技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及涉及蟲草養(yǎng)殖領(lǐng)域，尤其涉及一種提高蟲草素含量的蛹蟲草培養(yǎng)基。

背景技術(shù)：

冬蟲夏草又名蟲草，是我國民間慣用的一種名貴滋補(bǔ)藥材，其營養(yǎng)成分高于人參，可入藥，也可食用，是上乘的佳肴，具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。蟲草的主要藥用價(jià)值在于蟲草素，蟲草素是蛹蟲草產(chǎn)生的一種重要次生代謝產(chǎn)物，作為蛹蟲草重要的生物活性成分，由于蟲草素具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)等功效，市場(chǎng)需求越來越大，價(jià)格十分昂貴，但是蟲草素在蛹蟲草中的含量極低，影響其藥用價(jià)值，雖然蟲草素可通過化學(xué)合成，但合成工藝復(fù)雜，產(chǎn)物回收率低，生產(chǎn)成本高，因此，目前最好的方法是如何通過蛹蟲草發(fā)酵獲得蟲草素，但是現(xiàn)今蟲草培養(yǎng)方法簡單，培養(yǎng)基營養(yǎng)價(jià)值低，不能很好的提高蟲草中蟲草素的含量，導(dǎo)致蟲草要用價(jià)值低。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

根據(jù)以上技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種提高蟲草素含量的蛹蟲草培養(yǎng)基，其特征在于包括PDA加富培養(yǎng)基、實(shí)體培養(yǎng)基、液體菌種培養(yǎng)基，所述PDA加富培養(yǎng)基組成為：馬鈴薯汁500-1000ml、蔗糖15-25g、繭蛹汁150-250ml、奶粉50-100g、瓊脂10-15g、酸性氨基酸6-10g、堿性氨基酸10-15g、人參粉30-50g；所述液體菌種培養(yǎng)基組成為繭蛹粉150-300g、紅糖8-20g、蛋白胨5-15g、黃豆汁 200-300ml、純凈水200-500ml、腺嘌呤質(zhì)量濃度0.5-1.5g/L、羅漢果粉30-80g,所述實(shí)體培養(yǎng)基組成為小米10-20g、大米10-20g、大麥10-15g、液體菌種培養(yǎng)基35-45ml。

所述馬鈴薯汁制備方法為：選取未長芽的馬鈴薯清洗干凈切塊備用，然后將馬鈴薯和水放入榨汁機(jī)內(nèi)進(jìn)行榨汁，榨汁完畢后對(duì)其進(jìn)行過濾，選取馬鈴薯汁備用，所述馬鈴薯和水的質(zhì)量比為1:1-2。

所述繭蛹汁制備方法為：選取干繭蛹進(jìn)行粉碎，粉碎后將粉放入凈水中進(jìn)行沸煮30-50min，煮沸后過濾取汁。

所述黃豆汁制備方法為：將選取好的黃豆加水煮沸30-60min，然后將其進(jìn)行過濾取得黃豆汁。

所述小米、大米、大麥為熟小米、熟大米、熟大麥。

所述蛹蟲草培養(yǎng)基的使用方法為：

1）母種制備：將蛹蟲草菌種，在無菌條件下接種于PDA加富培養(yǎng)基中，置23-28℃恒溫避光培養(yǎng)，待菌絲萌發(fā)后見光培養(yǎng)，獲得原始母種；

2)液體菌種制作：取原始母種接種于液體菌種培養(yǎng)基中，23-28℃搖床培養(yǎng)3-5d，得液體菌種；

3 )子實(shí)體培養(yǎng)：將子實(shí)體培養(yǎng)基用聚丙烯薄膜封口，于121℃-126℃蒸汽滅菌，維持 40min-60min，按2-5％接種量將液體菌種接種于滅菌后的子實(shí)體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；

4 )栽培管理：菌絲生長階段要求避光培養(yǎng)；當(dāng)菌絲完全吃透培養(yǎng)料后，溫度15-25℃，空間濕度為70％-75％下，進(jìn)行弱光培養(yǎng)；子實(shí)體形成后，經(jīng)8-12℃溫差刺激，加強(qiáng)通風(fēng)，每天通風(fēng)2次-3次，每次20-30min，溫度16-20℃，空間 濕度85％-95％下，培養(yǎng)40d-50d。

本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明的培養(yǎng)基制備方法簡單，便于制備，用本培養(yǎng)基進(jìn)行蟲草培養(yǎng)，可以很好的提高蟲草中蟲草素的含量，在低成本的條件下提高了蟲草的要用價(jià)值。本發(fā)明中包含液體菌種培養(yǎng)基，蛹蟲草生長過程中 98% 的蟲草素分泌到培養(yǎng)基中，而從培養(yǎng)液中提取蟲草素，不僅提取方便，而且生產(chǎn)周期短，采用本發(fā)明中的液體培養(yǎng)基對(duì)蛹蟲草進(jìn)行液態(tài)深層培養(yǎng)，可明顯提高蛹蟲草蟲草素的含量。本發(fā)明的液體菌種培養(yǎng)基中放置有羅漢果粉，羅漢果粉中的黃酮類物質(zhì)對(duì)革蘭氏陽性菌的生長具有較顯著的抑制作用，如白色念球菌、產(chǎn)氣桿菌、枯草芽孢桿菌、藤黃八疊球菌。羅漢果粉對(duì)木霉、鏈孢霉、毛霉和根霉也有一定的抑制作用。在培養(yǎng)基中加入羅漢果粉充分發(fā)揮其抑菌功能，減少培養(yǎng)基的雜菌污染，提高菌種的成活率。本發(fā)明的固體培養(yǎng)基中以小米、大米、大麥為主，小米營養(yǎng)豐富，顆粒小，高壓蒸煮后粘度高，阻礙菌絲生長。大米、大麥顆粒大，通透性強(qiáng)，與小米混合使用，克服了小米粘度高的缺點(diǎn)，而且大麥中脂肪酸含量較高，國外大量文獻(xiàn)報(bào)道了植物油能促進(jìn)菌絲的生長，提高蟲草素的含量。本發(fā)明內(nèi)含有人參粉，增加了本發(fā)明的藥用價(jià)值。

具體實(shí)施方式

根據(jù)實(shí)施例所示，對(duì)本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步說明：

實(shí)施例1

分別進(jìn)行PDA加富培養(yǎng)基、實(shí)體培養(yǎng)基、液體菌種培養(yǎng)基的制備，PDA加富培養(yǎng)基制備方法為：選取未長牙的馬鈴薯清洗干凈切塊備用，然后將馬鈴薯和水放入榨汁機(jī)內(nèi)進(jìn)行榨汁，榨汁完畢后對(duì)其進(jìn)行過濾，選取馬鈴薯汁備用，所述馬鈴薯和水的質(zhì)量比為1:1.5，然后將馬鈴薯汁ml、蔗糖16g、繭蛹汁150ml、奶粉60g、瓊脂12g、酸性氨基酸8g、堿性氨基酸11g、人參粉35g進(jìn)行混合制成PDA加富培養(yǎng)基制備；將繭蛹粉200g、紅糖12g、蛋白胨13g、黃豆汁 230ml、純凈水400ml、腺嘌呤質(zhì)量濃度0.9g/L、羅漢果粉40g進(jìn)行混合，制成液體菌種培養(yǎng)基；將小米15g、大米12g、大麥13g、液體菌種培養(yǎng)基40ml制成實(shí)體培養(yǎng)基。

培養(yǎng)基制備完成后備用，然后進(jìn)行母種制備，將蛹蟲草菌種，在無菌條件下接種于PDA加富培養(yǎng)基中，置23-28℃恒溫避光培養(yǎng)，待菌絲萌發(fā)后見光培養(yǎng)，獲得原始母種；然后將制備的原始母種接種于液體菌種培養(yǎng)基中，23-28℃搖床培養(yǎng)3-5d，得液體菌種；將子實(shí)體培養(yǎng)基用聚丙烯薄膜封口，于121℃-126℃蒸汽滅菌，維持 40min-60min，按2-5％接種量將液體菌種接種于滅菌后的子實(shí)體培養(yǎng)基中培養(yǎng)； 最后進(jìn)行栽培管理，菌絲生長階段要求避光培養(yǎng)；當(dāng)菌絲完全吃透培養(yǎng)料后，溫度15-25℃，空間濕度為70％-75％下，進(jìn)行弱光培養(yǎng)；子實(shí)體形成后，經(jīng)8-12℃溫差刺激，加強(qiáng)通風(fēng)，每天通風(fēng)2次-3次，每次20-30min，溫度16-20℃，空間 濕度85％-95％下，培養(yǎng)40d-50d。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)，這些改進(jìn)也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。