本發(fā)明屬于藥物化學(xué)領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一種如下通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物，其制備方法，藥物組合物及其作為抗丙型肝炎藥物的用途。
背景技術(shù)：
：：丙型肝炎是丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus，以下簡稱HCV)引起的一種嚴(yán)重威脅人類健康的肝臟疾病。1978年，丙肝病毒被首次發(fā)現(xiàn)；1989年，完成基因序列測定，HCV被確認(rèn)為非甲型、非乙型肝炎的又一種主要病原體。根據(jù)HCV基因組異質(zhì)性特性，目前可以分為6種類型，30個亞型。感染的類型有較強(qiáng)的地域性，我國以1型為主。2011年的研究表明，中國HCV感染者中，1型占58.2％，其中基因1a型為1.4％，基因1b型為56.8％。目前，全球范圍內(nèi)HCV感染者超過2億，占世界總?cè)丝诘?.3％。美國約有320萬感染者，中國HCV患者超過了4000萬人次，居世界之首，很多HCV感染者同時是乙肝甚至艾滋病患者，這增加了治療的復(fù)雜性。目前還沒有正式獲得批準(zhǔn)的丙肝疫苗，所以防止丙肝傳播仍面臨挑戰(zhàn)。已有的慢性感染者病情正在發(fā)展中，預(yù)計未來10-20年將會迎來發(fā)病高峰。臨床上治療丙肝的標(biāo)準(zhǔn)方案是聚乙二醇干擾素α聯(lián)合利巴韋林，治愈標(biāo)準(zhǔn)是在治療后24周內(nèi)血液檢測不到HCV的RNA。這種治療方式副作用較大，包括抑郁、疲乏、流感樣癥狀和貧血癥等；治療成本較高，標(biāo)準(zhǔn)療程需要48周，費(fèi)用約40,000美元。為解決上述問題，近年來針對丙肝病毒RNA基因序列的抗丙肝病毒的小分子化合物藥物研發(fā)迅速成為熱點(diǎn)，抗病毒藥物將從干擾素時代進(jìn)入小分子藥物時代。目前，已有許多HCV蛋白酶抑制劑得到廣泛研究，其中Telaprevir(替拉瑞韋，VX-950，商品名Incivek)和Boceprevir(波西普韋，SCH-503034，商品名Victrelis)已于2011年被批準(zhǔn)上市。非結(jié)構(gòu)蛋白NS5A的抑制劑也是一種作用于丙肝病毒RNA鏈的特異性抗病毒藥物，多種基因型HCV病毒均具有顯著的抑制作用。此外，以NS5B聚合酶為靶點(diǎn)的藥物分為核苷類和非核苷聚合酶抑制劑兩類。其中的Sofosbuvir是迄今為止最為高效的抗HCV藥物，可有效對抗HCV基因型1、2、3、4和6感染。根據(jù)文獻(xiàn)報道，其在體內(nèi)的代謝途徑如下圖所示，其中GS331007是最終代謝產(chǎn)物，是研究Sofosbuvir在體內(nèi)代謝行為的標(biāo)志物。另外，肝臟作為人體最大的代謝活動中心，對人體尤其重要，保肝護(hù)肝藥主要是指促進(jìn)肝細(xì)胞再生，減少肝細(xì)胞損害的藥物，長期臨床證明，肝病的治療中保肝護(hù)肝作用顯得尤為重要。因此保肝護(hù)肝藥物在臨床上應(yīng)用越來越受到重視和認(rèn)可，用藥市場規(guī)模保持著穩(wěn)定增長，在所有肝病用藥中僅次于抗病毒及免疫調(diào)節(jié)劑。在臨床上，抗慢性肝炎病毒治療一般會采用具有保肝、降酶、緩解炎癥、調(diào)節(jié)免疫等功能的保肝護(hù)肝藥物與抗肝炎病毒藥物聯(lián)用，以起到治療清除病毒、調(diào)節(jié)免疫、恢復(fù)肝功能改善肝臟病理的作用，即達(dá)到“標(biāo)本兼職”的治療目的。然而，讓病患同時服用抗病毒藥物和保肝護(hù)肝藥物，不僅患者順應(yīng)性差，同時也增加了患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此，能夠研究一種既具有抗丙肝病毒活性，且具有保肝護(hù)肝活性的雙功能藥物具有重要的意義和應(yīng)用價值。本發(fā)明的目的在于提供一種新的抗HCV病毒和保肝、護(hù)肝雙功能藥物，使其發(fā)揮雙功能藥物的作用，具有口服生物利用度高，代謝性質(zhì)好的優(yōu)點(diǎn)，可以用于治療病毒性肝炎等癥。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個目的是提供一種通式I所示的前藥或其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物。本發(fā)明的另一個目的是提供本發(fā)明提供的化合物的制備方法。本發(fā)明的又一個目的是提供通式I所示的前藥或其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物作為NS5B抑制劑，保護(hù)肝細(xì)胞、肝臟組織，改善肝功能的用途，以及在制備治療病毒性肝炎中的應(yīng)用。本發(fā)明的再一個目的是提供包含通式I所示的前藥或其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物中的一種或多種的藥物組合物。本發(fā)明的再一個目的是提供一種治療病毒性肝炎，同時保護(hù)肝細(xì)胞、肝臟組織，改善肝功能的方法。本發(fā)明采用如下所述的技術(shù)方案：根據(jù)本發(fā)明的一個方面，通式I所示的的前藥或其立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；R為Linker為或不存在，A為已經(jīng)上市的用于治療或輔助治療肝病的藥物或其衍生物；R1為H或C1-C5烷基；n為1-19的整數(shù)。在所述通式I-A中，通式I-A化合物優(yōu)選為通式II-A所示含有類核苷結(jié)構(gòu)的前藥或其立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；Linker為或不存在；R1為H或C1-C5烷基；n為1、2、3、4或5；R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基。在所述通式II-A中，通式II-A化合物優(yōu)選為通式II-Aa或者式II-Ab所示的結(jié)構(gòu)或其互變異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；Linker為或不存在；R1為H或C1-C5烷基；n為1、2、3、4或5；R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基。在所述通式I中，通式I化合物優(yōu)選為通式II-B所示的結(jié)構(gòu)或其互變異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體、立體異構(gòu)體、立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；Linker為或不存在；R1為H或C1-C5烷基；n為1、2、3、4或5；R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基。在所述通式II-A中，通式II-A化合物優(yōu)選為通式II-Ba或式II-Bb所示的結(jié)構(gòu)或其光學(xué)異構(gòu)體、藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；Linker為或不存在；R1為H或C1-C5烷基；n為1、2、3、4或5；R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基。在所述通式II-A中，通式II-A化合物優(yōu)選為通式II-A-A所示含有硫普羅寧結(jié)構(gòu)的前藥或其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)，Linker為其中，R1為H或C1-C5烷基，n為1-19的整數(shù)。在所述通式II-A-A中，通式II-A-A化合物優(yōu)選為以下含有硫普羅寧結(jié)構(gòu)的前藥或其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；R1為H或C1-C5烷基，n為1、2、3、4或5。在所述通式II-A-A中，通式II-A-A化合物優(yōu)選為以下含有硫普羅寧結(jié)構(gòu)的前藥或其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物：其中，R1為H或C1-C5烷基，n為1、2、3、4或5。在所述通式I所示的化合物中，特別優(yōu)選的具體化合物為下列化合物之一：或上述優(yōu)選化合物的立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物。通式Ⅰ所示的化合物可含有一個或多個手性中心，因可存在立體異構(gòu)體，即對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或其混合物。因此，本發(fā)明式Ⅰ所示的化合物可以為單個異構(gòu)體或各異構(gòu)體的混合物。本發(fā)明包括通式Ⅰ所示的化合物的任何前藥形式。本發(fā)明還包括通式Ⅰ的化合物的可藥用溶劑化物。本發(fā)明也包括通式Ⅰ所示的化合物的可藥用氧化物，及其可藥用鹽和可藥用溶劑化物。本發(fā)明還包括通式Ⅰ所示的化合物的多種晶型。本發(fā)明的另一個目的是提供通式II-A化合物的制備方法，所述方法包括：1)式III化合物與式IV-A化合物反應(yīng)得到式V-A化合物，2)式V-A化合物經(jīng)過脫保護(hù)反應(yīng)得到式II-A化合物；其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；Linker為或不存在；n為1、2、3、4或5；R1為H或C1-C5烷基；R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基；LG為離去基團(tuán)，優(yōu)選為鹵素；Z為巰基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-雙甲氧基三苯甲基。本發(fā)明的另一個目的是提供通式II-B化合物的制備方法，所述方法包括：1)式III化合物與式IV-B化合物反應(yīng)得到式V-B化合物；2)式V-B化合物經(jīng)脫保護(hù)反應(yīng)得到式II-B化合物；其中，X羥基或鹵素(F、Cl、Br)；Linker為或不存在；n為1、2、3、4或5；R1為H或C1-C5烷基；R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基；LG為離去基團(tuán)，優(yōu)選為鹵素；Z為巰基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-雙甲氧基三苯甲基。更進(jìn)一步地，一種通式II-A-Aa所示的化合物的制備方法，可以由通式III化合物與通式IV化合物經(jīng)過烴化反應(yīng)得到通式V-A化合物，然后經(jīng)過脫保護(hù)反應(yīng)得到。其中，X為F、Cl或Br；R1為H或C1-C5烷基；Y為離去基團(tuán)，Z為巰基保護(hù)基團(tuán)。一種式II-A-Ab所示的化合物的制備方法，可以由通式III化合物與通式IV-B化合物經(jīng)過烴化反應(yīng)得到通式V-B化合物，然后經(jīng)過脫保護(hù)反應(yīng)得到：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；R1為H或C1-C5烷基；n為1-19的整數(shù)；Y為離去基團(tuán)；Z為巰基保護(hù)基團(tuán)。本發(fā)明的另一個目的是提供通式II-A-B的制備方法，可以由III化合物經(jīng)過保護(hù)反應(yīng)，然后與醛反應(yīng)得到通式VII化合物，然后與通式VIII-A化合物發(fā)生酯化或?；磻?yīng)得到通式IX-A-B化合物，然后脫去保護(hù)基得到通式II-A-B化合物。本制備方法的關(guān)鍵中間體的反應(yīng)活潑位點(diǎn)被適當(dāng)保護(hù)，有助于減少副反應(yīng)的發(fā)生，反應(yīng)選擇性高，得到的中間體、最終產(chǎn)物純度高，易于純化。且本方法涉及的反應(yīng)具有操作簡單、純化方便，以及工藝可控性好的優(yōu)點(diǎn)，適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；R1為H或C1-C5烷基；R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基；P1為羥基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三甲基硅基、三乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、三苯基硅基；P2為酰胺NH保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為叔丁氧羰基、芐氧羰基、4-甲氧基芐氧羰基；P3為巰基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-雙甲氧基三苯甲基。本發(fā)明的另一個目的是提供通式II-B-B所示的，可以由通式VII化合物，然后與通式VIII-B化合物發(fā)生酯化或?；磻?yīng)得到通式IX-B-B化合物，然后脫去保護(hù)基團(tuán)得到通式II-B-B化合物。本制備方法的關(guān)鍵中間體的反應(yīng)活潑位點(diǎn)被適當(dāng)保護(hù)，有助于減少副反應(yīng)的發(fā)生，反應(yīng)選擇性高，得到的中間體、最終產(chǎn)物純度高，易于純化。且本方法涉及的反應(yīng)具有操作簡單、純化方便，以及工藝可控性好的優(yōu)點(diǎn)，適合產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。其中，X，R1，R3，R4的定義同其在通式II-B中的定義，P1為羥基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三甲基硅基、三乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、三苯基硅基；P2為酰胺NH保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為叔丁氧羰基、芐氧羰基、4-甲氧基芐氧羰基；P3為巰基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-雙甲氧基三苯甲基。本發(fā)明的另一目的是提供如下VII所示的中間體及其用于制備抗丙肝病毒藥物的用途：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；R1為H或C1-C5烷基；P1為羥基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三甲基硅基、三乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、三苯基硅基。本發(fā)明的另一目的是提供如下VIII-A所示中間體或其立體異構(gòu)體或其立體異構(gòu)體混合物：其中，其中，P2為NH保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為叔丁氧羰基、芐氧羰基、4-甲氧基芐氧羰基；P3為巰基基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-雙甲氧基三苯甲基等。本發(fā)明的另一目的是提供如下IX-A-B所示的前藥或其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；R1為H或C1-C5烷基；P1為羥基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三甲基硅基、三乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、三苯基硅基；P2為NH保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為叔丁氧羰基、芐氧羰基、4-甲氧基芐氧羰基等；P3為巰基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-雙甲氧基三苯甲基等。本發(fā)明的另一目的是提供如下VIII-B所示中間體或其立體異構(gòu)體或其立體異構(gòu)體混合物：其中，R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基；P2為酰胺NH保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為叔丁氧羰基、芐氧羰基、4-甲氧基芐氧羰基；P3為巰基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-雙甲氧基三苯甲基。本發(fā)明的另一目的是提供如下IX-B-B所示的前藥或其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物：其中，X為羥基或鹵素(F、Cl、Br)；R1為H或C1-C5烷基；R3、R4各自獨(dú)立地為氫原子或C1-C5烷基；P1為羥基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三甲基硅基、三乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、三苯基硅基；P2為酰胺NH保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為叔丁氧羰基、芐氧羰基、4-甲氧基芐氧羰基；P3為巰基保護(hù)基團(tuán)，優(yōu)選為三苯甲基、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-雙甲氧基三苯甲基。根據(jù)本發(fā)明的又一方面，本發(fā)明提供了通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物的用途，其作為NS5B抑制劑同時保護(hù)保護(hù)肝細(xì)胞、肝臟組織，改善肝功能的用途，和在制備用于治療病毒性肝炎等疾病的藥物中的用途。根據(jù)本發(fā)明的再一方面，本發(fā)明還提供了一種包含治療有效量的通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物中的一種或多種的藥物組合物，其可以作為NS5B抑制劑，以及該組合物可以任選包含藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。根據(jù)本發(fā)明的另一方面，本發(fā)明還提供了一種NS5B抑制劑，其含治療有效量的通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物中的一種或多種，以及該抑制劑可以任選包含藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。該組合物由治療有效量的一種或多種通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其藥溶劑合物與至少一種可藥用輔料組成。藥用輔料的選擇因施用途徑和作用特點(diǎn)而異，通常是填充劑、稀釋劑、粘合劑、潤濕劑、崩解劑、潤滑劑、乳化劑、助懸劑等。式I化合物、其立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物在上述組合物中的所占的比例為總重量的0.1％～99.9％，優(yōu)選1％～99％。所述藥學(xué)上可接受的載體是指藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的藥物載體，例如：稀釋劑，如水等；填充劑，如淀粉、蔗糖等；粘合劑，如纖維素衍生物、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮；濕潤劑，如甘油；崩解劑，如瓊脂、碳酸鈣和碳酸氫鈉；吸收促進(jìn)劑，如季銨化合物；表面活性劑，如十六烷醇；吸附載體，如高嶺土和皂粘土；潤滑劑，如滑石粉、硬脂酸鈣和硬脂酸鎂、和聚乙二醇等。另外，還可以在所述藥物組合物中加入其它輔劑，如香味劑和甜味劑等。本發(fā)明還提供了通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物的可藥用的組合物的制備方法。通常將通式I所示的含有硫普羅寧結(jié)構(gòu)的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物與可藥用輔料相混合，經(jīng)常規(guī)的制備方法制成適于一定途徑施用的形式(劑型)。劑型包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、溶液劑、混懸劑、乳劑、軟膏、膜劑、霜劑、氣霧劑、注射劑、栓劑等。優(yōu)選片劑和膠囊劑。本發(fā)明化合物的使用劑量一般為每天1～1000mg，分單次或多次使用。但在必要時，可適當(dāng)偏離上述劑量。專業(yè)人員可根據(jù)具體情況和專業(yè)知識，確定最佳劑量。這些情況包括疾病的嚴(yán)重程度、患者的個體差異、制劑的特性和給藥途徑等。此外，本發(fā)明還提供了通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物，或其可藥用的組合物作為人用藥物的用途。根據(jù)本發(fā)明的又一方面，本發(fā)明還提供了治療病毒性肝炎等癥的方法，所述方法包括施用治療有效量的通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物中的一種或多種或者本發(fā)明的所述藥物組合物給患者。本發(fā)明提供的化合物或組合物可以口服、注射(靜脈、肌肉、皮下和冠狀動脈內(nèi))、舌下、經(jīng)頰、經(jīng)直腸、經(jīng)尿道、經(jīng)陰道、經(jīng)鼻、吸入或局部途徑施用。優(yōu)選的途徑是口服。用于口服時，可以將其制成常規(guī)的固體制劑，如片劑、粉劑、粒劑、膠囊等，或制成液體制劑，如水或油懸浮劑，或其它液體制劑，如糖漿等；用于腸外給藥時，可將其制成注射用的溶液、水或油性懸浮劑等。本發(fā)明還提供了通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其藥學(xué)上可接受的溶劑合物，在制備NS5B抑制劑的人用藥物中的用途。本發(fā)明還提供了通式I所示的化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體，立體異構(gòu)體混合物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物進(jìn)一步與其他治療肝病的藥物聯(lián)用。至少一種選自下列的治療：干擾素、干擾素β、干擾素γ和干擾素ω；白介素，包括白介素10和白介素12；利巴韋林；干擾素α或聚乙二醇化干擾素α與利巴韋林或者左旋韋林聯(lián)合使用；左旋韋林；蛋白酶抑制劑，包括NS3抑制劑，NS3/4A抑制劑；NS5A抑制劑；解旋酶抑制劑；聚合酶抑制劑，包括HCVRNA聚合酶和NS5B聚合酶抑制劑；膠霉毒素；IRES抑制劑；反義寡核苷酸；噻唑烷衍生物；N-苯甲酰苯胺，核酶；另一種核苷，核苷前藥或核苷衍生物；1-氨基-烷基環(huán)己烷；抗氧化劑，包括維生素E；角鯊烯；金剛胺；膽汁酸；N-(膦?；阴；?-L-天冬氨酸；苯二羧酰胺；聚腺苷酸；苯并咪唑；胸腺素；預(yù)防疫苗；免疫調(diào)節(jié)劑，一種IMPDH抑制劑；水飛薊素；水飛薊素-磷脂酰膽堿內(nèi)涵體；和麥考酚酸酯。“藥學(xué)上可接受的”是指這樣一些化合物、原料、組合物和/或劑型，它們在合理醫(yī)學(xué)判斷的范圍內(nèi)，適用于與患者組織接觸而無過度毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)或與合理的利益/風(fēng)險比相對稱的其他問題和并發(fā)癥，并有效用于既定用途。術(shù)語“鹵素”和“鹵代”在本發(fā)明中可互換使用，是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)。本發(fā)明使用的術(shù)語“烷基”或“烷基基團(tuán)”，表示含有1-20個碳原子，飽和的直鏈或支鏈一價烴基基團(tuán)，其中，所述烷基基團(tuán)可以任選地被一個或多個本發(fā)明描述的取代基所取代。在一實(shí)施方案中，烷基基團(tuán)含有1-6個碳原子；在另一實(shí)施方案中，烷基基團(tuán)含有1-4個碳原子；還在一實(shí)施方案中，烷基基團(tuán)含有1-3個碳原子。烷基基團(tuán)的實(shí)例包含，但并不限于，甲基(Me、-CH3)，乙基(Et、-CH2CH3)，正丙基(n-Pr、-CH2CH2CH3)，異丙基(i-Pr、-CH(CH3)2)，正丁基(n-Bu、-CH2CH2CH2CH3)，異丁基(i-Bu、-CH2CH(CH3)2)，仲丁基(s-Bu、-CH(CH3)CH2CH3)，叔丁基(t-Bu、-C(CH3)3)，等等。本發(fā)明所使用的“藥學(xué)上可接受的鹽”是指本發(fā)明的化合物的有機(jī)鹽和無機(jī)鹽。藥學(xué)上可接受的鹽在所屬領(lǐng)域是為我們所熟知的，如文獻(xiàn)：S.M.Bergeetal.,describepharmaceuticallyacceptablesaltsindetailinJ.PharmaceuticalSciences,1977,66:1-19.所記載的。藥學(xué)上可接受的無毒的酸形成的鹽包括，但并不限于，與氨基基團(tuán)反應(yīng)形成的無機(jī)酸鹽有鹽酸鹽，氫溴酸鹽，磷酸鹽，硫酸鹽，高氯酸鹽，和有機(jī)酸鹽如乙酸鹽，草酸鹽，馬來酸鹽，酒石酸鹽，檸檬酸鹽，琥珀酸鹽，丙二酸鹽，或通過書籍文獻(xiàn)上所記載的其他方法如離子交換法來得到這些鹽。其他藥學(xué)上可接受的鹽包括己二酸鹽，藻酸鹽，抗壞血酸鹽，天冬氨酸鹽，苯磺酸鹽，苯甲酸鹽，重硫酸鹽，硼酸鹽，丁酸鹽，樟腦酸鹽，樟腦磺酸鹽，環(huán)戊基丙酸鹽，二葡萄糖酸鹽，十二烷基硫酸鹽，乙磺酸鹽，甲酸鹽，反丁烯二酸鹽，葡庚糖酸鹽，甘油磷酸鹽，葡萄糖酸鹽，半硫酸鹽，庚酸鹽，己酸鹽，氫碘酸鹽，2-羥基-乙磺酸鹽，乳糖醛酸鹽，乳酸鹽，月桂酸鹽，月桂基硫酸鹽，蘋果酸鹽，甲磺酸鹽，2-萘磺酸鹽，煙酸鹽，硝酸鹽，油酸鹽，棕櫚酸鹽，撲酸鹽，果膠酸鹽，過硫酸鹽，3-苯基丙酸鹽，苦味酸鹽，特戊酸鹽，丙酸鹽，硬脂酸鹽，硫氰酸鹽，對甲苯磺酸鹽，十一酸鹽，戊酸鹽，等等。通過適當(dāng)?shù)膲A得到的鹽包括堿金屬，堿土金屬，銨和N+(C1-4烷基)4的鹽。本發(fā)明也擬構(gòu)思了任何所包含N的基團(tuán)的化合物所形成的季銨鹽。水溶性或油溶性或分散產(chǎn)物可以通過季銨化作用得到。堿金屬或堿土金屬鹽包括鈉，鋰，鉀，鈣，鎂，等等。藥學(xué)上可接受的鹽進(jìn)一步包括適當(dāng)?shù)?、無毒的銨，季銨鹽和抗平衡離子形成的胺陽離子，如鹵化物，氫氧化物，羧化物，硫酸化物，磷酸化物，硝酸化物，C1-C8磺酸化物和芳香磺酸化物。本發(fā)明的“溶劑化物”是指一個或多個溶劑分子與本發(fā)明的化合物所形成的締合物。形成溶劑化物的溶劑包括，但并不限于，水，異丙醇，乙醇，甲醇，二甲亞砜，乙酸乙酯，乙酸、乙醇胺或其混合物。術(shù)語“水合物”是指溶劑分子是水所形成的締合物。當(dāng)所述溶劑為水時，可以使用術(shù)語“水合物”。在一實(shí)施方案中，一個本發(fā)明化合物分子可以與一個水分子相結(jié)合，比如一水合物；在另一實(shí)施方案中，一個本發(fā)明化合物分子可以與多于一個的水分子相結(jié)合，比如二水合物，在又一實(shí)施方案中，一個本發(fā)明化合物分子可以與少于一個的水分子相結(jié)合，比如半水合物。應(yīng)注意，本發(fā)明所述的水合物保留有非水合形式的所述化合物的生物有效性。除非另作說明，本發(fā)明的化合物所有合適的同位素變化、立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、溶劑化物、代謝產(chǎn)物、鹽和藥學(xué)上可接受的前藥都包含在本發(fā)明范圍內(nèi)。在本發(fā)明公開的結(jié)構(gòu)中，當(dāng)任意特定的手性原子的立體化學(xué)未指明時，則該結(jié)構(gòu)的所有立體異構(gòu)體都考慮在本發(fā)明之內(nèi)，并且作為本發(fā)明公開化合物包括在本發(fā)明中。當(dāng)立體化學(xué)被表示特定構(gòu)型的實(shí)楔形線(solidwedge)或虛線指明時，則該結(jié)構(gòu)的立體異構(gòu)體就此明確和定義。式(I)所示化合物可以以鹽的形式存在。在一實(shí)施方案中，所述鹽是指藥學(xué)上可接受的鹽。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的”是指物質(zhì)或組合物必須與包含制劑的其它成分和/或用其治療的哺乳動物化學(xué)上和/或毒理學(xué)上相容。在另一實(shí)施方案中，所述鹽不一定是藥學(xué)上可接受的鹽，可以是用于制備和/或提純式(I)所示化合物和/或用于分離本式(I)所示化合物的對映體的中間體。本發(fā)明的可藥用鹽可以用常規(guī)化學(xué)方法由母體化合物、堿性或酸性部分來合成。一般而言，該類鹽可以通過使這些化合物的游離酸形式與化學(xué)計量量的適宜堿(如Na、Ca、Mg或K的氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽等)反應(yīng)，或者通過使這些化合物的游離堿形式與化學(xué)計量量的適宜酸反應(yīng)來進(jìn)行制備。該類反應(yīng)通常在水或有機(jī)溶劑或二者的混合物中進(jìn)行。一般地，在適當(dāng)?shù)那闆r中，需要使用非水性介質(zhì)如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。在例如“Remington′sPharmaceuticalSciences”，第20版，MackPublishingCompany,Easton,Pa.,(1985)；和“藥用鹽手冊：性質(zhì)、選擇和應(yīng)用(HandbookofPharmaceuticalSalts:Properties,Selection,andUse)”,StahlandWermuth(Wiley-VCH，Weinheim，Germany，2002)中可找到另外一些適宜鹽的列表。本發(fā)明給出的任何結(jié)構(gòu)式也意欲表示這些化合物未被同位素富集的形式以及同位素富集的形式。同位素富集的化合物具有本發(fā)明給出的通式描繪的結(jié)構(gòu)，除了一個或多個原子被具有所選擇原子量或質(zhì)量數(shù)的原子替換?？梢氡景l(fā)明化合物中的示例性同位素包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯的同位素，如2H、3H、11C、13C、14C、15N、17O、18O、18F、31P、32P、35S、36Cl和125I。另一方面，本發(fā)明涉及制備式(I)所示化合物的中間體。另一方面，本發(fā)明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含本發(fā)明化合物。在一實(shí)施方案中，本發(fā)明所述藥物組合物，更進(jìn)一步包括藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、佐劑、溶媒或它們的組合。在另一實(shí)施方案中，藥物組合物可以是液體、固體、半固體、凝膠或噴霧劑型。本發(fā)明的該類化合物或其藥物組合物可用于丙型肝炎的治療，具有口服生物利用度高、代謝性質(zhì)好的優(yōu)點(diǎn)，同時具有保護(hù)肝組織、肝細(xì)胞、改善肝功能的作用。具體實(shí)施方式為描述本發(fā)明，以下列出了實(shí)施例。但需要理解，本發(fā)明不限于這些實(shí)施例，只是提供實(shí)踐本發(fā)明的方法。一般地，本發(fā)明的化合物可以通過本發(fā)明所描述的方法制備得到，除非有進(jìn)一步的說明，其中取代基的定義如式(I)所示。下面的反應(yīng)方案和實(shí)施例用于進(jìn)一步舉例說明本發(fā)明的內(nèi)容。所屬領(lǐng)域的專業(yè)人員將認(rèn)識到：本發(fā)明所描述的化學(xué)反應(yīng)可以用來合適地制備許多本發(fā)明的其他化合物，且用于制備本發(fā)明的化合物的其它方法都被認(rèn)為是在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。例如，根據(jù)本發(fā)明那些非例證的化合物的合成可以成功地被所屬領(lǐng)域的技術(shù)人員通過修飾方法完成，如適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)干擾基團(tuán)，通過利用其他已知的試劑除了本發(fā)明所描述的，或?qū)⒎磻?yīng)條件做一些常規(guī)的修改。另外，本發(fā)明所公開的反應(yīng)或已知的反應(yīng)條件也公認(rèn)地適用于本發(fā)明其他化合物的制備。下面所描述的實(shí)施例，除非其他方面表明所有的溫度定為攝氏度。試劑購買于商品供應(yīng)商如AldrichChemicalCompany,ArcoChemicalCompanyandAlfaChemicalCompany，使用時都沒有經(jīng)過進(jìn)一步純化，除非其他方面表明。一般的試劑從汕頭西隴化工廠，廣東光華化學(xué)試劑廠，廣州化學(xué)試劑廠，天津好寓宇化學(xué)品有限公司，天津市福晨化學(xué)試劑廠，武漢鑫華遠(yuǎn)科技發(fā)展有限公司，青島騰龍化學(xué)試劑有限公司，和青島海洋化工廠購買得到。無水四氫呋喃，二氧六環(huán)，甲苯，乙醚是經(jīng)過金屬鈉回流干燥得到。無水二氯甲烷和氯仿是經(jīng)過氫化鈣回流干燥得到。乙酸乙酯，石油醚，正己烷，N,N-二甲基乙酰胺和N,N-二甲基甲酰胺是經(jīng)無水硫酸鈉事先干燥使用。以下反應(yīng)一般是在氮?dú)饣驓鍤庹龎合禄蛟跓o水溶劑上套一干燥管(除非其他方面表明)，反應(yīng)瓶都塞上合適的橡皮塞，底物通過注射器打入。玻璃器皿都是干燥過的。色譜柱是使用硅膠柱。硅膠(300-400目)購于青島海洋化工廠。1HNMR譜使用Bruker400MHz或600MHz核磁共振譜儀記錄。1HNMR譜以CDC13、DMSO-d6、CD3OD或丙酮-d6為溶劑(以ppm為單位)，用TMS(0ppm)或氯仿(7.26ppm)作為參照標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)出現(xiàn)多重峰的時候，將使用下面的縮寫：s(singlet，單峰)、d(doublet，雙峰)、t(triplet，三重峰)、m(multiplet，多重峰)、br(broadened，寬峰)、dd(doubletofdoublets，雙二重峰)、dt(doubletoftriplets，雙三重峰)。偶合常數(shù)，用赫茲(Hz)表示。低分辨率質(zhì)譜(MS)數(shù)據(jù)的測定條件是：Agilent6120四級桿HPLC-M(柱子型號：ZorbaxSB-C18,2.1x30mm,3.5微米,6min,流速為0.6mL/min。流動相：5％-95％(含0.1％甲酸的CH3CN)在(含0.1％甲酸的H2O)中的比例，采用電噴霧電離(ESI)，在210nm/254nm下，用UV檢測。純的化合物使用Agilent1260pre-HPLC或Caleseppump250pre-HPLC(柱子型號：NOVASEP50/80mmDAC)，在210nm/254nm用UV檢測。下面簡寫詞的使用貫穿本發(fā)明：CH2Cl2、DCM二氯甲烷CDC13氘代氯仿DMFN,N-二甲基甲酰胺DIPEAN,N-二異丙基乙胺DMSO二甲基亞砜MeOH甲醇MeCN、CH3CN乙腈HCl氯化氫KI碘化鉀t-BuOK叔丁醇鉀NaHCO3碳酸氫鈉Na2S2O3硫代硫酸鈉Na2SO4硫酸鈉Pd/C10％鈀碳g克h小時mL、ml毫升PE石油醚(60-90℃)RT、rt、r.t.室溫Rt保留時間TFA三氟乙酸實(shí)施例1：化合物II-A-1的合成方法A：步驟一：將529mg(1.0mmol)III-1溶于10mL無水丙酮中，室溫下加入680mg(1.5mmol)IV-A-1及碳酸鉀414mg(3.0mmol)，加熱攪拌回流6h，TLC檢測反應(yīng)完全。過濾，濾液用二氯甲烷(30mL)稀釋，依次用水(10mL)及飽和食鹽水(10mL)洗滌，分離有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥后過濾，減壓濃縮除去溶劑。剩余物硅膠柱層析純化得710mg白色固體V-A-1，收率75％，ESI-MS:m/z[M+H]+＝947.步驟二：將200mg(0.21mmol)V-A-1溶于10mL無水二氯甲烷中，室溫下加入2mL(體積比：二氯甲烷/三異丙基硅烷/三氟乙酸＝5/1/1)溶液，反應(yīng)約1h，TLC檢測反應(yīng)完全，小心加入飽和碳酸氫鈉溶液，分離有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮。剩余物硅膠柱層析純化得到96mg白色固體II-A-1，收率65％。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(t,J＝5.7Hz,1H),7.68(d,J＝7.2Hz,1H),7.39(t,J＝7.7Hz,2H),7.30–7.14(m,3H),6.14–5.96(m,2H),5.90(d,J＝4.9Hz,1H),5.84(d,J＝9.6Hz,1H),5.81(d,J＝9.6Hz,1H),5.74(d,J＝8.2Hz,1H),4.87(dt,J＝12.4,6.2Hz,1H),4.47–4.34(m,1H),4.29–4.20(m,1H),4.08–4.01(m,1H),3.94–3.76(m,4H),3.57–3.46(m,1H),2.82(d,J＝8.3Hz,1H),1.35(d,J＝6.9Hz,3H),1.27(t,J＝15.0Hz,6H),1.16(d,J＝6.2Hz,6H).13CNMR(100MHz,DMSO-d6)δ173.7,173.1,173.0,169.2,161.1,151.2,151.1,150.6,130.1,125.1,120.6,120.5,101.9,101.6,99.8,80.2,72.1,71.9,68.5,65.1,64.9,50.3,41.0,36.3,22.4,22.3,21.9,21.8,20.3,20.2,17.2,16.9.31PNMR(162MHz,DMSO)δ3.83(s)ESI-MS:m/z[M+H]+＝705。方法B:步驟一：將5.0g(9.5mmol)化合物III-1溶于25mL無水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，在Ar保護(hù)下依次加入1.6g(23.5mmol)咪唑，0.12g(1.0mmol)4-二甲氨基吡啶(DMAP)以及1.6mL(9.5mmol)三乙基氯硅烷(TESCl)。在室溫下攪拌反應(yīng)約10小時，TLC檢測反應(yīng)完全。然后往反應(yīng)體系中加入7mL37％HCHO溶液，加熱至80度攪拌反應(yīng)1小時。冷卻至室溫，加入80mL乙酸乙酯，依次用水、飽和食鹽水洗滌，分離有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮，得無色油狀物VII-1，不經(jīng)純化直接用于下一步。步驟二：將上一步新鮮所得的產(chǎn)物VII-1溶于40mL無水二氯甲烷(DCM)中，在氬氣保護(hù)下冰浴冷卻，依次加入62mg(0.5mmol)4-二甲氨基吡啶(DMAP)和2.36g(12.3mmol)1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDCHCl)，及6.1g(11.4mmol)化合物VIII-A-1，慢慢升至室溫并攪拌反應(yīng)約12小時，TLC檢測反應(yīng)完全。加入100mL二氯甲烷，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，分離有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮。粗產(chǎn)物用二氯甲烷-正庚烷重結(jié)晶得8.5g白色固體產(chǎn)物IX-A-1，收率70％(二步)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.57(d,J＝8.1Hz,1H),7.35(dd,J＝17.2,7.6Hz,6H),7.31–7.12(m,12H),6.77(d,J＝8.5Hz,2H),6.17(d,J＝18.4Hz,1H),6.04–5.87(m,2H),5.68(d,J＝8.2Hz,1H),5.00(dt,J＝12.3,6.2Hz,1H),4.60(dd,J＝11.4,6.4Hz,1H),4.35(q,J＝6.9Hz,1H),4.29–4.20(m,2H),4.15–4.08(m,1H),4.02–3.85(m,3H),3.78(s,3H),3.71(t,J＝10.0Hz,1H),1.39–1.32(m,6H),1.35(s,9H),1.27(d,J＝11.9Hz,3H),1.23(d,J＝6.2Hz,6H),0.92(s,9H),0.15(s,6H).ESI-MS:m/z[M+H]+＝1191。步驟三：將7.5g(6.3mmol)化合物IX-A-1溶于50％水-丙酮(20mL)混合溶液中，加入30mL冰醋酸(HOAc)及6mL三氟乙酸(TFA)，室溫下攪拌反應(yīng)約6小時，至TLC檢測不到剩余原料。減壓旋蒸除去丙酮、水，然后依次加入60mL二氯甲烷，9ml三氟乙酸(TFA)，6.5mL三異丙基硅烷(i-Pr3SiH)，在室溫下繼續(xù)反應(yīng)約15分鐘，TLC檢測反應(yīng)完全，小心加入飽和碳酸氫鈉水溶液萃滅反應(yīng)。加入100mL二氯甲烷，依次用水、飽和食鹽水洗滌，分離有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮得粗產(chǎn)物。用乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶得3.9g白色固體II-A-1，收率88％。1HNMR(400MHz,DMSO)δ8.43(t,J＝5.7Hz,1H),7.68(d,J＝7.2Hz,1H),7.39(t,J＝7.7Hz,2H),7.30–7.14(m,3H),6.14–5.96(m,2H),5.90(d,J＝4.9Hz,1H),5.84(d,J＝9.6Hz,1H),5.81(d,J＝9.6Hz,1H),5.74(d,J＝8.2Hz,1H),4.87(dt,J＝12.4,6.2Hz,1H),4.47–4.34(m,1H),4.29–4.20(m,1H),4.08–4.01(m,1H),3.94–3.76(m,4H),3.57–3.46(m,1H),2.82(d,J＝8.3Hz,1H),1.35(d,J＝6.9Hz,3H),1.27(t,J＝15.0Hz,6H),1.16(d,J＝6.2Hz,6H).ESI-MS:m/z[M+H]+＝705。實(shí)施例2：化合物II-A-1a的合成依實(shí)施例1中方法B步驟一新鮮制得化合物VII-1(3mmol化合物III-1為起始原料)，溶于12mL無水二氯甲烷(DCM)中，在氬氣保護(hù)下冰浴冷卻，依次加入18mg(0.15mmol)4-二甲氨基吡啶(DMAP)和0.75g(3.9mmol)1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸鹽(EDCHCl)，及1.93g(3.6mmol)化合物VIII-A-1a(由手性硫普羅寧制備得到，S構(gòu)型手性純度97％，分析方法：AD-H柱溫：25C；檢測波長：210nm；流速：1.0ml/min；流動相：n-Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.1等度洗脫)，然后慢慢升至室溫并攪拌反應(yīng)約12小時，TLC檢測反應(yīng)完全。加入30mL二氯甲烷，依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，分離有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮。粗產(chǎn)物用二氯甲烷-正庚烷重結(jié)晶得2.57g白色固體產(chǎn)物IX-A-1a，收率72％。將2.1g(1.76mmol)化合物IX-A-1a溶于50％水-丙酮(5mL)混合溶液中，加入8mL冰醋酸(HOAc)及2mL三氟乙酸(TFA)，室溫下攪拌反應(yīng)約6小時，至TLC檢測不到剩余原料。減壓旋蒸除去丙酮、水，然后依次加入15mL二氯甲烷，3ml三氟乙酸(TFA)，2.2mL三異丙基硅烷(i-Pr3SiH)，在室溫下繼續(xù)反應(yīng)約15分鐘，TLC檢測反應(yīng)完全，小心加入飽和碳酸氫鈉水溶液萃滅反應(yīng)。加入30mL二氯甲烷，依次用水、飽和食鹽水洗滌，分離有機(jī)相用無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮得粗產(chǎn)物。用乙酸乙酯-石油醚重結(jié)晶得1.04g白色固體II-A-1a，收率84％。ESI-MS:m/z[M+H]+＝705。實(shí)施例3：化合物II-A-1b的合成依據(jù)實(shí)施例2步驟一、步驟二，以VIII-A-1b(由手性硫普羅寧制備得到，R構(gòu)型手性純度95％，分析方法：AD-H柱溫：25C；檢測波長：210nm；流速：1.0ml/min；流動相：n-Hex:EtOH:TFA＝90:10:0.1等度洗脫)代替VIII-A-1a，以5.3g(10mmol)化合物III-1可制備得8.7g中間體IX-A-1b，收率73％(二步)。依據(jù)實(shí)施例2步驟三，化合物IX-A-1b(2.9mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得1.7g白色固體產(chǎn)物II-A-1b，收率86％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝705。實(shí)施例4：化合物II-A-2的合成方法A：步驟一：將529mg(1.0mmol)III-1溶于10mL無水丙酮中，室溫下加入680mg(1.5mmol)IV-A-2及碳酸鉀414mg(3.0mmol)，加熱攪拌回流6h，TLC檢測反應(yīng)完全。過濾，濾液用二氯甲烷(30mL)稀釋，依次用水(10mL)及飽和食鹽水(10mL)洗滌，分離有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥后過濾，減壓濃縮除去溶劑。剩余物硅膠柱層析純化得306mg白色固體V-A-2。ESI-MS:m/z[M+H]+＝961.步驟二：將200mg(0.21mmol)V-A-2溶于10mL無水二氯甲烷中，室溫下加入2mL(體積比：二氯甲烷/三異丙基硅烷/三氟乙酸＝5/1/1)溶液，反應(yīng)約1h，TLC檢測反應(yīng)完全，小心加入飽和碳酸氫鈉溶液，分離有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮。剩余物硅膠柱層析純化得到100mg白色固體II-A-2，收率67％。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.64(s,1H),7.50(dd,J＝8.1,2.3Hz,1H),7.36(t,J＝7.8Hz,2H),7.30–7.22(m,3H),7.19(d,J＝7.6Hz,1H),6.65(q,J＝6.5Hz,1H),6.19(d,J＝17.9Hz,1H),5.10–4.94(m,1H),4.52(dd,J＝11.4,5.7Hz,1H),4.39–4.21(m,3H),4.22–4.05(m,2H),3.98(tt,J＝11.5,5.8Hz,1H),3.57–3.45(m,1H),2.17(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),1.86(d,J＝6.5Hz,3H),1.56(dd,J＝7.1,1.0Hz,3H),1.37(dd,J＝14.8,7.5Hz,6H),1.27(s,1H),1.25(d,J＝6.3Hz,6H).ESI-MS:m/z[M+H]+＝719.方法B：依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟一、步驟二，以乙醛代替甲醛，以5.3g(10mmol)化合物III-1可制備得4.6g中間體IX-A-2，收率38％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1205。依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，化合物IX-A-2(2.9mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得1.7g白色固體產(chǎn)物II-A-2，收率82％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝719.實(shí)施例5：化合物II-A-3的合成依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟一、步驟二，以丙醛代替甲醛，以2.65g(5mmol)化合物III-1可制備得2g中間體IX-A-3，收率33％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1219。依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，化合物IX-A-3(0.8mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得445mg白色固體產(chǎn)物II-A-3，收率76％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝733。實(shí)施例6：化合物II-A-4的合成步驟一：將529mg(1.0mmol)III-1溶于10mL無水丙酮中，室溫下加入690mgIV-A-3及碳酸鉀414mg(3.0mmol)，加熱攪拌回流6h，TLC檢測反應(yīng)完全。過濾，濾液用二氯甲烷(30mL)稀釋，依次用水(10mL)及飽和食鹽水(10mL)洗滌，分離有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥后過濾，減壓濃縮除去溶劑。剩余物硅膠柱層析純化得300mgV-A-4，直接用于下一步反應(yīng)。步驟二：將200mg(0.21mmol)V-A-4溶于10mL無水二氯甲烷中，室溫下加入2mL(體積比：二氯甲烷/三異丙基硅烷/三氟乙酸＝5/1/1)溶液，反應(yīng)約1h，TLC檢測反應(yīng)完全，小心加入飽和碳酸氫鈉溶液，分離有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮。剩余物硅膠柱層析純化得到100mg白色固體II-A-4。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.62(s,1H),7.46(dd,J＝8.1,2.2Hz,1H),7.34(t,J＝7.8Hz,2H),7.29-7.22(m,3H),7.19(d,J＝7.4Hz,1H),6.16(d,J＝18.1Hz,1H),5.64-5.53(m,1H),5.37-5.17(m,1H),5.08-4.93(m,1H),4.53(dd,J＝11.4,5.5Hz,1H),4.38-4.20(m,3H),4.40-4.08(m,6H),3.97(tt,J＝11.7,5.9Hz,1H),3.57-3.43(m,1H),2.17(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),1.55(dd,J＝7.1,1.0Hz,3H),1.38(dd,J＝14.8,7.7Hz,6H),1.27(s,1H),1.24(d,J＝6.3Hz,6H).ESI-MS:749(M+1)。實(shí)施例7：化合物II-A-5的合成步驟一：將529mg(1.0mmol)III-1溶于10mL無水丙酮中，室溫下加入800mgIV-A-4及碳酸鉀414mg(3.0mmol)，加熱攪拌回流12h，TLC檢測反應(yīng)完全。過濾，濾液用二氯甲烷(30mL)稀釋，依次用水(10mL)及飽和食鹽水(10mL)洗滌，分離有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥后過濾，減壓濃縮除去溶劑。剩余物硅膠柱層析純化得400mgV-A-5，直接用于下一步反應(yīng)。步驟二：將200mg(0.21mmol)V-A-5溶于10mL無水二氯甲烷中，室溫下加入2mL(體積比：二氯甲烷/三異丙基硅烷/三氟乙酸＝5/1/1)溶液，反應(yīng)約1h，TLC檢測反應(yīng)完全，小心加入飽和碳酸氫鈉溶液，分離有機(jī)相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉干燥，過濾后減壓濃縮。剩余物硅膠柱層析純化得到100mg白色固體II-A-5。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ9.66(s,1H),7.44(dd,J＝7.9,2.1Hz,1H),7.32(t,J＝7.8Hz,2H),7.28–7.20(m,3H),7.16(d,J＝7.5Hz,1H),6.13(d,J＝17.6Hz,1H),5.15–5.03(m,1H),4.60(t,J＝7.5Hz,2H),4.55(dd,J＝11.5,5.7Hz,1H),4.48–4.25(m,3H),4.23–4.09(m,2H),3.95(tt,J＝11.8,5.8Hz,1H),3.59–3.42(m,1H),3.25(t,J＝7.5Hz,2H),2.16(dd,J＝8.4,2.2Hz,1H),1.54(dd,J＝7.1,1.0Hz,3H),1.39(dd,J＝14.7,7.6Hz,6H),1.28(s,1H),1.25(d,J＝6.5Hz,6H).ESI-MS:m/z[M+H]+＝719.實(shí)施例8：化合物II-A-7的合成依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟一、步驟二，僅以III-2代替代替III-1，以1.1g(2mmol)化合物III-2可制備得無色油狀物IX-A-7，收率71％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1221。依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，0.79g化合物IX-A-7(0.65mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得白色固體產(chǎn)物II-A-7，收率83％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝721。實(shí)施例9：化合物II-A-8的合成依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟一，步驟二，以VIII-A-2代替VIII-A-1，從而以1.6g(3mmol)化合物III-1可制備得1.29g中間體IX-A-8，收率65％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1219.依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，化合物IX-A-8(0.8mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得0.5g白色固體產(chǎn)物II-A-8，收率83％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝733.實(shí)施例10：化合物II-B-1的合成依據(jù)實(shí)施例1方法B，步驟二中以VIII-B-1(由(DL)-N-乙酰半胱氨酸制備獲得)代替VIII-1，以2.1g(4mmol)化合物III-1可制備得3.38g中間體IX-B-1，收率71％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1191.依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，化合物IX-B-1(2mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得1.17g白色固體產(chǎn)物II-B-1，收率83％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝705.實(shí)施例11：化合物II-B-1a的合成依據(jù)實(shí)施例1方法B，步驟二中以VIII-B-1a(由L-乙酰半胱氨酸制備獲得，手性純度>99％)代替VIII-1，以2.65g(5mmol)化合物III-1可制備得中間體IX-B-1a，收率67％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1191.依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，化合物IX-B-1a(2.1mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得1.2g白色固體產(chǎn)物II-B-1a，收率85％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝705.實(shí)施例12：化合物II-B-1b的合成依據(jù)實(shí)施例1方法B，步驟二中以VIII-B-1b(由D-半胱氨酸制備獲得，手性純度95％)代替VIII-1，以2.65g(5mmol)化合物III-1可制備得4.2g中間體IX-B-1b，收率70％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1191.依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，化合物IX-B-1b(2.1mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得1.2g白色固體產(chǎn)物II-B-1b，收率81％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝705.實(shí)施例13：化合物II-B-2的合成依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟一，以乙醛代替甲醛，依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟二，以VIII-B-1a(由L-乙酰半胱氨酸制備獲得，手性純度>99％)代替VIII-1，從而以1.6g(3mmol)化合物III-1可制備得1.3g中間體IX-B-2，收率36％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1205.依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，化合物IX-B-2(1mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得0.57g白色固體產(chǎn)物II-B-2，收率79％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝719.實(shí)施例14：化合物II-B-3的合成依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟一，步驟二，以VIII-B-2(由L-乙酰半胱氨酸制備獲得，手性純度>99％)代替VIII-1，從而以1.6g(3mmol)化合物III-1可制備得中間體IX-B-3，收率76％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1205.依據(jù)實(shí)施例1方法B步驟三，化合物IX-B-3(1mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得0.57g白色固體產(chǎn)物II-B-3，收率82％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝719.實(shí)施例15：化合物II-B-4的合成依據(jù)實(shí)施例1步驟一，步驟二，以III-2代替III-1，并以VIII-B-1a(由L-乙酰半胱氨酸制備獲得，手性純度>99％)代替VIII-1，以1.6g(3mmol)化合物III-2可制備得2.64g中間體IX-B-4，收率72％(二步)。ESI-MS:m/z[M+H]+＝1207.依據(jù)實(shí)施例6步驟三，化合物IX-B-4(1.5mmol)繼續(xù)脫去保護(hù)基，可制備得0.93g白色固體產(chǎn)物II-B-4，收率84％.ESI-MS:m/z[M+H]+＝721.實(shí)施例16:抗丙肝病毒活性(HCV,EC50)以及細(xì)胞毒性(CC50)由于缺乏理想的HCV體外感染細(xì)胞和動物模型，一般情況下，HCV病毒活性評價會采用HCVRNA復(fù)制中起關(guān)鍵作用的酶建立細(xì)胞外的分子復(fù)制模型。實(shí)驗(yàn)方法：在含有10％胎牛血清、1X非必需氨基酸、Pen-Strep-Glu、G418的DMEM培養(yǎng)基中，培養(yǎng)含HCV-復(fù)制子(1b基因型)的Huh7細(xì)胞?？共《竞Y選測試在不含G418的不同培養(yǎng)基中進(jìn)行。細(xì)胞接種于96孔板，接種細(xì)胞后立即加入試驗(yàn)的化合物，并在培養(yǎng)箱中37℃孵育。然后除去培養(yǎng)基，細(xì)胞用于全核酸提取(包括復(fù)制子RNA和宿主RNA)。在Q-RT-PCR方案中可放大復(fù)制子RNA，并相應(yīng)定量。所觀察到的復(fù)制子HCVRNA與未處理對照組的水平差異作為試驗(yàn)化合物抗病毒效力的方式，其結(jié)果見表1。表1化合物的抗丙肝病毒活性(HCV,EC50)以及細(xì)胞毒性(CC50)結(jié)果化合物對細(xì)胞內(nèi)HCV復(fù)制子1b的抑制活性(EC50)的結(jié)果作為評價其抗丙肝病毒活性，而同時細(xì)胞毒活性(CC50)的同步測試用于排除由于細(xì)胞毒性造成的假陽性結(jié)果。治療指數(shù)越高，代表化合物越有應(yīng)用前景。結(jié)果表明，本發(fā)明提供的化合物表現(xiàn)出與Sofosbuvir相似或者更優(yōu)的活性和治療指數(shù)，以II-A-2為例，其對細(xì)胞內(nèi)HCV復(fù)制子的抑制活性(EC50)明顯強(qiáng)于比陽性對照Sofosbuvir，表明該化合物在肝細(xì)胞內(nèi)可與Sofosbuvir一樣能夠在細(xì)胞內(nèi)快速降解成為活性代謝產(chǎn)物的形式發(fā)揮抗HCV的作用，此外，分子中降解得到的另一份子硫普羅寧對于抗病毒活性有一定的增益作用，而這種協(xié)同效應(yīng)使本發(fā)明提供的化合物，在抗HCV疾病方面更具有應(yīng)用前景。實(shí)施例17:小鼠CCl4肝損模型的保護(hù)作用研究實(shí)驗(yàn)方法：取體重24～28g的雄性小鼠實(shí)驗(yàn)前，禁食不禁水6小時，按體重隨機(jī)分成3組，每組5只小鼠，分設(shè)空白對照組、CCL4組、化合物組(硫普羅寧50mg/kg、試驗(yàn)化合物200mg/kg)。每12h灌胃給藥1次，每次灌胃容量均為10mL/kg，共給藥4次?？瞻讓φ战M和模型對照組同時灌服等容量的生理鹽水。在第三次給藥后1h，除空白對照組小鼠外，其它兩組小鼠按2mg/kgb.w的CCl4腹腔注射50％CCl4玉米油溶液。于12小時后，各組再給藥1次。于24小時后，各鼠取血，測定血清ALT和AST(表2)，取肝臟切小塊，甲醛固定后，石蠟切片，用蘇木精和伊紅染色，顯微鏡下觀察肝細(xì)胞情況。表2本發(fā)明化合物的CCl4肝損模型的保護(hù)作用研究結(jié)果組別ALT(U/L)AST(U/L)空白58.2125.4CCl4對照組1423.21214.3Sofosbuvir1325.71185.2硫普羅寧689.3733.8II-A-1617.5690.2II-A-2560.7656.3II-A-4701.5677.8II-A-5596.2702.3II-B-1725.6833.1結(jié)果表明，CCl4模型組小鼠的ALT和AST異常升高，硫普羅寧能顯著逆轉(zhuǎn)這種升酶作用，相比較下，Sofosbuvir則沒有這方面的活性。而本發(fā)明提供的化合物具有明顯的降酶作用，活性與硫普羅寧相當(dāng)或者更優(yōu)。究其原因，可能是因?yàn)榱蚱樟_寧的羧基被制成前藥后，可提高了其穩(wěn)定性和被口服吸收的能力，從而使其活性得到了增強(qiáng)。以II-A-2為例，其對CCl4誘導(dǎo)肝損傷導(dǎo)致ALT和AST升高作用，有明顯的抑制活性，且優(yōu)于陽性對照硫普羅寧。此外，肝臟組織病理切片觀察結(jié)果為，CCl4模型組，肝中央靜脈淤血，周圍有小葉中央性或周圍性壞死，肝細(xì)胞有腫脹、氣球樣變形，II-A-2給藥組呈現(xiàn)少量點(diǎn)狀和碎片狀壞死，大部分呈現(xiàn)氣球樣變形，顯示由CCl4引起的毒性已大大減少，說明II-A-2確實(shí)有保護(hù)CCl4引起的肝損作用。由于缺乏理想的HCV感染動物模型，直接評價本發(fā)明提供的化合物對HCV引起肝損傷的保護(hù)作用不可行，但理論上以及臨床應(yīng)用的角度來講，本發(fā)明提供的化合物的保肝護(hù)肝的作用對于HCV引起的炎癥反應(yīng)同樣具有保護(hù)作用。實(shí)施例18:藥代動力學(xué)性質(zhì)研究實(shí)驗(yàn)方法:以SD大鼠為實(shí)驗(yàn)動物(體重180-220g)，每個試驗(yàn)化合物6只SD大鼠，隨機(jī)分成2組(灌胃組和靜注組)，每組3只。灌胃給藥的尾靜脈取血時間點(diǎn)為0.17,0.33,0.5,1,1.5,2,4,6,8,12,24小時；靜脈給藥取血時間點(diǎn)為0.05,0.1,0.17,0.5,1,2,4,6,8,12,24小時。取全血0.3ml，離心后取血漿0.1ml采用LC-MS進(jìn)行分析。表3SD大鼠口服給藥后主要藥動學(xué)參數(shù)匯總以索菲布韋參比，分別考察了化合物II-A-1、II-A-2和II-B-1在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)性質(zhì)，結(jié)果表明，化合物II-A-1、II-A-2和II-B-1的口服生物利用度有明顯改善，與索菲布韋相比，分別是它的3.38、2.75、2.25倍。另外，II-A-1和II-A-2的其半衰期分別達(dá)到了6.14和6.23小時，分別為索菲布韋的2.95和2.51倍，其藥時曲線更為緩和。因此，II-A-1、II-A-2和II-B-1在藥動學(xué)性質(zhì)上優(yōu)勢明顯，可通過口服吸收給藥用于丙肝疾病的治療。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進(jìn)等，均包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3 當(dāng)前第1頁1 2 3