本發(fā)明提供一種高純度米糠多糖的制備方法，屬于食品加工技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
米糠是稻谷加工的重要副產(chǎn)品，我國年產(chǎn)量超過1000萬噸，米糠產(chǎn)量也居世界首位，是一種量大面廣的可再生資源，目前主要用于動(dòng)物飼料，產(chǎn)品附加值極低。聯(lián)合國工業(yè)發(fā)展組織把米糠成為一種未充分利用的原料，米糠資源的進(jìn)一步開發(fā)和利用，可作為食品工業(yè)提供豐富的生產(chǎn)原料。
米糠中存在著多種類型的多糖，其組分和結(jié)構(gòu)也各不相同，具有多種生物活性。不同的研究工作者給所提取的米糠多糖不同的名稱代號(hào)，如Eichi等提取的RBS，Takeo等提取的RDP、RON，Kimitoshi等提取的RBF-P、RBF-PM，Lamkooh等制備的RBG-3，Kado等制備的RBSR-01以及胡國華等制備的RBHB、RBHA等。諸多研究資料表明，米糠多糖在抗腫瘤、免疫增強(qiáng)、抗細(xì)菌感染及降血糖等方面也具有較高的生物活性。
目前從米糠提取水溶性多糖主要用水作溶劑直接提取，提取方法有：通過酶法、高壓、超聲、微波法輔助水提取的方法。用水溶劑提取方法時(shí)，在常壓下進(jìn)行提取效率低；另外，在加壓為100MPa以上的高溫高壓條件下，中性條件下，收率較低接近常溫；另外在130℃，20MPa的高溫高壓條件下，中性條件下，如果不用擠壓機(jī)等技術(shù)，不能有效的得到水溶性多糖；高溫高壓中性條件下，與酶法聯(lián)用，處理工藝復(fù)雜；超聲波和微波輔助水提米糠多糖提取率提高有限；加壓酸法提取，容易引起多糖水解導(dǎo)致低分子量化，影響多糖活性；常壓加熱高堿的提取方法，常用NaOH或KOH中和常用HCl,存在效率低、耗時(shí)長，色素雜質(zhì)多、工序繁瑣。由此可見，現(xiàn)有的米糠多糖提取方法，未對原料進(jìn)行有效的預(yù)處理除雜和多糖釋放，影響了提取效率、產(chǎn)品純度和口感品質(zhì)，存在明顯缺陷。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了一種高純度米糠多糖的制備方法。為了克服現(xiàn)有技術(shù)中米糠多糖制備存在提取效率低，純度低，口感品質(zhì)差的不足，本發(fā)明提供一種高純度米糠多糖的制備方法。
本發(fā)明所要解決的第一個(gè)技術(shù)問題為提供脫脂米糠中酸溶性雜質(zhì)的方法；
本發(fā)明要解決的第二個(gè)技術(shù)問題為提供去除脫脂米糠中大分子雜質(zhì)的方法；
本發(fā)明要解決的第三個(gè)技術(shù)問題是提供米糠多糖的釋放方法。
為解決上述第一個(gè)技術(shù)問題，本發(fā)明采用檸檬酸水溶液清洗脫脂米糠，過濾、棄濾液，除去酸溶性雜質(zhì)；
所述采用檸檬酸水溶液清洗，所用檸檬酸水溶液， PH為2-6，濃度為0.1-0.3mol/L；PH用酸堿調(diào)節(jié)，酸化酸可包括： H2SO4、HNO3等無機(jī)酸，堿為NaOH等無機(jī)堿。
所述，脫脂米糠：檸檬酸水溶液（w/w）比例為1:5-10，清洗時(shí)間為20-40min。
為解決第二個(gè)技術(shù)問題，本發(fā)明采用靈芝酵素酶解，去除大分子雜質(zhì)；
所述靈芝酵素為靈芝混合菌體低溫勻漿獲得產(chǎn)物，靈芝混合菌體為成熟期靈芝和菌蕾期靈芝混合菌體，重量比為1-3:1；勻漿溫度為0-5℃；
所述靈芝酵素碾磨混合酶解條件為：酶解混合方式為機(jī)械碾磨，酶解溫度為50-60℃，時(shí)間為30-120min，以1kg脫脂米糠計(jì)，粗酶液中淀粉酶用量為100-300U。
為解決第三個(gè)技術(shù)問題，本發(fā)明提供了機(jī)械碾磨、靈芝菌素酶解二種釋放方式，二者發(fā)生協(xié)同作用，共同起到促進(jìn)米糠多糖釋放的作用。
本發(fā)明通過前處理，利用檸檬酸溶液清洗、靈芝酵素酶解，去除雜質(zhì)更徹底，通過機(jī)械碾磨協(xié)同靈芝酵素酶解，釋放活性多糖，增加了提取率，解決了米糠多糖提取率低、純度不高和口感差的現(xiàn)狀。本發(fā)明制備的米糠多糖，提取率高、雜質(zhì)少，純度、口感均優(yōu)于傳統(tǒng)提取方法。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說明。
以通過預(yù)處理，去除雜質(zhì)，活化多糖的脫脂米糠粕為原料，采用的加壓活化多糖，壓力為100kPa，溫度為120℃，時(shí)間為30min；常壓熱水提取，脫脂米糠：水比例（w/w）為1:10；提取溫度為90℃，提取次數(shù)為2次，每次1h，膜過濾純化、濃縮，真空微波干燥，粉碎，形成高純度的米糠多糖粉。
所述的預(yù)處理方法，其特征在于采用以下步驟：脫脂米糠與檸檬酸水溶液（酸堿調(diào)節(jié)PH為2-6,濃度為0.1-0.3mol/L）以1:5-10的質(zhì)量比，清洗（20-40min），過濾、棄濾液，除去酸溶性雜質(zhì)；種植成熟期和菌蕾期靈芝菌體(重量比1-3：1)混合，0-5℃低溫勻漿，獲得靈芝酵素；將靈芝酵素加入除雜后的脫脂米糠粕，碾磨混合酶解反應(yīng)，釋放活性多糖，酶解溫度為50-60℃，時(shí)間為30-120min，以1kg脫脂米糠計(jì)，粗酶液中淀粉酶用量為100-300U。
實(shí)施例1
（1）脫脂米糠與檸檬酸水溶液（H2SO4調(diào)節(jié)PH為2,濃度為0.3mol/L）以1: 10的質(zhì)量比，清洗（20min），過濾、棄濾液，除去酸溶性雜質(zhì)；
（2）種植成熟期和菌蕾期靈芝菌體(重量比例為3：1)混合，0℃低溫勻漿，獲得靈芝酵素；
（3）將靈芝酵素加入除雜后的脫脂米糠粕，碾磨混合酶解反應(yīng)，釋放活性多糖，酶解溫度為60℃，時(shí)間為80min，以1kg脫脂米糠計(jì)，粗酶液中淀粉酶用量為200U；
（4）混合溶液加入加壓提取罐中，活化多糖，壓力為100kPa，溫度為120℃，時(shí)間為30min；
（5）脫脂米糠混合溶液加到常壓提取罐中，調(diào)節(jié)脫脂米糠：水比例（w/w）為1:10，提取溫度為90℃，提取次數(shù)為2次，每次1h，將煎煮后的物料離心去渣、上清液過濾，得到米糠多糖提取液；
（6）米糠多糖提取液，陶瓷膜設(shè)備膜分離濃縮后，濾液導(dǎo)入存儲(chǔ)罐；
（7）真空微波干燥，粉碎，制得米糠多糖粉；
（8）提取率為4.6%，純度為82%,口感微甜。
實(shí)施例2
（1）脫脂米糠與檸檬酸水溶液（HNO3調(diào)節(jié)PH為3,濃度為0.2mol/L）以1:8的質(zhì)量比，清洗（30min），過濾、棄濾液，除去酸溶性雜質(zhì)；
（2）種植成熟期和菌蕾期靈芝菌體(重量比例為1：1)混合，3℃低溫勻漿，獲得靈芝酵素；
（3）將靈芝酵素加入除雜后的脫脂米糠粕，碾磨混合酶解反應(yīng)，釋放活性多糖，酶解溫度為55℃，時(shí)間為120min，以1kg脫脂米糠計(jì)，粗酶液中淀粉酶用量為100U；
（4）混合溶液加入加壓提取罐中，活化多糖，壓力為100kPa，溫度為120℃，時(shí)間為30min；
（5）脫脂米糠混合溶液加到常壓提取罐中，調(diào)節(jié)脫脂米糠：水比例（w/w）為1:10，提取溫度為90℃，提取次數(shù)為2次，每次1h，將煎煮后的物料離心去渣、上清液過濾，得到米糠多糖提取液；
（6）米糠多糖提取液，陶瓷膜設(shè)備膜分離濃縮后，濾液導(dǎo)入存儲(chǔ)罐；
（7）真空微波干燥，粉碎，制得米糠多糖粉；
（8）提取率為4.1%，純度為72%,口感微甜。
實(shí)施例3
（1）脫脂米糠與檸檬酸水溶液（NaOH調(diào)節(jié)PH為6,濃度為0.1mol/L）以1:5的質(zhì)量比，清洗（40min），過濾、棄濾液，除去酸溶性雜質(zhì)；
（2）種植成熟期和菌蕾期靈芝菌體(重量比例為2：1)混合，5℃低溫勻漿，獲得靈芝酵素；
（3）將靈芝酵素加入除雜后的脫脂米糠粕，碾磨混合酶解反應(yīng)，釋放活性多糖，酶解溫度為55℃，時(shí)間為30min，以1kg脫脂米糠計(jì)，粗酶液中淀粉酶用量為300U；
（4）混合溶液加入加壓提取罐中，活化多糖，壓力為100kPa，溫度為120℃，時(shí)間為30min；
（5）脫脂米糠混合溶液加到常壓提取罐中，調(diào)節(jié)脫脂米糠：水比例（w/w）為1:10，提取溫度為90℃，提取次數(shù)為2次，每次1h，將煎煮后的物料離心去渣、上清液過濾，得到米糠多糖提取液；
（6）米糠多糖提取液，陶瓷膜設(shè)備膜分離濃縮后，濾液導(dǎo)入存儲(chǔ)罐；
（7）真空微波干燥，粉碎，制得米糠多糖粉；
（8）提取率為3.6%，純度為66%,口感微咸。