本發(fā)明屬于生物防治
技術領域：
，具體涉及一株平沙綠僵菌及其應用。
背景技術：
：目前我國大力推行農(nóng)藥減施，實現(xiàn)農(nóng)業(yè)的綠色安全生產(chǎn)。其中利用殺蟲微生物進行生物防治是實現(xiàn)這一目標的重要途徑。目前可用于生物防治的微生物包括細菌、真菌和病毒。因為真菌能夠在自然條件下即可通過體壁接觸感染并殺死害蟲，而細菌、病毒等其它昆蟲病原微生物只能通過消化道攝入的方式侵染寄主，所以真菌不僅可用于防治咀嚼式口器害蟲，還能防治刺吸式口器害蟲，具有更廣泛的應用價值。迄今研究開發(fā)的絲孢類殺蟲真菌制劑主要集中在自僵菌、綠僵菌及擬青霉等種類。它們的有效侵染體是分生孢子，可附著到蟲體表面，在適宜條件下萌發(fā)并產(chǎn)生芽管，穿透寄主體壁進入血腔，繼而利用寄主的營養(yǎng)在血腔中繁殖，當血腔中充滿菌絲體時寄主死亡變僵，在適宜環(huán)境條件下菌絲從昆蟲體壁長出并形成分生孢子梗而產(chǎn)生分生孢子，開始新的侵染。生防真菌在昆蟲體表產(chǎn)生的分生孢子是氣生分生孢子，對昆蟲奇主而言是最有效的自然侵染體。絲孢類生防真菌在自然條件下對刺吸式口器害蟲的侵染致死作用通常為小概率事件，害蟲微生物防治的根本目的就是通過對潛力菌株有效侵染體的生產(chǎn)和制劑化，以田間大量布菌的形式，將自然的小概率事件變?yōu)槿藶榭煽氐拇蟾怕适录?，從而控制害蟲種群的增長及危害。因此，生防菌株的分離和篩選是殺蟲真菌制劑的技術關鍵。雖然生防真菌的自然分離物很多，但具備多方面優(yōu)異性狀并可深度研究開發(fā)的菌種或菌株并不多見。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一株平沙綠僵菌。該菌株于2016年7月7日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，保藏單位地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號。分類命名為：平沙綠僵菌(Metarhiziumpingshaense)，保藏號CGMCC12765。本發(fā)明的另一目的在于提供上述平沙綠僵菌菌株在制備殺蟲劑中的應用。本發(fā)明的又一目的在于提供一種殺蟲劑。本發(fā)明的目的可以通過以下技術方案實現(xiàn)：一株平沙綠僵菌，該菌株于2016年7月7日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，分類名為分類命名為：平沙綠僵菌Metarhiziumpingshaense，保藏號CGMCC12765。該菌株于2015年7月份于江蘇省江浦采集的一頭有明顯感染真菌的金龜子幼蟲尸體分離，在本實驗室內(nèi)用PDA、SDAY(均加入50mg/mL多果定、200mg/Ml氯霉素)和孟加拉紅培養(yǎng)基分離，在PDA培養(yǎng)基上純化得到。在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)15d，表層真菌顏色為墨綠色，底部顏色淺黃色至淺黃褐色，成熟孢子為梭形，兩端對稱。研究表明該菌株用于防治農(nóng)作物害蟲效果顯著，且具有速效性。上述平沙綠僵菌菌株在制備殺蟲劑中的應用。所述的殺蟲劑用于防除農(nóng)業(yè)害蟲、衛(wèi)生害蟲和危害動物健康的害蟲。所述的農(nóng)業(yè)害蟲、衛(wèi)生害蟲和危害動物健康的害蟲包括但不限于半翅目害蟲(褐飛虱、灰飛虱、白背飛虱、中黑盲蝽、煙粉虱、禾谷縊管蚜、黑尾葉蟬等)，鱗翅目害蟲(二化螟、三化螟、小菜蛾、甜菜夜蛾、茶尺蠖等)，雙翅目昆蟲(黑腹果蠅、家蠅、柑橘小實蠅、麥黃吸漿蟲、淡色按蚊等)，直翅目害蟲(東亞飛蝗等)、鞘翅目(馬鈴薯甲蟲等)、等翅目(黑翅土白蟻)、蛛形綱(二斑葉螨)。一種殺蟲劑，該殺蟲劑以上述的平沙綠僵菌為主要有效成分。上述的殺蟲劑，優(yōu)選的，所述的平沙綠僵菌在殺蟲劑中的含量為103～1011孢子/克。上述的殺蟲劑，其在于以所述的平沙綠僵菌為主要有效成分和農(nóng)藥助劑、賦型劑配制成農(nóng)藥上允許的任意一種劑型，所述的劑型包括但不限于溶液劑、乳劑、混懸劑、粉劑、泡沫劑、糊劑、顆粒劑、氣霧劑、用活性成分浸漬的天然的和合成的材料、微膠囊劑、包衣劑。一種復配殺蟲組合物，該復配殺蟲組合物的主要有效成分包含組分(a)和組分(b)：(a)權利要求1所述的平沙綠僵菌；(b)細菌、真菌和化學農(nóng)藥中的至少一種。上述的復配殺蟲組合物，所述的主要有效成分和農(nóng)藥助劑、賦型劑配制成農(nóng)藥上允許的任意一種劑型。所述的平沙綠僵菌孢子在復配殺蟲組合物中的含量為103～1011孢子/克。本發(fā)明的有益效果：(1)目前所有報道的殺蟲真菌中殺蟲效果最好的。(2)具有速效性。對害蟲產(chǎn)生半數(shù)致死的時間低于目前所有報道的殺蟲真菌。(3)速效性：從接種到蟲子死亡(且確認是由于該菌致死)的時間很短。附圖說明圖1為毒力回歸曲線。圖2為接種平沙綠僵菌菌株后東亞飛蝗累計死亡率。具體實施方式一、分離及生測數(shù)據(jù)：該菌株于2015年7月份于江蘇省江浦采集的一頭有明顯感染真菌的金龜子幼蟲尸體分離，在本實驗室內(nèi)用PDA、SDAY(均加入50mg/mL多果定、200mg/Ml氯霉素)和孟加拉紅培養(yǎng)基分離，在PDA培養(yǎng)基上純化得到。在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)15D，表層真菌顏色為墨綠色，底部顏色淺黃色至淺黃褐色，成熟孢子為梭形，兩端對稱。該菌株NJMp2103于2016年7月7日在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，分類名為分類命名為：平沙綠僵菌Metarhiziumpingshaense，保藏號CGMCC12765。將生長旺盛的菌株NJMp2103孢子加入到含0.05％(v/v)吐溫-80的滅菌水中，渦旋混勻，取100微升加入到PDA固體培養(yǎng)基中(培養(yǎng)基在直徑為9cm的一次性滅菌塑料培養(yǎng)皿中)，在25℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)10天左右。收集綠僵菌孢子，用含0.05％的吐溫-80滅菌水將其混勻，并用血球計數(shù)板計數(shù)，并將其稀釋到1×108孢子/mL。試蟲為本實驗室飼養(yǎng)多年的敏感型褐飛虱，用手持式噴霧器對初羽化雌成蟲采用噴霧法進行室內(nèi)毒力測定，三次重復結果見表1(其中結果1是每24小時統(tǒng)計一次死亡率)：表1室內(nèi)毒力測定結果采用108、107、106、105、104對初羽化褐飛虱進行室內(nèi)毒力測定，結果見表2：表2梯度濃度的孢子懸液對初羽化褐飛虱的室內(nèi)毒力測定濃度死亡率％1×10^892.592591×10^783.44231×10^658.818961×10^563.188411×10^449.10256CK5.56如圖1所示的毒力回歸曲線(6天致死中濃度為3.26±0.27*104，95％致死濃度為8.63±0.47*107。單位均為孢子/mL)。如圖2所示注射1微升含5000個芽生孢子的PDA培養(yǎng)液(培養(yǎng)液對昆蟲無毒)，東亞飛蝗累計死亡率。對4齡東亞飛蝗進行室內(nèi)毒力測定(1×108孢子/mL噴霧法)，五天死亡率96％左右。對四齡蝗蟲注射1微升含5000個芽生孢子的PDA培養(yǎng)液(培養(yǎng)液對昆蟲無毒)，六天死亡率82.78％，對照組(注射1微升PDA培養(yǎng)液)死亡率15.40％。平沙綠僵菌菌株NJMp2103對不同害蟲毒力結果如表3和表4所示(生測孢子濃度均為1×108孢子/mL)：表3為平沙綠僵菌NJMp2103對不同害蟲毒力結果表4為平沙綠僵菌NJMp2103對不同害蟲毒力結果備注：①平沙綠僵菌NJMp2103對害蟲3天累積致死率②平沙綠僵菌NJMp2103對害蟲6天累積致死率結果顯示：(1)本發(fā)明所篩選的平沙綠僵菌菌株NJMp2103是目前所有報道的殺蟲真菌中殺蟲效果最好的。(2)具有速效性。對害蟲產(chǎn)生半數(shù)致死的時間低于目前所有報道的殺蟲真菌。(3)速效性：從接種到蟲子死亡(且確認是由于該菌致死)的時間很短。當前第1頁1 2 3