本發(fā)明涉及靈芝栽培技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種活體靈芝盆景的制作方法。
背景技術(shù)：
靈芝(Ganoderma Lucidum Karst)是多孔菌科真菌靈芝的子實體。具有補氣安神、止咳平喘、延年益壽的功效。用于眩暈不眠、心悸氣短、神經(jīng)衰弱、虛勞咳喘。靈芝是我國醫(yī)學寶庫中的一種名貴中藥，是集保健和藥用為一身的食用菌。現(xiàn)代醫(yī)學研究證明，靈芝中的多糖類、三萜類、甾醇類等活性成分，對人體有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫、調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)、調(diào)節(jié)循環(huán)系統(tǒng)等的功能。靈芝，性平，為滋補強壯、固本扶正、延年益壽的珍貴補品。我國古老的醫(yī)藥寶典《神農(nóng)本草經(jīng)》及李時珍的《本草綱目》中記載靈芝：“上上藥，主養(yǎng)命以應天。益心氣，補中，增慧智，堅筋骨，好顏色，久食輕身?！膘`芝寓意美麗、吉祥、富貴、長壽、如意。神農(nóng)本草經(jīng)記載，“山川云雨五行四時陰陽晝夜之精，可生五色靈芝，皆圣王休祥之易”；漢代班固的“靈芝歌”贊道：“象三德而應瑞圖，延壽命而光壽都”；魏朝曹植“永靈芝”詩中也贊道：“榮華相晃耀，光彩曄若神”。
靈芝盆景景象美觀，古樸清新，寓意吉祥富貴，具有深邃的藝術(shù)內(nèi)涵，已經(jīng)成為高檔裝飾的首選，也是饋贈、收藏的時尚佳品。生產(chǎn)靈芝盆景具有極高的經(jīng)濟效益和社會效益。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明目的是提供一種活體靈芝盆景的制作方法。
本發(fā)明技術(shù)方案如下：
一種活體靈芝盆景的制作方法，包括以下步驟：
1)將靈芝母種接種至母種培養(yǎng)基，獲得靈芝母種；
所述母種培養(yǎng)基包括以下成分：馬鈴薯200-300g/L、葡萄糖20-30g/L、牛肉膏3-5g/L、蛋白胨4-10g/L、瓊脂粉15-20g/L；
2)將靈芝母種接種至原種培養(yǎng)基培養(yǎng)，獲得靈芝原種；
所述原種培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：木屑60-80份、玉米芯5-10份、麥麩10-15份、紅糖1-3份、石膏粉1-3份、KNO3 0.05-0.5份；所述原種培養(yǎng)基含水量為55-60％；
3)將靈芝原種接種至栽培種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得靈芝栽培種；
所述栽培種培養(yǎng)基包括以下重量份的原料：木屑30-80份、豬糞5-15份、牛糞5-15、菜籽粕5-25份、腐植酸5-10份、紫萁小菇(Mycena osmundicola Lange)發(fā)酵液1-10份、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液1-10份、石膏1-3份；所述紫萁小菇發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-5.0×106/mL，所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-1.5×1010/mL；所述栽培種培養(yǎng)基的制備方法包括以下步驟：按配比將各原料混合，加水至含水量50-70％，發(fā)酵至腐熟；調(diào)節(jié)水分含量至55-60％，滅菌，即可；
4)將所述靈芝栽培種進行代料栽培，出芝；所述代料栽培的培養(yǎng)基與栽培種培養(yǎng)基相同；
5)將步驟4)所得靈芝移栽至盆景式容器中，定期或不定期向所述盆景式容器中輸入營養(yǎng)液和/或水；
所述盆景式容器中的基質(zhì)包括以下重量份的原料：沙壤土80-100份，鋸末10-30份，草木灰1-3份，石膏粉1-3份；
所述盆景式容器及所述基質(zhì)事先經(jīng)滅菌或消毒處理，徹底去除微生物及蛀蟲或蟲卵；
每1kg所述營養(yǎng)液包括以下成分：栽培種培養(yǎng)基浸出液50-100mL，脫氫乙酸鈉500-1000mg，MgSO4 100-500mg，KNO3 100-200mg，K2HPO4 50-100mg，三碘苯甲酸100-200mg，EDTA-2Na(即乙二胺四乙酸二鈉)5-10mg，維生素B1 5-10mg，水(溶劑)；
所述栽培種培養(yǎng)基浸出液制備方法包括將所述栽培種培養(yǎng)基加入10倍重量的水浸泡10-24h，過濾，將濾液滅菌，即可。
優(yōu)選地，所述母種培養(yǎng)基包括以下成分：馬鈴薯250g/L、葡萄糖25g/L、牛肉膏3g/L、蛋白胨6g/L、瓊脂粉15-20g/L。
優(yōu)選地，所述母種培養(yǎng)條件包括：在22-26℃下恒溫避光培養(yǎng)；一般培養(yǎng)5-7天即可菌絲長滿培養(yǎng)基斜面。
優(yōu)選地，所述原種培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：木屑70份、玉米芯6份、麥麩15份、紅糖2份、石膏粉2份、KNO3 0.25份；所述原種培養(yǎng)基含水量為55-60％。
優(yōu)選地，所述原種培養(yǎng)條件包括：在溫度為20-22℃、濕度為55-65％下恒溫避光培養(yǎng)，一般培養(yǎng)35-40天。
優(yōu)選地，所述栽培種培養(yǎng)基或代料培養(yǎng)基，包括以下重量份的原料：木屑40份、豬糞5份、牛糞15份、菜籽粕15份、腐植酸6份、紫萁小菇發(fā)酵液5份、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液5份、石膏2份；所述紫萁小菇發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-3.0×106/mL，所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-1.2×1010/mL。
優(yōu)選地，所述栽培種培養(yǎng)條件包括：在溫度為20-22℃、濕度為55-65％下恒溫培養(yǎng)，一般培養(yǎng)35-50天；前期10天內(nèi)避光培養(yǎng)，后期光照強度為1000-1500 1x(勒克斯)；有利于菌絲快速生長。
本發(fā)明所述母種培養(yǎng)基、原種培養(yǎng)基均可由本領(lǐng)域常規(guī)方法制得。
所述代料栽培出芝培養(yǎng)時間一般為30-50d.
優(yōu)選地，所述代料栽培條件(即出芝條件)包括：培養(yǎng)溫度為28-30℃，空氣相對濕度為60-75％，前期10天內(nèi)避光培養(yǎng)，后期光照強度為1000-1500 1x(勒克斯)；有利于菌絲快速生長。
優(yōu)選地，所述出芝為定型出芝，包括人工定點控制出芝或人工定型出芝，均可按常規(guī)方法進行。
優(yōu)選地，步驟5)移栽靈芝時保留部分代料栽培培養(yǎng)基，以確保靈芝移栽成活為準。
優(yōu)選地，所述盆景式容器中的基質(zhì)包括以下重量份的原料：沙壤土85份，鋸末12份，草木灰2份，石膏粉2份；
優(yōu)選地，每1kg所述營養(yǎng)液包括以下成分：栽培種培養(yǎng)基浸出液80mL，脫氫乙酸鈉600mg，MgSO4 300mg，KNO3 150mg，K2HPO4 100mg，三碘苯甲酸180mg，EDTA-2Na 10mg，維生素B1 10mg，水(溶劑)；
所述營養(yǎng)液包括按常規(guī)方法將各原料按比例混勻即可。優(yōu)選地，將所述營養(yǎng)液進行滅菌處理，以防止腐敗變質(zhì)。
本發(fā)明還提供一種用于活體靈芝盆景制作的盆景式容器中的基質(zhì)，所述盆景式容器中的基質(zhì)包括以下重量份的原料：沙壤土80-100份，鋸末10-30份，草木灰1-3份，石膏粉1-3份；優(yōu)選地，所述盆景式容器中的基質(zhì)包括以下重量份的原料：沙壤土85份，鋸末12份，草木灰2份，石膏粉2份。
本發(fā)明所述沙壤土用一般沙壤土即可。
本發(fā)明還提供一種用于活體靈芝盆景制作的營養(yǎng)液(主要用于輸入盆景式容器中的基質(zhì)中)，每1kg所述營養(yǎng)液包括以下成分：栽培種培養(yǎng)基浸出液50-100mL，脫氫乙酸鈉500-1000mg，MgSO4 100-500mg，KNO3 100-200mg，K2HPO4 50-100mg，三碘苯甲酸100-200mg，EDTA-2Na5-10mg，維生素B1 5-10mg，水(溶劑)；優(yōu)選地，每1kg所述營養(yǎng)液包括以下成分：栽培種培養(yǎng)基浸出液80mL，脫氫乙酸鈉600mg，MgSO4 300mg，KNO3 150mg，K2HPO4100mg，三碘苯甲酸180mg，EDTA-2Na 10mg，維生素B1 10mg，水(溶劑)。
本發(fā)明還提供一種栽培靈芝的栽培種培養(yǎng)基或代料培養(yǎng)基，包括以下重量份的原料：木屑30-50份、豬糞5-15份、牛糞5-15份、菜籽粕5-25份、腐植酸5-10份、紫萁小菇(Mycenaosmundicola Lange)酵液1-10份、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)發(fā)酵液1-10份、石膏1-3份；所述紫萁小菇發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-5.0×106/mL，所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-1.5×1010/mL；所述栽培種培養(yǎng)基的制備方法包括以下步驟：按配比將各原料混合，加水至含水量50-70％，發(fā)酵至腐熟；調(diào)節(jié)水分含量至55-60％，滅菌，即可。
優(yōu)選地，所述栽培種培養(yǎng)基或代料培養(yǎng)基，包括以下重量份的原料：木屑40份、豬糞5份、牛糞15份、菜籽粕15份、腐植酸6份、紫萁小菇發(fā)酵液5份、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液5份、石膏2份；所述紫萁小菇發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-3.0×106/mL，所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-1.2×1010/mL。
所述腐植酸可市售購得，例如購自山東創(chuàng)新腐植酸科技股份有限公司。
所述枯草芽孢桿菌優(yōu)選為CGMCC 1.3358。
本發(fā)明所述紫萁小菇、枯草芽孢桿菌均可以通過市售購得，例如購自中國普通微生物菌種保藏中心。
栽培種培養(yǎng)基或代料培養(yǎng)基的制備方法中所述滅菌需要徹底滅活枯草芽孢桿菌及其芽孢等各種微生物，可采用本領(lǐng)域常規(guī)滅菌方法。
所述紫萁小菇發(fā)酵液制備可采用本領(lǐng)域常規(guī)方法，例如制備方法包括取紫萁小菇母種，接種于培養(yǎng)液，搖床培養(yǎng)5-10d，用紗布濾掉紫萁小菇菌球，即得紫萁小菇發(fā)酵液；可置于冰箱中保存。所述搖床培養(yǎng)轉(zhuǎn)速優(yōu)選140-160rpm振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度優(yōu)選22-26℃；一般250mL三角瓶裝培養(yǎng)液量125-150mL，500mL三角瓶裝培養(yǎng)液量250-300mL。
所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液制備可采用本領(lǐng)域常規(guī)方法，例如包括以下步驟：
1)斜面培養(yǎng)：將枯草芽孢桿菌的原始菌種在無菌條件下接種于斜面培養(yǎng)基上，在29±1℃條件下培養(yǎng)36-48h；斜面培養(yǎng)基的配方如下：葡萄糖15g、蛋白胨5g、酵母膏5g、水1000mL、瓊脂15g；
2)搖床培養(yǎng)：將步驟1)培養(yǎng)得到的菌種接種于液體培養(yǎng)基，在pH 6.5-7.0、溫度為30±2℃條件下，140-160r/min搖床培養(yǎng)36-48h；液體培養(yǎng)基配方如下：玉米粉13g，葡萄糖5g，豆餅粉20g，魚粉5g，CaCO3 2g，(NH4)2SO4 1g，K2HPO4 0.3g，MgSO4·7H2O 0.2g，MnSO4·H2O0.2g，水1000ml；
3)發(fā)酵罐培養(yǎng)：將步驟2)培養(yǎng)得到的菌種接種于發(fā)酵罐培養(yǎng)基，在pH 7.5-8.0、罐壓0.5kg、溫度為30±2℃、通風量1:0.8-1.1條件下，至菌數(shù)大于1.0-1.2×1010/mL時下罐，即得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方如下：玉米粉5kg、豆餅粉2.5kg、硫酸銨0.5kg、葡萄糖1.5kg、酵母粉0.5kg、蛋白胨0.25kg、加水至100kg；通常培養(yǎng)48-56h。
具體地，栽培種培養(yǎng)基或代料培養(yǎng)基的制備方法中所述發(fā)酵至腐熟包括：發(fā)酵堆內(nèi)溫度達到50℃時第一次翻堆，以后每天翻堆1-2次，并補充適量水分，待發(fā)酵堆溫度降低至35℃以下、水分含量降至30％以下結(jié)束發(fā)酵。
本發(fā)明方法適用于各種靈芝，尤其適用于靈芝Ganoderma lucidum(Leyss.:Fr.)Karst；紫芝Ganoderma sinense J.D.Zhao,L.W.Hsu et X.Q.Zhang；薄蓋靈芝Ganoderma capense(L loyd)D.A.Reid。
本發(fā)明所述靈芝菌種均可市售購得，也可以從野生靈芝子實體上分離得到。
本發(fā)明優(yōu)化了母種培養(yǎng)基、原種培養(yǎng)基、栽培種培養(yǎng)基，使靈芝菌絲生長更快，更有利于后期形成子實體。特別地，本發(fā)明栽培種培養(yǎng)基可顯著提高靈芝子實體產(chǎn)量。本發(fā)明首次將紫萁小菇應用到靈芝栽培種培養(yǎng)基堆腐發(fā)酵中，所制得的栽培種培養(yǎng)基(也可用作代料培養(yǎng)基)具備抑菌功能，顯著降低了雜菌污染率，提高了靈芝質(zhì)量，增加了經(jīng)濟效益。本發(fā)明方法簡便易行，投資小、見效快，易于推廣；本發(fā)明方法菌絲生長速度快，菌絲日均生長速度可達18-20mm/d，子實體生物學效率可達9％-15％，子實體產(chǎn)量高、質(zhì)量好，顯著提高了經(jīng)濟效益。本發(fā)明還優(yōu)化了盆景式容器基質(zhì)及營養(yǎng)液。本發(fā)明方法顯著的延長了活體靈芝盆景的保藏期限和提高了其保藏質(zhì)量。本發(fā)明方法制作的靈芝盆景為活體靈芝，實驗證明經(jīng)存放3年后靈芝仍保持活體狀態(tài)，3年內(nèi)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象的靈芝盆景小于10％。
具體實施方式
以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描述的技術(shù)或條件，或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可通過正規(guī)渠道商購買得到的常規(guī)產(chǎn)品。
本發(fā)明菌種均可以通過市售購得。以下所述枯草芽孢桿菌為CGMCC 1.3358。
活體靈芝實驗方法包括：用無菌解剖刀將靈芝盆景中的靈芝子實體中切開，用解剖刀切取0.2-0.5cm小方塊組織，用鑷子將該組織置于培養(yǎng)皿PDA培養(yǎng)基(包括以下成分：馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂粉15g/L)的中央，培養(yǎng)2-3d后可見由組織塊長出白色菌絲，證明為活體靈芝。繼續(xù)轉(zhuǎn)管1-2次可獲得純化的靈芝菌絲，按本發(fā)明方法仍可獲得靈芝子實體。
實施例1
一種活體靈芝盆景的制作方法，包括以下步驟：
1)將靈芝Ganoderma lucidum(Leyss.:Fr.)Karst母種接種至母種培養(yǎng)基在22-26℃下恒溫培養(yǎng)5-7天，獲得靈芝母種。所述母種培養(yǎng)基包括以下成分：馬鈴薯250g/L、葡萄糖25g/L、牛肉膏3g/L、蛋白胨6g/L、瓊脂粉15-20g/L。
2)將靈芝母種接種至原種培養(yǎng)基在溫度20-22℃、濕度55-65％下培養(yǎng)，獲得靈芝原種。所述原種培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：木屑70份、玉米芯6份、麥麩15份、紅糖2份、石膏粉2份、KNO3 0.25份；所述原種培養(yǎng)基含水量為55-60％；原種培養(yǎng)基制成500mL原種瓶。所述原種培養(yǎng)基的制備方法包括按配比取各原料，混勻后調(diào)整水分含量，滅菌。
所述母種培養(yǎng)、原種培養(yǎng)條件均在暗室避光培養(yǎng)。
3)將靈芝原種接種至栽培袋內(nèi)的栽培種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得靈芝栽培種。所述栽培種培養(yǎng)條件包括在溫度為20-22℃、濕度為55-65％下恒溫培養(yǎng)，一般培養(yǎng)35-50天；前期10天內(nèi)避光培養(yǎng)，后期光照強度為1000-1500 1x(勒克斯)。
所述栽培種培養(yǎng)基包括以下重量份的原料：木屑40份、豬糞5份、牛糞15份、菜籽粕15份、腐植酸6份、紫萁小菇發(fā)酵液5份、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液5份、石膏2份；所述紫萁小菇發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-3.0×106/mL，所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-1.2×1010/mL。所述紫萁小菇發(fā)酵液制備方法包括取紫萁小菇母種，接種于培養(yǎng)液，搖床140rpm培養(yǎng)7-8d，培養(yǎng)溫度22-26℃，用紗布濾掉紫萁小菇菌球，即得紫萁小菇發(fā)酵液。
所述栽培種培養(yǎng)基的制備方法包括以下步驟：按配比將各原料混合，加水至含水量50-70％，發(fā)酵堆內(nèi)溫度達到50℃時第一次翻堆，以后每天翻堆1-2次，并補充適量水分，待發(fā)酵堆溫度降低至35℃以下、水分含量降至30％以下表明發(fā)酵腐熟，結(jié)束發(fā)酵；調(diào)節(jié)水分含量至55-60％，徹底滅菌(即徹底滅活枯草芽孢桿菌及其芽孢等各種微生物)，即可。
4)將所述靈芝栽培種進行代料栽培出芝培養(yǎng)，按常規(guī)方法進行人工定點控制出芝或人工定型出芝，獲得靈芝。所述代料培養(yǎng)基與栽培種培養(yǎng)基相同。
所述代料栽培條件包括：培養(yǎng)溫度為28-30℃，空氣相對濕度為60-75％，前期10天內(nèi)避光培養(yǎng)，后期光照強度為1000-1500 1x(勒克斯)。
5)將步驟4)所得靈芝移栽至盆景式容器中，定期或不定期向所述盆景式容器中輸入營養(yǎng)液和/或水；移栽靈芝時保留部分代料栽培培養(yǎng)基，以確保靈芝移栽成活為準。
所述盆景式容器中的基質(zhì)包括以下重量份的原料：沙壤土85份，鋸末12份，草木灰2份，石膏粉2份；
所述盆景式容器及所述基質(zhì)事先經(jīng)滅菌或消毒處理，徹底去除微生物及蛀蟲或蟲卵；
每1kg所述營養(yǎng)液包括以下成分：栽培種培養(yǎng)基浸出液80mL，脫氫乙酸鈉600mg，MgSO4300mg，KNO3 150mg，K2HPO4 100mg，三碘苯甲酸180mg，EDTA-2Na 10mg，維生素B1 10mg，余量為水(溶劑)。
所述栽培種培養(yǎng)基浸出液制備方法包括將所述栽培種培養(yǎng)基加入10倍重量的水浸泡24h，過濾，將濾液滅菌，即可。
所述營養(yǎng)液包括按常規(guī)方法將各原料按比例混勻，滅菌即可。
母種、原種、栽培種、栽培袋菌絲日均生長速度均可達18-20mm/d。從原基到子實體成熟一般需30-45d，一般培養(yǎng)后1.5-2個月可以采收；以1000kg干代料干重計，當年可以采收靈芝子實體90-125kg。(子實體產(chǎn)量以干重計，此處計算的產(chǎn)量僅指步驟4所得靈芝產(chǎn)量，下同。)本實施例制作的靈芝盆景為活體靈芝，實驗證明經(jīng)存放3年后靈芝仍保持活體狀態(tài)；3年內(nèi)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象的靈芝盆景小于10％。
實施例2
一種活體靈芝盆景的制作方法，與實施例1的區(qū)別僅在于：所述母種培養(yǎng)基包括以下成分：馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、牛肉膏3g/L、蛋白胨4g/L、瓊脂粉15g/L；所述原種培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：木屑60份、玉米芯5份、麥麩10份、紅糖1份、石膏粉1份、KNO30.05份；所述原種培養(yǎng)基含水量為55-60％；所述栽培種培養(yǎng)基包括以下重量份的原料：木屑30份、豬糞5份、牛糞10、菜籽粕5份、腐植酸5份、紫萁小菇發(fā)酵液1份、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液1份、石膏1份；所述紫萁小菇發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-2.0×106/mL，所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-1.2×1010/mL。所述盆景式容器中的基質(zhì)包括以下重量份的原料：沙壤土80份，鋸末10份，草木灰1份，石膏粉1份；每1kg所述營養(yǎng)液包括以下成分：栽培種培養(yǎng)基浸出液50mL，脫氫乙酸鈉500mg，MgSO4 100mg，KNO3 100mg，K2HPO450mg，三碘苯甲酸100mg，EDTA-2Na 5mg，維生素B1 5mg，余量為水(溶劑)。
母種、原種、栽培種、栽培袋菌絲日均生長速度均可達18-20mm/d。從原基到子實體成熟一般需30-45d，一般培養(yǎng)后1.5-2個月可以采收；以1000kg干代料干重計，當年可以采收靈芝子實體90-120kg。本實施例制作的靈芝盆景為活體靈芝，實驗證明經(jīng)存放3年后靈芝仍保持活體狀態(tài)。3年內(nèi)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象的靈芝盆景小于10％。
實施例3
一種活體靈芝盆景的制作方法，與實施例1的區(qū)別僅在于：所述母種培養(yǎng)基包括以下成分：馬鈴薯300g/L、葡萄糖30g/L、牛肉膏5g/L、蛋白胨10g/L、瓊脂粉20g/L；所述原種培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：木屑80份、玉米芯10份、麥麩15份、紅糖3份、石膏粉3份、KNO30.3份；所述原種培養(yǎng)基含水量為55-60％；所述栽培種培養(yǎng)基包括以下重量份的原料：木屑50份、豬糞15份、牛糞5份、菜籽粕25份、腐植酸10份、紫萁小菇發(fā)酵液10份、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液10份、石膏3份；所述紫萁小菇發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-2.0×106/mL，所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中有效活菌數(shù)為1.0-1.2×1010/mL。所述盆景式容器中的基質(zhì)包括以下重量份的原料：沙壤土100份，鋸末30份，草木灰3份，石膏粉3份；每1kg所述營養(yǎng)液包括以下成分：栽培種培養(yǎng)基浸出液100mL，脫氫乙酸鈉1000mg，MgSO4 500mg，KNO3200mg，K2HPO4 100mg，三碘苯甲酸200mg，EDTA-2Na 10mg，維生素B1 10mg，余量為水(溶劑)。
母種、原種、栽培種、栽培袋菌絲日均生長速度均可達18-20mm/d。從原基到子實體成熟一般需30-45d，一般培養(yǎng)后1.5-2個月可以采收；以1000kg干代料干重計，當年可以采收靈芝子實體90-120kg。本實施例制作的靈芝盆景為活體靈芝，實驗證明經(jīng)存放3年后靈芝仍保持活體狀態(tài)。3年內(nèi)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象的靈芝盆景小于10％。
對比例1
一種活體靈芝盆景的制作方法，與實施例1的區(qū)別僅在于：母種培養(yǎng)基采用PDA培養(yǎng)基，包括以下成分：馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂粉15g/L；原種培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：闊葉樹木屑80份、麥麩18份、蔗糖1份、石膏粉1份，攪拌均勻后加水，最終培養(yǎng)基含水量為55-60％；所述母種培養(yǎng)、原種培養(yǎng)均為22℃-25℃恒溫暗室避光培養(yǎng)；所述栽培種培養(yǎng)基與代料栽培培養(yǎng)基相同，包括以下重量份的成分：雜木屑73份，麥麩25份，黃豆粉1份，石膏粉1份。所述代料栽培條件包括：培養(yǎng)溫度為25-26℃，空氣相對濕度為60-95％，前20d光照強度1000-1500勒克斯，后期光照強度1500-3000勒克斯。制作好的靈芝盆景僅定期或不定期向所述盆景式容器中輸入水，但不輸入任何營養(yǎng)液。
母種、原種、栽培種、栽培袋菌絲日均生長速度一般10-15mm/d。從原基到子實體成熟一般需40-50d，一般培養(yǎng)后2-2.5個月可以采收；以1000kg干代料干重計，當年可以采收靈芝子實體40-50kg。1年內(nèi)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象的靈芝盆景大于30％。
對比例2
一種活體靈芝盆景的制作方法，與實施例1的區(qū)別僅在于：母種培養(yǎng)基采用PDA培養(yǎng)基，包括以下成分：馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂粉15g/L；原種培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：木屑80份、玉米芯6份、麥麩18份、石膏粉2份；攪拌均勻后加水，最終培養(yǎng)基含水量為55-60％；所述母種培養(yǎng)、原種培養(yǎng)均為22℃-25℃恒溫暗室避光培養(yǎng)。所述栽培種培養(yǎng)基與代料栽培培養(yǎng)基相同，包括以下重量份的成分：棉籽殼78份、麥麩20份、蔗糖1份、石膏1份；所述代料栽培條件包括：培養(yǎng)溫度為25-26℃，空氣相對濕度為60-95％，前20d光照強度1000-1500勒克斯，后期光照強度1500-3000勒克斯。制作好的靈芝盆景僅定期或不定期向所述盆景式容器中輸入水，但不輸入任何營養(yǎng)液。
母種、原種、栽培種、栽培袋菌絲日均生長速度一般10-15mm/d。從原基到子實體成熟一般需40-50d，一般培養(yǎng)后2-2.5個月可以采收；以1000kg干代料干重計，當年可以采收靈芝子實體40-50kg。1年內(nèi)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象的靈芝盆景大于30％。
對比例3
一種活體靈芝盆景的制作方法，與實施例1的區(qū)別僅在于：母種培養(yǎng)基采用PDA培養(yǎng)基，包括以下成分：馬鈴薯200g/L、葡萄糖20g/L、瓊脂粉15g/L；原種培養(yǎng)基包括以下重量份的成分：木屑80份、玉米芯6份、麥麩18份、石膏粉2份；攪拌均勻后加水，最終培養(yǎng)基含水量為55-60％；所述母種培養(yǎng)、原種培養(yǎng)均為22℃-25℃恒溫暗室避光培養(yǎng)。所述栽培種培養(yǎng)基與代料栽培培養(yǎng)基相同，包括以下重量份的成分：棉籽殼43份、雜木屑42份、麥麩10份、豆餅粉3份、過磷酸鈣1份、石膏1份。所述代料栽培條件包括：培養(yǎng)溫度為25-26℃，空氣相對濕度為60-95％，前20d光照強度1000-1500勒克斯，后期光照強度1500-3000勒克斯。制作好的靈芝盆景僅定期或不定期向所述盆景式容器中輸入水，但不輸入任何營養(yǎng)液。
母種、原種、栽培種、栽培袋菌絲日均生長速度一般10-15mm/d。從原基到子實體成熟一般需40-50d，一般培養(yǎng)后2-2.5個月可以采收；以1000kg干代料干重計，當年可以采收靈芝子實體40-50kg。1年內(nèi)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象的靈芝盆景大于30％。
對比例4
一種活體靈芝盆景的制作方法，與實施例1的區(qū)別僅在于：所述栽培種培養(yǎng)基及代料培養(yǎng)基的原料不包括紫萁小菇發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液。
母種、原種、栽培種、栽培袋菌絲日均生長速度一般13-16mm/d。從原基到子實體成熟一般需40-45d，一般培養(yǎng)后2-2.5個月可以采收；以1000kg干代料干重計，當年可以采收靈芝子實體50-60kg。1年內(nèi)出現(xiàn)蟲蛀現(xiàn)象的靈芝盆景大于25％。
雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。