序列為:

(a)由SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列組成的蛋白;或

(b)將SEQ ID NO.4的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加由SEQ ID NO.4衍生的且保持SEQ ID NO.4所示的蛋白功能的蛋白。

3.小米α淀粉酶或其編碼基因在制備花粉敗育轉(zhuǎn)基因植株中的應(yīng)用,所述小米α淀粉酶的氨基酸序列為:

(a)由SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列組成的蛋白;或

(b)將SEQ ID NO.4的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加由SEQ ID NO.4衍生的且保持SEQ ID NO.4所示的蛋白功能的蛋白;

小米α淀粉酶的編碼基因?yàn)榫哂校?/p>

1)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,或

2)在SEQ ID No.1所示的核苷酸序列中經(jīng)取代、缺失或添加一個(gè)或幾個(gè)核苷酸且具有同等功能的由1)衍生的核苷酸序列;或

3)在嚴(yán)格條件下與SEQ ID NO.1所示序列雜交且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列,所述嚴(yán)格條件為在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下雜交,并用該溶液洗膜;或

4)與1)、2)或3)的核苷酸序列具有90%以上同源性且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列。

4.含有小米α淀粉酶基因的生物材料在制備花粉敗育轉(zhuǎn)基因植株中的應(yīng)用,

所述小米α淀粉酶基因?yàn)榫哂校?/p>

1)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,或

2)在SEQ ID No.1所示的核苷酸序列中經(jīng)取代、缺失或添加一個(gè)或幾個(gè)核苷酸且具有同等功能的由1)衍生的核苷酸序列;或

3)在嚴(yán)格條件下與SEQ ID NO.1所示序列雜交且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列,所述嚴(yán)格條件為在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下雜交,并用該溶液洗膜;或

4)與1)、2)或3)的核苷酸序列具有90%以上同源性且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列;

所述生物材料為重組表達(dá)載體、表達(dá)盒、重組菌或宿主細(xì)胞。

5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用,其特征在于,所述的生物材料含有轉(zhuǎn)導(dǎo)肽和雄性配子優(yōu)先型啟動(dòng)子。

6.如權(quán)利要求5所述的應(yīng)用,其特征在于,所述轉(zhuǎn)導(dǎo)肽為SBE信號(hào)肽,其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述雄性配子優(yōu)先型啟動(dòng)子為PG47,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

7.一種調(diào)控植物花粉發(fā)育的方法,其特征在于,使植物表達(dá)小米α淀粉酶基因,該基因的核苷酸序列為:

1)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,或

2)在SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列中經(jīng)取代、缺失或添加一個(gè)或幾個(gè)核苷酸且具有同等功能的由1)衍生的核苷酸序列;或

3)在嚴(yán)格條件下與SEQ ID NO.1所示序列雜交且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列,所述嚴(yán)格條件為在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下雜交,并用該溶液洗膜;或

4)與1)、2)或3)的核苷酸序列具有90%以上同源性且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列。

8.如權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述的植物為禾本科植物。

9.如權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于,所述的調(diào)控是降解植物花粉中淀粉酶或誘導(dǎo)植物雄性不育。

10.一種降解植物花粉中外源基因擴(kuò)散的方法,其特征在于,將含有小米α淀粉酶基因的表達(dá)盒轉(zhuǎn)化愈傷組織,將轉(zhuǎn)化后的愈傷組織進(jìn)行誘導(dǎo)分化獲得轉(zhuǎn)基因花粉敗育的轉(zhuǎn)基因植株,使轉(zhuǎn)基因植株花粉無(wú)法正常授粉,進(jìn)而降解植物花粉中外源基因擴(kuò)散,

所述的小米α淀粉酶基因的核苷酸序列為:

1)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列,或

2)在SEQ ID No.1所示的核苷酸序列中經(jīng)取代、缺失或添加一個(gè)或幾個(gè)核苷酸且具有同等功能的由1)衍生的核苷酸序列;或

3)在嚴(yán)格條件下與SEQ ID NO.1所示序列雜交且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列,所述嚴(yán)格條件為在含0.1%SDS的0.1×SSPE或含0.1%SDS的0.1×SSC溶液中,在65℃下雜交,并用該溶液洗膜;或

4)與1)、2)或3)的核苷酸序列具有90%以上同源性且表達(dá)相同功能蛋白質(zhì)的核苷酸序列。

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